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SUMMARY
BEHAVIOUR OF ALCOHOLIC AND ACETIC FERMENTATIONS
OF KIWI MASHES (Actinidia deliciosa); COMPOSITION OF
MASHES AND PRODUCTION METHODS. The kiwi culture has
been expanding and the production of vinegar is an alternative
that aims to use surplus fruits to diversify production. In this
study, kiwi fruit (Actinidia deliciosa) vinegar was produced using
submerse and generator methods. Mashes were prepared in six
treatments: natural kiwi fruit juice (T1); kiwi fruit juice and nutrients
added (T2); kiwi fruit juice and sucrose until 18OBrix (T3); kiwi
fruit juice and sucrose until 18OBrix and nutrients (T4); kiwi fruit
juice and sucrose until 22OBrix (T5); and kiwi fruit juice and sucrose
until 22OBrix and nutrients (T6). The alcoholic fermentation occurred
at 28 OC, with 106 CFU/mL of Saccharomyces cerevisiae. Only
treatments 1, 3 and 5 were used in the acetic fermentation since
the addition of nutrients didnt influence ethanol production. In
acetic fermentation vertical generator (PG), at room temperature,
and submerged fermentator (PS), at 25OC, 500rpm agitation an
Recebido para publicao em 20/04/01. Aceito para publicao
em 31/07/01.
2
Departamento de Cincia e Tecnologia de Alimentos da Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Cincias Agrrias.
Rodovia Admar Gonzaga n. 1346. Bairro Itacorubi. CEP 88034001, Florianpolis, SC.
* A quem a correspondncia deve ser enviada.
1
236
1 INTRODUO
O vinagre utilizado no mundo inteiro como condimento e conservante de alimentos [11]. Alm disso
considerado um complemento indispensvel alimentao humana, pela ao nutritiva e biorregulatria [17].
produzido por dois processos bioqumicos distintos,
ambos resultantes da ao de microrganismos: a fermentao alcolica, pela ao de leveduras sobre matrias-primas aucaradas e amilceas e a fermentao
actica, pela ao de bactrias aerbias do gnero
Acetobacter [15, 26, 28].
A fabricao de vinagre proporciona um meio de
utilizao de matria-prima inaproveitvel dos estabelecimentos industriais de frutas e especialmente de propriedades rurais, que de outra forma, no poderiam
competir no mercado [10]. Vinagres de frutas so considerados superiores em qualidades sensoriais e nutritivas, quando comparados a outros tipos de vinagres,
apresentando caractersticas como sabor e aroma prprios [15]. Sob o aspecto nutricional, tm vitaminas,
cidos orgnicos, protenas e aminocidos provenientes do fruto e da fermentao alcolica [2].
O Brasil um importante produtor mundial de frutas, e no entanto o pas apresenta altos ndices de perdas ps-colheita, incluindo o no aproveitamento de
excedentes de safra [8]. O Estado de Santa Catarina
destaca-se como o principal produtor nacional de kiwi,
com uma produo aproximada no ano 2000, de 2500t
[9]. Sua utilizao industrial tem importncia cada vez
maior, pela disponibilidade das frutas de maneira diversa durante todo o ano, e pelo aproveitamento daquelas que apresentam defeitos (calcula-se de 10-15%
da produo anual), sem qualidade para consumo in
natura [21].
Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar as fermentaes alcolica e actica de sucos de
kiwi em diferentes composies de mosto, utilizando
dois processos rpidos de acetificao: gerador e
submerso, oferecendo com isso, alternativa para o produtor, na diversificao de produtos derivados de kiwi e
para a diminuio de perdas ps-colheita.
Rendimento da fermentao, foi calculado utilizandose os valores de etanol produzido (% p/v) em relao aos acares consumidos (% p/v) x 100 [2].
Eficincia da fermentao, pela relao: lcool produzido (% p/v)/lcool terico (% p/v) x 100. O lcool terico calculado a partir dos acares consumidos x 0,5111.
2 MATERIAL E MTODOS
2.1 Matria-prima
A matria-prima utilizada foi uma mistura de cultivares de kiwis (Actinidia deliciosa) excedentes de safra,
com grau de maturao uniforme, adquiridas em feiras
comerciais.
2.2 Microrganismos
Para a fermentao alcolica, foi utilizado um cultivo puro de Saccharomyces cerevisiae, a partir de fermento comercial desidratado. A fermentao actica
foi conduzida pela inoculao de bactrias cido-acticas
provenientes de vinagre de mel no pasteurizado (vinagre forte), fornecido por uma indstria.
