Carrera: ngeniera Qumica

Departamento: ngeniera Qumica

Bloque: Tecnologas Aplicadas
rea: ngeniera Qumica
FACULTAD REGONAL DELTA
UTN
2.010
Cagnoni, Horacio
Alderete, Laura
0iteo de
reuctoret biolgicot.
a) Equipos auxiIiares,
b) Agitacin,
c) Aireacin,
d) EsteriIizacin deI aire,
e) Trasferencia de oxigeno,
f) EI oxgeno como sustrato,
g) EI proceso: EsteriIizacin y carga.
< A pesar de que e| fermentador es e| corazn en un
proceso de producc|n b|o|g|ca su adecuado
func|onam|ento depende de un determ|nado nmero de
un|dades aux|||ares
<L| nmero de estas un|dades var|a en cada proceso pero
en e| caso de|os s|stemas m|crob|o|g|cos todos requ|eren
una preparac|n ester|||zac|n y enfr|ado de| med|o
nutr|ente as| como |a preparac|n de| |nocu|o
<Los procesos aerb|cos requ|eren compr|m|r e| a|re
ester|||zar|o y e||m|nar en cond|c|ones de segur|dad e| a|re
de sa||da
Auxiliares del fermentador Auxiliares del fermentador
O L| fermentador por su parte neces|ta
Vapor de gua
agua para |os refr|gerantes f|u|dos para e| contro| de pn y de
espuma que deben ser ester|||zados
W L| fermentador que se ut|||za para |a preparac|n de| |ncu|o
es un vers|n a esca|a reduc|da de| fermentador de
producc|n neces|ta de |os m|smo serv|c|os y puede a su
vez ser |nocu|ado con otro rec|p|ente menor que se ut|||za
como |ncu|o
Los vo|menes de |ncu|o norma|mente ut|||zados g|ran
a|rededor de| d|ez por c|ento de| vo|umen de| cu|t|vo que va
a ser |nocu|ado
Agitacin y mezclado
WLa energa de transferencia, el substrato y los
metabolitos dentro del Biorreactor deben ser puestos
en contacto mediante un mecanismo apropiado de
mezcla.
WLa eficiencia del transporte de cualquier substrato
puede ser crucial para la eficiencia de toda la
fermentacin.
WLa agitacin de un Biorreactor produce los siguientes
efectos en las tres fases:
a) Dispersin del aire en la solucin de nutrientes,
b) Homogeneizacin, para igualar la temperatura y la
concentracin de los nutrientes en el fermentador,
c) Suspensin de los microorganismos y de los
nutrientes slidos
d) Dispersin de los lquidos no miscibles.
;g f|u[o de gas en m
N ve|oc|dad de| |mpu|sor en nz
mero de Reynolds
O La agitacin asegura el transporte de los nutrientes dentro del
cultivo liquido.
O En el flujo turbulento dos molculas de liquido se mueven una
en relacin a la otra.
O La velocidad relativa entre la solucin nutritiva y las clulas
individuales debera ser de:
0,5 m/s
O El flujo turbulento puede ser caracterizado por el nmero
adimensional de Reynold
D N p
Re= Re=----------

e nmero de eyno|d
N Ve|oc|dad de| ag|tador (s')
D d|metro de| ag|tador (cm)
dens|dad (g]cm3)
v|scos|dad d|nm|ca (g]cms)
El mero de Reynolds en el fermentador
O El nmero de Reynold describe el flujo solamente en
el permetro del agitador.
O Para distribuir homogneamente la turbulencia
dentro del reactor debe ser utilizado un impulsor de
forma y dimetro apropiados.
O La velocidad de flujo es crucial para la distribucin de
la turbulencia.
O Sin embargo como la turbulencia puede daar a los
organismos filamentosos existe frecuentemente
limitaciones respecto a cuanto de rpido puede ser
agitado el sistema.
O El tiempo de mezclado es el tiempo necesario para
homogeneizar el reactor entero hasta el grado de
homogeneizacin requerido.
O Ejemplo: Re para fermentacin de la Penicilina con
Penicillum chrysogenum.
Ejemplo:
Re para fermentacin de la Penicilina con
Penicillum chrysogenum.
Los valores de Re para el medio de cultivo
son ms bajos que para el agua pura.
