CAMPUS UNIVERSITRIO DE GURUPI CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS E TECNOLGICAS CURSO DE ENGENHARIA DE BIOPROCESSOS E BIOTECNOLOGIA

BIOTICA E BIOSSEGURANA

CLONAGEM

Iohanna Gabrielle Kckelhaus

Gurupi, 2013

Introduo Em Biologia, a expresso clonagem designa um processo atravs do qual se obtm um clone ou um conjunto de indivduos geneticamente idnticos. Os processos de clonagem podem ser naturais (atravs de reproduo assexuada) ou artificiais (utilizando clulas somticas). A cincia tem vindo a desenvolver inmeras pesquisas no campo da clonagem artificial, criando mtodos e tcnicas que em lugar de clulas sexuais (vulo e espermatozide), utilizam clulas somticas responsveis pela formao de rgos, pele e ossos. Um exemplo meditico deste tipo de pesquisas o caso da ovelha Dolly, gerada a partir de clulas somticas retiradas de um animal adulto. O ser clonado apresenta sempre o mesmo gentipo (informao gentica) da sua matriz, contudo, podero ocorrer alteraes no fentipo. Na agricultura, a clonagem uma tcnica j bastante utilizada. A clonagem pode ocorrer de maneira induzida ou de maneira natural. A clonagem natural em todos os seres originados a partir de reproduo assexuada, ou seja, na qual no h participao de clulas sexuais (gametas), como o caso das bactrias, da maioria dos protozorios e algumas leveduras. Este o meio mais frequente e natural de reproduo dos vegetais inferiores, mas at vegetais superiores podem multiplicar-se naturalmente desse modo. A clonagem natural tambm pode ocorrer em mamferos, como no tatu e, mais raramente, nos gmeos univitelinos, que so parte de um clone. Nos dois casos, embora haja reproduo sexuada na formao do zigoto, os descendentes idnticos tm origem a partir de um processo assexuado de diviso celular. A clonagem induzida artificialmente uma tcnica da engenharia gentica aplicada em vegetais e animais, ligada pesquisa cientfica. Nesse caso, o termo aplica-se a uma forma de reproduo assexuada produzida em laboratrio, de forma artificial, baseada num nico patrimnio gentico. A partir de uma clula-me, ocorre a produo de uma ou mais clulas (idnticas entre si e original), que so os clones. Os indivduos resultantes desse processo tero as mesmas caractersticas genticas do indivduo doador, tambm denominado original.

Existem pesquisas sobre muitos tipos de clonagens, porm estes podem ser simplificados em clonagem teraputica e clonagem reprodutiva. A principal diferena destas tcnicas de clonagem so baseadas na reproduo propriamente dita; nas duas situaes h transferncia de um ncleo de uma clula diferenciada para um vulo sem ncleo, porm na tcnica de clonagem para fins teraputicos as clulas so multiplicadas em laboratrio para formar tecidos especficos e nunca so implantados em um tero o que ocorre na clonagem para fins reprodutivos.

Clonagem Vegetal Ao contrrio da clonagem animal, tema ainda recente e controverso no meio cientfico, a clonagem vegetal j est em uso comercial h muito tempo e trouxe diversos benefcios sociedade. A idia de cultivar clulas isoladas de plantas surgiu no incio do sculo XX com Gottlieb Haberlandt, botnico alemo, como uma estratgia capaz de materializar os conceitos embutidos na teoria celular proposta por Schwann e Shleider por volta de 1839. Esta conceituava a clula (vegetal e animal) como a menor unidade biolgica, autnoma, e capaz, em princpio, de originar um organismo inteiro. Assim, ela afirmava que a clula madura do corpo de um organismo pluricelular (clula somtica) manteria seu material gentico em condies de originar um indivduo idntico matriz doadora, comportando-se desta forma como se fosse uma clula-ovo ou zigoto. A questo, pois, era descobrir como fazer uma clula madura e especializada (diferenciada), programada para a realizao de funes especficas, voltar ao estgio embrionrio. A primeira demonstrao inquestionvel na obteno de embries de plantas a partir de clulas maduras (embriognese somtica) foi feita em 1958 pelo prof. F.C. Steward e colaboradores, atravs do cultivo de clulas isoladas de raiz de cenoura. A cultura de tecidos vegetais tem vrias aplicaes prticas utilizadas amplamente na agricultura. Dentre elas podem ser destacadas a clonagem de vegetais, o melhoramento gentico e a produo de mudas sadias.

