PRÁTICA DE COLETA E

PROCESSAMENTO DE
AMOSTRAS BIOLÓGICAS
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SOBRE DIREITOS AUTORAIS E REPRODUÇÃO

finalidade educacional e são destinados
para o seu estudo individual. É proibida a
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venham a ser criados, sem autorização
ATENÇÃO
prévia de seus autores.
!
Profa. Dra. Nathalia
nathalia.victo@unicid.edu.br
@nacruzvicto
Cronograma
❑ Coleta de Fezes;

❑ Microbiologia;

❑ Fluídos biológicos.
COLETA DE FEZES
Objetivos de Aprendizagem
❑ Compreender os conceitos básicos aplicados a coleta
de fezes.
❑ Compreender a coprocultura e a pesquisa de sangue
oculto.
Fezes, excremento ou dejeto são os
resíduos de alimento não digerido,
excretado pela defecação. Assim
ocorre após sua passagem pelo tubo
digestivo, através do ânus.
Um cocô saudável é marrom graças à
estercobilina, um pigmento escuro formado na
digestão da bile – fluido produzido pelo fígado
que facilita a ação das enzimas que digerem as
gorduras. Sua textura deve ser sólida, mas não de
forma exagerada, com uma forma
ligeiramente alongada. O ideal é que a
consistência e a forma não causem dor ou
dificuldade para evacuar.
Para que serve o exame de fezes?
O exame de fezes é um dos mais pedidos para
detectar problemas no sistema digestivo. Ele serve
para diagnosticar possíveis infecções, verminoses e
doenças no estômago, intestino e reto, por meio de
análise laboratorial que identifica a presença de
substâncias ou parasitas indesejados ou indicativos de
enfermidades nas fezes.
Amostra
Todos os tipos de consistência devem ser coletados;

Retirar frações de diferentes regiões do material

fecal;

50 - 100g de fezes;
INSTRUÇÕES DE COLETA:

1. Pote de coleta deve ser retirado no laboratório.

2. Não utilizar laxante, exceto sob orientação médica.

3. Evacuar em um recipiente limpo, seco (plástico ou jornal).

4. Não contaminar o material com urina, terra ou água do vaso sanitário.

5. Transferir uma pequena porção para o frasco fornecido pelo laboratório e fechar bem.

6. Não encher o pote com as fezes, o recomendável é até a metade.

7.Tempo para levar até o laboratório:

Em até 2h: COPROCULTURA e PESQUISA DE LEUCÓCITOS FECAIS.
Em até 12h: EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES e PESQUISA DE SANGUE OCULTO (manter em geladeira até
envio).
• Amostra única, em dias consecutivos ou alternados;
• Ideal no mínimo 3 amostras.
1 2 3
Fezes frescas devem ser enviadas imediatamente para o
laboratório;

Seriada, com ou sem Na impossibilidade de encaminhar o material logo após

conservante coleta, as fezes deverão ser refrigeradas;
1 3 5

O material fecal também pode ser coletado com

conservante (ideal que seja colocado logo após a
Alternados, com
evacuação);
conservante
Evacuação em recipiente limpo e seco ou sobre superfície seca protegida
por papel/plástico;

Preferencialmente utilizar frasco coletor de boca e base largas, com tampa

de rosquear;

Fezes eliminadas no vaso ou solo são inadequadas para o EPF;

Laxantes, antiácidos, óleos minerais, contrastes (bário e iodo)

interferem no exame.
Conservantes
Principais Conservantes
Formalina 10%
MIF (mertiolato, iodo e formol)
SAF (acetato de sódio, ácido
acético e formaldeído)
Conserva Observação
Cistos e oocistos de protozoários, Não conserva trofozoítos
ovos e larvas de helmintos
Cistos e oocistos de protozoários, Não conserva trofozoítos
ovos e larvas de helmintos
Cistos, oocistos e trofozoítos de Conserva trofozoítos
protozoários, ovos e larvas de
helmintos

