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Respiracin celular

Laboratorio 8 BIOL 3051L

Objetivos

Entender que es la respiracin celular, su importancia y los pasos principales de la misma. Diferenciar entre la respiracin aerbica y la anaerbica. Diferenciar entre la fermentacin lctica y alcohlica, y conocer sus aplicaciones.

Objetivos

Entender como ocurre la fermentacin alcohlica al usar distintos carbohidratos. Medir la respiracin aerbica en varios organismos. Conocer como se lleva a cabo una titilacin.

Respiracin

La respiracin celular es una serie de reacciones por las cuales la clula degrada molculas orgnicas y produce energa. Usualmente:

C6H12O6
glucosa

C O2 + H2O + Energa (ATP)

Respiracin (cont)

ATP ADP La respiracin celular sigue distintas rutas dependiendo si en la clula hay oxigeno o no. Respiracin aerbica (oxigeno), Respiracin anaerbica (sin oxigeno) En ambos primero ocurre gluclisis

Gluclisis
Ocurre en citoplasma Todos los organismos vivos llevan a cabo la gluclisis Glucosa + 2Pi + 2ADP +2NAD+ 2 cidos pirvicos + 2ATP + 2NADH + 2H+

Gluclisis (cont)

En ausencia de oxgeno, luego de la gluclisis, se lleva a cabo la fermentacin (respiracin celular anaerbica) Bacterias (respiracin celular anaerobia) Humanos (respiracin celular aerbica y anaerbica)

Respiracin celular aerbica

Es el conjunto de reacciones en las cuales el cido pirvico producido por la gluclisis se transforma en CO2 y H2O (36 ATP) Eucariota (mitocondria: ciclo de Krebs y cadena de transporte de electrones)

Mitocondria
Mitocondria :ciclo de Krebs y cadena de transporte de electrones

Cadena de transporte de electrones

Es un sistema multienzimtico ligado a membrana que transfiere electrones desde molculas orgnicas al oxgeno. Los electrones producidos en gluclisis y en el ciclo de Krebs, pasan a niveles mas bajos de energa y se libera energa que se usa para formar ATP.

Cadena de transporte

Respiracin celular anaerbica

1.

2.

Ocurre en clulas que no tienen oxigeno Menos eficiente pues solo produce 2 ATP Existen dos tipos: Fermentacin lctica Fermentacin alcohlica

Fermentacin lctica

cido pirvico + NADH + H+ cido lctico + NAD+ Ocurre en algunas bacterias: aprovechando esta propiedad se produce yogurt, crema agria y quesos. Algunos protozoarios Msculo esqueletal humano (cuando hay deficiencia de oxgeno), la acumulacin de cido lctico causa el dolor caracterstico.

Fermentacin lctica

Yogurt

Fermentacin alcohlica

Ocurre en levaduras, otros hongos y algunas bacterias, produciendo alcohol (etanol) y CO2. Se usa para obtener varios alimentos como el pan, la cerveza y el vino.

cido pirvico acetaldehdo + CO2 Acetaldehdo + NADH + H+ etanol + NAD+

Fermentacin alcohlica

Cerveza

Vino Pan

Resumen (Respiracin)

Diferencias entre respiracin celular aerbica y anaerbica

La diferencia bsica es la cantidad de molculas de ATP que se producen. En la respiracin celular anaerbica, los hidrgenos (electrones) pasan al piruvato para formar el cido lctico y el etanol, mientras que en la aerbica, los hidrgenos pasan a la cadena de transporte de electrones para formar ATP

Diferencias entre respiracin (cont)

En la respiracin aerbica, el piruvato, al pasar por el ciclo de Krebs, produce hidrgenos adicionales que pasan tambin a la cadena de transporte de electrones para formar ATP. Por lo anterior, en la respiracin aerbica se termina con 36 ATP mientras que en la anaerbica se extraen 2 ATP

Ejercicio 1. Respiracin anaerobia


A. Fermentacin alcohlica en levaduras La levadura es capaz de llevar a cabo respiracin aerobia y anaerobia Sacharomyces cerevisiae (pan, cerveza) Fermentacin alcohlica produce; bixido de carbono (efervescencia en cerveza y crecimiento del pan) y alcohol (presente en cerveza y vinos)

Procedimiento
1. Prepare una suspensin de levadura por laboratorio mezclando: Un paquete de levadura 2 g de sacarosa o melaza 100 ml de agua tibia 2. Rotule 4 tubos del 1-4. Aada y mezcle bien lo siguiente:

Procedimiento (cont)
Tubo 1: 2 ml de solucin de sacarosa + 2 ml de suspensin de levadura Tubo 2: 2 ml de solucin de galactosa + 2 ml de suspensin de levadura Tubo 3: 2 ml de solucin de maltosa + 2 ml de suspensin de levadura Tubo 4: 2 ml de solucin de lactosa + 2 ml de suspensin de levadura

