INSTRUÇÕES DE

UTILIZAÇÃO – MEIOS EM
PLACAS PRONTOS A
USAR
PA-254056.06 Rev.: April 2013

BD Yersinia Selective Agar (CIN) 

BD Aeromonas Yersinia Agar

UTILIZAÇÃO PREVISTA
O BD Yersinia Selective Agar (=Ágar CIN, Ágar de Novobiocina-Irgasan-Cefsulodina) é um
meio selectivo para diferenciação utilizado para o isolamento Yersinia enterocolitica e o BD
Aeromonas Yersinia Agar é um meio selectivo para diferenciação utilizado para isolamento
tanto da Yersinia enterocolitica como de Aeromonas spp. provenientes de uma variedade de
amostras clínicas e não clínicas.

PRINCÍPIO E EXPLICAÇÃO DO PROCEDIMENTO

Método microbiológico
O BD Yersinia Selective Agar foi descrito por primeira vez por Schiemann como alternativa
ao Ágar de MacConkey e outros meios vulgarmente utilizados para o isolamento de Yersinia
enterocolitica, uma agente causador da gastroenterite.1 Descobriu-se que este meio é superior
aos agares de MacConkey, SS, CAL ou Y.2 O BD Aeromonas Yersinia Agar é uma
modificação do BD Yersinia Selective Agar que, além da Yersinia enterocolitica, suporta o
crescimento de espécies de Aeromonas (que também podem causar enterite) uma vez que
possui um teor reduzido de cefsulodina.3,4

Em ambos os meios, são as peptonas que fornecem os nutrientes. A fermentação de manitol

na presença de vermelho neutro resulta numa colónia característica "olho-de-boi" de Y.
enterocolitica, incolor com centros vermelhos em ambos os meios. A inibição selectiva de
organismos gram-negativos e gram-positivos obtém-se por meio de cristal violeta, desoxicolato
de sódio e os agentes antimicrobianos, cefsulodina, Irgasan (Triclosan) e novobiocina. No BD
Aeromonas Yersinia Agar, as espécies de Aeromonas produzem colónias pálidas que
possuem um centro cor-de-rosa a vermelho, semelhantes à Yersinia. Os dois organismos
podem diferenciar-se um do outro por meio da reacção de oxidase (positiva apenas para
Aeromonas).3-5
O BD Yersinia Selective Agar e o BD Aeromonas Yersinia Agar também podem ser
utilizados para o isolamento de espécies de Yersinia que não a Y. enterocolitica, por exemplo
para Y. pseudotuberculosis.5

REAGENTES
Fórmulas* por Litro de Água Purificada
BD Yersinia Selective Agar
Hidrolisado pancreático de gelatina 10,0 g Sulfato de magnésio 0,001 g
Hidrolisado péptico de tecido animal 5,0 Cristal violeta 0,001
Extracto de bovino 5,0 Vermelho neutro 0,03
Extracto de leveduras 2,0 Cefsulodina 0,015
Manitol 20,0 Irgasan 0,004
Piruvato de sódio 2,0 Novobiocina 0,0025
Cloreto de sódio 1,0 Ágar 12,0
Desoxicolato de sódio 0,5
pH 7,4 ± 0,2
Em vez de 0,015 g de cefsulodina no BD Yersinia Selective Agar, o BD Aeromonas
Yersinia Agar contém apenas 0,004 g de cefsulodina por litro de meio.
*Ajustada e/ou suplementada conforme necessário para cumprir os critérios do desempenho.

PA-254056.06 -1-
PRECAUÇÕES
. Apenas para uso profissional.
Não utilizar as placas que apresentem sinais de contaminação microbiana, descoloração,
secura, fissuras ou outros sinais de deterioração.
Consultar as INSTRUÇÕES GERAIS DE UTILIZAÇÃO para informação sobre os
procedimentos de manuseamento asséptico, os riscos biológicos e os procedimentos de
eliminação do produto usado.

ARMAZENAMENTO E PRAZO DE VALIDADE

Após recepção das placas, conservar no escuro a uma temperatura entre 2 e 8°C, dentro do
invólucro original até ao momento da utilização. Evitar congelar e aquecer excessivamente. As
placas podem ser inoculadas até ao prazo de validade (ver a etiqueta da embalagem) e
incubadas durante o tempo de incubação recomendado.
As placas são fornecidas em pilhas de 10 placas e, quando uma destas pilhas é aberta, as
respectivas placas terão de ser utilizadas no prazo máximo de uma semana, se forem
conservadas em local limpo a uma temperatura entre 2 e 8°C.