A tcnica da clonagem in vitro de plantas (a mais comumente utilizada), conhecida tambm como micropropagao, uma forma rpida de multiplicar uma determinada planta, ou gentipo, que apresente caractersticas agronmicas desejveis como, por exemplo, produtividade elevada, qualidade elevada de gros ou frutos, tolerncia a pragas ou doenas, entre outras. Ela consiste, basicamente, em cultivar segmentos de plantas, em tubos de ensaio contendo meio de cultura adequado. A partir desses segmentos que podem ser gemas, fragmentos de folhas ou razes, entre outros podem ser obtidas centenas a milhares de plantas idnticas. Essas plantas so, posteriormente, retiradas dos tubos de ensaio, aclimatadas, e levadas ao campo, onde se desenvolvem normalmente. Os cuidados com a planta matriz, aquela da qual sero retirados os explantes (ou seja, os segmentos de tecido ou rgo vegetal utilizado para iniciar a cultura in vitro), tambm asseguram o bom estado dos clones. Dentre as vantagens da micropropagao pode ser citada a rapidez na produo de um grande nmero de mudas. A partir de uma planta de bananeira, por exemplo, podem ser obtidas atravs da micropropagao aproximadamente 100 mudas, no prazo de oito meses. Em condies de campo so obtidas at 12 mudas em um perodo similar. Quanto s orqudeas, leva-se cerca de dois anos para a obteno de uma boa muda utilizando se os mtodos convencionais, enquanto que, atravs do cultivo in vitro, possvel a produo de centenas de mudas nesse mesmo perodo de tempo. A micropropagao tem demonstrado grande importncia prtica e potencial nas reas agrcolas, florestal, na horticultura, floricultura, bem como na pesquisa bsica.

Clonagem Animal As plantas no so os nicos organismos que podem ser clonados naturalmente. Os ovos no fertilizados de alguns animais (pequenos invertebrados, vermes, algumas espcies de peixe, lagartos e sapos) podem se desenvolver em adultos plenamente crescidos sob determinadas condies ambientais - normalmente algum tipo de estmulo qumico. Este processo

chamado de partenognese e a prole so clones das fmeas que depositaram os ovos. Outro exemplo de clonagem natural so os gmeos idnticos. Apesar de serem geneticamente diferentes dos pais, os gmeos idnticos so clones entre si e que ocorrem naturalmente. Os cientistas j experimentaram com a clonagem animal, mas nunca foram capazes de estimular uma clula especializada (diferenciada) para produzir diretamente um novo organismo. Em vez disso, eles transplantam a informao gentica de uma clula especializada em uma clula de vulo no fertilizado cuja informao gentica foi destruda ou removida fisicamente. Nos anos 70, um cientista chamado John Gurdon clonou girinos com sucesso. Ele transplantou o ncleo de uma clula especializada de um sapo (B) em um ovo no fertilizado de outro sapo (A) no qual o ncleo foi destrudo por luz ultravioleta. O ovo com o ncleo transplantado se desenvolveu em um girino que era geneticamente idntico ao sapo B. Apesar de os girinos de Gurdon no terem sobrevivido at se tornarem sapos adultos, o seu experimento mostrou que o processo de especializao em clulas animais era reversvel e sua tcnica de transferncia nuclear abriu caminho para sucessos posteriores em clonagem. Em 1997, a clonagem foi revolucionada quando Ian Wilmut e seus colegas do Instituto Roslin em Edinburgo, Esccia, clonaram com sucesso uma ovelha chamada Dolly. Dolly foi o primeiro mamfero clonado. Wilmut e seus colegas transplantaram um ncleo de uma clula de glndula mamria de uma ovelha Finn Dorsett no ovo desnucleado de uma ovelha Blackface escocesa. A combinao ncleo-ovo foi estimulada com eletricidade para fundi-los e estimular a diviso celular. A nova clula se dividiu e foi colocada no tero de uma ovelha Blackface para se desenvolver. Dolly nasceu meses depois. Dolly provou ser geneticamente idntica s clulas mamrias Finn Dorsett e no ovelha Blackface, o que demonstrou claramente que era um clone bem-sucedido (foram feitas 276 tentativas antes de dar certo o experimento). Dolly depois disso cresceu e reproduziu vrias proles prprias atravs de meios sexuados normais. Portanto, a Dolly um clone vivel e saudvel. Desde a Dolly, diversos laboratrios universitrios e empresas empregaram vrias modificaes da tcnica de transferncia nuclear para

