Licenciatura em Anlises Clnicas e de Sade Pblica 2009/2010 2 ano 1 semestre

Gentica Molecular Humana

Discente: Catarina Bento (52009033)

Introduo
Caracteriza-se por uma alterao na actividade elctrica do crebro;

Essa alterao produz manifestaes motoras, sensitivas, sensoriais, psquicas ou neurovegetativas;

A epilepsia assume diferentes formas;

At hoje foram identificados pelo menos 12 tipos diferentes de epilepsia, os quais demonstram ter uma base gentica.

Introduo
A gravidade e tipo de epilepsia variam muito, no entanto, todas as suas formas derivam da: Queima de clulas anormais do crebro

Em aproximadamente 25-30% dos casos, a epilepsia causada por:

Tumores
Traumatismos cranianos Acidentes vasculares cerebrais Infeces Casos em que no h nenhuma causa conhecida, sugerem que h predisposio gentica para o desenvolvimento da doena.

Introduo
O que acontece

Os neurnios enviam impulsos elctricos que viajam pelo crebro, tendo como alvo a medula, os msculos, nervos, rgos, e outras partes do corpo. No entanto, se todos os neurnios comearem a enviar impulsos ao mesmo tempo todo o crebro vai acabar por ser estimulado levando convulso.

Durante grande parte do tempo, os neurnios disparam uma corrente elctrica cerca de 80 vezes por segundo; Durante uma convulso, eles enviam esses impulsos cerca de 500 vezes por segundo.

Introduo
As crises epilpticas podem ser desencadeadas por sons repetitivos, luzes cintilantes, videojogos ou inclusive tocando em certas partes do corpo. Mesmo um estmulo leve pode desencadear as convulses em pessoas com epilepsia. At nas que no sofrem de epilepsia, um estmulo muito forte pode desencade-la (como certos frmacos, valores baixos de oxignio no sangue ou valores muito baixos de acar no sangue).

A doena
Doena de LaFora ou epilepsia mioclnica progressiva forma mais agressiva de epilepsia (fatal), causada por uma mutao no cromossoma 6 (gene EPM2A); caracterizada pela presena de corpos LaFora no interior dos neurnios e clulas do fgado, corao, msculo e pele.

uma doena autossmica recessiva;

Indivduos que sofrem desta doena normalmente no vivem alm dos 25 anos.

A doena
Foi descoberta por Gonzalo Rodriguez Lafora (1887-1971)

Neuropatologista espanhol, foi o primeiro a reconhecer pequenos corpos de incluso em pacientes com Lafora.

Descrio da patologia
A doena distingue-se pela presena de corpos de incluso

Corpos Lafora

No interior do citoplasma das clulas

Estes corpos so compostos por glicognio anormal polyglucosans. Polyglucosans so parecidos com amido, so insolveis e por isso formam precipitado dentro das clulas.
Aparecem com a idade Na doena Lafora aumentam So observados em praticamente todos os rgos do paciente No crebro cinge-se aos neurnios A sua morfologia varia de tecido para tecido, geralmente tm: Ncleo central Aspecto perifrico fofo

Descrio da patologia
Os pacientes desenvolvem os primeiros sintomas durante a adolescncia 15 anos de idade. No incio assume a forma de: convulses mioclonia ataxia gota desenvolvimento rpido e grave de uma demncia progressiva Aps este incio o tempo de sobrevivncia curto, isto , menos de 10 anos, aproximadamente.

Descrio da patologia
Schwarz e Yanoff (1965)

Descrio de um caso

Um irmo e irm, fruto de um casamento entre primos (filhos de meiosirmos) com a doena Lafora. As convulses comearam aos 15 anos no rapaz com deteriorao motora e mental progressiva, levando morte na idade de 23,5 anos. As convulses na irm comearam aos 14 anos. Esta apresentou cegueira e demncia progressivas, com a morte aos 19 anos. Foram encontrados corpos Lafora intra e extra-celulares no SNC, na retina, cilindros-eixo dos nervos espinhais, msculo cardaco, clulas hepticas e fibras musculares estriadas.

