rea Temtica 5

IDENTIFICAO DE FUNGOS EXTERNA E INTERNAMENTE A SEMENTES DE PINHO-MANSO

Danila Alves Correa de S1, Gil Rodrigues dos Santos2, Gleiber Quinto Furtado3, Eduardo Andrea Lemus Erasmo4, Carlos Eduardo Rodrigues Neres5 e Camilo Gomes Antunes6

Resumo: O pinho-manso uma oleaginosa de grande importncia, devido possibilidade do seu uso na produo de biodiesel. O sucesso dessa cultura no campo depende de sementes de boa qualidade. Assim, torna-se necessrio a anlise sanitria para deteco e identificao dos patgenos associados s mesmas. Objetivou-se com esse estudo determinar os fungos associados externa e internamente s sementes de pinho-manso produzidas nos estados de Minas Gerais, So Paulo e Tocantins. Na avaliao foi utilizado o mtodo Blotter test. Os gneros de fungos associados s sementes foram Colletotrichum, Curvularia, Verticillium, Fusarium, Penicillium, Aspergillus e Rhizopus. Termos de indexao: micoflora, Jatropha curcas e transporte Introduo
O pinho manso (Jatropha curcas L.) uma planta arbustiva, oleaginosa, de crescimento rpido, pertencente famlia Euphorbiaceae, de alto potencial produtivo, tem possibilidades de ser mais uma alternativa no s para a produo de leo de boa qualidade, mas tambm para a produo sustentvel de biodiesel em nosso pas, sendo esta planta considerada originria da Amrica do Sul e Central, por alguns autores (ARRUDA et al, 2004; BELTRO, 2005; HELLER, 1996). Embora seja um cultivo que est em expanso no pas, somente nos ltimos 30 anos, que estudos agronmicos foram iniciados, se tratando assim de uma espcie ainda no domesticada. O Pinho Manso, cujo gnero Jatropha tem mais de 170 espcies, no mundo ainda escasso o conhecimento relativo a esta planta (SATURNINO et al., 2005). A interferncia dos patgenos associados s sementes pode promover a reduo da populao, a debilitao das mesmas e o desenvolvimento de epidemias (MENTEN, 1991). O teste de sanidade de sementes tem como objetivo determinar a condio fitossanitria de um lote de sementes, fornecendo informaes para programas de certificao, servios de vigilncia vegetal, tratamento de sementes, melhoramento de plantas e outros (HENNING, 1994, MACHADO, 2000). Para o desenvolvimento da cultura do pinho-manso de grande importncia que estudos cientficos em diversas reas sejam realizados visando o seu manejo e o desenvolvimento tecnolgico. Diante disso, propem se nesse estudo investigar a populao de fungos associada externa e internamente as sementes dessa espcie vegetal.

Material e Mtodos
Os experimentos foram conduzidos no laboratrio de Fitopatologia da Universidade Federal do Tocantins, campus de Gurupi- TO. Utilizaram-se lotes de sementes de pinho-manso provenientes de Minas Gerais, So Paulo e Tocantins. Para padronizao das amostras foi considerado como um lote, sementes coletadas em um mesmo estado e em uma mesma poca do ano de 2008. As sementes provenientes de cada lote foram submetidas aos seguintes tratamentos: com desinfestao com tegumento (CDCT), sem desinfestao com tegumento (SDCT), sem desinfestao sem tegumento (SDST) e com desinfestao sem tegumento (CDST). A desinfestao foi realizada emergindo as sementes a uma sequncia de lcool 70% (30 segundos), hipoclorito de sdio 2% (2 minutos) e gua destilada esterilizada. As sementes no desinfestadas foram lavadas em gua destilada esterilizada durante 1 minuto. Para o tratamento com desinfestao com remoo do tegumento, primeiramente as sementes foram esterilizada conforme a metodologia descrita acima, e posteriormente o tegumento foi removido com auxlio de um bisturi, de maneira cuidadosa para que no ocorressem danos ao embrio. Para o tratamento com remoo de tegumento sem desinfestao, primeiramente as sementes foram lavadas em gua destilada esterilizada durante 1 minuto e logo aps houve
1 2

Agroenergia Universidade Federal do Tocantins (UFT), Campus de Palmas-TO, danilasa@hotmail.com Agroenergia UFT, Campus de Palmas TO; gilrsan@uft.edu.br 3 Engenharia Florestal UFT, Campus de Gurupi TO, gleiber@uft.edu.br 4 Engenharia Florestal UFT, Campus de Gurupi TO, erasmolemus@uft.edu.br 5 Engenharia Florestal UFT, Campus de Gurupi-TO, cipocadu@hotmail.com 6 Engenharia Agronmica- UFT, Campus de Gurupi-TO, cgantunes@hotmail.com

a remoo do tegumento com o auxilio de um bisturi. As sementes tiveram sua qualidade fitossanitria avaliada por meio do teste de blotter (DHINGRA & SINCLAIR, 1996). Para cada tratamento utilizou-se um total de 100 sementes distribudas em 10 repeties. As mesmas foram depositadas no interior de Gerbox, contendo duas folhas de papel esterilizadas e umidecidas com 100 mL de gua destilada estril contendo 100ppm de sulfato de Estreptomicina, para evitar o surgimento de bactrias. Em seguida, os Gerbox foram acondicionados em sala de incubao sob fotoperodo de 12 horas e temperatura de 25oC durante 5 dias. As sementes foram avaliadas individualmente ao microscpio estereoscpico, buscando-se identificar as estruturas tpicas de cada fungo encontrado. Para o exame da morfologia dos fungos encontrados foram preparadas lminas e estas visualizadas ao microscpio de luz. Os fungos foram tambm isolados e cultivados em meio de cultura batata-dextrose-agar (BDA) para posterior confirmao da identificao. A identificao desses organismos foi feita com base em informaes disponveis na literatura (BARNET & HUNTER, 1986).

