UNIVERSIDADE SAVE

FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA E

ZOOTECNIA
CURSO DE LICENCIATURA EM ZOOTECNIA
CADEIRA: BIOQUÍMICA

TÓPICO: ESTUDO DAS ENZIMAS

CHONGOENE, OUTUBRO DE 2022

 CONTEÚDOS

• Introdução ao estudo de enzimas

• Funções, caracterísiticas gerais e estrutura das enzimas

• Nomenclatura, classificação e aplicações das enzimas

• Ligação Enzima substrato

• Cinética enzimática
 INTRODUÇÃO
• Generalidades
enzimas
• Grande parte da história da pesquisa da bioquímica
(início séc. XIX)

• Etimologia da palavra "in yeasts" (leveduras)

catálises biológicas fermentação do açúcar em álcool
• Nos organismos vivos reações muito lentas sem enzimas

• Reações enzimáticas fundamentais para manutenção da vida

 HISTÓRICO
1700

Reconhecimento da
James Sumner,
catálise biológica 1887-1955
Urease de
secreções do feijão
Cristais
estômago. proteicos J. B. S. Haldane
escreveu um
1830 Payen e tratado intitulado
1897, Eduard Enzymes
Persoz substância Buchener
Extracção de
enzimas da
termolábil (amilase) fermentação
alcoólica (extractos
de levedura)
estrato de malte.
 ENZIMAS
•Definição

Macromoléculas ou proteínas produzidas por qualquer organismo

vivo, responsáveis pela catálise das reacções que ocorrem nos
sistemas biológicos.

• Longas cadeias de pequenas moléculas chamadas aminoácidos.

 FUNÇÕES DAS ENZIMAS

 Viabilizar a actividade das células, quebrando moléculas

ou juntando-as para formar novos compostos.
 Diminuem a energia de ativação

 Aumenta a velocidade da reacção

 CARACTERÍSTICAS DAS ENZIMAS
Apresentam alto grau de especificidade;

São produtos naturais biológicos;

Reações baratas e seguras;

São altamente eficientes, acelerando a velocidade das reações (10 8

a 1011 + rápida);
 CARACTERÍSTICAS DAS ENZIMAS

São econômicas, reduzindo a energia de ativação;

Não são tóxicas;

Condições favoráveis de pH, temperatura, polaridade do

solvente e força iônica.
 ENZIMAS – ESTRUTURA

Estrutura Holoenzima
Enzimática
Proteína Cofator

Ribozimas Apoenzima ou Pode ser:

Apoproteína • íon inorgânico
• molécula orgânica
Coenzima
RNA Se covalente

Grupo Prostético
MUITAS ENZIMAS NECESSITAM DE COFATORES PARA A
SUA ATIVIDADE
 ENZIMAS – NOMENCLATURA
Século XIX - poucas enzimas identificadas

- Adição do sufixo ”ASE” ao nome do substrato:

* gorduras (lipo - grego) – LIPASE

* amido (amylon - grego) – AMILASE

- Nomes arbitrários:
* Tripsina e pepsina – proteases
 NOMENCLATURA DE ENZIMAS
a) Nome Usual : Consagrado pelo uso
Exs: Tripsina, Pepsina, Ptialina
b) Nome Recomendado: sufixo "ase" para caracterizar a enzima.
Exs: Urease, Arginase, Fosfatase, DNA polimerase
c) Nome Sistemático: informações mais precisas sobre a função metabólica
(International Union of Biochemistry and Molecular Biology – IUBMB)
6 Classes (Classificação Internacional)
Exs: ATP: creatina fosfotransferase
ATP-Glicose-Fosfo-Transferase
Texto sobre Nomenclatura e Calssificação de Enzimas
 CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS
De acordo com a International Union of Biochemistry (IUB), as enzimas são agrupadas
em 6 classes funcionais:
Oxidorredutase
Transferase

Hidrolase
Liase
Isomerase

Ligase
CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS
CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS
CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS
 Transferência de elétrons Se uma molécula se reduz, há outra que se oxida.
1. Óxido-redutases ( Reações de óxido- redução).