CONTROLO DE QUALIDADE PELO UTILIZADOR

Inocular amostras representativas com as seguintes estirpes (para mais detalhes, consultar as
INSTRUÇÕES GERAIS DE UTILIZAÇÃO). Incubar as placas em condições aeróbias, a uma
temperatura de 25 ± 2°C ou 35 ± 2°C, e ler os resultados após 20 a 24 e 42 a 48 horas.

Estirpes BD Yersinia Selective Agar BD Aeromonas

(Ágar de CIN) Yersinia Agar
Aeromonas hydrophila Inibição parcial a completa Crescimento razoável a bom;
ATCC 7966 colónia cor-de-rosa pálido com
uma centro cor-de-rosa a
vermelho
Yersinia enterocolitica Crescimento bom a excelente; Crescimento bom a excelente;
ATCC 9610 colónia cor-de-rosa pálido com colónia cor-de-rosa pálido com
um centro vermelho escuro um centro vermelho escuro
(colónia “olho de boi”) (colónia “olho de boi”)
Escherichia coli ATCC 25922 Inibição completa Inibição completa
Enterococcus faecalis Inibição parcial a completa Inibição parcial a completa
ATCC 29212
Proteus mirabilis ATCC 14153 Inibição parcial a completa Inibição parcial a completa
Pseudomonas aeruginosa Inibição parcial a completa Inibição parcial a completa,
ATCC 27853 crescimento razoável aceitável
Staphylococcus aureus Inibição parcial a completa Inibição parcial a completa
ATCC 25923
Não inoculadas Cor-de-rosa claro, ligeiramente opalescente
* Pode ficar completamente cor-de-rosa após 42 a 48 horas de incubação.

PROCEDIMENTO
Materiais fornecidos
O BD Yersinia Selective Agar (Ágar de CIN) ou o BD Aeromonas Yersinia Agar, ambos
fornecidos em placas Stacker de 90 mm. Microbiologicamente controlados.
Materiais não fornecidos
Meios de cultura auxiliares, reagentes e equipamento laboratorial, conforme necessário.
Tipos de amostra
O BD Yersinia Selective Agar é um meio selectivo para diferenciação utilizado para o
isolamento de Yersinia enterocolitica e o BD Aeromonas Yersinia Agar é um meio selectivo
para diferenciação utilizado para isolamento de espécies de Aeromonas e Yersinia
enterocolitica provenientes de fezes humanas ou zaragatoas rectais (consultar também
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO E LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO).
PA-254056.06 -2-
Procedimento do teste
Espalhar a amostra para cultura imediatamente após esta ser recebida no laboratório. A placa
para cultura é usada principalmente para isolar culturas puras das amostras que contêm flora
mista. Em alternativa, se o material estiver a ser cultivado directamente de uma zaragatoa,
fazer rolar a zaragatoa sobre uma pequena área da superfície, na extremidade; em seguida,
espalhar a partir desta área inoculada.
As espécies de Aeromonas e Yersinia desenvolvem-se bem a uma temperatura entre
25 e 37°C. A temperatura mais baixa é ideal para Yersinia e é recomendada para isolamento
primário. Incubar as placas a uma temperatura entre 25 e 32°C, durante 24 a 48 h.

Um meio menos selectivo como, por exemplo, BD MacConkey II Agar, também deve ser
inoculado com a amostra (e incubado a uma temperatura de 35 ± 2°C) para a detecção de
outros elementos patogénicos envolvidos na infecção.
Poderá, por vezes, ser necessário um procedimento de “enriquecimento a frio” para o
isolamento de Yersinia enterocolitica, proveniente de amostras de fezes e outro material como,
por exemplo, os alimentos: Inocular cerca de 1 grama de amostra numa solução salina
tamponada com 8 a 12 ml de fosfato (pH 7,2), mantendo a uma temperatura de 4°C durante
um máximo de 21 dias.5,6 O enriquecimento de Aeromonas pode realizar-se em água alcalina
com peptonas.4,7 Realizar, periodicamente, repicagens provenientes do respectivo
enriquecimento sobre placas de qualquer um dos meios descritos neste documento,
espalhando para isolamento. Incubar as placas conforme se indica mais acima.

Resultados
As colónias de Yersinia enterocolitica estarão dotadas de centros em vermelho escuro
circundados por um rebordo transparente e pálido, fazendo lembrar um "olho-de-boi" no BD
Yersinia Selective Agar e no BD Aeromonas Yersinia Agar após 24 horas de incubação.
Após 42 a 48 horas de incubação, estes apresentam-se completamente cor-de-rosa. A Yersinia
pseudotuberculosis geralmente não possui a zona transparente em torno das colónias. A
Aeromonas produz colónias mais pálidas que também possuem um centro cor-de-rosa a
vermelho e são positivas para oxidase. É fácil diferenciar a Aeromonas da Yersinia e de outras
Enterobacteriaceae realizando um teste padrão de oxidase (apenas as Aeromonas spp.
apresentarão um resultado positivo). É necessário proceder à confirmação bioquímica e
serológica para uma completa identificação dos isolados suspeitos.