Fermentador
pequeo
Fermentador de
produccin
Agua
=10- g/cm. s
= 1 centi Poise
Re= 4,0.10 Re= 6.9.10
edio de Cultivo
= 5 g/cm. s
= 500 centi Poise
Re= 8,0.10 Re= 1.4.10
Nmero de otenc|a
L| nmero de potenc|a NpNe nmero de newton ha s|do def|n|do
como un parmetro s|n d|mens|ones que re|ac|onan |a energ|a
requer|da por reactores ag|tados
Iuerza ap||cada o
Np
Iuerza de |a |nerc|a N D p
o fuerza de ag|tac|n (kW)
N ve|oc|dad de ag|tac|n (s')
D| d|metro de| ag|tador (cm)
p dens|dad de| med|o (g]cm3)
Ln e| rango de ve|oc|dad de mezc|ado de| f|u[o |am|nar (Ne 10) e|
nmero de eyno|ds est re|ac|onado con e| nmero de potenc|a
Np k (Ne) m
k constante que depende de|a geometr|a de| rec|p|ente y de |a forma
de| ag|tador pero no de| tamao de| reactor
m1
Nmero de otenc|a en e| f|u[o |am|nar
Con e| f|u[o |am|nar |a potenc|a requer|da para |a ag|tac|n no depende
de |a dens|dad pero est re|ac|onada con otros parmetros de |a
fermentac|n
o N D|
Ln e| rango de ve|oc|dad de mezc|ado de| f|u[o turbu|ento (Nre 10) e|
nmero de potenc|a depende de| nmero de eyno|ds y es constante
Npkconstante m0
8a[o estas cond|c|ones e| nmero de potenc|a es |ndepend|ente de |a
v|scos|dad
o kND|p
Ln e| rango |ntermed|o de ve|oc|dad de mezc|ado (Nre 10 10) no
ex|ste una corre|ac|n senc|||a entre e| nmero de potenc|a y e| nmero
de eyno|ds
Los |mpu|sores de d|sco t|enen un nmero de potenc|a ms a|to que |os
de pa|eta |nc||nada o |os ag|tadores de h||ce
L| vortex y e| Nmero de Iroude
Ln |os 8|orreactores en |os que se forma un vortex es t||
otro nmero s|n d|mens|ones que re|ac|ona e| efecto de |as
fuerzas de |nerc|a y |a fuerzas de gravedad que actan
sobre un f|u|do
ND
NIr
g
G ace|erac|n deb|da a |a gravedad
No se forma vortex en |os b|orreactores con cortacorr|entes
de forma que e| nmero de Iroude no t|ene |mportanc|a en
estos casos
L| nmero de potenc|a e| nmero de eyno|ds y e| nmero
de Iroude estn re|ac|onados unos con otros
Npk(Ne )m(NI)y
DUCCIN DL CAL en |a IL,LN1ACIN
A f|n de obtener rend|m|entos pt|mos |as fermentac|ones
deben ser ||evadas acabo a temperatura constante
nay d|versos parmetros que afectan e| ba|ance de ca|or de
un proceso de fermentac|n
La ve|oc|dad de producc|n de ca|or deb|da a |a ag|tac|n y
a |a act|v|dad metab||ca de |os m|croorgan|smos debe ser
ba|anceada por |as prd|das de ca|or que resu|tan de |a
evaporac|n y |a rad|ac|n mas |a e||m|nac|n de ca|or
deb|da a| s|stema de refr|gerac|n cam|sa de| fermentador
o |os serpent|nes de refr|gerac|n
La producc|n de ca|or durante |a ag|tac|n puede ser
ca|cu|ada a part|r de| consumo de energ|a de| motor menos
|as perd|das a travs de |as [untas |os co[|netes y e| e[e de|
motor
1A8LAS segn ,ICGANIS, y SUS1A1
nay tab|as de coef|c|entes de producc|n e ca|or para
bacter|as sobre d|ferentes substratos
Los substratos ms fuertemente ox|dados como |a g|ucosa o
e| acetato producen menos ca|or por b|omasa que con |os
substratos mas reduc|dos como metano y metano|
<
AIreacIn y esterIIIzacIn deI aIre
Adems de proporcIonar oxgeno, Ia aIreacIn es
tambIn Importante par IImpIar eI cuItIvo de
productos metabIIcos, voItIIes e IndeseabIe.
La agItacIn ya sea dIrecta o como eIecto
secundarIo de Ia aIreacIn es necesarIa
partIcuIarmente por Ias sIguIentes razones:
1) Para Incrementar Ia veIocIdad de transIerencIa de
oxIgeno desde Ia burbuja de aIre aI medIo IquIdo.
Los mIcroorganIsmos no pueden utIIIzar oxIgeno
gaseoso, sIno soIo oxIgeno en dIsoIucIn.
2) Para aumentar Ia veIocIdad de transIerencIa de
oxIgeno y nutrIentes desde eI medIo a Ias cIuIas.
DebIdo aI contInuo movImIento, se evIta que Ias
cIuIas creen areas estancadas con bajos nIveIes
de oxIgeno y nutrIentes.
<
AIreacIn y esterIIIzacIn deI aIre
Adems de proporcIonar oxgeno, Ia aIreacIn es
tambIn Importante par IImpIar eI cuItIvo de
productos metabIIcos, voItIIes e IndeseabIe.
La agItacIn ya sea dIrecta o como eIecto
secundarIo de Ia aIreacIn es necesarIa
partIcuIarmente por Ias sIguIentes razones:
1) Para Incrementar Ia veIocIdad de transIerencIa de
oxIgeno desde Ia burbuja de aIre aI medIo IquIdo.
Los mIcroorganIsmos no pueden utIIIzar oxIgeno
gaseoso, sIno soIo oxIgeno en dIsoIucIn.
2) Para aumentar Ia veIocIdad de transIerencIa de
oxIgeno y nutrIentes desde eI medIo a Ias cIuIas.
DebIdo aI contInuo movImIento, se evIta que Ias
cIuIas creen areas estancadas con bajos nIveIes
de oxIgeno y nutrIentes.
<
Iectos de Ia aIreacIn
3) Par ImpedIr Ia IormacIn de agrupacIones de
cIuIas o agregados de mIceIIo.
4) Para aumentar Ia veIocIdad de transIerencIa de
productos metabIIcos de Ias cIuIas aI medIo.
S) Para aumentar Ia tasa o Ia eIIcIencIa de Ia
transIerencIa de caIor entre eI medIo y Ias
superIIcIes de reIrIgeracIn deI Iermentador.
Todos estos eIectos son IavorecIdos por eI
movImIento deI medIo, pero adems Ia
turbuIencIa de Ia agItacIn mejora Ia aIreacIn de
Ia sIguIente Iorma:
1. DIspersando eI aIre en pequenas burbujas,
2. Provocando que Ias burbujas tengan que seguIr un
camIno ms tortuoso y retrasando su escape deI
cuItIvo,
<
Iectos de Ia aIreacIn
3) Par ImpedIr Ia IormacIn de agrupacIones de
cIuIas o agregados de mIceIIo.
4) Para aumentar Ia veIocIdad de transIerencIa de
productos metabIIcos de Ias cIuIas aI medIo.
S) Para aumentar Ia tasa o Ia eIIcIencIa de Ia
transIerencIa de caIor entre eI medIo y Ias
superIIcIes de reIrIgeracIn deI Iermentador.
