Biofsica das membranas excitveis

01-Introduo Galvani foi o primeiro a dedicar-se ao estudo da eletricidade animal. Ele observou que por meio de choque eltrico, era possvel obter a contrao de msculos. Aps estudos, descobriu-se que os msculos se contraiam de acordo com os estmulos eltricos ou originados ou conduzidos pelos nervos. Potencial de injria a ddp entre um msculo ntegro e um msculo lesado. A leso destri o sarcolema e expes o citoplasma cujo potencial eltrico menor que o meio extracelular. Corrente de injria o fluxo de corrente eltrica entre a zona lesada e a intacta. Potencial transmembrana a ddp que toda membrana superficial das clulas submetida. E quando ela est em repouso, possui um valor constante o potencial de repouso. 02- A membrana das clulas A membrana celular constituda por uma matriz lipdica onde existem protenas globulares parcialmente mergulhadas na matriz lipdica e outras protenas intrnsecas que atravessam toda a espessura da membrana, estabelecendo uma ponte entre o meio intra e extracelular, e elas se movem lateralmente ou transversalmente. A zona mais central da membrana celular dotada de fluidez, h componentes que podem reduzir a fluidez como o colesterol, Ca e Mg a baixas temperaturas ou aumentar como fosfolipdios. 03- Comportamento eltrico passivo da membrana Circuito RC: A membrana superficial se assemelha a uma associao do ripo resistor-capacitor em paralelo. Quando a tenso desligada pela abertura da chave. P capacitor perde progressivamente a carga acumulada. Correntes de membrana Rm: Pode ser a expresso dos canais hidroflicos por onde passam os ons, enquanto o capacitor Cm representa o comportamento da bicamada lipdica envolvida pelos meios condutores intra e extracelular. Por isso a membrana possui duas passagens para corrente eltrica: Uma que obedece lei de ohm que est associada aos canais inicos Outra com capacidade capacitiva associada ao dieltrico lipdico. 04- O potencial de repouso (a) O campo eltrico no interior das membranas: As membranas possuem uma ddp entre as superfcies externa e interna. A dificuldade para obter campos eltricos muito intensos est no dieltrico, pois a substncia que o constitui possui uma rigidez dieltrica muito alta para permitir o desenvolvimento do campo e, consequentemente, o aparecimento eltrico de grande magnitude. b) Parmetros eltricos da membrana: Capacitncia das membranas: a matriz lipdica responsvel pelas propriedades dieltricas, isto , por separar dois meios condutores, as membranas tm propriedades capacitivas. Sua capacitncia de 1F/cm2. Resistncia das membranas: as membranas possuem uma resistncia muito elevada, contudo, a incluso de certas protenas faz baixar sua resistncia. c) A assimetria inica existente nos meios O potencial de repouso gerado pelo fato da membrana ter permeabilidade diferente a diversos ons, bem como pela assimetria na distribuio inica A suspeita de Dean: a membrana, mesmo no repouso, bombeia ons no seu gradiente eletroqumico. d) A bomba de sdio e potssio

Consiste no sistema de transporte ativo para bombear ons. O transporte de Na + para fora da clula depende da presena de K+ no exterior e sua eficincia depende da temperatura e o efluxo de Na+ depende da concentrao do ATP intracelular. Localizao: A bomba est na membrana celular e nos tbulos T. A cada ATP hidrolisado, 3 Na so removidos da clula e 2 K so levados para dentro da clula Assim a cada ciclo, uma carga + transferida para o meio extracelular e a corrente gerada pela bomba forma o potencial transmembrana, este hiperpolarizado quando h bombeamento em alta velocidade.] Afinidades: O Na+ intracelular e o K+ extracelular ativam o funcionamento da bomba. - A afinidade para o Na+ no lado citoplasmtico cerca de 3 vezes maior que a afinidade do K pelo menos stio de ligao. - Pelo lado extracelular, a afinidade da protena pelo K + 100 vezes maior do que para o Na+ Cotransporte e contratransporte: A bomba transforma energia qumica do ATP numa distribuio assimtrica de ons. O sdio se torna mais concentrado no exterior e o citoplasma possui maior concentrao de potssio. Esses gradientes