As gastroenterites podem ser causadas por parasitas, vírus ou bactérias. Coprocultura é o exame bacteriológico das fezes, muito utilizado em casos de gastroenterite. A classificação das bactérias que podem provocar diarréia é a seguinte: - bactérias invasoras e bactérias toxigênicas. Após a colheita é realizado o plantio do material em um meio de enriquecimento ou um meio seletivo. Bactérias invasoras São bactérias colonizadoras do tubo gastrointestinal. Podem produzir toxinas e evoluir atingindo outros locais. Exemplos: Shigella, Salmonella, Yersinia enterocolitica , Campylobacter jejuni e alguns sorotipos de Escherichia coli. Bactérias toxigênicas Este tipo de bactéria, libera uma toxina para dissolver alimentos para sua nutrição, provocando assim, atividade patogênica no indivíduo. São exemplos de bactérias que produzem toxinas o Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Para que serve A coprocultura serve para identificar microrganismos que podem estar relacionados com alterações gastrointestinais, como intoxicação alimentar ou infecção intestinal. Assim, esse exame pode ser solicitado pelo médico quando a pessoa apresenta alguns dos seguintes sintomas: Desconforto abdominal; Diarreia; Náuseas e vômitos; Febre; Mal estar geral; Presença de muco ou sangue nas fezes; Diminuição do apetite. Na maioria dos casos, além de solicitar a coprocultura o médico também solicita a realização do exame parasitológico de fezes, para identificar a presença de parasitas nas fezes que também são responsáveis por sintomas gastrointestinais, como Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Taenia sp. e Ancylostoma duodenale, por exemplo. Quais são os tipos de meios de cultura? Meio de cultura enriquecido. Meio de cultura seletivo. Meio de cultura diferencial. Meio de cultura de transporte. Meio de cultura de triagem. Meio de cultura de identificação. Meio de cultura de contagem. Meio de cultura de estocagem e manutenção. Meio de cultura enriquecido. Meio de Enriquecimento: - geralmente líquido, de composição química rica em nutrientes, com a finalidade de permitir que as bactérias contidas em uma amostra clínica aumentem em número. Ex.: Caldo Brain Heart Infusion (BHI) e Caldo Tetrationato. Meio de cultura seletivo
A finalidade deste tipo de meio é selecionar as
espécies que se deseja isolar e impedir o desenvolvimento de outros germes (adição de corantes, antibióticos e outras substâncias com capacidade inibitória para alguns germes. Ex.: Agar Manitol Salgado e Agar SS Meio de cultura de transporte Consiste em um meio isento de nutrientes, contendo um agente redutor (Tioglicolato ou cisteína). Geralmente mantém o pH favorável, previne a desidratação de secreções durante o transp. e evita a oxidação e auto-destruição enzimática dos patógenos presentes. Ex.: Meio de Stuart, Meio de Cary-Blair e Caldo Tioglicolato. Meio de cultura de triagem Meios que avaliam determinadas atividades metabólicas permitindo caracterização e identificação perfunctória ou presuntiva de muitos microrganismos (ágar tríplice açúcar e ferro, meio Instituto Adolfo Lutz, ureia. Meio de cultura de identificação Prestam-se para a realização de provas bioquímicas e verificação de funções fisiológicas de organismos submetidos a identificação (meios Oxidação/Fermentação, Ágar Citrato, Caldo nitrato, meio semi-sólido, caldo triptofano, Meio de cultura de contagem Empregados para a determinação quantitativa da população microbiana (Ágar de Contagem em Placas, TSC, Ágar Batata Dextrose, Ágar Baird-Parker, etc. Meio de cultura de estocagem e manutenção
Utilizadospara conservação de microrganismos no laboratório, i.e. garantem a viabilidade de microrganismos (Ágar Sabouraud, Meios com leite, Ágar suco de tomate, Ágar sangue, Ágar Simples, meio semi-sólido, etc.) Como escolher o melhor meio. - A escolha dos meios de cultura, para o processamento inicial das amostras é muito importante e está condicionada à flora patogênica desse local; - em geral é usado mais de um tipo de meio, no sentido de fornecer condições de crescimento a todos os patógenos possíveis de estarem presentes. - Para cada caso em particular, existem os meios utilizados rotineiramente na semeadura primária; - atualmente, o