Todos estos eIectos son IavorecIdos por eI
movImIento deI medIo, pero adems Ia
turbuIencIa de Ia agItacIn mejora Ia aIreacIn de
Ia sIguIente Iorma:
1. DIspersando eI aIre en pequenas burbujas,
2. Provocando que Ias burbujas tengan que seguIr un
camIno ms tortuoso y retrasando su escape deI
cuItIvo,
<
3. ImpIdIendo Ia coaIescencIa de Ias burbujas,
4. DIsmInuyendo Ia ancbura IImItante de Ia peIcuIa
de IquIdo en Ia InterIase gas J IquIdo.
La dIsposIcIn ptIma de Ios equIpos de aIreacIn
y agItacIn se debe determInar para cada tIpo
dIIerente de IermentacIn medIante estudIos en
pIanta pIIoto.
n cuItIvos aerbIcos eI sumInIstro de oxgeno a
Ias cIuIas no debera ser eI Iactor IImItante .
Lo contrarIo es un IuncIonamIento IneIIcaz y por
Io tanto antIeconmIco.
I oxIgeno en cuItIvos aerbIcos
<
3. ImpIdIendo Ia coaIescencIa de Ias burbujas,
4. DIsmInuyendo Ia ancbura IImItante de Ia peIcuIa
de IquIdo en Ia InterIase gas J IquIdo.
La dIsposIcIn ptIma de Ios equIpos de aIreacIn
y agItacIn se debe determInar para cada tIpo
dIIerente de IermentacIn medIante estudIos en
pIanta pIIoto.
n cuItIvos aerbIcos eI sumInIstro de oxgeno a
Ias cIuIas no debera ser eI Iactor IImItante .
Lo contrarIo es un IuncIonamIento IneIIcaz y por
Io tanto antIeconmIco.
I oxIgeno en cuItIvos aerbIcos
<
Aspectos que aIectan aI sumInIstro de oxIgeno aI cuItIvo
1. TIpo de agItacIn: Ia Iorma, eI nmero y dIsposIcIn de Ios
ImpuIsores y deIIectores.
Un gran Iermentador esta provIsto normaImente de dos o
tres ImpuIsores a nIveIes adecuados deI eje de agItacIn y
tres o cuatro deIIectores vertIcaIes en Ia pared deI
recIpIente.
2. VeIocIdad de agItacIn: Los Iermentadores de IaboratorIo
pueden IuncIonar a 1.000 rpm o ms, pero esto es
ImpractIcabIe con recIpIentes ms grandes.
La consIstencIa deI cuItIvo en una IermentacIn de
penIcIIIna, por ejempIo, es taI que IncIuso S0 rpm pueden
exIgIr un consumo de energa eIevado y poco rentabIe.
n Ia practIca eI eIecto de cIzaIIa en eI extremo de Ia paIa es
eI Iactor ms Importante y ms que Ias rpm.
Hay que tener en cuenta, entonces, Ia veIocIdad en eI
extremo de Ia paIa.
<
Aspectos que aIectan aI sumInIstro de oxIgeno aI cuItIvo
1. TIpo de agItacIn: Ia Iorma, eI nmero y dIsposIcIn de Ios
ImpuIsores y deIIectores.
Un gran Iermentador esta provIsto normaImente de dos o
tres ImpuIsores a nIveIes adecuados deI eje de agItacIn y
tres o cuatro deIIectores vertIcaIes en Ia pared deI
recIpIente.
2. VeIocIdad de agItacIn: Los Iermentadores de IaboratorIo
pueden IuncIonar a 1.000 rpm o ms, pero esto es
ImpractIcabIe con recIpIentes ms grandes.
La consIstencIa deI cuItIvo en una IermentacIn de
penIcIIIna, por ejempIo, es taI que IncIuso S0 rpm pueden
exIgIr un consumo de energa eIevado y poco rentabIe.
n Ia practIca eI eIecto de cIzaIIa en eI extremo de Ia paIa es
eI Iactor ms Importante y ms que Ias rpm.
Hay que tener en cuenta, entonces, Ia veIocIdad en eI
extremo de Ia paIa.
<
Aspectos que aIectan aI sumInIstro de
oxIgeno aI cuItIvo
3. ProIundIdad de IIquIdo en eI Fermentador: Ias
burbujas se mantIenen ms tIempo en eI medIo en
un Iermentador aIto (o proIundo)
La gran presIn bIdrosttIca en eI dIIusor mejora
Ia dIsoIucIn deI oxgeno.
n Ia prctIca es corrIente encontrar una reIacIn
aItura J dImetro de 3:1 o 4:1
4. TIpos de dIIusor: Se debe reaIIzar una anIIsIs
preIImInar para desarroIIar eI mejor dIseno para
cada tIpo de Iermentador.
Los numerosos orIIIcIos son IcIImente
bIoqueabIes y una soIa abertura produce burbujas
muy grandes.
<
Aspectos que aIectan aI sumInIstro de
oxIgeno aI cuItIvo
3. ProIundIdad de IIquIdo en eI Fermentador: Ias
burbujas se mantIenen ms tIempo en eI medIo en
un Iermentador aIto (o proIundo)
La gran presIn bIdrosttIca en eI dIIusor mejora
Ia dIsoIucIn deI oxgeno.
n Ia prctIca es corrIente encontrar una reIacIn
aItura J dImetro de 3:1 o 4:1
4. TIpos de dIIusor: Se debe reaIIzar una anIIsIs
preIImInar para desarroIIar eI mejor dIseno para
cada tIpo de Iermentador.
Los numerosos orIIIcIos son IcIImente
bIoqueabIes y una soIa abertura produce burbujas
muy grandes.
<
Aspectos que aIectan aI sumInIstro de oxIgeno aI cuItIvo
S. FIujo de aIre: Ia eIIcIencIa de aIreacIn se Incrementa
aumentando Ia veIocIdad de IIujo de aIre, expresada
normaImente en trmInos de vvm (voIumen de aIre J
voIumen de medIos J mInuto).
n Ia prctIca no resuIta econmIco abastecer a Ios grandes
Iermentadores con aIre a veIocIdad mayor a 0,S vvm.