de concentrao so usados como fonte de energia para que haja a repolarizao/despolarizao celular Cotransporte: a movimentao de um ction arrasta consigo um nion Contratransporte: ons de mesma polaridade so trocados entre lados da membrana. Estrutura da bomba de Na/K: A bomba possui duas subunidades a alfa, com funo cataltica, e a beta com funo de estabilizar a enzima na matriz lipdica. A ATPase permite protena mover-se lateralmente. Isoformas da bomba de Na/K: Ao se observar a resposta da bomba oubana, identificou-se diferentes formas que so conhecidas 1,2, 3, que possui localizaes em tecidos diferentes. Regulao da bomba de Na/K: Ela regulada pelo K+ extra e pelo Na+ intra, e opera com 10-15% da sua capacidade mxima.Quando o msculo aumenta seu trabalho, a atividade de bombeamento pode ser aumentada (hormnios como epinefrina, insulina proporcionam isso). e)A difuso de ons e a formao do potencial de repouso A membrana seletivamente permevel para alguns ons. H a tendncia 1 + 2 de haver migrao do lado mais concentrado para o menos concentrado gerando D um fluxo . [S1] [S2] Fluxo difusional o fluxo gerado devido tendncia do on migrar do lado mais concentrado para o menos. Fluxo eltrico o fluxo criado devido o gradiente de potencial eltrico E correspondente a positividade do lado 2 e a negatividade do lado 1 Potencial de Equilbrio de um on: A soma das energias potenciais eltrica e qumica resulta na energia potencial eletroqumica. No potencial de equilbrio, o fluxo do on em ambos os lados se torna constante. Nessas condies temos o potencial de equilbrio de um on que a ddp entre as faces da membrana permevel ao on. A equao de Nernst determina o potencial de equilbrio:
T Z R-constante dos gases perfeitos temperatura em Kelvin valncia do on Ce concentrao do lado 1 exterior Ci concentrao do lado 2 interior

Por essa equao, determina-se que os potenciais de equilbrio do Na e Ca so + e do K e Cl so f) A contribuio do potssio para formar o potencial de repouso das clulas musculares: Hodgin & Horowicz suspeitaram que ou o K ou o Cl seriam responsveis pelo potencial de membrana. Ento, resolveram manter constante a concentrao extracelular de potssio e variaram a do cloreto, obtiveram que o potencial de membrana variou de modo no sustentado. J fazendo o contrrio, com o potssio variando, o potencial de membrana mantinha-se sustentvel. Assim, concluram que o potssio controla o potencial da membrana e que o cloreto ajusta suas concentraes de acordo com o nvel do potencial existente. Durante o repouso, a membrana mais permevel ao K do que ao Na. Por isso, o potencial de repouso da clula est muito prximo do potencial de equilbrio do potssio. g) Fatores que alteram o potencial de repouso A diminuio da atividade da bomba de NA/K A diminuio na produo de ATP como na anoxia Ao de drogas que alteram a permeabilidade da membrana a ons que forma o potencial de repouso como a acetilcolina, que aumentando a permeabilidade ao K hiperpolariza a clula. h) As principais correntes inicas que atravessam a membrana celular Durante o repouso, a resistncia da membrana permanece constante e o potencial invarivel (nessa situao o meio intracelular negativo em relao ao extracelular). O potencial de repouso formado principalmente pela movimentao dos ons potssio e a corrente de sada do potssio contrabalanceada pelo sdio. 05-O potencial de ao do axnio a)A descoberta do potencial de ao Nos msculos e nervos, o potencial de ao o sinal eltrico que se propaga para transmitir informao ou iniciar a contrao. b)A teoria de Bernstein e o overshoot Esse cientista imaginou que a membrana e o citoplasma do meio extracelular eram condutores de eletricidade e a membrana deveria possuir baixa condutividade No repouso, a membrana seria permevel unicamente ao potssio e que por isso, a ddp depende desse on. J quando a clula estimulada, a membrana ficaria permevel a todos os ons e a movimentao deles levaria o potencial da membrana para valores prximos de zero. O retorno ao potencial de repouso deveria ser realizado a custa de um aumento seletivo da permeabilidade da membrana para ons potssio. A