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Brazilian Applied Science Review 709

ISSN: 2595-3621

Avaliação da germinação de sementes de açaízeiro (Euterpe oleracea


M.) Submetidas à inoculação de 19 linhagens de bactérias isoladas no
semiárido

Evaluation of seeds germination of açaízeiro (Euterpe oleracea M.)


Submitted to the inoculation of 19 lines of semi-arid isolated bacteria.

DOI:10.34115/basrv5n1-008

Recebimento dos originais: 17/01/2021


Aceitação para publicação: 17/02/2021

Ugo L. R. Machado
Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Ciências Agronômicas e Florestais

Sara Monaliza C. Carvalho


Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Ciências Agronômicas e Florestais

Salvador B. Torres
Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Ciências Agronômicas e Florestais

Fernanda Matias
Universidade Federal Rural do Semi-Árido
Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, Departamento de Biociências

RESUMO
O açaizeiro é uma fruteira nativa da Amazônia que vem conquistando o mercado nacional
e internacional mediante comercialização da bebida in natura (suco), bem como da
congelada. Essa bebida é obtida pelo processamento da parte comestível dos seus frutos,
que são denominados açaí. A aplicação de reguladores de crescimento via semente tem
sido proposta por várias empresas. Esses reguladores são definidos como substâncias
naturais ou sintéticas que podem ser aplicadas diretamente nas plantas, em sementes e no
solo, com a finalidade de incrementar a produção e melhorar a germinação das sementes.
As classes de reguladores vegetais reconhecidas são as auxinas, giberelinas, citocininas,
retardadores e inibidores, e o etileno. As auxinas também são produzidas durante o
processo de germinação e estão envolvidas na permeabilidade das membranas e possuem
relação direta com o crescimento de plântulas. Objetivou-se avaliar a germinação das
sementes de açaízeiro inoculadas com 19 linhagens de bactérias coletadas na região do
Semiárido potiguar capazes de fixar nitrogênio, solubilização de fosfato e produzir
auxinas. O experimento foi conduzido no Laboratório de Nanobiotecnolgia e Biorreatores
– LABIN e no Laboratório de Análises de Sementes ambos pertencentes a Universidade
Federal Rural do Semi-Árido. Foram inoculadas três sementes de açaí para cada grupo de
bactéria, sendo que em uma amostra foi administrada sem a inoculação a fim de verificar
a evolução. O teste de germinação foi conduzido em papel toalha (Germitest®) que foi
acondicionado em sacos plásticos transparente e colocados em câmaras de germinação
do tipo Biochemical Oxigen Demand (B.O.D.), com fotoperíodo artificial adequado. Dez
10 dias após a semeadura, verificou-se que grande parte das sementes inoculadas com
bactéria germinaram. As que foram inoculadas com as de número BAC 5, BAC 13 e BAC
15 tiveram crescimento acelerado (mais vigorosas) apresentando nodulação nas raízes e

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liberando exudado de cor roseado. Equanto que as inoculadas com os números 0, BAC 1,
BAC 2, BAC 3, BAC 4, BAC 6, BAC 9, BAC 12 e BAC 14 resultaram em germinação
lenta e menos vigorosas. Já as de números BAC 7, BAC 8, BAC 10, BAC 11, BAC 17,
BAC 18, BAC 20 e BAC 27 obtiveram crescimento moderado. Com relação ao período
previsto para a germinação, as sementes que foram inoculadas com as bactérias
germinaram em tempo muito inferior ao previsto em média (90 dias).

ABSTRACT
The açaizeiro is a native fruit from the Amazon that has been conquering the national and
international market through the commercialization of the beverage in natura (juice), as
well as the frozen one. This drink is obtained by processing the edible part of its fruits,
which are called açaí. The application of growth regulators via seed has been proposed
by several companies. These regulators are defined as natural or synthetic substances that
can be applied directly to plants, seeds, and soil to increase yield and improve seed
germination. The recognized classes of plant regulators are auxins, gibberellins,
cytokinins, retarders and inhibitors, and ethylene. Auxins are also produced during the
germination process and are involved in membrane permeability and have a direct
relationship with seedling growth. The objective was to evaluate the germination of acai
seeds inoculated with 19 strains of bacteria collected in the semi-arid region of Potiguar
capable of fixing nitrogen, solubilizing phosphate and producing auxins. The experiment
was conducted in the Laboratory of Nanobiotechnology and Bioreactors - LABIN and the
Laboratory of Seed Analysis, both belonging to the Federal Rural University of the Semi-
Arid. Three açaí seeds were inoculated for each group of bacteria, and in one sample was
administered without inoculation in order to verify the evolution. The germination test
was conducted on paper towels (Germitest®) that were placed in transparent plastic bags
and placed in Biochemical Oxygen Demand (B.O.D.) germination chambers with an
adequate artificial photoperiod. Ten 10 days after sowing, it was found that most of the
seeds inoculated with bacteria germinated. Those inoculated with BAC 5, BAC 13 and
BAC 15 had accelerated growth (more vigorous) showing nodulation in the roots and
releasing rose-colored exudate. While those inoculated with the numbers 0, BAC 1, BAC
2, BAC 3, BAC 4, BAC 6, BAC 9, BAC 12 and BAC 14 resulted in slow germination
and less vigorous. On the other hand, those with numbers BAC 7, BAC 8, BAC 10, BAC
11, BAC 17, BAC 18, BAC 20 and BAC 27 obtained moderate growth. Regarding the
expected period for germination, the seeds that were inoculated with the bacteria
germinated in much less time than expected on average (90 days).

