Prof. Valmir F.

Juliano
2/2011
INTRODUO AOS MTODOS
INSTRUMENTAIS DE ANLISE
QUI624
Est fazendo o curso de Farmcia? Ento voc tem de gostar muito de
Qumica e de Biologia. Como essas duas reas perpassam por todo o curso,
desde o Ciclo Bsico at o ltimo perodo, o estudante precisa ter uma
forte inclinao para essas reas.

"Gostei muito do curso da UFMG. Ele nos oferece um bom
embasamento sobre a profisso de farmacutico. Formei
em 2001 e foram quatro anos dedicados exclusivamente ao
curso, pois as aulas so pela manh e tarde. Considero
que o profissional de farmcia precisa ser mais valorizado
tanto em relao s condies de trabalho quanto
financeiro. O segmento de farmcia industrial o que tem
maior mercado, pois o farmacutico pode trabalhar tanto
na produo do medicamento, quanto com controle de
qualidade, procedimento padro. Atualmente, trabalho com
distribuio de medicamentos e passei em um concurso
para perito criminal, na rea laboratorial."
Aluno formado na UFMG em 2001
Ao transferir bens materiais, o doador
perde a sua posse. H, porm, alguns
atributos intrnsecos que no podem ser
transferidos de um indivduo para o outro,
como a beleza e a coragem. O
conhecimento, por outro lado, algo to
importante que os deuses decidiram que o
doador pode ret-lo mesmo que o tenha
transmitido

Atribudo a Pitgoras de Samos, ~ 520 a.C.
Bibliografia
1. Holler, F. J.; SKOOG, D. A.; Crouch, S. R. Princpios de Anlise
Instrumental. 6 ed. Bookman, Porto Alegre, 2009.
2. Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J.; Crouch, S. R.
Fundamentos de Qumica Analtica. 8 ed. Pioneira Thomson
Learning, So Paulo, 2006.
3. Skoog, D. A.; Holler, F. J.; Nieman, T. A. Princpios de Anlise
Instrumental. 5 ed. Bookman, Porto Alegre, 2002.
4. Harris, D. A. Anlise Qumica Quantitativa. 6 ed. LTC Livros
Tcnicos e Cientficos Editora, Rio de Janeiro, 2005.
5. Ohlweiler, O. A. Fundamentos da Anlise Instrumental. Livros
Tcnicos e Cientficos Ed. RJ. 1981.
6. Ewing, G. W. Mtodos Instrumentais de Anlise Qumica. Vol. I,
Ed da USP, SP, 1977.
7. Willard, H. H. et al. Instrumental Methods of Analysis. 7th ed.
Wadswoth Publishing Company, California, 1988.
8. Christian, G. D.: Reilly, J. E. Instrumental Analysis. 2 th ed.
Allyn and Bacon, Inc. Boston, 1986.
A Qumica Analtica trata de mtodos para a determinao
da composio qumica das amostras.
Identidade das espcies atmicas ou
moleculares ou dos grupos funcionais
presentes em uma amostra
Informaes numricas
relativas a um ou mais
componentes de uma amostra
Anlise Qumica = Qumica Analtica
Mtodos Qualitativos e Quantitativos
A anlise qumica um
conjunto de tcnicas e manipulaes destinadas a
proporcionar o conhecimento da composio
qualitativa e quantitativa de uma amostra, mediante
mtodos de rotina. A qumica analtica
um ramo da qumica, a cincia que persegue o objetivo de
resolver os problemas de composio
com operaes de rotina.
Estgios de uma anlise quantitativa
Etapas Exemplos de procedimentos
1. Amostragem Depende do tamanho e da natureza
fsica da amostra
2. Preparao de uma amostra
analtica
Reduo do tamanho das
partculas, mistura para
homogeneizao, secagem,
determinao do peso ou do volume
da amostra
3. Dissoluo da amostra Aquecimento, ignio, fuso, uso de
solvente, diluio
4. Remoo de interferentes Filtrao, extrao com solventes,
separao cromatogrfica
5. Medidas na amostra Padronizao, calibrao
6. Resultados Clculo dos resultados analticos
7. Apresentao dos resultados Impresso e arquivamento
AMOSTRAGEM
Anlise de Alumnio
em gua do Mar
Anlise de Sdio e
Clcio em Solo
Mtodos CLSSICOS versus INSTRUMENTAIS
Designao histrica, pois os dois mtodos tm uma diferena
temporal pouco maior que um sculo.