teoria de Bernstein estava equivocada. Descobriu-se que durante a atividade eltrica, o potencial da membrana sofria inverso da polaridade. O interior, que antes era negativo, tornava-se positivo. c)A teoria do sdio e potssio Hodgkin & Katz,descobriram que caso o potencial de membrana dependesse exclusivamente do potssio o interior da clula seria negativo e se dependesse do sdio seria positivo.Ento, o overshoot estaria associado a uma aumento da permeabilidade ao sdio. A despolarizao era produzida pela entrada do sdio no meio interno e a repolarizao ocorria pela fuga de potssio para o meio extracelular. d) O estudo das correntes de membrana com a tcnica do voltage clamp Aps usar a tcnica do voltage clamp que colocava um eletrodo no interior de um axnio, descobriu-se que o potencial de ao era formado pela corrente de entrada do sdio e a corrente de sada do potssio. A fase da despolarizao do potencial de ao se deve a um aumento da condutncia da membrana ao sdio e a de repolarizao, uma maior fuga do potssio. A condutncia da membrana ao potssio permanece aumentada por mais tempo e a clula alm de se repolarizar se hiperpolariza. e)O modelo de Hodgkin & Huxley

O controle dos canais de sdio se d por partculas do tipo M (partculas de ativao) e do tipo H (partculas de inativao). J os canais de potssio no apresentam inativao, so controlados apenas por partculas N. As partculas so negativas e se movem, por fora eltrica e trmica, entre dois compartimentos prximos a face interna e externa da membrana. As partculas no repouso se concentram no compartimento externo (porque elas so negativas e o citoplasma negativo tambm). A despolarizao da membrana fora a migrao das partculas do compartimento externo pro interno e isso abre os canais inicos: 3 partculas M: abrem um canal de Na e 1 partcula H o inativa 4 partculas N: ativam um canal de K As partculas M se movem do meio intra pro extra com uma constante cintica m e voltam com m. Elas so dependentes da voltagem. Ao movimento das cargas eltricas no interior da membrana, deu-se o nome de Gating current f)A excitao da membrana do axnio O potencial de repouso -80mV e os pulsos so constantes, mas a intensidade varia para despolarizantes(+) e hiperpolarizantes(-) Resposta passiva: quando no h variao da resistncia da membrana. Resposta ativa: quando o estmulo capaz de elevar rapidamente o potencial da membrana alm de 20mV. Nesse momento h um grande influxo de sdio = potencial limiar ou limiar de excitao. Os estmulos supralimiares fazem surgir o potencial de ao Gradiente Mnimo excitador e acomodao da membrana: *Os estmulos hiperpolarizantes prolongados aproximam o limiar do potencial de ao do potencial de repouso. *Os estmulos despolarizantes tendem a afastar o potencial limiar do potencial de membrana. *Variaes lentas da voltagem podem fazer com que o potencial limiar se afaste do potencial de membrana e faz com que a clula no responda quando estimulada - isso a acomodao da membrana. *Para que a membrana tenha um potencial de ao, o estimulo deve fazer com que o potencial de membrana varie, o gradiente mnimo excitador. 06- Potencial de Ao do Corao a)A resposta eltrica do miocrdio Na maioria das clulas miocrdicas, tambm h o fenmeno da acomodao e a entrada rpida de sdio o mecanismo que gera potenciais de ao. O potencial de ao se subdivide em 4 fases FASE 0 - Fase inicial de rpida despolarizao. Representa a abertura dos canais de Na+ com grande influxo desses ons para o interior da clula. No grfico essa fase representada por uma linha quase que vertical, caracterstica das clulas chamadas de resposta rpida. FASE 1 - uma pequena e rpida repolarizao. Representa o fechamento dos canais de Na+ , um efluxo de K+ e uma ao pequena e rpida de canais de Cl-. FASE 2 - Conhecido como Plat, representa a fase de influxo de Ca++, que ser em ltima anlise responsvel pela contrao muscular. ocorre em contrapartida mantendo a estabilidade do potencial durante o plat um efluxo de K+. FASE 3 - Fase de repolarizao; representa principalmente uma corrente de sada de potssio que restabelece a diferena de potencial eltrico.

