Como extrair o DNA a partir de células

de tecidos vegetais?
Introdução
Os ácidos nucleicos, DNA e RNA, são polímeros de nucleótidos ligados por ligações fosfodiéster. Estes monómeros são constituídos por uma pentose
(desoxirribose no DNA e ribose no RNA), um grupo fosfato e por uma base nitrogenada (Timina, Citosina, Adenina e Guanina no DNA e Uracilo,
Citosina, Adenina e Guanina no RNA).
O ADN é um tipo de ácido nucleico que possui um papel fundamental na hereditariedade, armazenamento transmissão e expressão da informação
genética, nos seres eucariontes está maioritariamente localizado no núcleo das células. O modelo da estrutura do DNA consiste numa molécula
formada por dupla cadeia polinucleotídica enrolada em hélice, estando as cadeias unidas por pontes de hidrogénio entre as bases complementares. As
cadeias estão dispostas anti paralelamente, sendo que uma apresenta livre o carbono 5´da pentose e a outra o carbono 3´ da pentose.
A extração do DNA implica a sua libertação do núcleo e do meio intercelular, para isso os tecidos tem que ser triturados e posteriormente sujeitos à
ação de reagentes. Os detergentes adicionam-se para a dissolução e desintegração das membranas, que são de natureza fosfolipídica, permitindo que
o DNA se solte para a solução. Ao adicionar NaCl vai haver a neutralização da carga negativa do DNA, por ligação aos iões Na+ e, também, vai
favorecer a precipitação das proteínas. Quando se adiciona álcool etílico, para além de se formar uma mistura heterógena, faz com que os filamentos
de DNA que são mais densos que o álcool, mas menos densos que a água se acumulem na interfase, ficando assim visíveis.

OBJETIVO: Extração e isolamento de DNA de células vegetais

Material e Método Resultados

Material: Saco de plástico com fecho hermético • Gobelés de 250 mL • Filtro de café • Funil
• 2 tubos de ensaio e respetivo suporte • Provetas de 100 mL • Pipeta e pipetador • Pipeta de
Pasteur • Colher de laboratório • Álcool etílico a 96% (arrefecido no congelador durante
pelo menos 1 h) • Água da torneira• Detergente líquido da loiça • Papel absorvente
• Palito de madeira grande • Sal de cozinha • Diospiro e banana maduros.

Método:
1.Colocou-se metade de diospiro e de uma banana descascados dentro do saco plástico e
removeu-se o ar do seu interior antes de o fechar hermeticamente. 2. Esmagaram-se as metades
de diospiro e da banana, pressionando o saco repetidamente entre as duas mãos, até ficarem
completamente desfeitos. 3.Adicionou-se à fruta triturada 50 mL de água, três gotas de detergente
da loiça e uma colher de sal. Misturou-se bem. 4. Colocou-se o funil com o filtro de café na abertura
da proveta e transferiu-se o conteúdo do saco para o filtro. 5. Distribuiu-se a mistura obtida por tubo
s de ensaio.6. Adicionou-se, com a ajuda da pipeta de Pasteur, álcool etílico arrefecido, deixando-o
DNA
escorrer lentamente pela parede do tubo de ensaio ligeiramente inclinado. 7. Observou-se a
formação de um precipitado esbranquiçado na fase alcoólica.8. Recolheu-se do álcool, com um
palito de madeira, uma amostra de DNA.

Conclusão
Nesta atividade experimental foi possível por em prática o processo de extração e isolamento de DNA. A trituração do material biológico(1ªetapa) permitiu a
trituração das células dos tecidos vegetais.; a filtração levou à remoção de fragmentos e partículas celulares insolúveis. Os reagentes utilizados (detergente, sal e
álcool) libertaram o DNA do interior das células, devido à dissolução dos lípidos das membranas celulares e à desintegração dos núcleos, à neutralização das
cargas negativas dos grupos fosfato do DNA e à precipitação das proteínas insolúveis. No fim desta experiência foi possível visualizar uma massa filamentosa
esbranquiçada constituída por moléculas de DNA agregadas, localizada na interfase da fase alcoólica, uma vez que o DNA é menos denso que a água mas mais
denso que o álcool. Nestas moléculas isoladas na atividade encontra-se a informação genética. O modelo tridimensional em dupla hélice não é visível à vista
desarmada. Os objetivos foram amplamente atingidos.

Fontes
https://www.bing.com/search?q=extra%c3%a7%c3%a3o+de+dna+fruta&FORM=AWRE (consultado em
29/10/239)
http://www.ugb.edu.br/PIBID/revista/assets/docs/BIOLOGIA_EXTRACAO-DA-MOLECULA-DE-DNA-EM-

Biologia e Geologia 11.ºB / outubro de 2023 FRUTAS.pdf (consultado em 30/10/239)

https://educacaopublica.cecierj.edu.br/ (consultado em30/10/239)
Reis, Jorge et al. Odisseia 11 : biologia, 11º ano .1ª ed. Porto : Porto Editora
Afonso Martins, nº 1; Carolina Carvalho, nº 3; Edgar Elias, nº 7 e Leonor Carneiro, nº 12