Devem ser utilizados na proporção de três

partes de conservante para uma de fezes.
Análise
Macroscópica
Consistência;
Coloração;
Presença de elementos anormais;
Presença de vermes adultos ou partes deles.
Coloração
Fezes Verdes
As fezes verdes aparecem quando o intestino está
funcionando muito rápido e não tem tempo suficiente
para digerir corretamente a bile, como acontece
durante situações de estresse ou em crises do intestino
irritável. Além disso, a cor verde também pode aparecer
quando se ingere muitos vegetais verdes.
Fezes Avermelhadas
Esta cor de cocô geralmente indica a presença de
sangue e, por isso, é mais frequentes em situações de
hemorroidas, por exemplo. Porém, o sangramento
também pode ocorrer devido a infecções, problemas
inflamatórios, como doença de Crohn e colite ulcerativa
ou doenças mais graves, como câncer.
Fezes Amarelas
Este tipo de cocô normalmente é um sinal de dificuldade para
digerir a gordura e, por isso, pode estar relacionado com
problemas que diminuem a capacidade de absorção
intestinal, como doença Celíaca, ou ser causado pela falta de
produção de enzimas no pâncreas, podendo indicar
problemas neste órgão.
Fezes Escuras
As fezes escuras ou negras são, geralmente, acompanhadas
por um odor muito mais fétido do que o normal e podem ser
sinal de sangramento em algum lugar ao longo do sistema
digestivo.
Fezes Claras
As fezes claras, ou esbranquiçadas, surgem quando existe
muita dificuldade do sistema digestivo para digerir a gordura
e, por isso, são um sinal importante de problemas no fígado
ou nas vias biliares.
Presença de elementos anormais;
Presença de vermes adultos ou partes deles

Esse exame é feito através da observação

microscópica das fezes. Nele, é possível
pesquisar a presença de cistos ou ovos de
parasitas para identificar vermes intestinais de
dois tipos: protozoários e helmintos.
Método
Princípio
Sedimentação espontânea
Sedimentação por centrifugação
Flutuação Espontânea
Centrífugo-flutuação
Migração ativa (hidrotropismo e
termotropismo)
Filtração em tela
Método Achados
Hoffman, Pons e Janer / Lutz Ovos e larvas de helmintos, cistos
de protozoários
Blagg (MIFC) / Ritchie Ovos e larvas de helmintos, cistos e
oocistos de protozoários
Willis Ovos “leves” de helmintos
(Ancilostomídeos) e cistos de
protozoários
Faust Ovos “leves” de helmintos, cistos e
oocistos de protozoários
Rugai / Baermann-Moraes Larvas de helmintos (S. stercoralis)
Kato-Katz Ovos de helmintos
Hoffman, Pons e Janer
Baermann-Moraes
Kato-Katz
Coprocultura ou cultura de fezes

A coprocultura é o nome científico do exame cultura de

fezes, como é mais comum ser identificado nos
laboratórios. Ele é solicitado para identificar a presença
de bactérias nas fezes, e pode diagnosticar
a gastroenterite (inflamação ou irritação no tubo
intestinal).
Nesse exame, manter a amostra em refrigeração vai
depender da indicação do profissional de saúde e do
laboratório que realizará a coleta.
Através desse exame, é possível também analisar a saúde
geral do intestino, pois a presença de bactérias que não
fazem parte da microbiota intestinal – grupo de
microrganismos que vivem em determinado ambiente –
sugere uma irregularidade na saúde do paciente, que
necessita de acompanhamento clínico.
Pesquisa de sangue oculto

Esse exame é indicado para detectar câncer de cólon,

câncer de intestino e investigação de possíveis
hemorragias no sistema digestivo. Ele é feito por
observação microscópica e detecta pequenas
quantidades de sangue nas fezes que não podem ser
visualizadas a olho nu. O exame é realizado de duas
maneiras distintas:

• A primeira a partir de uma dieta específica de 3 a 5 dias

antes da coleta;
• A segunda sem a necessidade de restrições alimentares.
A restrição alimentar da primeira etapa consiste na não
ingestão de carne vermelha ou branca, rabanete, nabo,
couve-flor, beterraba, soja, feijão, lentilha, grão de bico,
milho, azeitonas, amendoim, nozes e castanhas.
Depois de colhida, a amostra deverá ser
armazenada na geladeira e enviada ao
laboratório em até 24 horas. As fezes não
devem ser coletadas se o paciente apresentar
sangramento anal, nasal ou na gengiva durante
a escovação, pois o sangue pode ser engolido e
pode interferir nos resultados.
“
Revisão de Aprendizagem

”
https://cruzeirodosul.grupoa.education/market
place/ua/5f1d0c9be64f7c0011a0673f
https://cruzeirodosul.grupoa.education/ob
ject/YL57rwCXROaOFzz8fzX51Q
MICROBIOLOGIA
Objetivos de Aprendizagem
❑ Entender a importância os exames microbiológicos.
O Setor de Microbiologia é responsável pelo cultivo, isolamento e
identificação de bactérias, fungos e leveduras causadores de doenças.

COLETA e/ou TRANSPORTE INADEQUADOS

podem ocasionar falhas no isolamento do
verdadeiro agente etiológico e favorecer o
desenvolvimento de microbiota normal ou
contaminante induzindo a tratamentos
inapropriados.
A identificação correta do sítio de coleta possibilitará a
análise adequada do crescimento microbiano na cultura.