FASE 4 - Fase de potencial de repouso, onde as concentraes inicas so restabelecidas. Nas clulas com automatismo ocorre uma despolarizao lenta nessa fase que, uma vez atingindo o potencial limiar, desencadeia novo potencial de ao. As clulas automticas do n sinusal possuem um potencial de repouso menor e uma forma de potencial de ao diferente chamada de resposta lenta, conforme a figura abaixo. b) Os componentes e os tipos do potencial de ao cardaco: Os componentes podem ser: Rpidos que se assemelha ao potencial de ao do nervo, com a despolarizao dependendo da entrada de sdio pelos canais de cintica rpida Lentos que caracterstico das clulas miocrdicas com a taxa de despolarizao muito menor do que a do componente rpido e com velocidade de propagao pequena. As formas de potencial pode ser: Tipo A: com componente rpido bem desenvolvido e presente nos ventrculos Tipo B: com componente rpido pouco desenvolvido e com amplitude desses potenciais dada pela intensidade do componente lento, presente em torno do ndulo AS e AV Tipo C: sem componente rpido e presente nas clulas nodais c)Condutncia da membrana durante o potencial de ao: Durante o processo de excitao a membrana clula muda do seu estado passivo para o ativo. A membrana ativa possui alteraes na condutncia para diversos ons: Sdio: o pulso aumenta a condutncia do Na, depois os canais se inativam, na fase de plat os canais lentos se ativam e com a repolarizao volta ao repouso. Potssio: com a despolarizao, a condutncia dos canais de potssio reduz-se temporariamente at retornar com o tempo a seu potencial de repouso, nesse instante ocorre um fluxo de sada de potssio que faz com que saia ons positivos; negativando o citoplasma e repolarizando as clulas. Clcio: no repouso h pequena condutncia do on Clcio, mas durante o plat a condutncia aumenta e permite o influxo desse on. Nas clulas do marcapasso, o potencial de ao caracterizado pela variao contnua do potencial de membrana durante a distole eltrica (fase 4) chamado DDL (despolarizao diastlica lenta) que se deve a uma progressiva reduo da permeabilidade do K. Quanto maior o DDL maior ser a freqncia do marcapasso d)As correntes inicas que formam o potencial de ao do miocrdio A formao do potencial depende de diversas correntes e existem em virtude de gradientes especficos de concentrao inica e de variaes bem definidas da condutncia da membrana. *Durante a fase 4, existem correntes lentas de Na, Ca e K. *Na fase 0 gerada pelo sdio por canais rpidos *Durante o plat as correntes de Cl, Na e Ca *Na repolarizao, a corrente se deve aos subcanais de K *Nas fibras de Purkinje h alm das correntes rpidas de sdio (INA), das correntes lentas de Na e Ca (ISI) e das correntes repolarizantes pelo K. Corrente IK2 relacionada ao marcapasso dessas fibreas e uma corrente dinmica positiva contra o influxo de Cl. e) Correntes de marcapasso: O desenvolvimento do ritmo cardaco decorre da capacidade de auto-excitao das clulas nodais. f) Caractersticas eletrofisiolgicas e farmacolgicas A gerao de potenciais eltricos depende de correntes inicas que a atravessam. O fluxo inico se faz por canais apropriados: Canais de sdio: O canal rpido de sdio responde pela fase 0 e bloqueado pela lidocana. A intensidade dessas correntes depende do potencial de membrana e da concentrao extracelular de Ca, que tem funo de apressar a inativao dos canais rpidos de sdio. Canais de clcio: durante o plat dos potenciais de ao completos, h um aumento da condutncia da membrana ao Ca. Com isso esse on que tem o potencial muito positivo, mantm a despolarizao e promove a contrao muscular. O influxo de Ca responsvel por uma corrente lenta de entrada. H canais do tipo L e T. A repolarizao e os canais de potssio: a resposta eltrica caracterstica do corao o plat dos potenciais de ao. Alm das correntes de Na e Ca, o aumento da condutncia do K forma o potencial. Quando os canais de K so reativados, a clula se repolariza.