2.3 Fermentao alcolica
2.3.1 Preparo do mosto
O homogeneizado foi submetido a seis tratamentos em cinco repeties: T1- suco da fruta natural (controle); T2- suco da fruta natural com adio de sais
inorgnicos (sulfato de amnia 0,2g/L, fosfato de amnia 1,0g/L e sulfato de magnsio 0,1g/L); T3- suco da
fruta com correo do grau Brix para 18% de slidos
solveis totais (SST) pela adio de sacarose (comercial); T4- suco da fruta com 18% de SST, adicionado
de sacarose e sais inorgnicos; T5- suco da fruta com
correo do grau Brix para 22% de SST; T6- suco da
fruta com 22% de SST, adicionado de sacarose e sais
inorgnicos. A fermentao alcolica foi conduzida em
cubas de polietileno com capacidade de 2,5L, em estufa. O volume de trabalho foi de 1000mL, a temperatura
de 28C (1). Em cada tratamento foi adicionado inculo
na proporo de 10% com uma populao de 106UFC/mL.
Os vinhos obtidos foram centrifugados a 3000rpm por
20 minutos, pasteurizados (65C/20 minutos) e congelados (-18C) para a posterior fermentao actica.
2.3.2 Acompanhamento da fermentao
Durante a fermentao alcolica foram determinadas as concentraes de: acares totais, pelo mtodo
Clegg Anthrone [20] ; concentrao de etanol, pelo mtodo da oxidao do dicromato (tcnica n 962.12) [3] e
pH [13].
A populao de leveduras viveis foi determinada
utilizando-se a tcnica de semeadura em profundidade
com incubao a 25C/5 dias [18].
Para a produo de vinagre foram utilizados os vinhos obtidos na fermentao alcolica, dos tratamentos 1, 3 e 5 com teores alcolicos de 3,54%, 6,74% e
9,43% (p/v), respectivamente, submetidos fermentao actica: TA: vinho com 3,54% de etanol (p/v); TB:
vinho com 6,74% de etanol (p/v); TC: vinho com 9,43%
de etanol (p/v), em processo por gerador; TD: vinho
com 3,54% de etanol (p/v); TE: vinho com 6,74% de
etanol (p/v); TF: vinho com 9,43%, de etanol (p/v), em
processo submerso.
2.4.2 Processo do gerador
Foi realizado em gerador vertical, construdo em
PVC, dividido em: depsito inferior, para a adio de
mosto e para retirada de vinagre, compartimento intermedirio (onde ocorre a fixao das bactrias sobre o
material de suporte contendo pedaos de carvo vegetal esterilizados) e depsito superior (ou reservatrio,
de onde o mosto circulou sobre o compartimento intermedirio). A fermentao foi conduzida em temperatura ambiente (20 a 25C) nas 5 (cinco) repeties, com
volume de trabalho de 2 litros. Os vinhos foram enriquecidos com sulfato de amnio 0,1g/L, fosfato de amnio
0,5g/L, fosfato de potssio 0,1g/L, sulfato de magnsio
0,1g/L e glicose 1,0g/L.
Durante o processo de acetificao, a adio de
vinho de kiwi foi feita retirando-se 500mL de vinagre
com teor alcolico inferior a 1,0% (v/v) e adicionandose igual quantidade de vinho a cada 24 horas do processo fermentativo. Foram realizadas coletas para anlises de acidez e teor alcolico. Cada adio de novo
mosto alcolico foi considerada uma repetio do experimento. A circulao do mosto no interior do gerador ocorreu em intervalos de 15 minutos.
2.4.3 Processo submerso
Os mostos foram acetificados em fermentador (New
Brunswick Cientific, Modelo Bioflo 2000), no qual foram controlados o fluxo de oxignio (0,05vvm volume
de ar/volume de mosto x minuto), a temperatura (25C)
237
e a velocidade de agitao (500rpm). Durante a fermentao actica, foram realizadas coletas em intervalos de 6 (seis) horas, em triplicata, para anlise de
acidez e teor alcolico. O volume de trabalho foi de 2
litros. A adio do clarificante Acetozim (R) foi realizada numa proporo de 0,1g/L, facilitando a filtrao.
O vinagre foi retirado com teor alcolico abaixo de
1,0% de etanol (v/v). Aps a retirada de 500mL do produto foi feita a substituio por novo vinho, utilizandose como inculo parte da batelada anterior que permaneceu no fermentador. A adio dos mostos alcolicos
dos diferentes tratamentos ocorreu a cada 12 horas do
processo fermentativo.
2.4.4 Acompanhamento da fermentao
Nos produtos finais foram realizadas, em triplicata,
as seguintes determinaes: concentrao de etanol pelo
mtodo da oxidao do dicromato (tcnica n 962.12)
[3]; acidez fixa em cido actico (tcnica n 930.35) [3];
resduo mineral fixo (tcnica n 900.02) [3]; resduo seco
a 105C (tcnica n 920.68) [3]. A acidez foi expressa
em % de cido actico (p/v) e o teor alcolico, em % de
etanol (p/v).
