Es el grado de utilizacin digestiva de una racin, un

alimento o un principio inmediato. Se expresa por el llamado coeficiente de digestibilidad (CD), que corresponde a la fraccin de sustancias ingeridas que no son excretadas en las heces.

 Para la evaluacin de cada forraje debern utilizarse 6 ovinos con

peso vivo y edades similares; el consumo se mide en el total de los animales y si es posible se realiza la coecta de heces en todo el grupo, aunque tambin es vlido utilizar solamente 4 de los 6 animales, para la determinacin de la digestibilidad, que es el mnimo requerido, en los cuales se recogern y pesarn las heces fecales, mientras que el consumo ser necesario medirlo en los 6.

Jaulas para estudios metablicos

Arneses

Variante Boca-ano
En este procedimiento se utilizan, generalmente carneros adultos.

En la mayora de los casos son utilizados ovinos macho castrados alojados en jaulas de metabolismo para la determinacin del valor nutritivo, ya que son ms dciles, requieren menos volumen de alimnto y, por consiguiente, hacen menos costosas las evaluaciones; debe tenerse el cuidado de seleccionar animales sanos, que tengan entre 1,5 y 3 aos de edad, y que estn correctamente identificados, de forma tal que pueda conocerse si presentan diferencias con el resto del grupo en su normal fisiologismo digestivo y ser eliminados como animales experimentales.

 En estas especies cuando el animal come, el alimento se introduce

en el rumen en cantidades relativamente grandes. Mientras el alimento permanece en esta porcin, se fermenta y se mezcla constantemente, durante este proceso porciones del alimento son impulsadas por el aparato digestivo y siguen el proceso de digestin y absorcin.
No existe un mecanismo para asegurar que la totalidad del alimento

suministrado en un momento dado sea digerido en un tiempo determinado, incluso existen evidencias de que algunas porciones del alimento pueden permanecer en el rumen durante horas o das enteros.
En el caso de rumiantes el alimento no se moviliza directamente a

travs del aparato digestivo, no cumplindose el principio de que el primero en llegar es el primero en salir.

 Para contrarrestar estos factores, cada periodo de evaluacin de un

forraje determinado debe constar de una fase preliminar de adaptacin de 10 a 12 das, que es el tiempo requerido para que se evacuen todas las heces de un alimento precedente, y a partir de este momento se iniciar el periodo de medicin que debe ser de 57 das; este perodo puede repetirse si existen dudas de que no fue suficiente la adaptacin o si se quieren tener dos perodos para mayor precisin en un forraje determinado con iguales caractersticas.
Para el caso de animales no rumiantes el proceso es ms sencillo

pues en estas especies pasan los nutrientes a travs del aparato digestivo de forma rpida, sin embargo en los rumiantes este proceso tiene sus particularidades

 En el caso de las especies arbreas y de otros

forrajes que no sufren cambios tan bruscos como las gramneas y otras especies forrajeras estacionales, el perodo de adaptacin debe ser ms amplio, ya que por sus caractersticas qumicas dicho perodo es ms prolongado y puede enmascarar los resultados, sobre todo en el consumo.

Procedimiento
Se ofrece una cantidad conocida diariamente de

o de los

alimentos.
El rechazo se pesar individualmente en horas de la maana y se

tomar una muestra aleatoria para todo el grupo. Las heces fecales se recolectarn y pesarn individualmente en su totalidad, en horas de la maana. Del alimento ofrecido y rechazado, se tomarn muestras de 300g respectivamente y de las heces un 10% del peso total para cada animal.
Posteriormente las muestras de forraje, rechazo y heces fecales se

secan en estufas de ventilacin forzada a 80C durante 48 horas a fin de determinar el contenido de materia seca. Al final de cada periodo de medicin se unen las muestras del forraje ofrecido, las del rechazo y las de las heces fecales individualmente y se toma una muestra aleatoria para ser enviada al laboratorio para la determinacin de su composicin bromatolgica.