Mtodo Clssico:
Baseiam-se na separao dos ANALITOS por: PRECIPITAO,
EXTRAO OU DESTILAO

Anlise Qualitativa: reaes especficas gerando
produtos caracterizados por cor, ponto de fuso ou ebulio,
solubilidade, etc.

Anlise Quantitativa: medidas titulomtricas
(volumtricos) ou gravimtricas.
Mtodos CLSSICOS versus INSTRUMENTAIS

Mtodo Instrumental Incio do sculo XX:
Baseiam-se em medidas fsicas dos ANALITOS: Condutividade,
Potencial de eletrodo, Emisso ou absoro de luz, etc.
Tcnicas eficientes de cromatografia e eletroforese
substituram os mtodos de precipitao, extrao e destilao.

Muitos dos fenmenos por trs de mtodos instrumentais so
conhecidos h um sculo ou mais. A aplicao de tais
fenmenos, contudo, foi adiada pela falta de instrumentao
simples e confivel.
O crescimento dos mtodos instrumentais de anlise
modernos tem ocorrido paralelamente ao
desenvolvimento das indstrias eletrnicas e de
computadores.
O que so Mtodos INSTRUMENTAIS ?

So mtodos realizados em instrumentos.
- No por instrumentos!
- Por analistas que conhecem os instrumentos!
Instrumentos simples....
O que so Mtodos INSTRUMENTAIS ?

So mtodos realizados em instrumentos.
- No por instrumentos!
- Por analistas que conhecem os instrumentos!
Ou complexos ....
Mtodos INSTRUMENTAIS

Cada tipo de instrumento tem uma aplicao:
- Distinta e limitada e ...
- Possui vantagens e desvantagens.
Medidas de pH em solues aquosas (no
aquosas em alguns casos). Fornece informaes a
respeito da concentrao de ons H
3
O
+
.
Baixo custo inicial e manuteno barata. Fcil
de usar.
Caracterizao de slidos cristalinos.
Fornece informaes sobre a estrutura
cristalina.
Custo inicial elevado e manuteno
relativamente cara.
Mtodos INSTRUMENTAIS
Um grande objetivo da qumica analtica
moderna o desenvolvimento de
instrumentos e metodologias com a
conscincia verde.



Mtodos com consumo mnimo de amostra,
de reagentes, de etapas e, de preferncia,
anlises com a amostra in natura, reduzindo
ao mximo a quantidade de rejeitos.
Classificao dos mtodos analticos
CLSSICOS E INSTRUMENTAIS
Chamados de mtodos
de via mida
Baseados em propriedades
fsicas (qumicas em alguns casos)
Algumas tcnicas instrumentais so mais sensveis que as
tcnicas clssicas, mas outras no o so!
Gravimetria
Volumetria Eletroanaltico
Espectromtrico
Cromatogrfico
Propriedades
eltricas
Propriedades
pticas
Propriedades
diversas
PROPRIEDADES FSICAS E QUMICAS EXPLORADAS PELOS
MTODOS INSTRUMENTAIS
Propriedade caracterstica
Mtodo instrumental
Emisso de radiao Espectroscopia de emisso atmica e
molecular (RX, UV, Vis, luminescncia)
Absoro de radiao Espectroscopia de absoro atmica e
molecular (UV, Vis, IV, RX)
Espalhamento de radiao Turbidimetria e nefelometria
Difrao de radiao RX e eltrons
Potencial eltrico Potenciometria; cronopotenciometria
Resistncia eltrica Condutimetria
Corrente eltrica Amperometria; voltametria; polarografia
Massa Gravimetria (microbalana de cristal de
quartzo)
Relao massa/carga Espectrometria de massas (CG-EM e CL-EM)
Caractersticas trmicas TGA, DSC, DTA
Os mtodos destacados em vermelho sero abordados nesta disciplina.
INSTRUMENTOS PARA ANLISE
O instrumento converte a informao armazenada nas
propriedades fsicas ou qumicas do analito em um tipo
de informao que pode ser manipulada e interpretada.
necessrio um estmulo (radiao eletromagntica, energia
eltrica, mecnica ou nuclear) para provocar uma resposta.
Fonte de
Energia
Sistema em
Estudo
Informao
Analtica
Estmulo
Resposta
Estmulo
Resposta
Espectrofotmetro UV/Visvel
INSTRUMENTOS PARA ANLISE E SEUS COMPONENTES
Equipamentos e tcnicas utilizados nesta disciplina.
Equipamento no utilizado, mas a tcnica usada para a emisso atmica em chama.
FUNO DO INSTRUMENTO
Traduzir a composio qumica em uma informao
diretamente observvel pelo operador.
Os instrumentos transformam um sinal analtico que
usualmente no diretamente detectvel ou entendido pelo
ser humano em um sinal que pode ser medido.
O instrumento atua direta ou indiretamente como um
COMPARADOR, no sentido de que se avalia a amostra
desconhecida em relao a um padro.