TODA requisição de exames microbiológicos deve conter:

• Identificação do paciente: Nome completo, número de

prontuário ou registro.
• Data da solicitação
• Identificação da amostra: sítio de coleta e tipo de amostra
• USO de antimicrobianos
• Suspeita Clínica
• Exames solicitados
https://cruzeirodosul.grupoa.education/object
/PrtpwFFxRDCFXdsqpZh0gw
Considerações gerais:

• Coletar amostra, sempre que possível, antes da antibioticoterapia;

• A amostra deve ser coletada do sítio anatômico onde o microrganismo suspeito possa
ter mais chance de ser isolado;
• Fazer antissepsia antes de coletar as amostras;
• Aguardar 72 horas após mudança da antibioticoterapia para coletar novas amostras do
mesmo sítio de infecção;
• Utilizar frascos e meios de transporte apropriados;
• Enviar a amostra ao laboratório o mais breve possível;
• Em situações onde o próprio paciente irá realizar a coleta (urina, fezes), instruí-lo de
maneira clara e certificar-se de que ele compreendeu as orientações.
Amostra
• Sangue.
• Pus, exsudato ou drenagem de feridas.
• Urina, fezes e escarro.
• Corrimentos ou secreções genitais.
• Líquido cerebrospinal.
• Drenagem do olho ou ouvido.
Métodos
Amostra

https://cruzeirodosul.grupoa.education/ma
rketplace/ua/6113cc592025e00018066f02
“
Revisão de Aprendizagem

”
https://cruzeirodosul.grupoa.education/
object/QWq7rUa4S4mPxpY3bfN9jQ
FLUÍDOS BIOLÓGICOS
Objetivos de Aprendizagem
❑ Compreender as etapas de coleta e análise de líquor e
sêmen.
Espermatogênese anormal e infertilidade masculina
Algumas doenças destroem o epitélio do túbulo seminífero:
❖Caxumba;
❖doenças congênitas de causas desconhecidas.

Causas “fisiológicas” de infertilidade ou esterilidade temporária:

❖temperatura dos testículos (o  da temperatura degenera as células dos túbulos
seminíferos e as espermatogônias);
❖esta seria a causa dos testículos estarem fora do corpo, mantendo sua
temperatura abaixo da temperatura corporal (~2 0C);
❖os testículos se “adaptam” à temperatura externa (frio: retrai, calor: relaxa).
❑ Azoospermia: ausência de espermatózoides

❑ Azoospermia obstrutiva: O problema não está relacionado com a

produção, mas sim, à obstrução do ducto deferente.
• Infecções genitais
• Fibrose cística
• Vasectomia

❑ Azoospermia não obstrutiva: Produção mínima ou incapaz de sair pela

ejaculação, ou, ausência completa na formação de espermatózoides.
❑ Azoospermia: ausência de espermatózoides

❑ Azoospermia obstrutiva: O problema não está relacionado com a

produção, mas sim, à obstrução do ducto deferente.
• Infecções genitais
• Fibrose cística
• Vasectomia

❑ Azoospermia não obstrutiva: Produção mínima ou incapaz de sair pela

ejaculação, ou, ausência completa na formação de espermatózoides.
Espermograma
Análise do sêmen;

Avanços nos campos da andrologia e tecnologia

em reprodução assistida;

↑ da preocupação quanto a infertilidade;

Além disso, há análise pós-vasectomia e análises

forenses;
Importante para investigação da infertilidade masculina;

Quadro crescente que atinge cerca de 20% dos casais;

Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), a infertilidade é

caracterizada por casais que não conseguem engravidar após 12 meses de
coito regular, sem uso de métodos contraceptivos.
Formulário:
Nome;
Data de nascimento;
Número do código pessoal;
Período de abstinência;
Data da coleta;
Intervalo entre coleta e início da
amostra.
Informações sobre coleta e
acondicionamento:
Após período de abstinência sexual de
2 a 5 dias;
O laboratório deve fornecer frasco
estéril , identificado com o nome do
paciente, número de identificação, o
tipo do material e data;
A coleta deve ser realizada em sala
disponibilizada pelo laboratório;
A amostra deve ser obtida por
masturbação, diretamente no
recipiente estéril;
Não utilizar lubrificantes (gel, óleo, saliva)
ou preservativo (propriedades espermicida)
para a coleta;
É de suma importância que todo o material
seja coletado em uma única ejaculação
(qualquer perda do material deve ser
relatada);
O material deve ser analisado dentro de
uma hora após a coleta;
Amostras que estejam aguardando análise
devem ser mantidas a 37°C;
Coleta

Urinar antes da coleta;

Lavar as mãos;
Lavar o pênis;
Secar as mãos e pênis;
Ejacular em recipiente estéril.
https://www.youtube.com/watch?v=bEIxLLJ11Jc
Interferentes
Perda de material durante a
ejaculação;

Amostras coletadas fora do

período de abstinência;

Doenças febris recentes.