1 INTRODUÇÃO
O açaizeiro (Euterpe oleracea M.) é uma fruteira nativa da Amazônia que vem
conquistando o mercado nacional e internacional nas últimas décadas mediante
comercialização da bebida in natura (suco), bem como congelada. Essa bebida é obtida
pelo processamento da parte comestível dos seus frutos, denominados de açaí, e que são
bastante semelhantes aos da palmeira-jussara (Euterpe edulis + descritor), nativa da Mata
Atlântica.

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Uma das principais dificuldades no cultivo de mudas de açaizeiro em escala


comercial é a dificuldade na germinação de sementes, pois é normalmente lenta e
desuniforme. Citações em diversas literaturas mostram porcentagens de germinação
inferiores a 60%, e com tempo de permanência das sementes no solo de até 270 dias
(GUEDES et al., 2014). Os trabalhos sobre germinação de sementes de espécies frutíferas
amazônicas ainda são raros. No entanto, Müller et al. (1983) verificaram as características
de germinação de sementes de diversas fruteiras tropicais, e constataram que algumas
destas apresentavam germinação extremamente lenta e com acentuada desuniformidade,
enquanto que, na maioria, o processo era rápido, porém mantendo a desuniformidade.
A aplicação de inoculantes em diferentes culturas tem se tornado cada vez mais
atraente, uma vez que poderá reduzir significativamente o emprego de fertilizantes e
pesticidas industriais (BERG, 2009, HUNGRIA et al., 2010). Nesse sentido, as bactérias
nodulantes da família Rhizobium são comuns nos trópicos semiáridos ao redor do mundo.
No Brasil, o semiárido possui 95 milhões de hectares, destes, apenas 3% são adequados
para irrigação, deixando uma imensa área de terras secas a ser explorada por práticas
sociais e econômicas. Sob estas condições, produção de grãos pode representar um
importante fator econômico alternativo (MARTINS et al., 2003).
O uso de inoculantes contendo bactérias que promovem o crescimento e
incrementam a produtividade de plantas, devido ao alto custo dos fertilizantes químicos
e de acordo com Davison (1988), as bactérias promotoras de crescimento de plantas
(BPCP) correspondem ao grupo de microrganismos benéficos às plantas devido à
capacidade de colonizar a superfície das raízes, rizosfera, filosfera e tecidos internos das
plantas. As BPCP podem estimular o crescimento das plantas por diversas maneiras,
sendo as mais relevantes a capacidade de fixação biológica de nitrogênio (HUERGO et
al., 2008), o aumento na atividade da redutase do nitrato quando crescem endofiticamente
nas plantas (CASSÁN et al., 2008) e, além disso, citocininas, auxinas, giberilinas, etileno,
solubilização do fosfato que atuam como agentes de controle biológico de patógenos
(CORREA et al., 2008). Em geral, acredita-se que as BPCP beneficiam o crescimento das
plantas pela combinação de todos esses mecanismos (DOBBELAERE et al., 2003).
A seca é uma das principais limitações à produção de alimentos em todo o mundo
e estima-se que tenha reduzido o consumo nacional de cereais. produção em 9-10%
(LESK et al., 2016). Espera-se que a seca cause sérios problemas de crescimento de
plantas para as culturas em mais de 50% as terras aráveis da Terra até 2050 (VINOCUR
e ALTMAN, 2005). Além disso, espera-se que a população mundial atinja 9 bilhões até

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2050, necessitando de aumentos contínuos nos produção para garantir a segurança


alimentar (FOLEY et al., 2011; GATEHOUSE et al., 2011). Portanto, há um interesse
renovado em encontrar soluções para problemas relacionados com a água, como a seca e
impactos na segurança alimentar (ALEXANRATOS e BRUINSMA, 2012). Portanto, há
a necessidade de encontrar soluções que aumentem a tolerância das plantas ao estresse
hídrico, permitindo o crescimento e que satisfaçam demandas de alimentos sob
disponibilidade limitada de recursos hídricos (EDITORIAL, 2010; MANCOSU et al.,
2015).
Com isso, objetivou-se avaliar a germinação de sementes de açaízeiro inoculadas
com 19 linhagens de bactérias coletadas na região do semiárido potiguar e que são
capazes de fixar nitrogênio, solubilização de fosfato e produzir auxinas e resistência a
seca.