 Cada periodo experimental cuenta con 10 a 12 das

de adaptacin y 5 a 6 das de medicin; en los casos de forrajes verdes con edades continuas, cada periodo de medicin se realiza de forma continua con uno o dos das de separacin y en los forrajes conservados y subproductos frescos y conservados, generalmente, se realizan dos periodos continuos de medicin.

Procesamiento de los resultados

Digestibilidad:
La digestibilidad de la materia seca (DMS), de la materia

orgnica (DMO), de la protena bruta (DPB) y de la fibra bruta (DFB) se estiman de la siguiente forma:

Ingerido - excretado Digestibilidad (%) = x 100 Ingerido

Cuando se realizan trabajos en los que se tiene en cuenta el

consumo y la excrecin del nitrgeno o la energa se requiere de la coleccin de la orina. El diseo comnmente utilizado es completamente aleatorizado, aunque cuando se evalan varios tratamientos se deben emplear diseos de cambio como el cuadro latino para controlar la variabilidad individual de los animales.

 La determinacin de la digestibilidad in situ (tambin conocida

como in sacco o bolsas mviles).

Esta tcnica se basa en la colocacin de una cantidad conocida de

muestra del alimento en un rgano determinado del tracto gastrointestinal de los animales siendo el mtodo de la bolsa de nylon el ms empleado. Lgicamente, el valor de digestibilidad que se obtiene es para el rgano en cuestin, por lo general el rumen, Estos datos son de gran inters pues en este rgano es donde se degrada en mayor magnitud la fibra.
La tcnica in situ tiene como objetivo fundamental medir la

desaparicin de materia seca, orgnica u otro nutriente de las bolsas adecuadamente incubadas en el rumen a travs de una cnula permanente en el saco dorsal del rumen. Los primeros experimentos se usaron bolsas de seda, las que fueron reemplazadas posteriormente por otros tejidos como el Nylon, el Polister y el Dacrn.

Algunos elementos que deben estandarizarse:

Caractersticas de la bolsa y la muestra.
Especie animal y dieta a utilizar. Condiciones y tiempo de incubacin, lavado de las

bolsas.

 Inicialmente

el mtodo se utiliz exitosamente para evaluar diferentes alimentos y para determinar la efectividad del tratamiento con formaldehdo a los suplementos proteicos. Los resultados de dichos estudios eran obtenidos a partir de un solo tiempo de incubacin, procedimiento que presenta algunos puntos dbiles

Un estudio realizado (Erasmus et al 1990) demostr que las bolsas

mviles permiten estimar la digestibilidad intestinal de protenas en alimentos durante el pasaje a travs del intestino de rumiantes (bovinos) por ser una medicin rpida, econmica y con suficiente confiabilidad. Aunque muchas variables deben ser controladas antes del uso de esta tcnica como son tamao de muestra, tamao de bolsas, variacin animal y dieta animal, adems de existir otra fuente de variacin de mayor peso relacionada con la fermentacin en el ltimo compartimiento del TGI del rumiante, que provoca una sobreestimacin en la digestibilidad y absorcin real de nitrgeno en el Intestino.

Caractersticas de la bolsa y la muestra

La muestra incubada debe ser capaz de moverse libremente dentro

de la bolsa con vistas a evitar microambientes que afecten la repetibilidad del anlisis. La relacin ideal entre muestra y tamao de la bolsa es de 15 mg MS/cm2 (Michalet-Doreau y Ould-Bah, 1992; rskov, 1992). Otro aspecto a considerar en el tamao de la muestra es la cantidad requerida para posterior anlisis; el nmero de bolsas a utilizar a un mismo tiempo depender de la especie de animal canulado.
Los poros de la bolsa deben permitir la entrada del lquido ruminal y

los microorganismos, deben ser lo suficientemente pequeos para minimizar las prdidas de material sin degradar, a la vez que permitan una adecuada actividad microbiana y se eviten obstrucciones.

