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Espectrofotometria no Ultravioleta

Professora: Roberta Fusco Marra Alunas: Andra Azevedo, Carina Ozawa, Cristina, Juliete, Luanna Gonalves, Patricia Costa, Teresa Fernandes e Zacarias Miranda Curso: Farmcia 7 Perodo

Espectrofotometria no Ultravioleta

O ultravioleta talvez seja uma das tcnicas mais utilizadas em todo o mundo, em especial em anlises quantitativas em laboratrios qumicos, clnicos e farmacuticos. aplicada para determinaes de compostos orgnicos e inorgnicos, como por exemplo, na identificao do princpio ativo de frmacos e determinao da concentrao dos mesmos.Devido s suas propriedades e caractersticas, este mtodo apresenta-se como ferramenta muito til nas anlises de frmacos associados em comprimidos, pastilhas, cremes, entre outros, sem a necessidade de separaes prvia.

Espectrofotometria no Ultravioleta
Esta tcnica, continuamente aperfeioada, ainda permanecer durante longo perodo sendo um dos mais teis instrumentos de medida. As principais vantagens desta tcnica so:  Facilidade de manuseio;  Boa sensibilidade (10-4 a 10-7 molL-1);  Boa exatido;  Seletividade moderada;  Ampla aplicabilidade;

Espectrofotometria de Absoro no UV- Visvel


Na regio de absoro do visvel, a fotometria clssica um dos maiores trunfos de que dispe o laboratrio na atualidade sendo um dos mais teis instrumentos de medida. Quando se usa a espectrofotometria como processo de medida, basicamente esto sendo empregadas as propriedades dos tomos e molculas de absorver e emitir energia eletromagntica em uma das muitas reas do espectro eletromagntico, portanto essa tcnica instrumental utilizada para determinao quantitativa de substncias, por meio de luz por solues coloridas.

Espectrofotometria de Absoro no UV- Visvel

Leis da Fotometria
A primeira lei da fotometria a Lei de Lambert que, estabelece quando a energia radiante atravessa uma soluo, a quantidade de energia transmitida diminui exponencialmente, em relao ao aumento da espessura atravessada. A absoro da regio visvel e ultravioleta depende, em primeiro lugar, do nmero e do arranjo dos eltrons nas molculas ou ons absorventes. Como conseqncia, o pico de absoro pode ser correlacionado com o tipo de ligao que existe na espcie que est sendo estudada.

Espectrofotometria no Ultravioleta

Nos compostos orgnicos, os que possuem dupla ligao absorvem fortemente no ultravioleta. Os compostos que possuem ligaes simples e duplas alternadamente, chamadas de ligaes conjugadas, produzem absoro em comprimentos de ondas maiores. Quanto mais extenso for o sistema conjugado, mais longos sero os comprimentos de onda absorvidos, podendo chegar regio do visvel.

Espectrofotometria no Ultravioleta
preciso determinar a quantidade de luz que a amostra ir absorver, sendo descrito pela Lei de Beer-Lambert que a relao entre a intensidade da luz incidida na soluo (I0) e a intensidade da luz saindo da soluo (I). log (I/Io) = A = Icl I0 = intensidade da luz incidente I = intensidade da luz transmitida A = absorbncia I = absorvidade molecular ou coeficiente de extino c = concentrao do material absorvedor l = espessura da amostra atravs da qual a luz passa

Espectrofotometria no Ultravioleta
Preparo da curva de calibrao
Como uma dosagem tem a finalidade primordial de avaliar quantidades, importante usar uma rigorosa calibrao visando a obteno de resultados exatos. Logo, so imprescindveis as solues padres e uso de brancos.  Solues padres so partes importantes da anlise quantitativa no laboratrio e usadas nas dosagens de amostras desconhecidas. Uma soluo padro apresenta uma concentrao exata de uma substncia que servir como referncia na determinao fotomtrica de uma substncia desconhecida, tendo grande importncia no preparo da curva analtica.

Espectrofotometria no Ultravioleta
Uso dos brancos usamos o branco em espectrofotometria para estabelecer o zero de absorbncia ou 100% transmitncia. Determinado o comprimento de onda, devemos proceder a medida da absorbncia para pelo menos cinco solues com concentrao conhecida ( interessante que a faixa de amplitude de concentrao dessas cinco solues seja da ordem de 1.000 unidades). Esses pontos devem ser utilizados para traar uma curva e determinar a regio de linearidade na qual pode ser aplicada a Lei de Lambert-Beer. Caso no seja possvel determinar a regio de linearidade com esses dados, uma nova bateria de solues com concentraes adequadas deve ser preparada. Determinada a regio de linearidade da curva, a equao da reta deve ser ento estabelecida e essa equao ser utilizada para a determinao da concentrao de solues desconhecidas. A utilizao das ferramentas estatsticas para a regresso linear, determinao da equao da reta via planilhas eletrnicas ou no, altamente recomendvel.

