ISQ – Preparação e Estocagem de Cepas de Referência

1. Quem

2. Onde

3. Quando

4. Equipamentos e Materiais

· Criotubo com caldo BHI + Glicerol a 20%;

· Cepas de referência;
· Alças de inoculação;
· Placas de Petri com Meios de Cultura;
· MicroScan WalkAway 96;
· Corantes para GRAM e Ziehl;
· Discos de Antibiograma;
· Cabine de Segurança Biológica;
· Estufas de 30°C e 36°C;
· Freezer <-20°C;

5. Como

5.1. Cepa Original Liofilizada:

· Ressuspender a cepa liofilizada, conforme as recomendações do fabricante;

· Semear em meio de cultura específico (Ágar Sangue, MacConkey, Chocolate,
Saboraud(?), Lowenstein Jensen(?));
· Fazer dois repiques;
· Realizar coloração de Gram;
· Identificar através de provas bioquímicas automatizadas e, quando necessário,
manuais;
· Realizar testes de sensibilidade a antimicrobianos;
· Certificando-se quanto a identificação e os testes de sensibilidade, armazenar a cepa
conforme recomendações a seguir (Fluxograma, Figura 1):
a. Transferir as colônias recentes de 18 a 24 horas, em 15 frascos estéreis
(criotubos), para cada cepa de referência a ser utilizada no controle;
b. Etiquetar os frascos com o nome do microrganismo, número da cepa de
referência, a data do armazenamento e o mês a ser utilizado (janeiro a
dezembro);
c. Nos outros três frascos, colocar a data dos três anos seguintes para realizar o
mesmo procedimento;
d. Armazenar em freezer –20°C.