2.4.5 Clculo do rendimento e produtividade
da fermentao actica
O rendimento foi calculado de duas maneiras: (a)Produo observada de cido actico em relao ao
rendimento terico. O rendimento terico calculado a
partir da reao de converso do etanol a cido actico,
onde 1,0g de etanol rende 1,304g de cido actico [2].
(b)- Concentrao total ou GK (Gesammte Konzentration),
calculada pela eficincia da fermentao expressa pela
soma da concentrao de etanol (% v/v) e cido actico
(% p/v) no incio e final da fermentao [7]. Essa relao foi aplicada para calcular a eficincia com a qual o
etanol convertido a cido actico: Rendimento GK =
(GK final/GK inicial) x 100. A produtividade foi calculada pela quantidade produzida de cido actico em relao ao volume e tempo (g/L.h).
2.4.6 Tratamento final do vinagre
Os vinagres obtidos foram diludos em gua destilada para uma acidez de 5,0%. Para os vinagres resultantes do processo submerso, foi adicionada bentonita
(0,05% p/v), por um perodo de 8 horas para sedimentao. Posteriormente os vinagres foram centrifugados,
filtrados, engarrafados e pasteurizados a 65C/20 minutos. Pesquisa de sujidades foi realizada segundo a
tcnica n 970.66 [3]. O material retido no papel filtro
foi examinado em microscpico estereoscpico.
2.4.7 Anlise sensorial
As avaliaes sensoriais dos vinagres foram realizadas pela equipe de julgadores do Departamento de
Cincia e Tecnologia de Alimentos da Universidade
Federal de Santa Catarina. Para a avaliao dos atributos aspecto, cor e odor, as amostras foram distribudas em tubos de ensaio com tampa rosquevel, cada
238
3 RESULTADOS E DISCUSSO
3.1 Caracterizao da matria-prima
A polpa in natura apresentou uma concentrao
aproximada de slidos solveis totais (SST) de 14Brix,
correspondendo a 9,47% (p/v) de acares totais.
3.2 Fermentao alcolica
3.2.1 Acares totais
Os mostos de kiwi apresentaram concentraes de
acares totais superiores nos tratamentos 5 e 6 (cerca de 20,0% p/v) devido adio de sacarose, e menores nos tratamentos 1 e 2 (cerca de 9,0% p/v). Os acares totais consumidos, podem ser observados na Tabela 1. As concentraes de acares residuais encontradas foram menores que 0,33% (p/v), indicando a eficincia das fermentaes realizadas. AQUARONE &
ZANCANARO JR. [2] encontraram, ao final de fermen-
Acares
Etanol
consumidos produzido
Etanol
terico%
Rendimento Eficincia
Produtividade
(g/L.h)
0,738
%(p/v) *
% (p/v) *
(p/v)
T1
9,159
3,540
4,681
38,650
75,624
T2
9,113
3,648
4,657
40,031
78,333
0,760
T3
15,498
6,742
7,921
43,502
85,137
1,404
T4
15,426
7,054
7,884
45,728
89,484
1,469
T5
20,286
9,483
10,368
46,746
91,482
1,975
T6
20,338
9,605
10,394
47,226
92,409
2,001
12,00
Aproximadamente 95% do etanol foi produzido entre 34 horas (T1 a T4) e 40 horas (T5 e T6).
Etanol % (p/v)
Tratamentos com maiores concentraes de acares totais (T5 e T6) no incio da fermentao, podem promover uma inibio e retardar o consumo por parte das
leveduras [14]. Mesmo assim, a fermentao alcolica
desenvolveu-se normalmente e poderia ser encerrada em
40 horas (T5 e T6). Por outro lado, para menores concentraes de acares (T1 a T4), pode-se considerar que a
fermentao poderia ser concluda em 36 horas com acares residuais e teor alcolico quase constantes.
10,00
T1
T2
T3
T4
T5
T6
8,00
6,00
4,00
2,00
0,00
0
12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tempo (horas)
FIGURA 1. Produo de etanol e durao da fermentao alcolica de mostos de kiwi nos seis tratamentos analisados.
239
11,00
Segundo a reao estequiomtrica, que representa a transformao do etanol a cido actico, 1,0g de
etanol pode fornecer 1,304g de cido actico. Industrialmente, a converso de 1,0g de etanol a 1,0g de cido
actico (rendimento de 76,7%) considerada econmica [2].