6. PropIedades IsIcas deI medIo: Ia temperatura, vIscosIdad,
tensIn superIIcIaI y Ia naturaIeza deI organIsmo aIectan Ia
dIsoIucIn deI oxgeno dIrectamente o por tamano de burbuja
y turbuIencIa.
Un Incremento de presIn Iavorece Ia dIsoIucIn deI oxgeno.
Para aprovecbar este eIecto se puede dIsenar un
Iermentador ms proIundo (o aIto) o restrIngIr
parcIaImente Ia Iuga de Ios gases de escape para aumentar
Ia presIn en Ia parte aIta.
<
Aspectos que aIectan aI sumInIstro de oxIgeno aI cuItIvo
S. FIujo de aIre: Ia eIIcIencIa de aIreacIn se Incrementa
aumentando Ia veIocIdad de IIujo de aIre, expresada
normaImente en trmInos de vvm (voIumen de aIre J
voIumen de medIos J mInuto).
n Ia prctIca no resuIta econmIco abastecer a Ios grandes
Iermentadores con aIre a veIocIdad mayor a 0,S vvm.
6. PropIedades IsIcas deI medIo: Ia temperatura, vIscosIdad,
tensIn superIIcIaI y Ia naturaIeza deI organIsmo aIectan Ia
dIsoIucIn deI oxgeno dIrectamente o por tamano de burbuja
y turbuIencIa.
Un Incremento de presIn Iavorece Ia dIsoIucIn deI oxgeno.
Para aprovecbar este eIecto se puede dIsenar un
Iermentador ms proIundo (o aIto) o restrIngIr
parcIaImente Ia Iuga de Ios gases de escape para aumentar
Ia presIn en Ia parte aIta.
Sum|n|stro de ox|geno
L| ox|geno e sum|n|stra norma|mente en forma de a|re
Ln teor|a es pos|b|e me[orar |a ef|c|enc|a de a|reac|n sum|n|strando
ox|geno puro en de bombonas No es |o comn
Los fermentadores pequeos estn equ|pados norma|mente con
bombas de a|re |nd|v|dua|es med|dores de f|u[o y f||tros
L| med|dor de f|u[o de a|re debe estar ub|cado en |a secc|n N
estr|| prev|a a| f||tro para perm|t|r su extracc|n para
manten|m|ento o recamb|o por desperfectos s|n contam|nar a|
s|stema
Los grandes fermentadores estn equ|pados con un grupo de
compresores que a||mentan un grupo de f||tros de a|re que a su vez
sum|n|stran una corr|ente de a|re estr|| a todos |os fermentadores y
tamb|n a |a fuente de potenc|a neumt|ca para v|vu|as
automt|cas
LS1LILI2ACIN DLL AIL
,todos
Inyecc|n de ozono
ad|ac|n UV
Ca|or se rea||za e| pasa[e de a|re sobre e|ementos ca|entados
e|ctr|camente
Se reemp|aza por |a f||trac|n por su a|to costo
I||trac|n por
a) 1orres de carbn act|vado
b) I||tros profundos de |ana de v|dr|o
1|enen |a desventa[a de que e arrugan y so||d|f|can durante |a
ester|||zac|n por vapor
c) I||tros cartucho de f|bra de v|dr|o
No t|enen |a |nconven|entes durante |a ester|||zac|n
1|enen |a venta[a de que se recamb|an fc||mente
Los cartuchos puede ser de Lsteres de ce|u|osa o||su|fona Ny|on
Su estructura membranosa produce un efecto de f||tros abso|utos
Lstos f||tros se ut|||zan para bacter|as pero no s|rven como f||tros
de bacter|fagos
Los bacter|fagos pueden ocas|onar e| fa||o tota| de un s|stema como por e[emp|o
en |a producc|n de ac|do g|utm|co por corynebocterium q/utomicum
Intercamb|o de gases y transferenc|a de masas
Uno de |os factores ms cr|t|cos en |a operac|n de fermentac|n a
gran esca|a es e| sum|n|stro de un |ntercamb|o de gases adecuado
L| ox|geno es e| substrato gaseoso ms |mportante para e|
metabo||smo de |os m|croorgan|smos aerb|cos y e| d|x|do de
carbono es e| producto metab||co ms |mportante
Cuando se requ|ere ox|geno como sustrato frecuentemente es un
factor ||m|tante en |a fermentac|n
Deb|do a su ba[a so|ub|||dad de 9 ppm o 03 m, en un ||tro de
agua 20 C en una mezc|a de a|re agua
or |a |nf|uenc|a de |os |ngred|entes de| cu|t|vo e| conten|do
mx|mo de ox|geno rea|mente es ms ba[o de |o que deb|era ser en
agua pura
La so|ub|||dad de |os gases s|gue |a |ey de nenry en e| rango de
pres|n de gas en e| que opera e| fermentador
LL DL nLN
La |ey de nenry descr|be |a so|ub|||dad de ox|geno en so|uc|ones de
nutr|entes en re|ac|n a |a pres|n parc|a| de| ox|geno en |a fase
gaseosa o
C*
n
C* concentrac|n de ox|geno de |a so|uc|n de nutr|entes a saturac|n
o es |a pres|n parc|a| de| gas en |a fase gaseosa
n es |a constante de nenry que es espec|f|ca para |as fases ||qu|da y
gaseosa
A med|da que aumenta |a concentrac|n de ox|geno en |a fase
gaseosa aumenta |a proporc|n de ox|geno en |a so|uc|n de
nutr|entes
Ln consecuenc|a |a pres|n ms a|ta de ox|geno se cons|gue durante
|a a|reac|n con ox|geno puro
Ln a|reac|n con a|re en agua se cons|gue 9 mg ]|
Ln a|reac|n con ox|geno puro en agua se cons|gue 43 mg ]|
A med|da que aumenta |a 1emperatura desc|ende |a so|ub|||dad de|
ox|geno
1ransferenc|a de OIGLN
ara que e| ox|geno se transf|era desde una burbu[a de gas a una c|u|a
|nd|v|dua| deben ser superadas var|as res|stenc|as parc|a|mente
|ndepend|entes
1 La res|stenc|a dentro de |a pe||cu|a de gas a |a |nterfase