produzir mamferos clonados, inclusive vacas, porcos, macacos, camundongos e etc. Dentro da clonagem animal, um tema que gera muita polmica a clonagem humana. Esta a criao de uma cpia geneticamente idntica de um ser humano. O termo empregado para se referir clonagem humana artificial, sendo que ele no empregado para se referir ao nascimento de gmeos idnticos, cultura de tecidos ou a cultura de clulas humana. Apesar da possibilidade da clonagem humana ter sido objeto de especulao por grande parte do sculo XX, cientistas e polticos comearam a tomar o assunto a srio por volta da dcada 60. O vencedor do Prmio Nobel e geneticista Joshua Lederberg, defendeu a clonagem e a engenharia gentica em um artigo no American Naturalist em 1966 e, novamente, no ano seguinte, no Washington Post. Essa discusso acendeu um debate com o bioeticista conservador Leon Kass, que escreveu na poca em que "a reproduo programada do homem o desumaniza". Outro prmio Nobel, James D. Watson, um dos descobridores da estrutura do DNA, discutiu o potencial e os perigos da clonagem em um artigo de 1971.

Clonagem teraputica A clonagem teraputica tem finalidade de obter-se clulas-tronco por clonagem de clulas; ou seja, se em vez de inserirmos em um tero o vulo cujo ncleo foi substitudo por um de uma clula somtica deixarmos que ele se divida no laboratrio teremos a possibilidade de usar estas clulas - que na fase de blastocisto so pluripotentes - para fabricar diferentes tecidos. Isto abrir perspectivas fantsticas para futuros tratamentos, porque hoje s se consegue cultivar em laboratrio clulas com as mesmas caractersticas do tecido do qual foram retiradas. importante que as pessoas entendam que, na clonagem para fins teraputicos, sero gerados s tecidos, em laboratrio, sem implantao no tero. No se trata de clonar um feto at alguns meses dentro do tero para depois lhe retirar os rgos como alguns acreditam. Tambm no h porque

chamar esse vulo de embrio aps a transferncia de ncleo porque ele nunca ter esse destino. Uma pesquisa publicada na revista Science por um grupo de cientistas coreanos (Hwang e col., 2004) confirma a possibilidade de obter-se clulastronco pluripotentes a partir da tcnica de clonagem teraputica ou transferncia de ncleos. O trabalho foi feito graas a participao de dezesseis mulheres voluntrias que doaram, ao todo, 242 vulos e clulas "cumulus" (clulas que ficam ao redor dos vulos) para contribuir com pesquisas visando clonagem teraputica. As clulas cumulus, que j so clulas diferenciadas, foram transferidas para os vulos dos quais haviam sido retirados os prprios ncleos. Dentre esses, 25% conseguiram se dividir e chegar ao estgio de blastocisto, portanto, capazes de produzir linhagens de clulas-tronco pluripotentes.

Polmicas que envolvem a clonagem Quando se fala em clonagem, diversas polmicas so levantadas sobre sua utilizao, principalmente no que se diz respeito clonagem animal, e comum falar-se em moralidade de clonagem. Por moralidade da clonagem entendo o conjunto de argumentos morais pr e contra a utilizao da tecnologia clonagem com fins reprodutivos e/ou teraputicos, ou seja, consistentes em produzir seres vivos, ou partes de seres vivos (por exemplo, rgos e tecidos), a princpio iguais ao original do ponto de vista de alguma caracterstica considerada essencial, ou de todas. Um aspecto essencial no debate sobre a moralidade da clonagem em humanos diz respeito vulnerabilidade dos futuros indivduos geneticamente idnticos. Os crticos mais radicais usam esse entre outros argumentos para classificarem os avanos da cincia como perigosos. impossvel, entretanto, imaginar nossa sociedade como eterna ou imutvel. Por outro lado, os benefcios decorrentes do progresso cientfico precisam ser alcanados. Resta ento agir ? e permitir a continuidade das pesquisas com prudncia e tolerncia, sabendo respeitar os limites entre o necessrio e o possvel.

Referncias Bibliogrficas FREUDENRICH, C. C. Como funciona a clonagem. Disponvel em <http://ciencia.hsw.uol.com.br/clonagem3.htm> com acesso em 05 de abril de 2013.

BENTO, M. A. F.; SILVA, V. A. P.; ALVIM, N. C. Clonagem de animais. Revista cientfica eletrnica de medicina veterinria FAMED. Disponvel em <http://www.revista.inf.br/veterinaria04/revisao/revisao05.pdf>com acesso em 05 de abril de 2013.