• grupos aldeído
2. Transferases (Transferência de grupos funcionais) • gupos acila
• grupos glucosil
• grupos fosfatos (quinases)

• Transformam polímeros em monômeros.

Atuam sobre:
3. Hidrolases • Ligações éster
(Reações de hidrólise) • Ligações glicosídicas
• Ligações peptídicas
• Ligações C-N

• Entre C e C
4. Liases
• Entre C e O
(Adição a ligações duplas)
• Entre C e N

5. Isomerases
(Reações de isomerização)

6. Ligases • Entre C e O
(Formação de laços covalentes com gasto de ATP) • Entre C e S
• Entre C e N
• Entre C e C
 CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS (COMPOSIÇÃO)

a) Simples
Compostas inteiramente de proteína.
b) Complexas ou holoenzimas
Compostas de proteína e de uma pequena molécula orgânica.
CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS (LOCALIZAÇÃO)

a) Enzimas intracelulares
b) Enzimas da membrana plasmática
c) Enzimas extracelulares
 ENZIMAS – APLICAÇÕES
Diagnóstico de doenças
Produção de medicamentos

Ferramentas importantes na engenharia química, tecnologia

de alimentos e agricultura.
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

ENZIMA FONTE APLICAÇÃO

Papaína papaia Ajuda na digestão, Médica, bebidas,
carnes
Bromelina abacaxi Ajuda na digestão, Médica, bebidas,
carnes
Diastase malte Panificação, xarope

Pepsina mucosa gástrica Amaciamento de carne

suíno
Lipase Candida rugosa Tratamento de efluentes
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

 Proteases

 Leite: na preparação do leite de soja.

 Carnes e Peixes: recuperação de proteínas do osso ou espinha.
 Vinhos: clarificação.
 Queijo: coagulação da caseína.
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

Lactase
 Sorvete: prevenção da cristalização da lactose.
 Leite: estabilização das proteínas do leite em leites congelados
por remoção da lactose.
 Hidrólise da lactose, permitindo o uso por adultos deficientes
na lactase intestinal e em crianças com deficiência em lactase
congênita.
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

-amilase
 Fermentados: conversão do amido a maltose por fermentação.
Remoção da turbidez do amido
 Chocolate/cacau: liquefação do amido
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

Peroxidase
Deterioração - Frutas: contribui na reação de escurecimento.
Polifenoloxidase
Chá/Café: desenvolvimento do escurecimento durante
fermentação.

Deterioração - Frutas e Vegetais: reação de escurecimento e

perda de vitaminas.
 ENZIMAS – APLICAÇÕES
Enzimas utilizadas em rações para aves.
Enzima Substrato Efeitos

Celulases Celulose Degradação da celulose e liberação de nutrientes

Proteases Proteínas Degradação mais eficiente de proteínas.

Amilases Amido Degradação mais eficiente do amido.

Fitase Ácido fítico Melhora a utilização do fósforo dos vegetais.

Lipases Lipídios e ácidos Melhora a utilização de gorduras animais e vegetais

graxos
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

Tratamento de efluentes

 Preocupação ambiental desencadeou procura por outras

alternativas, as chamadas "tecnologias limpas“.
 ENZIMAS – APLICAÇÕES
Enzimas utilizadas em tratamento de efluentes
Enzima e fonte Poluentes e efluentes

Azorredutase (Pseudomonas luteola) Indústria de tinta

Catalase (Baccilus sp.) Remoção de H2O2 em efluentes de branqueamento de tecidos

-glicosidase e Manganês peroxidase Remoção de corantes azo na industria de alimentos e industria

têxtil
Polifosfatase e Fosfotransferase Remoção de fosfato biológico de efluentes

Protease pronase (Pseudomonas aeruginosa) Inativação de vírus bacteriófago Cox A9 de efluentes, para
reutilização da água

Naftaleno-dioxigenase Remoção de naftaleno

Lipase (Penicillium P4) Remoção do teor de DQO de efluentes de óleo de oliva

(Candida rugosa) Redução do teor de lipídeos e DQO efluentes avícolas

(pâncreas de porco) Redução do teor de lipídeos e SS de efluentes da indústria de

derivados lácteos
 ENZIMAS – APLICAÇÕES

 Indústria de detergentes;

 Indústria têxtil;

 Indústria de papel e celulose;

 Curtumes;

 Biorremediação: polímeros, hidrocarbonetos e clorados.