2 La penetrac|n de |a |nterfase entre |a burbu[a y de gas y e| ||qu|do
3 1ransferenc|a desde |a |nterfase a| ||qu|do
4 ,ov|m|entos dentro de |a so|uc|n de nutr|entes
S 1ransferenc|a a |a superf|c|e de |a c|u|a
Ln |a fermentac|ones que se ||evan a cabo con organ|smos un|ce|u|ares
como bacter|as o |evaduras e| factor ms |mportante que contro|a |a
ve|oc|dad de transferenc|a es |a res|stenc|a en |a |nterfase entre |a
burbu[a de gas y e| med|o ||qu|do
Las c|u|as m|crob|anas cerca de |a burbu[a de gas pueden absorber
d|rectamente e| ox|geno a travs de |a |nterfase y |a ve|oc|dad de
transferenc|a de gas a estas c|u|as aumenta
Ln |as ag|omerac|ones de c|u|as o en |as bo||tas de m|ce||o |a
transferenc|a de gas dentro de| ag|omerado puede ser un factor
||m|tante
8urbu[a de
gas
e||cu|a de gas
I|u|do
e||cu|a de
I|u|do
e||cu|a de
I|u|do
C|u|a
es|stenc|a para |a transferenc|a de desde |a burbu[a de
a|re a |a c|u|a m|crob|ana
Iase ||m|tante
Gas f|u|do
CG
C
CO
CG
CI CI
CO
1ransferenc|a de masa de| OIGLN
La trasferenc|a de masa de| ox|geno a ||qu|do puede ser caracter|zado de
|a s|gu|ente forma
NA kL a (C* C L ) 1
NA 1ransferenc|a de masa depend|ente de| vo|umen
kL Coef|c|ente de transferenc|a en |a |nterfase
a superf|c|e espec|f|ca de |ntercamb|o
k L a coef|c|ente vo|umtr|co de transferenc|a de ox|geno (h')
C* va|or de saturac|n de| gas d|sue|to en |a |nterfase
C L concentrac|n de| gas d|sue|to (m,]|)
1 ve|oc|dad de trasferenc|a de ox|geno (m,]| h')
k L a
Coef|c|ente vo|umtr|co de 1ransferenc|a de OIGLN
L| coef|c|ente vo|umtr|co de transferenc|a de ox|geno ha s|do ana||zado
como parmetro cr|t|co para e| func|onam|ento de| b|orreactor
Lste coef|c|ente depende de
W L| d|metro
W Capac|dad
W otenc|a
W S|stema de a|reac|n
W Ve|oc|dad de a|reac|n de| b|orreactor
W Dens|dad
W V|scos|dad
W Compos|c|n de |a so|uc|n de nutr|entes
W Lstructura de| m|croorgan|smo
W Agentes ant|espumantes ut|||zados
W 1emperatura
L| ox|geno como sustrato ||m|tante
Durante e| crec|m|ento |ogar|tm|co |a ve|oc|dad de absorc|n de ox|geno
aumenta y e| con ten|do de ox|geno de| ca|do desc|ende hasta que se
hace ||m|tante
Con organ|smos un|ce|u|ares |a ve|oc|dad de absorc|n de| ox|geno es
constante hasta que otro sustrato se haga ||m|tante
Ln fermentac|ones m|ce||a|es (estreptom|cetos y hongos) |a ve|oc|dad
de absorc|n desc|ende cuando e| ox|geno se hace ||m|tante deb|do a|
aumento en e| vo|umen de| m|ce||o y a| aumento de |a v|scos|dad
re|at|va
Concentrac|n cr|t|ca de ox|geno
Ls e| trm|no ut|||zado para |nd|car e| va|or de |a ve|oc|dad
espec|f|ca de absorc|n de ox|geno que perm|te |a resp|rac|n s|n
|mped|mentos
Equipos accesorios
1 VALVULAS DL SLGUIDAD Como e| Iermentador func|ona
ba[o pres|n se neces|ta una v|vu|a de segur|dad
La v|vu|a debe tener un d|seo que no perm|ta e| paso de
m|croorgan|smos porque de |o contrar|o puede poner en
pe||gro a un s|stema estr|| en este |t|mo caso debe estar
ba[o pres|n de vapor o a|re estr||
L| fermentador debe tener un s|stema constru|do para
reventar a |a pres|n mx|ma perm|t|da en e| fermentador e
|nsta|ado como |t|mo recurso de protecc|n contra |a
exp|os|n
Ln cond|c|ones norma|es de func|onam|ento |as pres|ones se
mant|enen bastante por deba[o de| ||m|te de rotura de| d|sco
Equipos accesorios
2 ,AN,L1S L| manmetro debe estar d|seado para perm|t|r
su ester|||zac|n res|st|r a| ca|or de ester|||zac|n que no perm|ta
|a contam|nac|n
3 VALVULAS DL CN1L |as v|vu|as de contro| debe asegurar que
no se produzcan fugas que pongan en pe||gro de contam|nac|n a|
cu|t|vo puro
Deben estar d|seadas para operac|ones manua|es como
automt|cas
L| contro| automt|co de |os grandes fermentadores puede ser por
un s|stema e|ectro neumt|co donde una db|| sea| e|ctr|ca
contro|a una entrada de a|re estr|| que proporc|ona |a potenc|a
neumt|ca necesar|a para e| func|onam|ento de |a v|vu|a
Equipos accesorios
4 1U8LIAS L| d|seo cu|dadoso de |a red de tuber|as reduce |a
pos|b|||dad de contam|nac|n m|crob|ana
Las tuber|as deber|an tener |as s|gu|entes caracter|st|cas
estar so|dadas con [untas ||sas
en |os puntos en donde es necesar|o e| desmonta[e se deben
ut|||zar [untas su[etas con pernos
|as [untas deben estar a||neadas con prec|s|n para ev|tar cua|qu|er
|rregu|ar|dad |nterna que cause acumu|ac|n de| |echo m|crob|ano
en |o pos|b|e |as tuber|as deber|an tener una |nc||nac|n cont|nua
en una d|recc|n
|as secc|ones hor|zonta|es o |as depres|ones acumu|an med|o
consum|do o ||qu|do de |avado |o que const|tuye una fuente de
|nfecc|n
en todos |os puntos ba[os se debe co|ocar una v|vu|a para drenar
|os |avados o condensados
