Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Prof. Henrique Santana Costa, M.Sc. Prof. Antonio Mrcio Teodoro Cordeiro Silva, M.Sc.
Mutao
Mutaes modificao sbita e hereditria no conjunto gnico de um organismo no explicvel pela recombinao da variabilidade gentica pr-existente. Mutante organismo possuidor de uma forma alterada como resultado da presena de uma mutao.
# Tipos
aneuploidias mudanas no nmero cromossmico. aberraes cromossmicas cromossomos. mudanas grosseiras na estrutura dos
1. Atualmente, o termo mutao tem sido utilizado quando da presena de alteraes detectadas em nvel de genes individuais.
Mutao
Mutao
# Geralmente, organismos portadores de uma mutao num determinado gene apresentam problemas em sua sobrevivncia (sendo, assim, eliminados por seleo natural). # Contudo, nem toda mutao resulta numa conseqncias deletria para seu portador. # mutao fonte bsica de toda variabilidade gentica (matria-prima para a evoluo) Sem a mutao, todos genes existiriam apenas em uma forma.
mutaes espontneas resultam de funes celulares normais ou interaes aleatrias com o ambiente.
podem ser aumentadas pelo tratamento com determinados compostos (agentes mutagnicos mutaes induzidas)
Mutao
Sntese de Protena
Mutaes
Classificao Geral
Mutao Cromossmica: Nmero ou Estrutura Mutaes Gnicas: Genes individuais
Processo Evolutivo
Mutao como fonte de variabilidade
1. Recombinao: Rearranjos Novas combinaes 2. Seleo Natural Preserva as combinaes mais adaptadas 3. Ausncia de Mutao Genes com apenas uma forma
Mutaes Cromossmicas
Euploidia
1. 2. 3. 4. Conjunto de cromossomo de uma espcie
Monoploidia: n cromossomos Diploidia: 2n cromossomos Triploidia: 3n cromossomos Poliploidia: mais de dois conjuntos
Aneuploidia
Mutao
# Mutao de ponto modificao num nico par de base (substituio, adio ou deleo) mau funcionamento do sistema replicativo mau funcionamento do sistema de reparo interferncia qumica direta sobre uma das bases do DNA
Classes
Mutantes auxotrficos incapazes de sintetizar um metablito essencial (aminocido, purina, pirimidina, etc.)
crescem e se reproduzem quando o metablito fornecido pelo meio (condio permissiva) no crescem quando o metablito est ausente (condio restritiva)
Mutao
mutantes sensveis ao supressor viveis quando um segundo fator gentico (supressor) est presente - mas inviveis na ausncia deste.
# Mutaes transmitidas descendncia clulas germinativas # Mutaes perpetuadas em clulas que descenderam da clula original na qual a mutao ocorreu (podendo no afetar o organismo inteiro) clulas somticas
Rearranjos Cromossmicos
1. Inverses: Paracntricas ou Pericntricas
Rearranjos Cromossmicos
2. Deleo: Terminal ou Intersticial
Rearranjos Cromossmicos
3. Translocao: Recproca ou Robertisoniana
Rearranjos Cromossmicos
4. Duplicao x Replicao
alteram o pareamento de bases normal. # Envolvem a substituio de um par de bases por outro tipo mais comum de mutao
# Transio substituio de uma purina por outra purina, ou de uma pirimidina por outra pirimidina. # Transverso substituio de uma purina por uma pirimidina ou vice-versa.
mutaes que modificam a estrutura da leitura envolve a adio ou deleo de um ou alguns pares de bases.
alteram a estrutura de leitura de todas as trincas de pares de bases no gene depois da mutao.
Mutao Molecular
Modificaes Tautomricas
Transio
Transverso
AT CG
TA GC
AT
CG
TA
GC
Taxas de Mutaes
procariotos 10-5 a 10-6 evento/locus/gerao (mutao espontnea) eucariotos estimativa semelhante encontrada nos procariotos.
# mutaes silenciosas sem efeito aparente # Hotspots stios de pares de bases mais susceptveis mutao.
Envolvem a troca de bases do DNA mas no causam a troca do aminocido presente na protena correspondente. Levam troca do aminocido, mas a substituio no afeta a atividade da protena (mutaes neutras).
Radiao
poro do espectro eletromagntico que contm comprimentos de onda menores e de maior energia que a luz visvel (0,1m). Tipos
ionizante raios X, raios gama e raios csmicos (teis no diagnstico mdico pelo fato de poderem penetrar nos tecidos vivos). no-ionizante luz ultravioleta.
No processo de penetrao, a radiao ionizante colide com tomos da matria causando a liberao de eltrons (formando radicais livres positivamente carregados ons). Quimicamente mais reativos quando comparados tomos em seu estado estvel normal.
# a reatividade aumentada dos tomos presentes nas molculas de DNA a base dos efeitos mutagnicos da luz ultravioleta e da radiao ionizante.
# mutaes de ponto diretamente proporcionais dose de irradiao. # Teoria da cintica de coliso nica toda ionizao tem uma probabilidade de induzir uma mutao.
Acidentes Radioativos
Aberraes Estruturais
Caritipo - Metfase
mecanismos de reparo revertem os efeitos de processos mutagnicos artificiais ou naturais sob o DNA.
muitos dos danos sofridos pelo DNA podem ser reparados porque a informao gentica preservada em ambas as fitas da dupla-hlice.
a informao perdida em uma fita pode ser recuperada atravs da fita complementar
Mutantes induzidos de cevada, trigo, aveia, soja, tomate podem melhorar as linhagens cultivadas.
resistncia ferrugem, maior produo, maior quantidade de protena, sementes sem casca, ente outro.
elucidam as vias pelas quais os processos biolgicos ocorrem (isolamento e estudo das mutaes nos genes que codificam enzimas envolvidas nas mais diversas atividades metablicas)
Reparao do DNA
Tipos de Reparao do DNA
Reparao do DNA
Reparao por Fotorreatividade Enzimtica
# dmeros de pirimidina impedem a replicao e a expresso gnica Fotoliase catalisa uma 2 reao fotoqumica, na presena de luz visvel, desfazendo a mutao e refazendo as bases pirimdicas individuais.
