Data: 10/02/2008 MEIO RPMI Ingredientes: REAGENTES - 1 pacote de meio RPMI (GIBCO) - 2,0 g de bicarbonato de sdio - qsp 1L de gua

bidestilada. APARELHAGEM - Bquer, 1L - Proveta, 1 L - Basto de vidro - Agitador magntico. - Filtro de vidro fechado e estril com membrana de 0,2 micrmetos. - PHmetro. - Fluxo laminar. - Garrafa de vidro de 1L, especiais para armazenar o meio (deve ser limpa e estril previamente). - 2 tubos Falcons de 15 mL - Shaker 37C -Geladeira 4C Instrues para o preparo: 1- Todo o contedo do pacote de RPMI deve ser dissolvido em 900 mL de gua bidestilada em um bquer. 2- Todo o p deve misturado com basto de vidro em gua no aquecida at a completa dissoluo. 3 - O interior do pacote deve ser rinsado para remover os resqucios do p. 4 - Adicionar 2g de bicarbonato de sdio (conforme recomendaes do fabricante). 6- Levar ao agitador magntico. 5 - O pH deve ser ajustado para 7,2 a 7,4. 6- Completar o volume para 1L na proveta. 7- No fluxo laminar, esterilizar o meio imediatamente utilizando o filtro de vidro (que deve ser aberto tambm no fluxo). Armazenar na garrafa de vidro, e guardar na geladeira a 4C. 8 - Colocar a soluo para teste de contaminao: colocar 3 mL de meio em cada tubo Falcon e levar para o shaker a 37C, por 48h. Se ficar turvo, significa que o meio est contaminado, e deve ser descartado.

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