Equipos accesorios
S CN1L DL 1L,LA1UA |os termmetros deben estar d|seados para
que puedan ser ca||brados con |a mayor prec|s|n en e| rango norma| de
1emperatura de func|onam|ento de| fermentador que en genera| es de
a|rededor de 30 C
L| termmetro debe estar |nsta|ado en un or|f|co en |a parte |atera| de|
fermentador s|n que entre en contacto d|recto con e| cu|t|vo
La sea| de| termmetro se podr |eer d|rectamente o hacer func|onar un
reg|stro o actuar sobre e| equ|po de contro|
6 CN1L DL pn |os e|ementos contro|adores de| pn deben estar en
contacto con e| med|o de cu|t|vo y no pueden sacarse o reemp|azarse
durante e| desarro||o de una fermentac|n
or esta razn debe |nsta|arse un segundo e|emento a|ternat|vo a| ma|
func|onam|ento de| pr|mero
Deben ser res|stentes a |a ester|||zac|n por vapor
Como en |a mayor|a de |as fermentac|ones se produce c|do durante e|
crec|m|ento m|crob|ano e| a[uste de| pn se debe hacer automt|camente con
e| aad|do de |ca|| estr|| por med|o de |a un|dad de contro| que opera
med|ante |a sea| de| s|stema de determ|nac|n de pn de| med|o
Equipos accesorios
CN1L DL LSU,A |os |ngred|entes de| med|o de cu|t|vo
m|crob|ano es espec|a| |os po||ppt|dos y prote|nas son compuestos
tenso act|vos y |a a|reac|n y |a ag|tac|n v|gorosas necesar|os para
un crec|m|ento ef|caz producen una abundante espuma
S| no se con tro|a |a espuma podr|a perderse e| conten|do comp|eto
de| fermentador a travs de| tubo de escape
Ln consecuenc|a e| fermentador debe tener un s|stema de contro| de
formac|n y e||m|nac|n de espuma med|ante |a ad|c|n de ant|
espumante en forma prevent|va y automt|ca
Se debe tener en cuenta que hay ant|espumantes que reducen |a
tasa de transferenc|a de ox|geno por |o que no puede perm|t|rse una
ad|c|n exces|va de |os m|smos
Equipos accesorios
UN1S DL ,ULS1L Ln todo proceso de fermentac|n es
|mportante tomar muestras en forma aspt|ca para e| necesar|o
contro| de| proceso
La metodo|og|a de |a toma de muestras s|gue |as s|gu|entes
secuenc|as
a) L| punto de toma de muestra debe estar proteg|do de |a
contam|nac|n por vapor o a|re estr||
b) ara |a toma de muestra se c|erra |a fuente de vapor o a|re estr||
c) Se f|amea |a boqu|||a de toma de muestra
d) Se de[a pasar un pequeo vo|umen de| med|o para que enfr|e e|
s|stema y e||m|na e| med|o estancado o cercano a| punto de
muestreo
e) Luego se recoge |a muestra en un contenedor estr||
f) La boca de| contenedor conv|ne que este en forma ob||cua para
ev|tar |a contam|nac|n area
g) L| ||qu|do remanente en |a tuber|a se expu|sa por vapor e| cua|
reester|||za a pres|n e| punto de toma de muestra
requiere un suministro continuo de vapor para la
proteccin frente a la contaminacin.
est protegido por aire estril a presin y slo se usa el
vapor para la esterilizacin tras la toma de muestra.
Diseos alternativos de puntos de muestreo
Vapor
Vapor Aire
A
B
Inter|or de un |ermentodor |ndustr|o|
Se ven e| og|todor y |os serpent|nes |nternos.
ESTERILIZACIO de FERETADORES
Ln e| |aborator|o e| mtodo estndar de ester|||zac|n es e| ca|or 120C
de ca|or hmedo durante 1S m|nutos o 160C de ca|or seco durante a|
menos 1 hora
A esca|a |ndustr|a| |a ester|||zac|n por ca|or hmedo es e| mtodo
emp|eado hab|tua|mente
L| ca|or seco es proh|b|t|vamente caro para todos |os usos sa|vo para
unos pocos espec|a||zados como por e[emp|o
Inc|nerac|n de| a|re de escape procedente de cu|t|vos patgenos
emp|eados en |a fabr|cac|n de vacunas
L| rg|men de ester|||zac|n de |aborator|o 120C 1S' no garant|za |a
ester|||dad pero con vo|menes de 1 ||tro o menos y |os n|ve|es norma|es
de contam|nac|n de |os |ngred|entes |a probab|||dad de |nfecc|n de un
|ote es menor de| 1 por 1000
A med|da que |a esca|a de operac|n se |ncrementa |a ester|||zac|n
debe ser ms r|gurosa aumentando e| t|empo |a temperatura o ambos
para mantener |a probab|||dad de contam|nac|n en 1 por 1000
Lsta proporc|n es genera|mente aceptab|e y s|gn|f|ca una c|u|a o una
espora superv|v|ente
ETODOS DE ESTERILIZACIO de FERETADORES
La ester|||zac|n de un rec|p|ente de fermentac|n puede
tener |ugar
Lster|||zar e| rec|p|ente vac|o y |uego aad|r e| med|o
estr||
Lster|||zar e| rec|p|ente [unto con un camb|o comp|eto de
med|o aad|do no ester||mente
Ln este caso para ev|tar e| dao de| va|or nutr|t|vo de|
med|o por reacc|ones de carame||zac|n se ester|||za e|
componente g|uc|d|co de| med|o por separado y aad|do
a| resto de| |os nutr|entes que han s|do ester|||zados en
e| fermentador
ESTERILIZACIO del FERETADOR
y el EDIO por SEPARADO
L| rec|p|ente vac|o de| Iermentador se ester|||za con re|at|va rap|dez
