Corantes.

que so corantes?
que servem? os tipos?

Para

Quais

 So

substncias compostas, tanto naturais como artificiais, utilizadas para dar colorao a outras coisas.

Mas, que coisas so essas?

 Tecidos; Alimentos; Produtos Papel; Cabelo;

de beleza;

Anlises

bioqumicas.

Classificao:

Naturais extrados de origem animal ou vegetal.

Artificiais ou Sintticos compostos orgnicos da srie aromtica obtidos por sntese de corpos da hulha.

Natureza dos corantes

cidos, bsicos e neutros.

Como saber o pH de uma substncia?

Bsicos: Sais cujos radicais livres so alcalinos, ou seja, coram os tecidos de natureza cida

cidos: Sais que apresentam domnio de nions, ou seja, coram tecidos de natureza alcalina que so constitudos na sua maior parte por protenas que contem excesso de aminocidos alcalinos Neutros: So misturas ou solues contendo corantes cidos e bsicos.

Corantes na anlise de clulas

Tanto os tecidos, quanto as clulas em seu estado natural so praticamente invisveis. Ao entrarem em contato com as estruturas celulares, os corantes realam determinados compostos das clulas.
Com ele, fica mais fcil distinguir as diferentes estruturas celulares que tm o mesmo grau de refringncia, portanto indistinguveis quando observadas ao microscpio ptico.

Tipos de corantes utilizados em clulas (Exemplos):

Antes de corar as clulas as amostras em geral so tratadas com fixadores como lcool, cido actico ou formaldedo, para estabilizar e preservar suas estruturas. Corantes fluorescentes: podem ser utilizados para estudar diferentes molculas dentro das clulas (frequentemente utilizado para a marcao de anticorpos). Azul de Metileno: evidencia o ncleo e grnulos citoplasmticos (vacolos).

Vermelho Neutro: Indicador de pH e se acumula em vacolos digestivos; quando o pH inferior a 7, a colorao apresenta a cor vermelha, j quando o pH est na zona neutra e bsica apresenta-se amarelado. Soluo de Lugol: evidencia flagelos, clios, e grnulos Verde Janus: facilita a observao das mitocndrias.

Tecidos que se coram com corantes bsicos so chamados basfilos, sendo chamados de acidfilos os que se ligam a corantes cidos.

O azul-de-toluidina e o azul-de-metileno so exemplos de corantes bsicos. A hematoxilina comporta-se como um corante bsico, ligando-se s estruturas basfilas dos tecidos. Os ncleos celulares, por serem ricos em DNA, coram-se pelos corantes bsicos. Os corantes cidos, tais como o orange G, a eosina e a fucsinacida, coram principalmente as protenas citoplasmticas. A hematoxilina cora em azul os ncleos celulares e outras estruturas de natureza cida (basfilas), como as regies do citoplasma ricas em RNA. Em contraste, a eosina cora o citoplasma e o colgeno do material extracelular em diversas tonalidades do vermelho.

A colorao para clulas bacterianas a mesma?

A tcnica de colorao de Gram uma tcnica de colorao diferencial que permite distinguir os dois principais grupos de bactrias por microscopia ptica. O mtodo da colorao de Gram baseado na capacidade das paredes celulares de bactrias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactrias Gram-negativas no o fazem.

A tcnica de colorao de Gram uma tcnica de colorao diferencial que permite distinguir os dois principais grupos de bactrias por microscopia ptica. O que se verifica, quando se observam as diferentes bactrias sujeitas a esta colorao ao microscpio, que estas tm um comportamento diferente face colorao de Gram, o que permite classific-las em: Bactrias Gram-positivo (apresentam cor prpura) Bactrias Gram-negativo (apresentam cor vermelha)

Corantes Orgnicos como Marcadores Celulares em Diagnstico Muitas so as abordagens utilizadas para a investigao dos fenmenos biolgicos. Dentre as principais, esto s tcnicas baseadas em fluorescncia, principalmente a microscopia.

 A fluorescncia o fenmeno em que a absoro de

luz de um dado comprimento de onda por uma molcula seguida pela emisso de luz a comprimentos de onda mais longos (visveis)

Fluorforo: um componente de uma molcula que faz com que esta seja fluorescente.

O primeiro fluorforo orgnico sinttico inventado foi o Isotiocianato de Fluorescena (FITC)

Na microscopia de fluorescncia, as preparaes so irradiados com luz de onda curta, e a luz de onda longa (fluorescncia) emitida como um resultado por certas estruturas ou corantes. Corantes fluorescentes so utilizados para corar e visualizar as clulas, componentes celulares, cromossomas, e bactrias, entre outros.

Corantes eFluor:

eBioscience oferece muitos corantes orgnicos fluorescentes adequadas para gerao de imagens de imunofluorescncia. Cada corante eFluor n omeado de acordo com sua emisso de pico, permitindo aos utilizadores a compreender rapidamente a emisso que ser necessrio para a visualizao.

Comprimento de onda

Quase todo tecido biolgico, devido presena dos aminocidos aromticos tirosina, triptofano, e fenilalanina, autofluorescente.
Medidas baseadas em fluorescncia utilizando corantes orgnicos ou nanopartculas ligados a protenas tm grande especificidade bioqumica e alta sensibilidade, e so utilizadas como mtodos de diagnstico.

Atualmente j existe uma grande quantidade de fluorforos orgnicos

Alguns exemplos:
- membranas (DiL (perclorato de Tetrametillindocarbocianina), e o DiO (3,3dioctadeciloxacarbocianina)

Organelas e citoesqueleto - complexo de golgi - NBD-ceramida - mitocndria a rodamina-B)

cido nucleico (Laranja de Acridina, 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), Brometo de Etdio

cido nucleico, 4',6-diamidino-2fenilindol (DAPI),

4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI)

A grande vantagem da GFP, reside no fato de, como o fluorforo faz parte da cadeia peptdica, ela no precisa de nenhum aditivo para fluorescer

a)

Arranjo conformacional da GFP(cadeia de aminocidos; b) Fluorforo responsvel pela emisso da cor verde.

Clulas MCF-7 (cncer de mama)com Alexa Fluor 488 (colorao verde), Alexa fluor 615 (colorao em vermelho) e o ncleo marcado com DAPI (colorao em azul)