Licenciatura em Engenharia Qumica e

Biolgica
Imobilizao de Enzimas
Efeitos difusionais
Engenharia Biolgica I - Universidade de Cabo Verde - Dept. cincias e tecnologias 2009/10
Engenharia
Biolgica I
Difuso, Partio, Reaco
Quando o enzima est imobilizado num suporte, necessrio que
haja difuso do substrato desde a soluo ate enzima, para que
haja reaco.
A fora motriz desse processo o gradiente de concentrao
das espcies. Os substratos aproximam-se da superfcie da matriz
onde se encontra o enzima, atravessando a camada estagnada de
liquido que rodeia o slido.
Este processo, no caso de um suporte poroso, pode ser descrito
como duas etapas sequenciais:
Difuso externa a que tem lugar superfcie do slido;
Difuso interna em que os solutos so transportados dentro dos
poros do suporte, concomitantemente com o processo de reaco.
Engenharia
Biolgica I
Difuso externa
Difuso externa o transporte do substrato para a superfcie, e os produtos
afastados, esto em srie com a converso cataltica dos substratos aos
produtos que ocorrem na superfcie.
A velocidade do fluxo do substrato para a superfcie dada por;
o
S
L
D
K =
Onde A a superfcie total, [S] a concentrao do substrato no
microambiente, [S
0
] a concentrao do substrato no macroambiente e K
L
(coeficiente de transferncia de massa) dada por;
D
s
definida pela lei de Fick, e depende do peso molecular, da
temperatura, viscosidade e composio da fase lquida:
dx
d
A D
dt
dm
S

=
| | | | ( ) S S A K V
L
=
0
D
s
difusividade do substrato na
soluo e o a espessura efectiva da
camada estagnada atravs do qual o
substrato deve difundir.
Engenharia
Biolgica I
Difuso externa
No equilbrio a velocidade de reaco enzimtica igual
velocidade do processo de transporte de massa
| |
| |
| | | | ( ) S S K
S K
S V
L
M
=
+
0
max
Caso A Quando [S] muito maior que k
m
(reaco de ordem zero),
considerando a velocidade da reaco por unidade de rea de enzima
imobilizado (V
A
), obtm-se:
| | | | ( ) V S S K V
L
= =
0 max
A velocidade da reaco controlada cineticamente (=1)
Engenharia
Biolgica I
Difuso externa
Caso B Quando [S] muito menor que k
m
(reaco de ordem 1):
Rearranjando:
A grandeza relativa dos dois termos no denominador determina se
a reaco controlada pela difuso do substrato (k
L
) ou pelo
poder cataltico do enzima (v
max
/k
m
)
Engenharia
Biolgica I
Difuso externa
1. A reaco encontra-se em controlo cintico quando K
L
>>
M
K
V
max
Quando o transporte de massa muito mais eficiente do que a catalise, a reaco
est em controlo cintico, que to efectiva como o enzima livre (=1)
2. A reaco encontra-se em controlo difusional quando K
L
<<
M
K
V
max
Quando o transporte de massa menos eficiente do que a velocidade intrnseca
dos enzimas, o processo esta em controlo difusional:
Engenharia
Biolgica I
Difuso externa
Variao da taxa da reaco catalisada por um enzima imobilizado e
no imobilizado em funo da sua concentrao;
a) Controlo cintico
b) Controlo misto
c) Controlo difusional
Essa analise pode ser efectuada introduzindo o nmero de Damkhler, que
uma grandeza adimensional que traduz a razo entre as velocidades de
reaco e transporte:
Engenharia
Biolgica I
Limitaes difusionais
Limitao difusional externa o substrato tem que atravessar a
pelcula lquida estacionria (bulk) que rodeia a matriz do suporte;
Limitao difusional interna - os solutos so transportados dentro
dos poros do suporte, simultaneamente com o processo de reaco
Engenharia
Biolgica I
Factor de efectividade ()
Factor de efectividade () este factor quantifica a modificao na
velocidade da reaco, variando este factor entre 0 e 1, no entanto ela
pode tomar valores superiores a 1, devido a efeitos de partio,
inibio, ou estabilizao das enzimas imobilizadas.
livre
V
V
= q
| |
| |
|
|
.
|

\
|
+
=
S K
S V
V
m
max
q
Sendo que a cintica da reaco dada pela seguinte equao:
Engenharia
Biolgica I
Factor de efectividade ()
Quando os efeitos difusionais externos e internos afectam
simultaneamente a velocidade de reaco enzimtica o factor de
efectividade dada por;
i e T
q q q =
Sendo que para uma reaco de primeira ordem e geometria esfrica

i
dada por:
( ) 1 3 coth 3
3
1
2
= | |
|
q
i
ef
D
k R
1
3
= |
Engenharia
Biolgica I
Factor de efectividade
| |
| |
| | | | ( ) S S K
S K
S V
L
M
=
+
0
max
O factor de efectividade varia com |
0
e , diminuindo para |
0
reduzidos
(baixo [S]
0
) e de elevados (baixo k
L
); as condies que proporcionam
maior probabilidade de controlo difusional da reaco incluem:
Elevada carga de enzima na superfcie
Baixa concentrao do substrato no bulk
Baixa difusividade do substrato
Baixo k
m
Agitao pouco eficiente
Superfcies com baixa rea superficial
Engenharia
Biolgica I
Factor de efectividade
Engenharia
Biolgica I
Factor de efectividade
Engenharia
Biolgica I
Limitaes difusionais externas
O factor de efectividade externo (
e
) relaciona-se com o mdulo de
substrato () e com a concentrao adimensional de substrato |.
m L
K K
V
max
=

|
|
+
=
1
0
Engenharia
Biolgica I
Limitaes difusionais internas
O factor de efectividade interno (
i
)encontra-se relacionado com o
mdulo de Thiele e com a concentrao adimensional de substrato (
s
)
ef P
P
D
k
A
V
1
1
= |
Engenharia
Biolgica I
Difuso em suportes porosos
Engenharia
Biolgica I
Difuso em suportes porosos
Engenharia
Biolgica I
Difuso em suportes porosos
Engenharia
Biolgica I
Difuso em suportes porosos
Engenharia
Biolgica I
Difuso em suportes porosos
Engenharia
Biolgica I
Difuso em suportes porosos