Extrao de DNA com NaOH Procedimentos: Sangue 1 - Aliquotar 50 microlitros de sangue total em microtubo estril identificado; 2 - Adicionar 1 mL de gua

estril; 3 - Temperatura/tempo de incubao: temperatura ambiente/6min (agitar a cada 2 min no vortex); 4 - Centrifugar 1 min/12.000g (giro) ou 13.000 rpm; 5 - Descartar 950 microlitros do sobrenadante; 6 - Repetir os passos 2 a 5; 7 - Prosseguir com o protocolo: Procedimentos: Sangue e clulas orais. 1 - Adicionar 600microlitros de NaOH 50mM ao tubo contendo as amostras; 2 - Agitar o tubo em alta rotao (vortex) por 5 - 10 segundos; 3 - Incubar a 95 graus por 5 minutos; 4 - Agitar o tubo em alta rotao (vortex) por 5 - 10 segundos; 5 - Neutralizar a soluo em 60microlitros de Tris HCl pH 8,0; 6 - Agitar o tubo em alta rotao no vortex por 5 - 10 segundos; 7 - DNA extrado 8 - Incubar a 56 graus antes de amplificar TRIS HCL 1M (pH 8,0) Pesar 47,29 de Tris-HCl e dissolver em 100mL de gua deionizada (ultra-pura) sob agitao. Completar o volume com gua deionizada para 300mL. Ajustar o pH at 8,0 e conservar em geladeira entre 2 - 8graus. Validade: 6 meses. NaOH 50mM Pesar 1g de NaOH e dissolver em 100mL de gua deionizada sob agitao e completar o volume com gua deionizada para 500mL. Conservar em temperatura ambiente 20 a soluo25graus. Validade: 6meses