“ Em animais, a avaliação laboratorial dos teores de proteínas do plasma e do soro sanguíneo é parte tanto de exames hematológicos quanto de bioquímicos Introdução
▷ Proteína plasmática total
▷ Proteína sérica total
▷ Líquidos cavitários, líquido sinovial, líquor e outras
secreções/excreções Proteínas ▷ Dois principais tipos: albumina e gobulina Albumina
▷ Proteína pequena
▷ 35 a 50% das proteínas totais
▷ Sintetizada no fígado
▷ Metabolizada nos tecidos
○ Meia vida: 8 dias (cães) a 20 dias (equinos) Albumina Funções
▷ Proteínas grandes, com diferentes tamanhos e pesos
moleculares
▷ Classificadas em alfa, beta ou gama-globulinas em função
da mobilidade eletroferética (peso molecular)
▷ Fígado e tecidos linfoides (imunoglobulinas)
Globulinas
α β Ɣ Transportadora de tiroxina; Lipoproteínas; Transcortina; transferrina e Ceruloplasmina; ferritina; Haptoglobina; Componentes do Imunoglobulinas: IgG, Sistema Antitrombina III; IgA, IgM Complemento (C3 e Alfa, - C4); macroglobulina; Fibrinogênio; Amilóide A sérica.... Plasminogênio 10 a 1000x Amilóide Sérica A
Proteína C reativa Haptoglobina Fibrinogênio α-1-antitripsina 5 a 10x α-1-glicoproteína ácida Ceruloplasmina
Albumina Transferrina Proteínas de fase aguda Funções
Proteína C reativa Opsoniza os micro-organismos
Amilóide sérica Recrutamento de células imunes para
locais da inflamação Indução de enzimas que degradam a matriz extracelular Ceruloplasmina Oxida o ferro, facilitando a ação da ferritina. Inibe a captação de ferro pelos microorganismos Haptoglobina Se liga a hemoglobina Inibe a captação de ferro pelo microorganismo Evita lesão renal Alpha-1-antitripsina Modula a inflamação SAA: Amilóide Sérica A AGP: glicoproteína ácida Hp: haptoglobina CRP: proteína C reativa Cp: ceruloplasmina Mensuração de proteínas
▷ Proteína total ○ Albumina
*Teste bioquímico por espectrofotometria
▷ Globulina = proteína total – albumina
▷ Relação albumina:globulina ○ Alteração => A:G <0,5 Refratometria
▷ Determinação da proteína total
○ Refratômetro: escala de 0 a 12 ○ Método simples, rápido e de baixo custo para detecção de hiper e hiproteinemia.
▷ Interferências (falsa elevação)
○ Hemoglobina ou bilirrubina, lipídeos e aumento na concentração de solutos (glicose, ureia, sódio e cloretos). Mensuração das globulinas
▷ Principal método: Eletroforese
○ Aplicação da amostra de soro na extremidade de uma fina placa de gel ○ Gerar um campo elétrico para a corrida das proteínas em direção à carga oposta (do negativo ao positivo) ○ Coloração do gel ○ Leitura do gel em um espectrofotômetro (densitometro com scaner), obtendo-se um traçado eletroforético. Determinação IgG
▷ Teste imunoenzimático (ELISA)
○ Custo, infra-estrutura laboratorial, mão de obra especializada, tempo entre execução e resultados (2 a 3 dias) Fibrinogênio
▷ 5% das proteínas plasmáticas
▷ Maior concentração entre as proteínas de fase aguda
▷ Refratometria ○ Mede-se a concentração de proteína plasmática antes e após a precipitação do fibrinogênio por aquecimento a 56° por 10 minutos. ○ Diferença das leituras => teor de fibrinogênio Fibrinogênio
▷ Redução: CID
▷ Aumento: Processos inflamatórios
○ Ruminantes: elevação acentuada =>interpretada junto com o hemograma ○ Equinos: elevação discreta ○ Cães e gatos: aumento é inconsistente com inflamãção Fibrinogênio ▷ PP/Fb = PP (g/dL) Fib (mg/dL)/ 1000
Aumento absoluto ou relativo
▷ PP:Fb > 15 = desidratação ▷ PP:Fb < 10 = aumento real do fibrinogênio Interpretação do proteinograma ▷ Diminuição na concentração de proteína total
Albuminas Globulinas Diminuição
Hipoalbuminemia Hipogamaglobulinemia Ambas (Pan-hipoproteinemia) Hipoalbuminemia Normal ou aumentado Albumina Normal ou aumentado Hipoglobulinemia Globulinas Interpretação do proteinograma
