Aluna: Luana Maria Pacheco Schittino

Matrícula: 95633

Trabalho I

1. Sobre o projeto

1.1 Título: Expressão Heteróloga do Fator VII de coagulação sanguínea em

Leishmania tarentolae otimizada

Área do conhecimento: 2.08.00.00-2 Bioquímica

Subárea de conhecimento: 2.08.04.00-8 Biologia Molecular

1.2 Este projeto originará resultado prático (uma nova técnica, uma nova
tecnologia, um novo equipamento, uma nova metodologia ou uma nova
prática)? Isto é, seus resultados poderão ser imediatamente usados para
resolver algum problema prático?

☐ Não. Em um primeiro momento os resultados não poderão ser aplicados,

pois haverá necessidade de continuação visando um maior refinamento da
pesquisa.

X Sim. Imediatamente após a conclusão do projeto, os resultados poderão ser

aplicados para solução de um problema prático (Tecnologia, Inovação).

1.3 Este projeto originará conhecimento teórico novo? Isto é, seus resultados
poderão significar um avanço do conhecimento a que se refere o projeto?
☐ Não. O projeto não objetiva resolver questões teóricas.
X Sim. O projeto visa justamente elucidar uma parte obscura e ainda
inexplicada da sua área de conhecimento (Ciência).

1.4 Qual é a questão abordada neste projeto? Apresente de forma clara e

objetiva a pergunta e a hipótese principal que será investigada neste
projeto. (Máximo 50 palavras)
A questão abordada será a padronização da expressão do Fator VII
(proteína participante da coagulação sanguínea) no microrganismo não
patogênico Leishmania tarentolae. A hipótese levantada é de que esta
proteína, quando produzida em L.tarentolae, apresenta maior funcionalidade
em comparação à produzida em E.coli, devido ao padrão de glicosilação
expresso.

1.5 Cite as três referências bibliográficas principais de sua revisão que

sustentam a pesquisa proposta.

Jurlander, B., Thim, L., Klausen, N. K., Persson, E., Kjalke, M., Rexen, P.,
Jørgensen, T. B., Østergaard, P. B., Erhardtsen, E., & Bjørn, S. E. (2001).
Recombinant Activated Factor VII (rFVIIa):Characterization,
Manufacturing,and Clinical Development (Vol. 27, Issue 4).
https://doi.org/10.1055/s-2001-16971

Mirzaahmadi, S., Asaadi-Tehrani, G., Bandehpour, M., Davoudi, N., Tahmasbi,

L., Hosseinzadeh, N., Mirzahoseini, H., Parivar, K., & Kazemi, B. (2011).
Expression of recombinant human coagulation factor VII by the lizard
Leishmania expression system. Journal of Biomedicine and Biotechnology,
2011. https://doi.org/10.1155/2011/873874

Basile, G., & Peticca, M. (2009). Recombinant Protein Expression in

Leishmania tarentolae. In Molecular Biotechnology (Vol. 43, Issue 3, pp. 273–
278). https://doi.org/10.1007/s12033-009-9213-5

1.6 Por que este tema é importante para a sua área de conhecimento?
Isto é, o que mudará na área de conhecimento específica quando este
projeto tiver sido executado? Quais serão os possíveis impactos?
(Máximo 100 palavras).

O tema selecionado para o projeto será de grande valia na elucidação

do metabolismo relacionado a produção da glicoproteína em bactéria (E.coli)
e também em protozoário (L.tarentolae), permitindo a comparação estrutural
e funcional entre ambas. Além de possibilitar a investigação e validação acerca
do sistema mais adequado e promissor para expressão do Fator VII.

1.7 Por que este tema é importante para a sua subárea de conhecimento?
Isto é, o que mudará nesta subárea de conhecimento quando este projeto
tiver sido executado? Quais serão os possíveis impactos? (Máximo 100
palavras).
Conhecer a ligação entre as principais moléculas presentes no
organismo é uma das bases da biologia molecular. Aplicar o conhecimento
teórico sobre a relação DNA-RNA-proteínas no organismo em questão e
procurar entender o metabolismo de produção da proteína de interesse pode
colaborar para a padronização da expressão de um gene de forma eficaz,
trazendo economia de tempo e maior qualidade, pontos significativos para
desenvolvimento de um produto aplicável para escala industrial.