Diagnstico
Baseia-se na existncia de corpos Lafora na clulas mioepiteliais que rodeiam as glndulas sudorparas apcrinas axilares. Biopsia da pele axilar Fora da axila os corpos Lafora so encontrados nas clulas que compem os ductos das glndulas sudorparas crinas. Os corpos so marcados com colorao especfica, PAS (cido Schiff peridico) resistente ao tratamento com diastase.

Tambm se podem fazer biopsias no crebro, musculo e fgado, mas actualmente o diagnstico mais seguro feito atravs de sequenciao de DNA.

Diagnstico

Diagnstico
Em dois pacientes no relacionados com a doena de Lafora: mutao no gene EPM2A mutao no gene NHLRC1 O diagnstico foi feito atravs da presena de corpos Lafora nas clulas mioepiteliais das glndulas axilares apcrinas.

Em outros 2 pacientes no relacionados, cada um com mutaes nos dois genes diferentes, o diagnstico da doena foi feito atravs de uma biopsia no antebrao revelando a presena de corpos Lafora nas clulas dos ductos crinos. Conclui-se que os pacientes com qualquer forma gentica da doena tm corpos de Lafora, tanto nas clulas mioepiteliais apcrinas e clulas do ducto crino.

Diagnstico
No entanto
Um paciente foi originalmente diagnosticado com uma forma de doena Lafora atpica, tendo como base uma bipsia axilar mostrando material PAS-positivo nas clulas que revestem o lmen da glndula, mas no nas clulas mioepiteliais ou glndulas crinas.

A anlise da mutao mostrou na verdade que o paciente tinha a doena de Unverricht-Lundborg.

Dificuldade em diagnosticar a doena de Lafora por biopsia axilar, e favoreceu a biopsia da pele fora da axila.

Caractersticas gentipicas e fentipicas

Padro de herana Autossmica Recessiva
Entendimento da patologia restrito Porque os corpos Lafora afectam apenas os neurnios e no os astrcitos.

Glicognio normal solvel no meio celular (estrutura fractal), ao contrrio do glicognio anormal nos corpos Lafora, com teor de fosfato mais alto e ramificaes muito prximas umas das outras.

A laforin desfosforila o glicognio , mantendo a sua solubilidade Assim numa mutao no gene que codifica a laforin, o glicognio torna-se hiperfosforilado

Caractersticas gentipicas e fentipicas

As afirmaes anteriores foram confirmadas em ratos deficientes em Laforin

Chegou-se a uma concluso de que o corpo de Lafora polyglucosan na natureza, isto , molculas de glicognio ramificadas anormalmente. Pesquisas sugerem que a hiperactividade da glicognio-sintetase pode levar formao de polyglucosan. - A glicognio-sintetase inactivada por fosforilao em vrios resduos de aminocidos de muitas molculas, incluindo GSK-3;

Caractersticas gentipicas e fentipicas

A glicognio-sintetase activada por desfosforilao pela fosfatase-1.

Necessita de PTG (protena marcadora de glicognio)

Malin a protena responsvel pela degradao de PTG, com a ajuda da laforin atravs do sistema ubiquitina proteossoma (UPS). Na doena Lafora a protena Malin uma das que sofre uma mutao e, consequentemente, h uma acumulao de PTG. Excesso de glicognio-sintetase
PRODUO DE GLICOGNIO ANORMAL

Caractersticas gentipicas e fentipicas

Neurnios expressam a glicognio-sintetase mas, ao contrrio dos astrcitos, so incapazes de a degradar devido ausncia de glicognio fosforilase. Os astrcitos so responsveis pelo armazenamento de glicognio no crebro, no desenvolvem corpos Lafora.

Destaca a importncia da capacidade de degradar glicognio

Caractersticas gentipicas e fentipicas

Em concluso
Na mutao, o complexo Malin-Laforin deixa de existir e de conduzir os neurnios para fazer glicognio normal.