Espectrofotmetro
Instrumento que utiliza a medida de absoro de energia eletromagntica radiante por solues que utilizam grades de difrao na seleo da poro desejada do espectro ultravioleta. Registra dados de absorbncia em funo do comprimento de onda ( ). A caracterstica mais importante do espectrofotmetro a seleo de radiaes monocromticas.

Componentes Bsicos

Fonte de energia eltrica: fornecedora de energia regulada, constante e apropriada para a operao do aparelho.  Fonte de energia radiante: capaz de emitir uma mistura de comprimentos de onda.  Monocromador: utilizado para o isolamento da poro desejada do espectro.  Porta cubeta: recipiente onde se coloca a cubeta contendo a soluo a ser medida.  Detector: recebe a energia radiante transmitida pela soluo, transformando-a em energia eltrica.  Circuito medidor: recebe a energia eltrica emitida, pelo detector que se apresenta sob a forma de leitura, isto , transmitncia ou absorbncia.

Espectrofotometria no Ultravioleta
Como toda instrumentao em controle de qualidade, o espectrofotmetro deve ser calibrado, afim de que desvios fsicos no comprometam a anlise. A relao fotometria-luz deve ser encarada em termos de energia e no em termos de luz e cor. A energia, por sua vez, apresenta relao inversa com o comprimento de onda ( ). A unidade medida do comprimento de onda ( ) o nanmetro (nm). Na faixa espectral do UV-visvel, a interao entre matria e energia se d por transies eletrnicas. Assim, a espectroscopia no ultravioleta tambm chamada de espectroscopia de absoro eletrnica. O grau com que ocorre absoro da energia luminosa depende das transies eletrnicas possveis para a molcula e da intensidade de energia. Uma soluo quando iluminada por luz branca apresenta uma cor que resultante da absoro relativa dos vrios comprimentos de onda.

Espectrofotometria no Ultravioleta
Em geral, quando se utiliza radiao na faixa do UVvisvel mede-se a absoro da radiao pelas molculas dos compostos qumicos. A absoro de energia quantizada e faz com que ocorra a passagem dos eltrons de orbitais do estado fundamental para orbitais de maior energia em um estado mais excitado. Quando esse eltron retorna ao seu estado fundamental, libera exatamente a mesma energia que foi absorvida. Esta energia quando na regio visvel do espectro eletromagntico, fornece a cor. A relao entre a energia absorvida em uma transio eletrnica e a frequncia (v), o comprimento de onda ( ) dado na equao abaixo:

E = h.v = h.c/

Espectrofotometria no Ultravioleta
E = h.v = h.c/
Onde:  h a constante de Planck = 6,626X10-34 J.s.  c a velocidade da luz = 2,998 X 108 m.s.-1 no vcuo  E a energia absorvida pela molcula na transio eletrnica entre um estado de menor energia (estado fundamental) e um estado de maior energia (estado excitado). A energia absorvida depende da diferena de energia entre o estado fundamental e o estado excitado. Quanto menor for a diferena, maior ser o comprimento de onda de absoro. A energia diretamente proporcional freqncia (v) e inversamente proporcional ao comprimento de onda ( ).

Espectrofotometria no Ultravioleta

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Espectrofotometria no Ultravioleta
Conclui-se ento que a grande vantagem da utilizao da espectrofotometria no ultravioleta est relacionada com a possibilidade de se minimizar os problemas com interferentes, sem complicados procedimentos de separao ou extrao prvios. Quando estudamos garantia e/ou controle de qualidade, nos deparamos com uma disciplina rgida e sistemtica, entretanto tamanha rigidez se justifica pela inerente importncia do tema, afinal qualidade para medicamentos um atributo de carter no apenas comercial, mas tambm legal, tico e moral. Assim, enquanto a qualidade para muitos produtos uma questo de competitividade, no campo da sade deve ser obrigatoriamente atendida.

Referncias Bibliogrficas
 Controle Fsico-Qumico de Qualidade de Medicamentos. Gil, E., S. (Eric de Souza Gil) Editora: Pharmabooks 2 Edio 2007 Revisada. 

Espectrofotometria no Ultravioleta

.BOLO HOMENAGEM PARA PROFESSORA

Espectrofotometria no Ultravioleta
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