Se reduce e| t|empo en que e| fermentador est |mproduct|vo
L| fermentador t|ene n|ve|es de ex|genc|a e|evados y costosos ya que
t|ene que operar aspt|camente durante un c|erto t|empo s|n n|nguna
pos|b|||dad de manten|m|ento
Con un a ca|dera senc|||a y barata se puede sum|n|strar med|o estr|| para
var|os fermentadores suces|vos
La desventa[a es que una fa||a en |a ca|dera de[a fuera de serv|c|o a todos
|os fermentadores y puede ser que se neces|ten |argas ||neas de
transferenc|a estr|| hasta |os fermentadores ms |e[anos
SECUECIAS
Descarga - Recuperacin del Producto
Limpieza
Calentamiento
Esterilizacin
Enfriamiento
Carga del medio estril
Carga del inculo
ESTERILIZACIO del FERETADOR VACIO
a) CALETAIETO
Se sum|n|stra vapor a| fermentador ||mp|o a travs de una v|vu|a
super|or y e| a|re y e| condensado se purgan med|ante una v|vu|a en e|
punto ms ba[o de| fermentador
Conv|ene que |a v|vu|a de| fondo est equ|pada con un trampa
termostt|ca de vapor
Cuando e| a|re y e| agua se han extra|do |a a|ta temperatura de| vapor
puro c|erra |a v|vu|a
b) ESTERILIZACIO
Luego se aumenta |a pres|n para mantener |a 1emperatura a 120C
1S0C durante e| t|empo requer|do
c) EFRIAIETO
L| rec|p|ente puede ser enfr|ado ba[o pres|n de a|re estr|| hac|endo
c|rcu|ar agua fr|a a travs de| serpent|n o |a cam|sa
1amb|n se puede aad|r med|o estr|| enfr|ado |nmed|atamente despus
de |a ester|||zac|n de| rec|p|ente
Ls esenc|a| ev|tar |a formac|n de vac|o en e| |nter|or de| rec|p|ente
Ln e| caso de un fermentador vac|o tener en cuenta que u rec|p|ente en
vac|o se puede deformar ba[o |a pres|n de| a|re exter|or
L| med|o se puede ester|||zar
1) Ln una ca|dera de| m|smo tamao que e| fermentador
2) ,ed|ante un proceso cont|nuo de a|ta 1emperatura a travs de
un |ntercamb|ador de ca|or
Isterilizucin del medio en onu culderu del mismo tumuo
qoe el Iermentudor:
La ca|dera cerrada prov|sta de serpent|nes para ca|entam|ento y
refr|gerac|n y un ag|tador para max|m|zar e| |ntercamb|o de ca|or se
||ena con med|o
Se ester|||za e| med|o
La tuber|a que une |a ca|dera con e| fermentador se ester|||za
|ntroduc|endo vapor en cada uno de |os puntos super|ores de| s|stema
Se purga e| a|re y e| condensado en |os puntos |nfer|ores
Las tres secc|ones Ca|dera 1uber|a y Iermentador estn separadas por
v|vu|as de forma que cada una se pueda ester|||zar |ndepend|entemente
ISTIRILIZACION del MIIO
L| med|o se puede ester|||zar
Se transf|ere e| med|o estr|| a| fermentador por una comb|nac|n de
gravedad y pres|n de a|re estr|| ya que |a ca|dera est a n|ve| super|or
de| fermentador
La pres|n de a|re estr|| en |a ca|dera se puede sub|r a 2 bar y a 03 bar
en e| fermentador
La transferenc|a se rea||za s|n neces|dad de usar bombas
Conv|ene desconectar |a tuber|a despus de |a transferenc|a para ev|tar
contam|nac|n acc|denta| de| fermentador cuando se recargue |a ca|dera
con med|o no estr|| para e| s|gu|ente proceso
La tuber|a se mant|ene ba[o pres|n de vapor en forma permanente para
ester|||zar cua|qu|er pos|b|e perd|da
,|entras se est ester|||zando y enfr|ando e| med|o en |a ca|dera se vac|a
e| fermentador de |a producc|n anter|or se ||mp|a y se ester|||za de esta
manera se reduce a| m|n|mo e| t|empo en que e| fermentador esta fuera
de serv|c|o
TRANSIIRINCIA del MIIO
L| med|o se prepara en un mezc|ador
Se pasa a travs de un |ntercamb|ador de ca|or a una
ve|oc|dad de f|u[o ta| que est en contacto con |a
parte ca||ente durante e| t|empo suf|c|ente para |a
ester|||zac|n
Las bombas necesar|a para |a transferenc|a de|
med|o se deben co|ocar en e| |ado no estr|| de|
|ntercamb|ador de ca|or
La ester|||zac|n en cont|nuo requ|ere ms t|empo
que |a transferenc|a de| med|o ya ester|||zado desde
|a ca|dera a| fermentador estr|| vac| pero causa
menor deter|oro trm|co a| med|o
Isterilizucin del medio en continoo
Ln |os equ|pos modernos de fermentac|n |os procesos de ester|||zac|n y
enfr|ado se rea||zan automt|camente
Las operac|ones t|enen |a s|gu|ente secuenc|a
Ln e| fermentador ||mp|o se carga e| med|o de cu|t|vo o "pap|||a" a travs de |a
boca de acceso de |o a|to de| rec|p|ente o se bombea desde una un|dad de
mezc|a |ndepend|ente
Ln e| fermentador o en |a un|dad de mezc|a se agrega agua ca||ente generada por
e| enfr|am|ento de un |ote de med|o prev|amente ester|||zado
Lsto t|ene dos venta[as
W Ahorro de energ|a para ca|entar e| agua
W La reducc|n de| deter|oro por ca|entam|ento de| med|o
L| ag|tador debe estar en func|onam|ento durante e| c|c|o comp|eto de
ca|entam|ento ester|||zac|n y enfr|am|ento para me[orar |a trasferenc|a de ca|or
y ev|tar que e| med|o en contacto con |as superf|c|es ca||entes se cueza
