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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR FACULDADE DE FARMCIA, ODONDOLOGIA E ENFERMAGEM DEPARTAMENTO DE ANLISES CLNICAS E TOXICOLGICAS ANLISES TOXICOLGICAS

FUNDAMENTO DAS ANLISES TOXIOLGICAS


Teresa Maria de Jesus Ponte Carvalho

Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

Toxicologia
a cincia que tem como objeto de estudo o efeito adverso proveniente da interao das substncias qumicas com os organismos vivos.

Elementos bsicos
Toxicante Toxicidade Intoxicao
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Toxicologia
Diviso

Analtica ou Qumica (Toxicante)

Experimental (Toxicidade) Clnica (Intoxicao)

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OBJETO DE ESTUDO DA TOXICOLOGIA

Propriedades fsicas e qumicas dos agentes txicos


Efeitos fisiolgicos ou comportamentais no organismo

vivos Os mtodos qualitativos e quantitativos para anlises em materiais biolgicos e no-biolgicos Desenvolvimento de procedimentos para o tratamento da intoxicao.

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reas da Toxicologa

Toxicologa de alimentos

Toxicologa ambiental

Toxicologa de medicamentos

Toxicologa ocupacional

Toxicologa social

Aspectos

Clnico

Analtico

Legislao

Investigao

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Anlises Toxicolgicas
Estima os compostos qumicos de forma qualitativa ou quantitativa

Anlises de urgncia Monitorizao do grau de exposio Teraputica Biolgica da exposio ocupacional Ambiental Farmacodependncia Controle da Dopagem Toxicologia Alimentos Forense
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Finalidades

Toxicologista Analtico
Capaz

de identificar os agentes txicos, diferenci-los dos similares e quantific-los. Amostra limitada, complexa, compostas esto em quantidades pequenas. Confiabilidade e interpretao dos resultados

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Laboratrio de Anlises Toxicolgicas


Conjunto de processos analticos capaz de identificar substncias qumicas

o Informaes que ajudem na anlise

o Caractersticas do toxicante
o Tipos de mtodos o Tempo de anlise o Documentao
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Agentes txicos
Gases (contaminantes da atmosfera)
Monxido de carbono/xidos de

nitrognio/Oznio
Volteis
Solventes

Inorgnicos
Metais

Orgnicos no volteis
Drogas de abuso Frmacos
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Substncias nos alimentos, meio ocupacional e

ambiental

Anlises Toxicolgicas
Aspectos a serem definidos antes do trabalho analtico

Finalidade (Para qu)


Toxicante (O qu) Amostra (Onde)

Mtodo (Como)
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Amostra
Seleo
Finalidade da anlise Natureza qumica Forma e concentrao do

analito Indicador que se pretende reconhecer ou quantificar


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Post-mortem Urgncia Monitorizao Teraputica Biolgica Farmacodepend ncia Ambiental

Tipos de Amostras
Amostras Sangue, soro, plasma Urina Contedo Gstrico Visceras, humor vtreo, crebro, pulmes Unhas, cabelo, plos Uso
Urgncia, Monitorizao teraputica Urgncia, Monitorizao Biolgica Urgncia/ Forense Forense Monitorizao Biolgica, Forense

Alimentos, gua, plantas

Urgncia, Forense

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Anlises Toxicolgicas
Mtodos de anlise
Triagem
Confirmao Seletivos ou especficos

Sistemticas Analticas

Gases (poluentes atmosfricos) Volteis (tolueno) Inorgnicos (metais) Orgnicos no volteis (medicamentos)

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Etapas da Anlise
Amostragem e obteno das amostras

(homogeneizao, hora, condies coleta)

Tratamento das amostras


Determinao dos analitos

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Coleta , Transporte e Conservao de Amostras


Especificidades - rea da toxicologia Estabelecer a finalidade
Protocolo toxicolgico Caractersticas da exposio Hbitos individuais Higiene Frasco para coleta Identificao

Anticoagulantes Conservantes Modo de transporte e armazenamento

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Anlises Toxicolgicas
Tratamento das amostras Separao: liberao dos analitos amostra

Exemplo: destruio matria orgnica, hidrlise, digesto

Extrao: retirada dos analitos da matriz Purificao: remoo de interferentes endgenos e

analitos ligados protenas

Exemplo: precipitao protenas

Principais tcnicas de extrao


Lquido-lquido Fase slida (SPE)

Microextrao (SPME e LPME)


Headspace

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Garantia de Qualidade em Anlises Toxicolgicas


Boas Prticas de Laboratrio (BPL)
Todas as aes planejadas ou sistemticas necessrias para

prover a confiana necessria de que o produto ou servio ir satisfazer certas necessidades. Os sistemas de qualidade esto relacionados aos processos organizacionais e s condies sob as quais estudos no clnicos sobre sade e ambiente so planejados, realizados, monitorados, registrados, relatados e arquivados. Sistemas o BPL (Boas Prticas de Laboratrio) o BPLC (Boas Prticas de Laboratrio Clnico) o ISO/IEC 17025:2005
(International Standard Organization/International Eletrotechnical Commision)

Validao Demonstrar que o ensaio analtico tem confiabilidade (ANVISA RE 899/2003, Inmetro DOQ-CGCREAnlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC 19 008/2003).

Anlise de metais
Separar o metal da matriz orgnica
Tcnica

de mineralizao, digesto desagregao da matria orgnica.

ou

Considerar: natureza da matriz, o metal a ser

determinado e a tcnica de identificao. Tipos de mineralizao:


por via mida: com agentes oxidantes (cidos

fortes sulfrico, clordrico, perclrico), agentes solubilizadores e agentes neutralizantes e fonte de aquecimento (chapa ou micro-ondas) por via seca: altas temperaturas.

Mineralizao da matria orgnica


Anlise de metais
Objetivos da Mineralizao: degradar a matria

orgnica em CO2 e H2O.


Ligados a constituintes de tecidos como grupos - SH de

enzimas e protenas e na corrente sangunea na forma de albuminatos.

Devemos ter os seguintes cuidados:


Evitar

perdas por deflagrao, volatilizao ou adsoro. Usar reagentes isentos de metais. Lavagem vidraria com HNO3 e gua desmineralizada.

Mineralizao via seca


As vantagens:
Enrgico, rpido, poucos reagentes

Desvantagens
Perdas por volatilizao ( Hg e As) Adsoro do material na cpsula quanto maior a

temperatura maior a adsoro Produo de carvo pode levar a perdas por reduo (antes de ir para a mufla retirar toda a umidade para evitar deflagrao do vapor dgua).

Na mineralizao da matria orgnica para anlise de arsnio em alimentos marinhos as reaes so: Reaes As+3 + 2 Mg(NO3)2 + MgO Mg3(AsO4)2 + 4NO2 Arseniato de Magnsio (fixo) Mg3(AsO4)2 As2O7Mg2 + MgO 550C Piroarseniato de Magnsio

Reaes do Mtodo de Vasak e Sedivec


Fundamento: Baseia-se na captao de arsina por uma soluo de DDC-Ag 0,5% em piridina, formando um complexo colorido

Formao da arsina
Zn0 + 2HCl 2H0 + As-3 ZnCl2 + 2H0 As H3 (arsina)

Arsina + reagente cromognico = complexo colorido