Resultados e Discusso
De acordo com a Tabela 1, apenas nas sementes com tegumento, desinfestadas e no desinfestadas foram detectados fungos associados ao pinho manso. Nas sementes com remoo do tegumento no se observou a presena de fungos, sugerindo ausncia de infeco. No lote proveniente de Minas Gerais detectou-se a presena dos gneros Colletotrichum, Curvularia, Verticillium, Fusarium, Penicillium, Aspergillus e Alternaria. Com exceo do Colletotrichum, todos os demais fungos foram encontrados associados s sementes provenientes de So Paulo, acrescentando-se o Rhizopus. Tabela 1. Gneros de fungos associados a sementes de pinho-manso (J. curcas) submetidas aos tratamentos SDCT (sem desinfestao com tegumento), SDST (sem desinfestao sem tegumento), CDCT (com desinfestao com tegumento) e CDST (com desinfestao sem tegumento) originrias dos estados de Minas Gerais, So Paulo e Tocantins. Origem das Sementes Minas Gerais So Paulo Tocantins Tratamentos Fungos Incidncia Fungos Incidncia Fungos Incidncia (%) (%) (%) SDCT Colletotrichum 7 Curvularia 3 Aspergillus 52 Curvularia 3 Verticillium 87 A. niger 22 Verticillium 6 Fusarium 7 Verticillium 4 Fusarium 25 Aspergillus 11 Penicillium 49 Penicillium 7 Alternaria 11 Aspergillus 6 Alternaria 6 SDST CDCT Aspergillus 2 Fusarium 1 Aspergillus 2 Rhizopus 2 A. niger 2 Aspergillus 2 Penicillium 1 CDST
-

Os gneros encontrados no presente estudo esto de acordo com aqueles detectados por Santos et al. (2009), ao avaliar a qualidade sanitria de sementes de pinho-manso, por meio de Blotter test e meio de cultura BDA, produzida no Norte do estado de Minas Gerais, onde foram detectados os gneros Fusarium, Aspergillus, Penicillium e Colletotrichum. No presente trabalho, as maiores incidncias encontradas para o estado de Minas Gerais foram os gneros Fusarium (25%) e Colletotrichum (7%). J para So Paulo o fungo que mais se destacou foi o Verticillium (87%), seguido de Alternaria e Aspergillus, ambos com medias de 11%. No estado do Tocantins os fungos com maior incidncia foram Aspergillus (52%) seguido de Penicillium sp. (49%).

I Congresso Brasileiro de Pesquisas de Pinho Manso

Braslia-DF, Novembro, 2009

Concluses
Todos os gneros fngicos detectados nas sementes de pinho- manso foram encontrados externamente no tegumento.

Agradecimentos
O presente trabalho foi realizado com o apoio do Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e tecnolgico CNPq Brasil.

Referncias
ARRUDA, F.P.; BELTRO, N.E.M.; ANDRADE, A.P.; PEREIRA, W.E.; SEVERINO, L.S. Cultivo de pinho-manso (Jatropha curcas) como alternativa para o semi-rido nordestino. Revista Brasileira de Oleaginosas e Fibrosas, v.8, p.789-799, 2004. BARNETT, H.L.; HUNTER, B.B. Ilustrade genera of fungi imperfect. New York: MacMillan Co., 1986, 218p. BELTRO, N.E.M. Agronegcio das oleaginosas no Brasil. Informe Agropecurio, v.26, p.44-78, 2005. DHINGRA, O.D.; SINCLAIR, J.B. Basic plant pathology methods. 2a edio. Boca Raton: Lewis Publishers, 1996. 434p. HELLER, J. Phisic nut (Jatropha curcas): promoting the conservation and use of underutilized and neglected crops. Rome: Institute of Plant genetic and crop Plant Research, 1996, 66p. HENNING, A.A. Patologia de sementes, Londrina: EMBRAPA CNPSo. 1994. 43p. (EMBRAPA CNPSo/ Documento 90). MACHADO, J.C. Tratamento de sementes no controle de doenas. Lavras: LAPS/UFLA/FAEPE, 2000. 138p. MENTEM, J.O.M. Patgeno em sementes: deteco, dano e controle qumico. Piracicaba: FEALQ/ESALQ, 1991, 312p. SANTOS, A.A.; CALDEIRA, N.C.A.; AQUINO, CF; MARANGON, B.; BRANDO JNIOR, D.S. Avaliao da qualidade sanitria das sementes de pinho-manso oriundas do Norte de Minas Gerais. Fitopatologia Brasileira, p.320, 2009. SATURNINO, H.M.; PACHECO, D.D.; KAKIDA, J.; TOMINAGA, N.; GONALVES, N.P. Cultura do pinho manso ( Jatropha curcas L. ). Informe Agropecurio, v. 26, p. 44-78, 2005.

I Congresso Brasileiro de Pesquisas de Pinho Manso

Braslia-DF, Novembro, 2009