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO E LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO

O BD Yersinia Selective Agar (CIN) e o BD Aeromonas Yersinia Agar são adequados para o
isolamento da Yersinia enterocolitica proveniente de amostras de fezes humanas ou outro
material.1,2, 5-8 Além disso, o BD Aeromonas Yersinia Agar é utilizado para o isolamento de
Aeromonas.3-5, 7,8
Embora seja possível recuperar a Yersinia por colocação directa em placas, as amostras com
contagens viáveis baixas podem necessitar de enriquecimento a frio (4°C) em solução salina
tamponada com fosfato.5,7 No entanto, o enriquecimento a frio pode não ser prático devido ao
longo período de incubação e porque selecciona estirpes não patogénicas de Y. enterocolitica e
outras espécies de Yersinia.5
O enriquecimento de Aeromonas em água alcalina com peptonas pode ajudar a isolar o
organismo de populações das quais se desprendem números reduzidos de organismos como,
por exemplo, portadores ou pacientes em fase de convalescença.4,7
Nos dois meios aqui descritos, também se desenvolverão outras espécies de Yersinia como,
por exemplo, a Y. pseudotuberculosis, a Y. frederiksenii e a Y. intermedia.5 O potencial
patogénico destas últimas duas espécies é controverso, mas nesta altura, não se devem ignorar
os isolados.5
A formulação do BD Aeromonas Yersinia Agar mas não do BD Yersinia Selective Agar é
recomendada para o isolamento selectivo de Yersinia pestis.5
Podem desenvolver-se neste meio Enterobacteriaceae além da Yersinia, especialmente a
espécie Citrobacter. Nem sempre é possível diferenciar de forma fiável a Serratia e a
Citrobacter da Yersinia apenas pela morfologia da colónia. É, portanto, necessária a execução
de testes bioquímicos e serológicos para a confirmação e identificação completa dos isolados.
PA-254056.06 -3-
Algumas estirpes de Aeromonas podem produzir um crescimento fraco no BD Aeromonas
Yersinia Agar. Recomenda-se a inclusão de outros meios de isolamento para uma
recuperação da população total destes organismos.

BIBLIOGRAFIA
1. Schiemann, D.A. 1979. Synthesis of a selective agar medium for Yersinia enterocolitica.
Can. J. Microbiol. 25:1298-1304.
2. Head, C.B., D.A. Whitty, and S. Ratnam. 1982. Comparative study of selective media for
recovery of Yersinia enterocolitica. J. Clin. Microbiol. 16:615-621.
3. Altorfer, R., et al. 1985. Growth of Aeromonas spp. on cefsulodin-irgasan-novobiocin agar
selective for Yersinia enterocolitica. J. Clin. Microbiol. 22: 478-480.
4. Abbott, S.L. 2003. Aeromonas. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller,
and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for
Microbiology, Washington, D.C.
5. Bockemühl, J., and J.D. Wong. 2003. Yersinia. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H.
Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C.
6. Weissfeld, A.S. and A.C. Sonnenwirth. 1982. Rapid isolation of Yersinia spp. from feces. J.
Clin. Microbiol. 15:508-510.
7. Kist, M., et al. 2000. Infektionen des Darmes. In: Mauch, H., Lüttiken, R., and S. Gatermann
(eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol. 9.
Urban & Fischer, Munich, Germany.
8. Downes, F.P., and K. Ito. 2001. Compendium of methods for the microbiological examination
of foods. 4th edition. American Public Health Association (APHA). Washington, D.C. USA.

EMBALAGEM / APRESENTAÇÃO
BD Yersinia Selective Agar (CIN)
Cat. No. 254056 Meios em placas prontos a usar, 20 placas
Cat. No. 254088 Meios em placas prontos a usar, 120 placas
BD Aeromonas Yersinia Agar
Cat. No. 254443 Meios em placas prontos a usar, 20 placas

INFORMAÇÕES ADICIONAIS
Para obter informações adicionais, contacte o representante local da BD.

Becton Dickinson GmbH

Tullastrasse 8 – 12
D-69126 Heidelberg/Germany
Phone: +49-62 21-30 50 Fax: +49-62 21-30 52 16
Reception_Germany@europe.bd.com

http://www.bd.com
http://www.bd.com/europe/regulatory/

ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection

BD, BD Logo and all other trademarks are the property of Becton, Dickinson and Company. © 2013 BD

PA-254056.06 -4-