2 MATERIAIS E MÉTODOS
O experimento foi conduzido nos Laboratórios de Nanobiotecnolgia e
Biorreatores – LABIN e de Análises de Sementes - LASA ambos situados na
Universidade Federal Rural do Semi-Árido no ano de 2018. O clima da região é do tipo
BSwh’ (quente e seco, com período chuvoso de janeiro a maio e seco de junho a
dezembro), segundo a classificação de Köppen. A temperatura média anual é de 27,4 °C,
com precipitação anual média de 673 mm e clima seco durante 7 a 8 meses (CARMO
FILHO et al., 1995).
Os frutos de açaizeiros foram colhidas de plantas nativas existentes na Floresta
Amazônica Maranhense, que em seguida foram submetidos à extração mecânica do
epicarpo e lavados para eliminação dos resíduos. Durante a seleção manual, descartou-se
aqueles perfurados e danificados por insetos. As sementes foram mantidas em ambiente
controlado (20 °C e média 55%% de umidade relativa do ambiente) com teor de água de
aproximadamente 40% até a instalação do experimento). As 19 linhagens bacterianas,
oriundas a partir de material vegetal, foram coletadas e isoladas no município de Mossoró,
RN, intituladas como: BAC 1, BAC2, BAC 3, BAC 4, BAC 5, BAC 6, BAC 7, BAC 8,
BAC9, BAC 10, BAC 11, BAC 12, BAC 13, BAC 14, BAC 15, BAC 17, BAC 18, BAC
20, BAC 27. Produziu-se 100 mL de meio de cultura nutriente líquido estocados em
erlenmeyers individuais com capacidade volumétrica de 250 mL para cada grupo de
bactérias nas quais foram incorporadas, ficando em repouso por 24 h em temperatura
ambiente. A desinfecção das sementes de açaí se deu por meio da lavagem abundante em

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água mineral, lavagem com solução de hipoclorito de sódio a 0,5% por 5 minutos e após
novamente lavagem com água mineral abundante. Após o repouso das linhagens
incorporadas ao meio de cultura, inoculou-se três sementes de açaí para cada grupo de
bactéria sendo que uma amostra foi administrada sem a inoculação (testemunha). O teste
de germinação foi instalado em cabine de fluxo laminar, utilizando como substrato papel
toalha (Germitest®) que foram colocados em sacos plásticos transparente devidademente
identificados e levados para câmaras de germinação do tipo Biochemical Oxigen Demand
(B.O.D.), com fotoperíodo artificial de 16 horas de luz.
Os dados obtidos no experimento em laboratório foram analisados
estatisticamente, e os fatores qualitativos dispostos em delineamento em blocos
casualizados com 19 tratamentos e três repetições. As médias foram comparadas pelo
teste de Tukey, a 5% de probabilidade com auxílio do software Sisvar e suplemento de
análise estatística do Excel.

3 RESULTADOS E DISCUSSÃO
O teor de água das sementes de açaí com aproximadamente 40% foi adequado
para a manutenção da viabilidade até o início do experimento por aproximadamente 20
dias. Segundo Nascimento et al. 2009, independentemente da temperatura de
armazenamento, as sementes de E. oleracea com 21,0% de água não ocorre emergência
de plântula e que sementes com 37,4% de água podem ser conservadas em ambiente com
temperatura constante de 20 ºC por até 270 dias.
Após 10 dias da semeadura, verificou-se que grande parte das sementes inoculadas
com bactéria germinaram. Uma das principais dificuldades no cultivo de mudas de
açaizeiro em escala comercial é a dificuldade na germinação de suas sementes, pois
normalmente são lenta e desuniforme. Citações em diversas literaturas mostram
porcentagens de germinação inferiores a 60%, e com tempo de permanência das sementes
no solo de até 270 dias (GUEDES et al., 2014).

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FIGURA 1. Início da germinação de sementes de açaízeiro a partir do sexto dia.

As sementes que foram inoculadas com as bactérias de números BAC 5, BAC 13


e BAC 15 tiveram germinação e crescimento radicular acelerado, apresentando nodulação
nas raízes e liberando exsudato de cor roseado (Figura 2). O sucesso na semeadura
visando a produção de mudas uniformes e vigorosas depende, entre outros fatores, do
conhecimento do comportamento das sementes frente às condições adversas do meio
(SANTOS et al., 2008).