Procedimiento (cont)
3. Para cada tubo: a. Llene una pipeta graduada con la solucin del tubo b. Tape el extremo con el dedo mientras sella el lado opuesto con papel de parafina c. Utilizando la pipeta pasteur, llene la pipeta graduada con la solucin hasta que se desborde d. Invierta la pipeta, colocndola en el tubo de ensayo

Procedimiento (cont)
4. Durante la fermentacin, el CO2 subir y se acumulara en el extremo superior de la pipeta. Anote la produccin de CO2 en cada pipeta a intervalos de 5 minutos por 20 minutos (mirar tabla). Esta formacin de gas es lo que va a medir (en ml) y anotar en la siguiente tabla:

Procedimiento (cont)
Tabla 1. Resultados produccin de CO2 en la fermentacin Tiempo (en minutos) 5 10 15 20 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

Procedimiento (cont)
5. Cul fue la produccin final de CO2 (ml/20 minutos) para cada tubo? 6. Que tipo de fermentacin ocurri? 7. La levadura puede usar diferentes carbohidratos para la fermentacin? Analice los resultados segn la composicin qumica de los azcares usados. 8. Que pasaba si no sellaba con parafina ambos extremos de la pipeta?

Ejercicio 2. Respiracin aerbica


A. Respiracin celular en plantas y animales Recuerde que en la respiracin celular se produce CO2, agua y 36 ATP. Se usarn organismos que viven en agua dulce, que al liberar CO2 producen cido carbnico en el agua (medicin con fenoltalena) Se compara la respiracin celular en una planta acutica en oscuridad y en luz para determinar si se lleva a cabo respiracin celular en todo momento.

Procedimiento
1. Determine los volmenes de los organismos que se van a utilizar en este experimento, y anote la informacin en la tabla 2. Los pasos a seguir para determinar el volumen del organismo son los siguientes: a. Aada el organismo a un vaso (beaker) pequeo con 50 ml de agua b. Haga una marca donde queda el menisco c. Remueva el organismo

Procedimiento
d. Con una pipeta completamente llena, aada agua hasta llegar a la marca e. La lectura en la pipeta ser el volumen del organismo f. Repita para cada organismo 2. Rotule cinco vasos (150 ml) de 1-5, y aada lo siguiente a cada uno: 1: 100 ml de agua + 1 pez o camarn 2: 100 ml de agua + 1 caracol grande

Procedimiento (cont)
3: 100 ml de agua + 5 cm de Elodea fresca. 4: 100 ml de agua + 5 cm de Elodea fresca. 5: 100 ml de agua. Nota: es importante tratar el agua con anticloro antes de aadir los animales

Procedimiento (cont)
3. Tape la boca de los vasos con papel de aluminio, excepto el vaso 4 que se cubrir por completo para mantener la Elodea en oscuridad. 4. Coloque el vaso 3 cerca de la bombilla. 5. Despus, de 30 minutos remueva los organismos y devulvalos a los recipientes correspondientes en la mesa del instructor. 6. Transfiera 25 ml de la solucin del vaso 1 a un vaso pequeo. 7. Aada cuatro gotas de fenolftalena y mezcle.

Procedimiento (cont)
8. Llene la pipeta de titilacin con la solucin de 0.0025 M de NaOH. 9. Titule hasta observar un color rosa plido persistente, dejando caer gotas de la solucin de NaOH en el vaso mientras mueve este de forma giratoria para mezclar. Previo a este punto, podr observar que al aadir gotas de NaOH se ve un color rosado que desaparece. 10. Anote la cantidad de NaOH que se utiliz en la tabla 2

Procedimiento (cont)
11. Repita el proceso con los otros vasos. 12. Calcule la produccin de CO2 para cada vaso utilizando la siguiente ecuacin:
Produccin de CO2= [ml NaOH (experimental) ml NaOH (control*)] X 2.5 ml NaOH
Volumen del organismo (ml) * Al titular agua del vaso 5.

Procedimiento (cont)
13. Coloque los resultados en la tabla 2.
Tabla 2. Resultados respiracin celular aerbica en plantas y animales

Vaso de Organismo precipitado 1 2 3 4 5 Pez o camarn Caracol

NaOH (ml)

Volumen del organismo (ml)

Cantidad de CO2 (ml)

Elodea (en
luz)

Elodea (en
oscuridad) Agua (control)

Procedimiento (cont)
14. Cul organismo tiene un metabolismo ms alto? 15. Cul organismo tiene un metabolismo ms bajo? 16. Qu indican los resultados? 17. Compare los resultados de Elodea en la oscuridad y en la luz. Cul tiene una mayor tasa de respiracin celular? Por qu? 18. Identifique lo siguiente para este experimento: hiptesis, variables dependiente e independiente, rplicas, control.

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