 La eleccin de la porosidad de la bolsa es un compromiso entre la

prdida de partculas de alimento no degradadas y el movimiento de los microorganismos a travs de la bolsa. Un tamao de poro entre 40-60 m es adoptado como estndar (rskov, 1992; Michalet-Doreau y Ould-Bah, 1992).
La muestra debe, hasta donde sea posible, aparecer en el rumen

tal y como si la consumiesen los animales; como esto no es siempre posible se sugiere secar y moler la muestra en su lugar. La muestra seca debe molerse a travs de una criba entre 2.5-3.0 mm de dimetro. Mehrez y rskov (1977) y Nocek (1985) recomiendan remojar las bolsas con las muestras, aunque se reconoce que existe poca informacin al respecto (Michalet-Doreau y Ould-Bah, 1992).

Especie animal y dieta a utilizar

Existe muy poca o ninguna diferencia en la degradacin de

muestras incubadas tanto en ovinos como en bovinos, el uso de bovinos tiene la ventaja de permitir un mayor numero de bolsas y/o bolsas ms grandes por periodos (rskov, 1992). Mehrez y rskov (1977) observaron que la mayor fuente de variacin en esta tcnica son los animales; se ha sugerido que una muestra debe ser incubada como mnimo en tres animales para ofrecer una estimacin precisa en un tiempo de incubacin dado, fundamentalmente en aquellos casos que se evala la degradacin ruminal bajo el efecto de diferentes dietas o se desea estudiar el ambiente ruminal. En los casos que se desee caracterizar un lote de diversos forrajes de una vez se puede emplear un solo animal, preferiblemente un bovino. La dieta de los animales debe ser igual al alimento evaluado, pero como eso no siempre es posible, lo correcto es garantizar un ambiente ruminal estable, donde se cubran todas las necesidades nutritivas de los microorganismos ruminales.

Condiciones y tiempo de incubacin, lavado de las bolsas

Las bolsas se deben mover libremente dentro del rumen, tanto en

la fase lquida o slida (rskov, 1992). La inclusin de un peso adicional en las bolsas no parecer tener mayor importancia (Michalet-Doreau y Ould-Bah, 1992). El tiempo de incubacin depender de las caractersticas del alimento a evaluar; es importante que la parte ms sensible de la curva este bien apoyada con observaciones (rskov, 1992). Las bolsas, una vez extradas del rumen, deben lavarse a mano o en mquinas lavadoras domsticas para eliminar las partculas y microorganismos (Michalet-Doreau y Ould-Bah, 1992). Al menos dos bolsas con la muestra a analizar deben ser lavadas para determinar las prdidas en material altamente soluble y de finas partculas que escapan de las mismas. El lavado en mquinas disminuye las variaciones dentro de cada laboratorio, si se compara con el lavado manual.

Interpretacin de los resultados.

Con el propsito de simular lo ms posible las condiciones

ruminales se han desarrollado modelos matemticos que tienen en consideracin el recambio ruminal. A los resultados as obtenidos se les llama digestibilidad efectiva.
La curva debe mostrar la degradacin de la muestra con el

tiempo; se asume que desaparicin es sinnimo de degradacin. A pesar que esto es generalmente cierto, hay casos en que esta asuncin no es valida, por ejemplo substratos muy solubles en agua (rskov, 1992).

 Aunque

se han informado algunas ecuaciones para describir la curva de degradacin ruminal, la primera y ms utilizada es la planteada por rskov y McDonald (1979): p = a + b ( 1- e-ct)

Donde

p es el por ciento de degradacin al tiempo t, a es la fraccin soluble, b es la fraccin insoluble pero potencialmente degradable si el tiempo no es limitante. El valor a+b es el potencial de degradabilidad del material. Todos se expresan en por ciento; mientras que c es la velocidad de degradacin y se expresa en por ciento por hora.