Pan-hipoproteinemia
▷ Hidratação excessiva (hemodiluição) - erros cálculos da
fluidoterapia, ingestão de grande volume de água
▷ Perdas proporcionais de ambas as frações
○ Hemorragias, derrame (exsudato), enteropatias com perda de proteínas (extravasamento de proteínas para o lúmen), etc. Interpretação do proteinograma
Hipoproteinemia por hipoalbuminemia
▷ Menor produção ○ Inanição (má nutrição) ○ Má absorção intestinal (diarreias crônicas) ○ Insuficiência pancreática exócrina ○ Parasitismo gastrintestinal ○ Insuficiência hepática (relação alb:glob <0,5) Interpretação do proteinograma
▷ Perda da albumina ○ Doença glomerular (relação alb:glob <0,5) ○ Aumento da concentração urinária de proteínas e aumento da relação proteína:creatinina urinária Interpretação do proteinograma
Hipoproteinemia por hipoglobulinemia
▷ Falha na transferência de imunidade passiva
▷ Imunodeficiência adquirida ou hereditária
○ Imunodeficiencia que envolve linfócitos B, plasmocitos Interpretação do proteinograma ▷ Aumento de proteína total (principalmente globulina)
Albuminas Globulinas Diminuição
Hiperalbuminemia Hipergamaglobulinemia Ambas (pan- hiperproteinemia) Hiperalbuminemia Normal Albumina Normal Hiperglobulinemia Globulinas Interpretação do proteinograma
Pan-hiperproteinemia
▷ Desidratações ○ Perda de água = aumento da concentração plasmática de albumina associada ou não a hiperglobulinemia
▷ Proporção alb:glob normal
▷ Volume globular (%) elevado
Interpretação do proteinograma
Hipergamaglobulinemia
▷ Aumento da concentração de alfaglobulina e betaglobulina
○ Aumento é inespecífico ○ Aumentadas => injúria tissular ou inflamação Interpretação do proteinograma ▷ Aumento da concentração de gamaglobulina (gamopatia) ○ Dois tipos: monoclonais e policlonais Gamopatias policlonais ○ Aumento de Igs induzido por população heterogênea de linfócitos B e/ou plasmócitos ○ Mais do que um estímulo antigênico ○ Estimulação antigênica crônica ○ Ex.: Erliquiose canina, PIF, doenças infecciosas crônicas induzidos por microorganismos infecciosos, doença imunomediada Interpretação do proteinograma
Gamopatias monoclonais ○ Aumento de Igs induzido por um único clone de linfócitos B e/ou plasmócitos ○ Ex.: Mieloma múltiplo (neoplasia de plasmócitos). Caso clínico ▷ Cão, macho, histórico de ascite (transudato).
▷ Estimulação antigênica Referências bibliográficas BIBLIOGRAFIA BÁSICA: THRALL, M. A.; WEISER, G. ALLISON, R. W. CAMPBELL, T. W. Hematologia e Bioquímica Clínica Veterinária. 2. ed. São Paulo: Roca. 2015. 688p. STOCKHAM, S. L.; SCOTT, M. A. Fundamentos de Patologia Clínica Veterinária. 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan. 2011. 729. ESTRIDGE, B. H.; REYNOLDS, A. P. Técnicas Básicas de Laboratório Clínico. 5. ed. São Paulo: Artmed, 2011. 800p. REGAN, W. J.; ROVIRA, A. R. I.; DeNICOLA, D. B. 2.ed. Atlas de Hematologia Veterinária. 2011. 120p.
BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR BUSH, B. M. Interpretação de resultados laboratoriais para clínicos de pequenos animais. 1.ed. São Paulo: Roca, 2004. 376p. ALMOSNY, N. R. P. Hemoparasitoses em Pequenos Animais Domésticos e como Zoonoses. Rio de Janeiro: L.F. Livros. 2002. COLES, E. H. Patologia Clínica Veterinária. 3. ed., São Paulo: Manole, 1984. FABRIZIO, G.; BESERRA, H. E. O.; COSTA, L. D. Citopatologia Veterinária Diagnóstica.1. ed. São Paulo: Medvet, 2014. 163p. VADEN, S. L.; KNOLL, J. S.; SMITH Jr., F. W. K.; TILLEY, L. P. Exames Laboratoriais e Procedimentos Diagnósticos em Cães e Gatos. 1. ed. São Paulo: Roca, 2014. 848p.
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