FIGURA 2. Raízes de açaizeiro com nódulos e liberando exsudato de cor roseado.

A relação dos nódulos com a planta remete em fornecer subsídios em relação a


capacidade de sobrevivência, regulação e competitividade com os outros microrganismos
no solo (MARTINS et al., 2003). Como prospecção futura, será feita a microscopia
eletrônica de transmissão dos nódulos para averiguar os diminutos detalhes presentes
nestas estruturas.
O tratamento testemunha, BAC 1, BAC 2, BAC 3, BAC 4, BAC 6, BAC 9, BAC
12 e BAC 14 resultaram em germinação lenta e pouco vigorosa. As demais BAC 7, BAC
8, BAC 10, BAC 11, BAC 17, BAC 18, BAC 20 e BAC 27 tiveram crescimento moderado
e com presença de hifas. A germinação de sementes de palmeiras, de modo geral é
considerada lenta, desuniforme e frequentemente baixa. A propagação é feita, quase que

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exclusivamente, por meio de sementes, com grande variação no processo germinativo,


influenciado por diversos fatores (MEEROW, 1991; BROSCHAT, 1994).

FIGURA 3. Sementes de açaizeiro com germinação moderada.

De acordo com a tabela 1, verifica-se o coeficiente com variação de 13,16% que


tem por vantagem caracterizar a dispersão dos dados em termos relativos a seu valor
médio. Esse fato gera também maior precisão do experimento no sentido de que as
sementes são homogêneas quanto ao caráter ou processo estudado. A média de
germinação de 15,16 dias se deve ao fato da testemunha, cuja média foi superior aos
outros tratamentos.

TABELA 1. Análise de variância – ANAVA obtida pelo Sisvar


Fonte da variação SQ gl MQ Fc Pr > Fc
Bloco 0,633 2 0,3166 0,079 0,092ns
Bactérias 8724,3 19 459,17 115,2 0,0000**
Erro 151,36 38 3,98
Total 8876,3 59

CV (%): 13,16
Média Geral: 15,16

Os tratamentos com as BAC-15, BAC-13 e BAC-5 foram mais eficientes no


tempo de germinação e percentual de sementes germinadas sendo que para as duas
primeiras a germinação aconteceu aos seis dias após a inoculação, enquanto que para a
última ocorreu aos 9 dias (Tabela 2).

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TABELA 2. Tempo e percentual de germinação de sementes de açaizeiro.


Tratamentos Tempo (dia) Germinação (%)
BAC-15 6.000000 a 100,00
BAC-13 6.666667 a 100,00
BAC-5 9.000000 a b 100,00
BAC-8 10.33333 a b c 100,00
BAC-9 11.333333 a b c d 66,66
BAC-11 11.333333 a b c d 66,66
BAC-10 11.333333 a b c d 100,00
BAC-27 11.666667 a b c d 66,66
BAC-14 13.333333 b c d 66,66
BAC-17 13.333333 b c d 100,00
BAC-2 13.666667 b c d 100,00
BAC-18 14.000000 b c d 100,00
BAC-6 14.333333 b c d 100,00
BAC-12 14.333333 b c d 100,00
BAC-1 14.333333 b c d 66,66
BAC-20 14.666667 b c d 66,66
BAC-3 15.000000 b c d 100,00
BAC-4 15.333333 cd 100,00
BAC-7 17.000000 d 100,00
Testemunha 66.333333 e 66,66

Médias, seguidas das mesmas letras nas colunas, não diferem estatisticamente pelo teste de Tukey em 5%
de probabilidade.

O gráfico 1 mostra como cada semente do teste de germinação se comportou até


a finalização do experimento. Vale ressaltar que as sementes do tratamento testemunha
obtiveram germinação a partir dos 60 dias, resultando no aumento da média geral.

GRÁFICO 1 – Comportamento da germinação de sementes de açaizeiro em função do tempo (dias) para


as três repetições
80
70
60
50
40
30 1ª repetição
20 2ª repetição
10 3ª repetição
0
B-1
B-2
B-3
B-4
B-5
B-6
B-7
B-8
B-9

B-11
B-10

B-12
B-13
B-14
B-15
B-17
B-18
B-20
B-27
TESTEMUNHA

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4 CONCLUSÃO
De forma geral, as bactérias proporcionaram efeito benéfico quanto a redução do
tempo para a germinação de sementes de açaizeiro.
Portanto a presença de bactérias classificadas para a solubilização de fosfato,
fixação de nitrogênio, tolerar sais e resistência a seca tornam-se grandes potenciais no
semiárido para pesquisas que venham a atuar como bioinoculantes.

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