1.8 Por que seria importante financiar este projeto? (Máximo 100
palavras).
A produção de glicoproteínas é um mercado crescente e o Fator VII pode
ser de grande interesse, principalmente para o setor farmacêutico-industrial,
visto que, a ausência ou deficiência desta proteína no organismo humano
pode representar a causa de doenças graves como um tipo raro de hemofilia
que atinge milhares de pessoas. Investir em pesquisas na área consiste em
colaborar com o crescimento intelectual dos membros participantes, com
aumento da infraestrutura do laboratório e instituição sediadores, além de
possibilitar avanços técnicos para produção de proteínas de interesse
biotecnológico.
2. Sobre a equipe

2.1 Por que a equipe proponente é capacitada a desenvolver este projeto

de forma eficiente e eficaz? (Máximo 100 palavras).
A equipe proponente é integrante do grupo de pesquisa Biologia
Sintética e Modelagem de Sistemas Biológicos sob orientação do professor
Tiago A. de Oliveira Mendes e está envolvida com outros projetos seguindo a
mesma linha de pesquisa, ou seja, produção de glicoproteínas. Portanto, além
de ter familiaridade com Leishmania tarentolae como sistema de expressão, é
também capaz de contar com tais conhecimentos prévios para padronizar a
expressão do Fator VII recombinante.

2.2 Quais são os três trabalhos anteriores desenvolvidos recentemente

por esta equipe que mais se aproximam do tema deste projeto? Cite
publicações científicas (artigos, livros), propriedade intelectual,
exibições, espetáculos, palestras, dias de campo, ou qualquer outra
realização que possa demonstrar a qualidade e experiência prévia da
equipe neste tema. (Máximo 150 palavras)

PEREIRA, H. S. et al. Chimeric protein designed by genome-scale

immunoinformatics enhances serodiagnosis of bovine neosporosis. Journal of
Clinical Microbiology, v. 58, n. 7, 2020.

Mendes, T.A.O. et al. Leishmania tarentolae otimizada, processo de produção,

e uso para produção de glicoproteínas sializadas. Depositantes: Universidade
Federal de Viçosa, Universidade Federal de Minas Gerais. BR n.
PI1020190003674-5 A2. Depósito: 22 fev. 2019. Concessão: 06 out. 2020.

de Oliveira, T. A., Silva, W. da, da Rocha Torres, N., Badaró de Moraes, J. V.,
Senra, R. L., de Oliveira Mendes, T. A., Júnior, A. S., Bressan, G. C., & Fietto,
J. L. R. (2019). Application of the LEXSY Leishmania tarentolae system as a
recombinant protein expression platform: A review. In Process Biochemistry
(Vol. 87, pp. 164–173). Elsevier Ltd.
https://doi.org/10.1016/j.procbio.2019.08.019
3. Sobre a instituição

3.1 Por que o presente projeto pode ser desenvolvido de forma eficiente
e eficaz na Entidade onde será sediado?
O projeto será realizado no Laboratório de Biotecnologia Molecular,
representado por dois espaços no Departamento de Bioquímica e Biologia
Molecular da Universidade Federal de Viçosa. Os laboratórios oferecem
equipamentos essenciais para realização dos experimentos como centrífuga
refrigerada, vidrarias, cabine de segurança biológica, capela de exaustão,
estufas, shakers, eletroporador, FPLC (GE Äkta Purifier), aparatos para
eletroforese, foto-documentador, banho-maria, freezers -20ºC e -80ºC para o
armazenamento de amostras, termocicladores, autoclaves e reagentes
diversos. Ou seja, a Entidade dispõe dos recursos necessários para o
desenvolvimento do estudo de forma eficiente e eficaz.