*No repouso, o canal tipo K1 cria uma corrente para fora da clula. Durante a fase 0, a condutncia desses canais diminui e ajuda a formar o plat. * O canal Kto PE o canal de ativao transitria e se abre na fase 0 e depois se inativa impossibilitando a repolarizao imediata. *O canal K apresenta uma progressivo aumento de condutncia ao potssio medida que se forma o potencial, produzindo uma corrente de sada no final do plat e so de dois tipos o Kr e o Ks. Esses canais so controlados por uma protena G Canais durante o Potencial de Ao: -CaT limiar -CaL aberto durante todo PA -Kir canal se fecha durante o PA -Kur canal ultra rpido -Kto1 joga corrente para fora e transitrio -Kto2 canal transiente -Keag repolariza -Kdr(tipo K) delay, abre com retardo e repolariza -Katp um canal que se abre para o ATP quando o potencial de ao diminui -Nos 2/3 inicias a clula insensvel a qualquer estmulo (Perodo Refratrio Absoluto), nos ltimos 1/3 o Perodo Refratrio Relativo. -VOCS so canais operados por voltagem e LOCS so canais operados por ligantes Canais controlados por ligantes: o Katp necessita da ligao do ATP e o KCa depende do clcio citoplasmtico. PCO e PCC: Alguns agentes podem aumentar a condutncia dos canais de KATP. So as substncias abridoras de canais de potssio. E so importantes durante a anoxia miocrdica, pois a grande disperso dos potenciais facilita aparecimento de arritmias Canais de Cloreto: *Ativados pelo AMPc que quando aumenta o AMP intra ativa os canais de cloreto, que contribui para a repolarizao *Ativados por substncias purinrgicas *Ativados pelo entumecimento celular g) Canalopatias: Canais de sdio: ocorre paralisia temporria de msculos esquelticos caso haja alterao em um dos 4 domnios. Paralisia peridica hipercalemia Cais de cloreto: No caso da fibrose cstica, as clulas epiteliais no so capazes de transportar eficientemente os ons cloreto, dificultando o transporte de gua para a luz dos tubos e espessando o muco. Canais de clcio: doenas como a paralisia peridica hipocalmica e hipertermia maligna Canais de potssio: sndrome do QT longo. h)O acoplamento celular no miocrdio: Leses musculares geram correntes eltricas, as correntes de injria. A musculatura lisa e miocrdio possuem mecanismos que isolam as reas injuriadas, isso porque o corao possui barreiras eltricas transversas, ou discos intercalares, possuindo tambm regies com membrana juncional para a passagem de correntes eltricas. Estruturas dos discos intercalares: *Nexis, que so segmentos curtos que no se distingue separao entre as membranas juncionais, possuem baixa resistncia e por isso se relacionam com o acoplamento eltrico. *Junes comunicantes: formados por 2 hemicanais chamados conexons e juntos formam um poro hidroflico(gap junction). Os conexons so formados por 6 protenas denominados conexinas (cada uma tem 4 stios especficos). *Desacoplamento eltrico: solues hipertnicas rompem os discos intercalares e causam bloqueios de conduo. i) A propagao do impulso eltrico no miocrdio

A onda eltrica propagada no miocrdio promove a contrao das fibras miocrdicas. O Potencial de ao da membrana: o acoplamento intercelular permite que elas funcionem de modo sincronizado. O potencial de ao do marca passo gerado simultaneamente em clulas centrais do ndulo, mas no se propagam entre as clulas centrais - chamado de potencial de ao da membrana, que excita clulas perifricas. Potencial de ao propagado: ele se propaga na periferia do ndulo sinusal e susceptvel a bloqueios de conduo pelo fato de possuir: *Pequeno acoplamento eltrico (isso restringe o fluxo de corrente despolarizante entre as clulas) *Grande massa de tecido atrial na borda do ndulo AS, que funciona como um grande sumidouro de corrente despolarizante, *Os potenciais de ao da regio central do ndulo sinusal possuem longo perodo refratrio. Circuito local de corrente: a propagao do potencial se d por esses circuitos atravs das junes gap Transmisso do impulso eltrico: a passagem pelo ndulo AV se d com um pequeno retardo, pois os potencias ali so lentos Microanatomia do miocrdio: os ventrculos devem ser ativados e desativados sincronicamente, isso desempenhado pelo impulso eltrico, alem disso para funcionar corretamente necessrio bom suprimento de oxignio e substratos para dar a energia que precisa.