10,00
2,75
9,00
8,00
T1
T2
T3
T4
T5
T6
7,00
6,00
5,00
4,00
0
2,25
8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
1,75
1,50
1,00
2,00
1,25
Tempo (horas)
240
TA
TB
TC
TD
TE
TF
2,50
Etanol % (p/v)
12,00
0,75
0
12
18
24
Tempo (horas)
FIGURA 3. Consumo mdio de etanol% (p/v) e durao da fermentao actica de vinhos de kiwi para os processos gerador e submerso em diferentes tratamentos.
Etanol (*)
Acido
cido
Rendimento
Produtividade
consumido
actico (*)
actico
(g/L.h)
%(p/v)
produzido
terico %
0,30
%(p/v)
(p/v)
TA
0,68
0,72
0,88
81,81
TB
0,65
0,75
0,85
88,23
0,31
TC
0,65
0,70
0,85
82,35
0,29
TD
0,82
1,00
1,06
94,33
0,83
TE
1,39
1,78
1,81
98,34
1,48
TF
1,71
2,07
2,22
93,24
1,73
um tempo de 12 horas, nas condies desse experimento. J para o processo do gerador, um tempo de 24
horas foi necessrio para produzir vinagres com teores
acima de 5,0% de cido actico (p/v).
A retirada de vinagre e reposio do mesmo volume de mosto alcolico, quando a concentrao de etanol
baixava a nveis inferiores a 1,0% e a concentrao de
cido actico alcanava teores de 5,0 a 8,0% permitiu
que o GK permanecesse aproximadamente constante,
indicando que no houve perdas por evaporao ou
superoxidao. A Figura 4 apresenta a produo mdia de cido actico em funo do tempo de fermentao, nos dois processos de acetificao.
TABELA 3. Produo de cido actico e rendimento GK, durante a fermentao actica de vinhos de kiwi em seis tratamentos do experimento.
Tratamento
Perodo de
Etanol %
c. Actico
acetificao
(v/v)*
% (p/v)*
GK
Rendimento
GK (%)
(h)
TA
TB
TC
TD
TE
TF
2,05
5,23
7,28
24
1,19
5,95
7,14
2,69
4,78
7,47
24
1,88
5,53
7,41
3,09
4,61
7,70
24
2,27
5,31
7,58
2,33
6,99
9,32
12
1,29
7,99
9,28
2,90
6,55
9,45
12
1,14
8,33
9,47
3,17
6,49
9,66
12
1,00
8,56
9,56
98,07
99,19
98,44
99,57
100,21
98,96
10,00
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
8,00
12
18
4,00
6
6,00
24
Tempo (horas)
241
observado que houve variao significativa entre os tratamentos. O tratamento A foi superior e o tratamento D
inferior, o mesmo tendo sido observado para o atributo
sabor. Os tratamentos B, C, E e F so estatisticamente
iguais ao nvel de significncia de 5%. Por outro lado,
TA diferente de TD e TE, e tambm diferem entre si
os tratamentos B e D (Tabela 7).
TABELA 6. Anlise estatstica do atributo sabor nos produtos
finais obtidos na fermentao actica em seis tratamentos.
Tratamentos
TABELA 4. Caractersticas fsico-qumicas dos vinagres obtidos diludos e limites estabelecidos pela Legislao.
T A(*)
Caractersticas
T B(*) T C(*)
T D(*)
T E(*)
T F(*)
fsico-qumicas
Mdias (*)
TA
Limites da
Legislao
2,94 a
TB
2,53 a b
TC
2,33 a b
TF
2,16 a b
TE
2,11 a b
TD
1,64
Brasileira**
Acidez % (p/v)
5,01
4,98
5,13
5,01
5,13
5,11
4,0 (mnimo)
Etanol % (v/v)
0,54
0,70
0,65
0,49
0,32
0,41
1,0 (mximo)
0,18
0,15
0,16
0,11
0,17
0,13
0,1 (mnimo)
1,18
1,19
1,15
1,26
1,29
1,24
1,2 (mnimo)
Mdias (*)
TA
2,89 a
TC
2,61 a b
TB
TF
Mdias (*)
TA
2,89 a
100,00
2,56 a b
TB
2,33 a b
80,62
2,06 a b
TC
2,22 a b c
76,82
TE
2,00 a b
TF
2,11 a b c
73,01
TD
1,67
TE
1,33
bc
46,02
TD
1,11
38,41
(*) Mdias assinaladas com a mesma letra, no diferem entre si, pelo teste de
Tukey ao nvel de 5% de significncia.
242
(*) Mdias assinaladas com a mesma letra, no diferem estatisticamente entre si,
pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de significncia.
4 CONCLUSES
A velocidade de acetificao foi superior no processo submerso, com maiores rendimentos e produtividades.
5 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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Anual de Fruticultura de Clima Temperado. EPAGRI.
Videira, 2000.
243