Análise
Consiste em exame macro e microscópico.

Exame macroscópico:

Envolve a observação de liquefação, aspecto, viscosidade, volume e pH;

Exame microscópico:

Envolve a observação da motilidade, morfologia dos espermatozoides e

células germinativas imaturas, vitalidade dos espermatozoides,
concentração de espermatozoides, contagem de espermatozoides,
leucócitos e eritrócitos.
Exame macroscópico
Volume: mede-se em mililitros (ml) a quantidade de sêmen expelida durante a ejaculação.
Liquefação: ocorre quando a amostra é deixada em repouso por 20 minutos em
temperatura ambiente. O sêmen torna-se menos compacto já pode ser realizado
corretamente o exame microscópico da amostra.
Viscosidade: Analisa-se a presença de filamentos.

Cor: o sêmen em condições

normais tem uma cor branca
acinzentada ou um pouco
amarela.
pH: os valores normais de pH
situam-se entre 7,2 e 8,0
Exame microscópico
Líquor
O líquido cefalorraquidiano (LCR) é um líquido
incolor, que circula o cérebro e a medula espinhal
através do espaço subaracnoideo, ventrículos
cerebrais e o canal central da medula.

As duas principais funções do LCR são relacionadas à

homeostase: proteção e circulação. Ele constitui um
eficiente amortecedor de choques para proteger o
encéfalo e a medula espinhal de impactos. Em sua
função circulatória, o líquido distribui substâncias
nutritivas filtradas do sangue e remove as impurezas
e substâncias tóxicas produzidas pela célula do
encéfalo e da medula espinal.
Coleta De Uma Amostra
Uma vez que a coleta do LCR é um procedimento
invasivo, só pode ser realizada por um profissional
especializado (médico) e só pode ser realizado pós
assinatura de termo de consentimento.

A coleta da amostra de LCR pode ser realizada por

três vias clássicas: lombar que é a mais utilizada na
rotina. Faz-se a punção lombar entre L3 e L4, L4 e L5
ou L5 e S1 (espaços entre as vértebras lombares).
Seguida pela suboccipital feita na região cisterna
magna entre o occipital e a via ventricular feita
diretamente em um dos ventrículos laterais através
da trepanação da calota craniana.
❖ Indicações para a punção podem ser divididas em quatro categorias das principais doenças:
Infecção das meninges, hemorragia subaracnoide, malignidade primária ou metastática, e doenças
desmielinizantes.

❖ As boas práticas na coleta do LCR recomendam a utilização de três frascos estéreis sem
anticoagulantes onde, um será utilizado para análises bioquímicas e sorológicas, outro para exames
microbiológicos e o terceiro para contagem celular.

❖ Dessa foram o primeiro tubo é destinado ao setor de análise bioquímica e sorológica, o segundo
para o setor de microbiologia e o terceiro para o setor de citologia. Se a coleta for efetuada apenas
em um frasco, deve-se realizar primeiro os exames bacteriológicos, seguido do
hematológico/citológico e por último o sorológico.
https://www.google.com/search?q=COLETA+D
E+L%C3%8DQUOR&rlz=1C1FCXM_pt-
PTBR991BR991&hl=pt-
BR&biw=1366&bih=657&tbm=vid&sxsrf=AJOq
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Armazenamento e Estabilidade da Amostra Critérios Para Rejeição da Amostra

O líquor deve ser armazenado em três tubos, onde: Deve-se pedir uma nova amostra quando:
- Tubo 1: destinado para testes químicos e - A amostra for insuficiente;
sorológicos, esses tubos podem ser congelados - O líquido colhido estiver com mais de 12 horas;
para manter a estabilidade da amostra; - A amostra estiver contaminada;
- Tubo 2: destinado para laboratório de - O recipiente da amostra estiver danificado.
microbiologia, os tubos devem permanecer na
temperatura ambiente;
- Tubo 3: destinado à hematologia, os tubos podem
ser refrigerados.
Um quarto tubo pode ser retirado para fazer testes
adicionais. Excesso de fluido não deve ser
descartado e deve ser congelado até que não haja
nenhum uso para ele.
Fatores Pré-analíticos que Influenciam a Análise

Principais erros laboratoriais relacionados à análise do LCR ocorrem na fase pré-analítica

❖Identificação errada de pacientes

❖Transporte inadequado da amostra ou o uso de tubo incorreto para a coleta

Existem fatores pré-analíticos que influenciam a composição da amostra e análise, e

podem ser divididas em 3 fatores. E a padronização é de extrema importância para se
obter uma qualidade analítica consistente em que os resultados sejam precisos e
reprodutíveis.
“
Revisão de Aprendizagem

”
ATÉ A
PRÓXIMA!