Cuando se ha preparado |a cant|dad correcta de med|o ca||ente se c|erra e|
fermentador y se e|eva |a temperatura
Isterilizucin del Iermentudor
y el medio conjontumente
La e|evac|n de |a 1emperatura se cons|gue de |a s|gu|ente forma
Inyecc|n de vapor en e| med|o
Ln este caso e| med|o se prepara ||geramente concentrado para
compensar |a d||uc|n por e| vapor condensado
Se deben contro|ar r|gurosamente |os ad|t|vos de |a ca|dera para que no
produzcan efectos adversos en e| crec|m|ento de |os m|croorgan|smos
L| ca|or |atente de vapor|zac|n conforme se condensa en |e med|o hace
que este mtodo sea muy ef|caz
L| vapor se sum|n|stra tanto a travs de| conducto de a|re como de |a
entrada de muestras o entrada prop|a
or conducc|n
L| med|o se ca||enta por conducc|n hac|endo pasar vapor por |a cam|sa
de termostat|zac|n y e| serpent|n s| |o hay
!roceso de Isterilizucin del Iermentudor
y el medio conjontumente
Cuando e| med|o a|canza |os 100C se produce un v|goroso
desprend|m|ento de vapor en e| escape
A cont|nuac|n se c|erra |a v|vu|a de escape para perm|t|r que |a pres|n
y |a temperatura suban hasta e| n|ve| de ester|||zac|n 120 a 1S0C
depend|endo de var|os factores entre e||os e| tamao de| rec|p|ente y |a
estab|||dad trm|ca de| med|o
Se deben ev|tar pres|ones por deba[o de |a atmosfr|ca dentro de|
fermentador para que e| a|re no estr|| de| entorno no pueda ser atra|do
a travs de cua|qu|er pequea f|sura en |a s [untas so|dadas de| rec|p|ente
o |as tuber|as o travs de |as [untas o v|vu|as
ara ev|tar esta s|tuac|n se de[a entrar un sum|n|stro de a|re estr|| a|
espac|o de cabeza por enc|ma de| med|o tan pronto como se detenga e|
aporte de vapor ester|||zante
Ilevucin de lu Temperutoru
Se sum|n|stra agua de refr|gerac|n a travs de |a cam|sa o serpent|n
L| agua debe ser estr|| por c|orac|n |rrad|ac|n UV o f||trac|n para
ev|tar |a contam|nac|n deb|da a una fuga fortu|ta a| rec|p|ente
No deber|a haber ta| fuga pero econm|camente conv|ene e| costo de
ester|||zar e| agua a| costo de perder |a ester|||dad de| med|o en e|
fermentador
L| enfr|am|ento es un proceso |ento de transferenc|a de ca|or entre e|
med|o y e| serpent|n o |a cam|sa de refr|gerac|n
L| agua ca|entada se usa para |a preparac|n de| s|gu|ente |ote de med|o
INOCLLACION
I|na|mente se aade e| Inocu|o y se a[usta |a a|reac|n y termostat|zac|n
para adaptar|as a |as neces|dades de| organ|smo en cu|t|vo
InIriumiento del Iermentudor y el medio
ara favorecer e| manten|m|ento de |a ester|||dad deber haber
un nmero m|n|mo de aberturas en e| fermentador
Las pequeas aberturas deben ser a prueba de prd|das con
an|||os |os or|f|c|os ms grandes con [untos con cu|atas
p|anas
S|empre que un e[e mv|| entre en |a pared de Iermentador se
van a produc|r prob|emas espec|a|es de manten|m|ento de |a
ester|||dad
Se ut|||zan norma|mente c|erres mecn|cos dob|es sobre e| e[e
de| ag|tador y presentan venta[as notor|as en comparac|n a
|os c|erres ms convenc|ona|es
De ser pos|b|e |a un|n de todas |as partes conectadas con e|
rea estr|| |o m|smo que |as tuber|as tanto dentro como
fuera de| Iermentador debern estar so|dadas
No deber|a haber n|nguna conex|n d|recta entre e| rea no estr|| y e|
rea estr|| es dec|r |os mecan|smos para toma de muestras y |os puntos
de |nyecc|n deben estar cub|ertas de c|erres ester|||zab|es a vapor
Las tuber|as estr||es deben ser |nc||nadas para recoger y escurr|r e|
mater|a| que se condensa
ara ev|tar e| r|esgo de contam|nac|n se mant|ene |a pres|n pos|t|va en
|os fermentadores aspt|cos med|ante una v|vu|a de contro| en |a sa||da
de| gas mu|da de un sensor de pres|n s|tuado dentro de| Iermentador
L| gas de sa||da debe pasar a travs de un f||tro antes de ser descargado
para |mped|r que |os m|croorgan|smos sean ||berados a |a atmosfera
uede ocurr|r que una ca|da de pres|n dentro de| fermentador
provoque |a entrada de a|re contam|nado de m|croorgan|smos a travs
de| f||tro de sa||da y provocar una |nfecc|n
L| a|re de sa||da crea adems otro prob|ema y es que est saturado de
vapor de agua que t|ende a condensarse en e| tubo de sa||da y penetrar
de nuevo en e| fermentador
Lsto se puede ev|tar med|ante un s|stema de descarga o b|en ca|entando
e| gas de sa||da con vapor antes de pasar a| f||tro de sa||da de gases
Como evitar la entrada de microorganismos
iagrama de esteriIizacin va
cambiadores de caIor en espiraI.
P
Desde una perspectIva cIentIIca,
Ia expIIcacIn ms sImpIe,
sueIe ser Ia correcta.
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Desde una perspectIva cIentIIca,
Ia expIIcacIn ms sImpIe,
sueIe ser Ia correcta.