Isso pode ser prejudicial para a funo neuronal e possivelmente resultar na manifestao de DEMNCIA

Caractersticas gentipicas e fentipicas

Quanto aos genes
EPM2A
Em 10 famlias com epilepsia mioclnica de Lafora, identificou-se seis variaes distintas da sequncia de DNA do gene EPM2A e uma microdeleco no homozigoto. Calcula-se que estas mutaes causem efeitos de deleco na protena laforin, resultando na doena.

Caractersticas gentipicas e fentipicas

NHLRC1 (EPM2B)
Em 34 probandos com doena de Lafora, identificou-se 17 diferentes mutaes no gene NHLRC1 em 26 famlias, incluindo 8 eliminaes, uma insero, 7 mudanas missense, nonsense e uma mudana. Dezoito famlias eram homozigotos e oito eram heterozigotos compostos para as mutaes. Identificaram 18 mutaes, incluindo 12 novas mutaes, no gene malin em 23 dos 25 pacientes com doena de Lafora que no apresentam mutaes no gene laforin. P69A foi a mutao dominante, identificada em 14 cromossomas de 9 pacientes no relacionados. Anlise de hapltipos sugere um efeito fundador para apenas 2 dessas famlias.

Caractersticas gentipicas e fentipicas

Identificou seis diferentes mutaes no gene NHLRC1 em 5 de 8 famlias japonesas com a doena de Lafora. Outra famlia japonesa tinha uma mutao no gene EPM2A e 2 famlias japonesas no tm mutaes em nenhum. Concluiu-se que mutaes no gene NHLRC1 so uma causa comum da doena de Lafora, no Japo. Identificaram sete mutaes diferentes, incluindo duas novas mutaes, no gene NHLRC1 em membros afectados de 8 famlias com doena de Lafora. Os autores afirmam que 39 mutaes diferentes foram identificadas no gene NHLRC1.

Caractersticas gentipicas e fentipicas

difcil de estabelecer correlaes gentipo-fentipo na doena de Lafora, porque heterozigotos compostos em diferentes combinaes so comuns. A variao dos cuidados disponveis nos vrios pases para indivduos com LD pode, em parte influenciar longevidade e complicaes na doena. Alm disso, a variabilidade intra-e inter-familiar na idade de incio considervel, sugerindo que outros factores genticos alm das mutaes em EPM2A ou NHLRC1 podem influenciar na patognese da doena. At data, nenhuma correlao foi demonstrada entre o fentipo e o tipo de mutaes ou a localizao da mutao no gene.

Caractersticas gentipicas e fentipicas

Apesar de um sub-fentipo, que consiste num distrbio de aprendizagem na infncia seguido por epilepsia e deteriorao neurolgica tem sido associado a mutaes no exo 1 do EPM2A ou no p . Ile198Asn localizado num domnio de interaco protena-protena NHL de NHLRC1 (EPM2B), estes resultados precisam ser replicados, amplificados e mais estudados, a fim de compreender a sua relao com os processos fisio-patolgicos subjacentes. Indivduos com mutaes no NHLRC1 tendem a viver mais do que aqueles com mutaes no EPM2A. Este achado tem sido demonstrado repetidamente por pessoas com a mutao NHLRC1 (EPM2B) p.Asp146Asn. No entanto, isto no se aplica a todas as pessoas com mutaes no NHLRC1, j que alguns podem ter fentipos extremamente graves.

Tratamento
No h tratamento!

A terapia visa apenas o alivio sintomtico

Apesar das convulses e mioclonia serem controladas durante um longo perodo de tempo com antipilticos, os pacientes raramente sobrevivem alm de uma ou duas dcadas devido aos efeitos devastadores da demncia e ataxia. Tratamento com zanosinamida prolongou a vida das pessoas com a doena, pois ajuda a controlar e diminuir a gravidade das crises epilpticas. Testes de terapia gnica esto a ser realizados em ratos.

Perspectivas Futuras

Pesquisas e estudos recentes sobre os mecanismos exactos da doena de Lafora esto a ser feitos, com a possibilidade futura de substituio da protena deficiente em clulas nervosas atravs de terapia gnica.

Bibliografia

http://rarediseases.about.com/od/rarediseasesl/a/lafora05.htm
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1389/