FUNO DO ANALISTA
Ter conhecimento do que est realmente medindo!
Seleo de um mtodo analtico
Conhecer os detalhes prticos das diversas
tcnicas e seus princpios tericos.
Definir claramente a natureza do problema
analtico, respondendo s questes:
Que exatido necessria?
Qual a quantidade de amostra disponvel?
Qual o intervalo de concentrao do analito?
Que componentes da amostra causaro
interferncia?
Quais so as propriedades fsicas e qumicas da
matriz da amostra?
Quantas amostras sero analisadas?
Qual o tempo requerido para a anlise?
Qualquer que seja o mtodo instrumental, o
sinal analtico ser sempre uma funo da
concentrao do analito (atividade).
S = f(C)
V
titulante
S
i
n
a
l

a
n
a
l

t
i
c
o

Curva de titulao potenciomtrica
Qualquer que seja o mtodo instrumental, o
sinal analtico ser sempre uma funo da
concentrao do analito (atividade).
S = f(C)
V
titulante
S
i
n
a
l

a
n
a
l

t
i
c
o

Curva de titulao condutomtrica ou
espectromtrica
Qualquer que seja o mtodo instrumental, o
sinal analtico ser sempre uma funo da
concentrao do analito (atividade).
S = f(C)
[Analito]
S
i
n
a
l

a
n
a
l

t
i
c
o

S
A
= mC
A
+ S
br
Curva Analtica
Amostra: Poro de um determinado material que representa a totalidade.
Analito: Espcie (inica, atmica ou molecular) que se deseja determinar
em uma amostra.
Matriz: Conjunto de todos os constituintes que compem uma amostra.
Detector: Dispositivo mecnico, eltrico ou qumico que identifica, registra
ou indica uma alterao em uma das variveis na sua vizinhana (presso,
temperatura, etc.).
Sistema de deteco: Conjunto inteiro que indica ou registra as
quantidades fsicas ou qumicas.
Transdutor: Dispositivo que converte informao de domnio no-eltrico
em informao de domnio eltrico e vice-versa (microfone, fotoclulas,
etc.).
Sensor: Dispositivo analtico capaz de monitorar espcies qumicas
especficas de forma contnua e reversvel (eletrodo de vidro, QCM, etc.).
Equivale ao transdutor associado a uma fase de reconhecimento
quimicamente seletiva.
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
Curva analtica: Representao grfica da resposta do instrumento (sinal
analtico) em funo da concentrao do analito proveniente de solues-
padro (padro externo). Tambm chamada de curva de trabalho ou
curva de calibrao.
Branco (br): Sinal do instrumento para matriz (ou imitao) na ausncia
do analito ou de uma espcie que corresponda ao analito.
Limite de deteco (LD ou c
m
): Concentrao ou massa mnima do analito
que pode ser detectada em um nvel confivel.
S
m
= S
br
+ k s
br
(valor mais aceito k = 3)

onde S
m
e S
br
so o sinal analtico mnimo e do branco e s o desvio padro do branco.