procedimento mais utilizado é a aquisição de meios pré-fabricados e fornecidos de forma desidratada, onde é necessário apenas a pesagem criteriosa da quantidade necessária ao volume desejado, seguido de dissolução e esterilização. Exemplos de meios específicos • Agar Lowestein Jensen – Micobactérias • Agar Sal Manitol – Staphylococcus spp • Agar Verde Brilhante – Salmonella spp, exceto S. typhi • Agar Sabouraud Dextrosado – Fungos e Leveduras • Agar Infusão Cérebro Coração – Fastidiosos como pneumococo e meningococo, muito utilizado em hemoculturas Como é feita a coprocultura Para fazer a coprocultura é recomendado que a pessoa colete as fezes, não devendo ser coletada as fezes que tiverem entrado em contato com a urina ou com o vaso. Além disso, caso seja visualizado sangue, muco ou outras alterações nas fezes, é recomendado que essa parte seja coletada, pois há maior probabilidade de serem identificados os microrganismos possivelmente responsáveis pela infecção. Em alguns casos, pode ser sugerido pelo médico que a coleta seja feita utilizando um swab diretamente do reto da pessoa, sendo essa coleta mais frequentemente de ser realizada em pessoas que estão hospitalizadas. Após coleta e armazenamento adequado da amostra, esta deve ser levada ao laboratório para que seja feita a análise. No laboratório, as fezes são colocadas em meios de cultura específicos que permitem o crescimento das bactérias invasoras e toxogênicas, que são aquelas que não fazem parte da microbiota normal ou que fazem mas que produzindo toxinas e levando ao aparecimento de sintomas gastrointestinais. É importante que a pessoa indique se está fazendo uso de algum antibiótico ou se fez nos últimos 7 dias antes do exame, pois pode interferir no resultado. Além disso, não é indicado que a pessoa faça uso de laxantes para estimular a evacuação, pois também pode interferir no resultado do exame. Meio de Cary Blair O Meio de Cary Blair é um meio de cultura de transporte utilizado para conservação de fezes e os microorganismos contidos nesta. Este meio foi desenvolvido a partir do meio de Stuart. Possui coloração branca opaca que não evidencia crescimento de bactérias por ser apenas um meio de transporte. Campylobater spp A bactéria Campylobacter se encontra normalmente no trato digestivo de muitos animais de fazenda (incluindo gado, carneiros, porcos e aves). As fezes desses animais podem contaminar a água em lagos e riachos. A carne (geralmente de aves) e o leite não pasteurizado podem também ser contaminados. As pessoas podem ser infectadas de várias maneiras: Comer ou beber água contaminada (não tratada), leite não pasteurizado, carne não cozida (geralmente de aves) ou alimentos preparados em superfícies da cozinha tocadas por carne contaminada Contato com água ou alimentos contaminados (por exemplo, ao manusear alimentos contaminados) Contato com pessoas infectadas principalmente contato sexual oral Contato com um animal infectado. A bactéria Campylobacter, geralmente Campylobacter jejuni, causa inflamação do cólon (colite) que resulta em febre e diarreia. Essas bactérias são causa comum de diarreia infecciosa nos Estados Unidos e entre pessoas que viajam para países onde alimentos ou água podem estar contaminados. Identificação Bioquímica A investigação das atividades metabólicas das bactérias “in vitro” é chamada de Provas Bioquímicas e servem para auxiliar o microbiologista a identificar grupos ou espécies de bactérias ou leveduras através da verificação das transformações químicas, que ocorrem num determinado substrato, pela ação das enzimas de um dado microrganismo. Como muitas vezes um determinado microrganismo possui um sistema enzimático específico, promovendo transformação bioquímica específica, as provas bioquímicas podem ser utilizadas na prática para a sua caracterização. Para a realização das provas bioquímicas é necessário utilizar meios de cultivo especiais contendo o substrato a ser analisado e fornecer ao microrganismo as condições nutritivas e ambientais necessárias ao seu desenvolvimento. Objetivos: executar e interpretar os resultados e as transformações metabólicas ocorridas em algumas provas bioquímicas empregadas para identificação de bactérias