McDonald (1981) modific ligeramente esta ecuacin para poder

ser utilizada en la evaluacin de aquellos alimentos que su degradacin ruminal no fuese inmediata y tuviesen una fase lag o de colonizacin. Su ecuacin incluye el termino lag, que se expresa en horas. La ecuacin es la siguiente: p = a + b ( 1- e-c(t-lag))

 La magnitud de degradacin de la protena depender del tiempo

que permanezca en el rumen, por lo que rskov y McDonald (1979) definen la degradabilidad efectiva de la protena, P, como: P = a + [bc/(c+r)] [1 - e-(lc+r)t]
En el cual r es la velocidad de pasaje del rumen al omaso. Como el

tiempo de incubacin se incrementa, la fraccin de protena que permanece en el rumen cae a cero, conjuntamente con la velocidad de degradacin y P puede entonces definirse como: P = a + bc/(c + r)
En esta ecuacin

a es la protena inmediatamente degradada y bc/(c + r) la fraccin lentamente degradable. El valor de r puede ser determinado por tratamiento con dicromato a la protena.

 A partir de los parmetros de la propia ecuacin propuesta por

rskov y McDonald (1979) se puede determinar el potencial alimenticio (IFRU, 1997), que indica el consumo relativo o productividad posible de los alimentos. Su formula es la siguiente: PA = a+b(0.4)+c(200)
Este potencial puede equipararse a un ndice que caracteriza el

consumo de energa digestible relativo al mantenimiento de un bovino de carne de razas europeas (rskov, 1993; IFRU, 1997); el valor de 30 representa un consumo de materia seca, del alimento en cuestin, que cubre las necesidades energticas del mantenimiento. Mayor informacin se necesita para sostener este enfoque; no obstante, parece ser prometedor al analizar informacin de diferentes lugares con grandes diferencias de recursos alimenticios y tipos de animales (rskov, 1998).

 Los mtodos in vitro se realizan en frascos de cristal, en los cuales

se simula las condiciones de fermentacin ruminal. Bajo estas condiciones es posible evaluar un gran nmero de alimentos de forma rpida y sencilla.
Para su montaje se requiere de animales canulados que se

emplean como donantes de lquido ruminal (inculo). Una cantidad de muestra es incubada en presencia del inculo y saliva artificial y ausencia de oxigeno a una temperatura de 39 O C con movimiento mecnico. El tiempo de incubacin depende de los intereses de la investigacin. Un requisito para obtener resultados confiable es el de mantener los animales donantes en buen estado de salud y debidamente alimentados.

 Existen varias tcnicas para determinar la digestibilidad in vitro

mediante la fermentacin con inoculo ruminal, que van desde las que solo utilizan la parte que simula la fermentacin ruminal hasta las que combinan estas con un tratamiento enzimtico para simular la digestin del resto del tracto digestivo. Estas ltimas son ms precisas, pero ms costosas, la eleccin de una u otra depende de la disponibilidad de recursos y del fin que se persigue.
Tilley y Terry en 1963 disearon un sistema para simular el proceso

digestivo de los rumiantes, especficamente cuando stos consumen forrajes. Este sistema consiste en obtener un inculo diluyendo un volumen de lquido ruminal con tres volmenes de solucin tampn de McDoughall (pH entre 6,8 y 6,9), a mantener a 39-40 grados celsius y en anaerobiosis por CO2.

Procedimiento
Una muestra de 0,5 g de forraje preparado para el anlisis se

incuba con 50 mL del inculo durante 48 horas, en las condiciones descritas.

Interrumpida la fermentacin por adicin de HgCl2 y decantando el

sobrenadante tras centrifugar, se aaden 50 mL de solucin clorhdrica de pepsina que acta por 48 horas.
Entonces se repite la centrifugacin, se filtra, se seca y se calcula el

peso del residuo seco.

Luego se procede a la incineracin y se estima el contenido de

materia orgnica no digerida.

 Estos datos permiten determinar la digestibilidad in vitro de la

materia seca y la materia orgnica.

Nota: El lquido ruminal es preciso obtenerlo de un animal fistulado

en el rumen, por lo que influye un gran nmero de variables: especie animal, caractersticas individuales, alimentos que recibe, cantidad, etc. Existe una estandarizacin segn CEC (Van der Meer, 1982), pero es imposible controlar con absoluto rigor la variabilidad. A todo esto hay que agregar la aleatoriedad inducida por el manejo.