Limite de quantificao (LQ): Considera-se ser a concentrao para a qual
o sinal analtico excede em 10 desvios padres o sinal do branco.
Limite de resposta linear (LRL): Concentrao limite a partir da qual no
mantida a linearidade.
m
ks
m
S S
c
br br m
m

Faixa linear de trabalho (FLT) ou Faixa tima de trabalho (FOT) ou Faixa

dinmica: Faixa de concentrao que se estende de LQ at LRL.
Mtodo do padro interno: Consiste em adicionar uma substncia em
quantidade constante a todas as amostras, aos brancos e aos padres de
calibrao em uma anlise. Compensa diversos tipos de erros, aleatrios
ou sistemticos.
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
LQ
LRL
c
m
FOT
S
i
n
a
l

A
n
a
l

t
i
c
o

Concentrao
Mtodo de adio de padro: Consiste em uma srie de medidas
envolvendo a adio de incrementos de uma soluo-padro do analito
alquotas da amostra de mesmo volume com a finalidade de corrigir a
interferncia da matriz sobre o sinal analtico.
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
-10 -5 0 5 10 15 20 25
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1,0
1,1
1,2
y = 0,0382x + 0,2412
R
2
= 0,9999
S
i
n
a
l

a
n
a
l

t
i
c
o
Volume de soluo do padro, mL
Exatido: Grau de concordncia entre o valor medido (mdia de vrias
replicatas) e o valor de uma referncia padro.
Preciso: Grau de concordncia mtua entre os dados que foram obtidos
do mesmo modo. Fornece uma medida do erro aleatrio, ou
indeterminado, de uma anlise.
Tendncia (bias) ou vis (D): Fornece uma medida do erro sistemtico, ou
determinado, de um mtodo analtico. D = m t, onde m a mdia de
vrias replicatas para a concentrao de um analito em uma material de
referncia com a concentrao verdadeira t.

Sensibilidade: A sensibilidade de um instrumento ou mtodo uma medida
de sua habilidade em discriminar pequenas diferenas na concentrao de
um analito. Em uma curva de calibrao, a sensibilidade a inclinao da
curva (m).
S = mc + S
br
, onde S o sinal medido, c a concentrao do analito e
S
br
sinal do instrumento para o branco.
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
Sensibilidade analtica: A sensibilidade analtica definida com sendo o
quociente da inclinao da curva pelo desvio padro da medida:
g = m / s
S
. Esta medida inume aos efeitos de amplificao e
independente das unidades de medida de S.

Seletividade: A seletividade de um mtodo analtico refere-se ao grau em
que o mtodo esta livre de interferncia de outras espcies contidas na
matriz da amostra. Infelizmente nenhum mtodo analtico est totalmente
livre de interferncia de outras espcies e, assim, procura-se minimiz-las.
Define-se um coeficiente de seletividade que representa a resposta
relativa do mtodo a cada uma das espcies interferentes em relao ao
analito de interesse. Exemplo: Uma amostra contendo o analito A, bem
como B e C potencialmente interferentes:
S = m
A
c
A
+ m
B
c
B
+ m
C
c
C
+ S
br
;

e

S = m
A
(c
A
+ k
B,A
c
B
+ k
C,A
c
C
) + S
br
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
A
B
A B
m
m
k
,
A
C
A C
m
m
k
,
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
Um mtodo que produz
resposta para apenas um
analito chamado especfico
Um mtodo que produz
resposta para vrios
analitos, mas que pode
distinguir a resposta de um
analito da de outros
chamado seletivo
0 2 4 6 8 10
0
10
20
30
40
50
60
S
i
n
a
l

A
n
a
l

t
i
c
o
Concentrao (mg/L)
B
A
Repetibilidade: Grau de concordncia entre resultados independentes
obtidos com o mesmo mtodo para um material de teste idntico sob as
mesmas condies (mesmo operador, mesmo equipamento, mesmo
laboratrio em um pequeno intervalo de tempo).