COMPONENTES DA REAÇÃO ENZIMÁTICA

• Enzima: proteína catalisadora;

• Substrato: objeto que irá ser

modificado;
• Sítio ativo: engloba o substrato;

• Produto
ENZIMAS –
COMPONENTES DA REAÇÃO

E+S ES P+E

Substrato se liga ao
SÍTIO ATIVO
da enzima
 ENZIMAS – CATALISADORES

Não são consumidos na reação

Catalase
H2O2 H2O + O2

E+S E+P
 ENZIMAS –
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO
Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das enzimas originou  Chave-
Fechadura , que considera que a enzima possui sitio ativo complementar ao
substrato.
 ENZIMAS –
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO
 ENZIMAS –
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO

Koshland (1958): Encaixe Induzido , enzima e o substrato sofrem

conformação para o encaixe. O substrato é distorcido para conformação exata do
estado de transição.
 ENZIMAS –
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO
 ENZIMAS –
CINÉTICA ENZIMÁTICA

 Victor Henri (1903): E + S  ES

1913
Leonor Michaelis -Enzimologista
Maud Menten - Pediatra

K1 Kp
E+S ES E+P
K-1

Etapa rápida Etapa lenta

 ENZIMAS – CINÉTICA ENZIMÁTICA

• Estudo dos
mecanismos pelos
quais as enzimas
ligam substratos e
os transformam
em produtos.
ENZIMAS – CINÉTICA ENZIMÁTICA
 Inibidores
Enzimáticos
 INIBIDORES ENZIMÁTICOS -TIPOS DE INIBIDORES

a) Competitivos: são
aqueles que se ligam
exclusivamente à
enzima livre.

Ou no mesmo sítio ativo

do substrato
 INIBIDORES ENZIMÁTICOS -TIPOS DE INIBIDORES

b) Incompetitivos:
ligam-se
exclusivamente ao
complexo reagente-
enzima.
 TIPOS DE INIBIDORES

c) Não competitivos
ou mistos: fazem
ligação tanto com a
enzima livre quanto
com o complexo
reagente-enzima.
FACTORES QUE AFECTAM A ACTIVIDADE DAS ENZIMAS

a) Temperatura

b) PH

c) Concentração da enzima e do reagente

d) Inibição enzimática
 ENZIMAS –
INFLUÊNCIA DA TEMPERATURA

  temperatura dois efeitos ocorrem:

(a) a taxa de reação aumenta, como se observa na maioria das reações químicas;

(b) a estabilidade da proteína decresce devido a desativação térmica.

 Enzima  temperatura ótima para que

atinja sua atividade máxima, é a
temperatura máxima na qual a enzima
possui uma atividade cte. por um período de

tempo.
 ENZIMAS –
INFLUÊNCIA DO PH
O efeito do pH sobre a enzima deve-se às variações no estado de ionização dos
componentes do sistema à medida que o pH varia.
Enzimas  grupos ionizáveis, existem em ≠ estados de ionização.
 ENZIMAS –
INFLUÊNCIA DO PH
A estabilidade de uma enzima ao pH depende:
- temperatura;

- força iônica;

- natureza química do tampão;

- concentração de íons metálicos contaminantes;

- concentração de substratos ou cofatores da enzima;

- concentração da enzima.
ENZIMA pH ÓTIMO

Pepsina 1,5

Tripsina 7,7

Catalasa 7,6

Arginasa 9,7

Fumarasa 7,8
 ENZIMAS –
INFLUÊNCIA DA [S]

 [S] varia durante o curso da reação à medida que S é convertido em P.

 Medir Vo = velocidade inicial da reação.
[E] = cte.
vo
[S] pequenas  Vo linearmente.
Vmax
[S] maiores  Vo por incrementos cada vez
menores.
Vmax  [S]  Vo insignificantes.

Vmax é atingida  E estiverem na forma ES e a [E]

livre é insignificante, então, E saturada com o S e V não
[S]
 com  de [S].
Fim