Responda em grupo: 1 Como se faz a fixao de um esfregao bacteriano? R.

.: Para fazer a fixao de um esfregao bacteriano necessrio o aquecimento da lmina na chama. 2 Qual a finalidade da fixao? R.: Este passo desnatura as enzimas bacterianas, evitando que digiram partes das clulas, provocando a sua autlise. O calor tambm promove a aderncia das clulas lmina. 3 Explique o mecanismo da colorao de Gram em funo da estrutura da parede bacteriana. R.: A colorao de Gram muito utilizada em bacteriologia permitindo a distino entre bactrias gram positivas e gram negativas. A diferena entre os 2 tipos de clulas relaciona-se com a estrutura da parede celular das bactrias. Assim a parede celular de bactrias ditas gram (+) formada por uma camada espessa de peptidoglicano, enquanto que a parede celular de bactrias gram (-) formada por uma camada fina de peptidoglicano, rodeada por uma camada externa de lipopolissacarideo e proteina. Diferenas na permeabilidade destas membranas aos reagentes quimicos, levam a diferenas de colorao. Na tcnica de Gram utiliza-se primeiro um corante bsico, o violeta de cristal, seguido de um mordente, o iodo de Gram que aumenta a afinidade da clula para o corante, um agente descolorante, o alcool a 95% que remove o corante, e finalmente um segundo corante bsico por exemplo a safranina. As clulas que retm o primeiro corante chamam-se gram (+) e as que descoram ficaro coradas pelo segundo corante e so as gram (-). Nas gram (-) o solvente alcool ou acetona remove a membrana externa da parede destas bactrias, e como a camada de mucocomplexo pouco espessa no consegue reter o corante violeta de cristal que assim retirado da clula por lavagem.
4 Das preparaes coradas pelo Gram, observadas ao microscpio, especifique a morfologia, arranjo e a reao colorao.