Reprodutibilidade: Grau de concordncia entre resultados independentes
obtidos com o mesmo mtodo para um material de teste idntico sob
diferentes condies (diferentes operadores, diferentes equipamentos,
diferentes laboratrios e aps diferentes intervalos de tempo). A medida
da reprodutibilidade o desvio padro qualificado com o termo
reprodutibilidade. Em alguns contextos reprodutibilidade pode ser
definida como o valor abaixo do qual a diferena absoluta entre dois
resultados individuais com um material idntico, obtido nas condies
acima, aconteam com a mesma probabilidade especificada. Note que
uma declarao completa de reprodutibilidade exige a especificao das
condies experimentais que diferem.
Glossrio da Qumica Analtica Instrumental
No desenvolvam a Arte de Enrolar

O QUE O PROFESSOR ESPERA DOS ALUNOS EM
QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL?
A exatido um parmetro de difcil preciso, pois
est sujeita a uma srie de erros determinados.
O ponto de equivalncia encontrado se interpolando
por extrapolao o ponto no qual a curva muda de sua
concavidade.
Uma maior exatido seria obtida condutimetricamente,
uma vez que em condutimetria possvel determinar
pequenas variaes de potencial ...
... em se tratando de uma amostra com vrias matrizes,
este tipo de detector traria maior seletividade ...
Dados de calibrao obtidos para determinao do analito X em soluo
aquosa.
Exemplo 1:
[X], ppm N replicatas Sinal analtico
mdio
Desvio padro
0,00 25 0,031 0,0079
2,00 5 0,173 0,0094
6,00 5 0,422 0,0084
10,00 5 0,702 0,0084
14,00 5 0,956 0,0085
18,00 5 1,248 0,0110
a) Determinar a sensibilidade de calibrao.
b) Determinar a sensibilidade analtica.
c) Determinar o coeficiente de variao para a mdia de cada grupo de
replicatas.
d) Determinar o limite de deteco do mtodo.
a) Inclinao: m= 0,067 ppm
-1
y = 0,067x - 0,001
R
2
= 0,9996
-0,2
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Cx, ppm
g

CV, %
2,00 7,1 5,4
6,00 8,0 2,0
10,00 8,0 1,2
14,00 7,9 0,89
18,00 6,1 0,88
d) Limite de deteco:

= 3 x 0,0079 / 0,067 = 0,35 ppm
m
ks
c
br
m

Exemplo 1:
b) g = m / s
S
c) CV = (s
x
/ S
am
)x100 S
am
= sinal analtico mdio

O grfico deve ser traado com o sinal
analtico, descontando-se o sinal do branco.
Alquotas de exatamente 5,00 mL de uma soluo de fenobarbital foram
transferidas para frascos volumtricos de 50,00 mL e foram ajustados
com KOH para tornarem-se bsicas. Os seguintes volumes de soluo-
padro contendo 2,000 mg/mL de fenobarbital foram introduzidas em
cada frasco: 0,000, 0,500, 1,00, 1,50 e 2,00 mL. O volume foi
completado e as leituras de cada frasco em um fluormetro forneceu as
seguintes respostas: 3,26, 4,80, 6,41, 8,02 e 9,56.
a) Construa o grfico com os dados.
b) Usando o grfico, determine a concentrao de fenobarbital na
amostra desconhecida.
c) Obtenha a equao por regresso linear (mnimos quadrados).
d) Calcule a concentrao pela equao obtida em (c).
e) Calcule o desvio padro para a concentrao obtida em (d).

Exemplo 2:
y = 79,1x + 3,246
R
2
= 0,9999
0
2
4
6
8
10
12
-0,05 -0,03 -0,01 0,01 0,03 0,05 0,07
[F], mg/mL
S
i
n
a
l

a
n
a
l

t
i
c
o

Pela equao, para y = 0 x = -3,246 / 79,1 = 0,0410 mg/mL.
Como a amostra foi diluda de 5,00 para 50,00 mL, a sua concentrao
10 vezes maior: 0,0410 x 50 / 5 = 0,410 mg/mL.
Desvio padro relativo da regresso, s
c
/c = 0,007957 (ou 0,7957%)
Desvio padro da medida = 0,410 x 0,007957 = 0,003 (ou 0,3%)
V, mL C, mg/mL S

0,000 0,000 3,26
0,500 0,0200 4,80
1,00 0,0400 6,41
1,50 0,0600 8,02
2,00 0,0800 9,56
Exemplo 2:
0,0407 mg/mL