ETAPAS 1 reconhecimento da enzima ao dmero na ausncia de luz. 2 aps a absoro de luz, energia fornecida para a converso do dmero em monmeros de pirimidina. 3 dissociao da enzima do DNA.
Reparao do DNA
Reparao por Fotorreatividade Enzimtica
Fotorreativao
1. Fotoliase reconhece e se liga ao dmero 2. Absoro de luz Converso em monmeros
Reparao do DNA
Reparao de Bases Alquiladas
Ao de enzimas especficas: O6-Metilguanina-metiltransferase
CH3-Cys-Enzima
No h meios de recuperar a enzima metilada (necessidade de novas enzimas para cada grupamento metil removido).
Reparao do DNA
Reparo por exciso
# A remoo de uma base defeituosa (ou no habitual) pode ocorrer a partir da:
clivagem da ligao base-acar (exciso de base) inciso endonucleoltica nos dois lados da leso liberao de nucleotdeos preenchimento da regio pela ao da DNA-polimerase I e posterior ligao
Reparao do DNA
Reparao por exciso de base
# A citosina do DNA desaminada espontaneamente sendo, portanto, percebida pela uracil. evento mutagnico potencial
Etapas de reparo
1. Hidrlise da ligao glicosdica entre uracil e as molculas de desoxirribose pela enzima uracil-DNA-glicosilase 2. Liberao da base nitrogenada errnea (formao do stio AP)
Reparao do DNA
Reparao por exciso de base
Etapas de reparo 1. Hidrlise da ligao glicosdica entre uracil e as molculas de desoxirribose pela enzima uracil-DNA-glicosilase 2. Liberao da base nitrogenada errnea (formao do stio AP) 3. Exciso da cadeia em regies adjacentes base perdida pela enzima AP endonuclease 4. Insero de citosina no local mutado pela enzima DNA-polimerase I 5. Ligao da fita corrigida pela enzima DNA-ligase
Reparao do DNA
Reparao do DNA
Reparao por Exciso de Base
Reparao do DNA
Reparo por exciso de nucleotdeos
Um dos mais importantes e gerais mecanismos de reparo (REN)
ETAPAS
1. Reconhecimento da leso 2. Inciso da fita lesada em ambos os lados da leso e a alguma distncia desta 3. Exciso do segmento (oligonucleotdeo) contendo a leso 4. Sntese de um novo segmento de DNA utilizando a fita no-danificada como molde 5. Ligao
Reparao do DNA
Reparao por Exciso de Nucleotdeo (REN)
1. Reconhecimento da leso 2. Inciso da fita lesada em ambos os lados da leso 3. Exciso do seguimento contendo a leso 4. Sntese do novo seguimento de DNA e Ligao
Reparao do DNA
REN: Sistema Uvr (E. coli)
ATP
Helicase 5 3
3 (4 a 5nt) 5 (8nt)
# Remoo de bases mal pareadas Qual das fitas contm o erro? Qual das bases a errada? Um dos mais importantes e gerais mecanismos de reparo (REN) enzima de correo de erro ETAPAS 1. Reconhecimento da leso 2. Inciso da fita lesada em ambos os lados da leso e a alguma distncia desta 3. Exciso do segmento (oligonucleotdeo) contendo a leso 4. Sntese de um novo segmento de DNA utilizando a fita no-danificada como molde 5. Ligao # sinal que direciona o sistema de exciso do erro exclusivamente para a fita recm-sintetizada seqncias GATC prximas ao erro
Reparao do DNA
Reparao do DNA
1. Enzima de correo de erro liga-se seqncia GATC no modificada e ao par de bases mal pareadas da mesma fita de DNA.
2. Enzima de correo de erro remove o segmento de DNA que inclui o erro da fita que contm a seqncia GATC no metilada.
# Modificaes na adenina da seqncia GATC por metilases faro com que a enzima de correo no mais atue (no ocorrendo a exciso).
qualquer uma das bases inserida no local lesado a fim de garantir a continuidade do processo replicativo # possvel indutor mutagnico (3/4 75%) Ainda assim, mais vantajoso para a clula a incorporao de uma base errada do que no replicar mais.
Reparao do DNA
Reparao de Bases Malpareadas
N6-Metiladenina (GATC)
Padro de metilao
Replicao
Reparao do DNA
Reparao de Bases Malpareadas: Sistema Mut
1. MutS pb malpareado 2. Reconhece stio do erro 3. MutL se liga a MutS 4. Deslizamento at GATC (ATP) 5. MutH Reconhece GATC 6. Cliva: GATC at o malpareamento 7. Remoo da fita clivada (SSB)
Reparao do DNA
Sistema de Reparao por Resgate
1. Dano impede a replicao 2. Cpias com lacuna no stio lesado 3. Resgata-se a seqncia da fita normal 4. A lacuna da fita lesada preenchida 5. A lacuna da fita normal repolimerizada
Concluso
Mutao: Alterao do cdigo gentico Efeito benfico x Efeito malfico Mutaes cromossmicas numricas/estruturais Mutaes gnicas (Nvel molecular) Mecanismos de reparao de erros Sistemas enzimticos complexos que removem vrios tipos de erros Manuteno da integridade do DNA