PONTIFCIA UNIVERSIDADE CATLICA DO RIO GRANDE DO SUL

FACULDADE DE BIOCINCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR
BIOQUMICA I
Prof. Maurcio Bogo
Prof. Luiz A. Basso
DETERMINAO DO PONTO ISOELTRICO
A cas e na a pr incipal pro te na e nco ntr ad a no le ite . Apre se nta s e u
po nto is o e l tr ico no pH 4, 7.De pe nd e nd o d o pH do m e io , um a pr o te na pod e
apr es e ntar car ga e l trica po s itiv a, ne gativ a ou nula. As v ar ia es do pH na
s o luo inf lue nciam as car gas do s rad icais do s am ino cid o s co ns tituinte s d as
pro te nas . Com is s o a pr pr ia es trutura pr o t ica se mo d if ica, be m co mo se us
f ator es d e so lubilid ad e ( car ga e l tr ica e capacid ad e de h idr atao d as
m o l culas ) .
Em so luo , quando as m o l culas de d e ter minad a pro te na e s tiv e re m
carr e gad as po s itiv am e nte o u ne gativ am e nte , a so lubilid ad e d es s a pr o te na
s er m aior , po is as m o l culas se r e pe lir o e ntre s i, aum e ntand o a inter ao
co m o s o lve nte . Exis te um pH inte rm ed ir io , que v aria de pr o te na par a
pro te na ( po is de pe nd e do s r ad icais R d os am ino cid o s que a co ns tituem ) , e m
que h um e quilbr io e ntre as car gas po s itiv as e ne gativ as . Es te pH
co nh e cid o co mo PO NT O I SO ELT RI C O d a pro te na pI . Ne s se pH , a
pro te na apr e se nta so lubilid ad e mnim a, po rque a car ga ef e tiv a d a mo l cula
nula (h um balano e ntre car gas pos itiv as e ne gativ as ) , f icand o d im inud a a
r e puls o e ntre as mo l culas e h av e ndo inte r ao e le tr os ttica d as m o l culas
e ntre s i. Co m o co nse q ncia, f or m a- s e gr um o s que te nd e m a pr e cipitar .
T cnica
1 - Dis por um a s r ie d e tubo s d e e ns aio co mo a s e guir :
Tubos
H2O destilada (mL)
c. Actico 0.1N
(mL)
Ac. Actico 1N
(mL)

1
4.4
0.1

2
4.3
0.2

3
4.0
0.5

4
3.5
1.0

5
2.5
2.0

6
0.5
4.0

7
3.9
-

0.6

2 - Pipe tar e m cad a tubo 0, 5 m L d e so luo d e cas e na.

3 - Agitar to do s os tubo s por inve rs o .
4 - O bse rv ar a tur bid e z lo go ap s a agitao e d e po is de 10 m inutos .
5 - Me d ir o pH d o tubo que apr es e nta m aior pr e cipitao .
6 - Co ncluir ind icand o qual o pI d a cas e na.