Replicao do DNA

O que no d prazer no d proveito. Em resumo, senhor, estude apenas o que lhe agradar. William Shakespeare

Replicao: ao ou processo de duplicao ou reproduo. Uma entidade original d origem a cpias com propriedades semelhantes. Ocorre na fase S da interfase

Replicao semiconservativa Como os dois filamentos de nucleotdeos em uma molcula de DNA so complementares (adenina com timina; guanina com citosina), durante a replicao, cada filamento pode servir como molde para a sntese de um novo filamento. Cada um dos filamentos originais permanece intacto (conservados), apesar de no estarem mais combinado na mesma molcula. Assim, durante um evento de duplicao so produzidas duas molculas novas de DNA, cada uma delas consistindo de uma fita velha (do duplex original) e uma nova (recm-sintetizada) .

Replicao em eucariotos Etapas: iniciao, alongamento e trmino Iniciao: 1- Protenas iniciadoras se ligam nica origem de replicao (oriC) e fazem com que um curto trecho de DNA se deselicoidize. 2

2- A deselicoidizao do curto trecho de DNA permite que Helicases( quebram pontes de hidrognio entre as bases das duas fitas de DNA deselicoidizao) e SSBs(estabiliza os filamentos separados de DNA, evitando sua reelicoidizao) se liguem aos filamentos separdos do DNA. A DNA girase diminui a fora torcional(resultado da deselicoidizao), fazendo e fechando cortes na dupla-hlice do DNA.

Alongamento -Sntese do DNA a partir da DNA polimerase III. As DNA polimerases (enzimas que sintetizam DNA) precisam de um nucleotdeo com um grupo 3OH ao qual um novo nucleotdeo possa ser adicionado. Ou seja, as DNA polimerases adicionam apenas nucleotideos ponta 3-OH do filamento em crescimento. 3

Por isso, h a necessidade de iniciadores (primers) para comear a sntese da nova fita de DNA a partir da fita molde: -uma enzima chamada primase sintetiza um trecho de nucleotdeos de RNA (primers) que fornece um grupo 3-OH ao qual a DNA polimerase III possa adicionar nucleotdeos. Assim, a DNA polimerase III inicia a sntese de DNA adicionando nucleotdeos ponta 3-OH do pimer e do filamento em crescimento na direo 53. medida que o DNA se desenrola, uma fita molde exposta no sentido 53 e a outra fita exposta no sentido 35, devido polaridade inversa das fitas (lembra-se?). Ento... ... se a DNA polimerase possui somente uma atividade no sentido 5 -> 3 da fita de DNA como possvel haver replicao nas duas fitas do DNA em um mesmo sentido? Resposta: Um filamento sintetizado continuamente(replicao contnua) e outro descontinuamente(replicao descontnua). Na replicao contnua, o novo filamento chamado de filamento leading. Na replicao descontnua so produzidos curtos fragmentos curtos de DNA chamados fragmentos de Okazaki. Cada fragmento de Okazaki ter um primer e o filamento formado pela unio dos fragmentos de Okazaki chamado de filamento "lagging

Quando a DNA pol III encontra o primer seguinte ela pra e a DNA polimerase I remove os primers dos filamentos sintetizados e os substitui por nucleotdeos de DNA. Possui funo de polimerase53(sntese de DNA) e de exonuclease 35( remoo de nucleotdeos para correo de erros). O grupo 3-OH do ltimo nucleotdeo adicionado pela DNA pol I no ligado ao grupo 5-fosfato do primeiro nucleotdeo adicionado pela DNA pol III. A DNA ligase une esses nucleotdeos por catalisar uma ligao fosfodister entre eles.

Trmino
Em algumas molculas de DNA , a replicao terminada sempre em que se encontram 2 forquilhas de replicao. Em outras, protenas de trmino TUS ligam-se s sequncias especficas de trmino, bloqueando o movimento da Helicase, parando a forquilha de replicao. OBS: Cada forquilha de replicao ativa requer cinco componentes bsicos: -Helicases, para desenrolar o DNA -protenas SSBs, para manter os filamentos nucleotdicos separados para permitir a replicao -A topoisomerase girase, para remover a fora frente forquilha de replicao -primase, para sintetizar primers -DNA polimerase para sintetizar os filamentos leading e legging

Replicao em eucariotos O DNA de eucariotos possui vrias origens de replicao. Essas origens de replicao so reconhecidas por um complexo multiprotena chamado ORC ( complexo de reconhecimento de origem). A presena de ORC na origem serve para recrutar outras duas protenas, Cdc6 e Cdt1. Ambas a as protenas mais o ORC recrutam a helicase replicativa, chamada de complexo MCM e juntos formam um complexo pr-replicao( pr-RC). 5

Fatores de permisso de replicao (RLFs) se ligam ao pr-RC, para permitir a replicao do DNA. Da, duas protenas quinases(aquelas que fosforilam!) atuam sobre pre-RC, sendo uma delas a cyclin B-CDK. Fosforilao pela cyclin B-CDK causa: Desligamento de Cdc6p do complexo Dissociao de algumas protenas MCM (RFLs) Ativao de Cdc7p-Dbf4p que fosforila o complexo MCM.

A fosforilao do complexo MCM coloca a clula em estgio S. Ocorre ento a deselicoidizao de um trecho curto de DNA e recrutamento de protenas necessrias paras sntese de DNA, como por exemplo, a DNA v polimerase. A replicao eucaritica tambm possui helicases,protenas de ligao unifilamentar e topoisomerases. Essas enzimas funcionam na deselicoidizao do DNA eucaritico mais ou menos do mesmo modo que nos procariotos. Ocorre replicao contnua e descontnua com produo de primers no inco de cada filamento.

As clulas eucariticas possuem vrios tipos de DNA polimerases que participam na replicao, combinao e reparo do DNA. DNA pol Funo Sintetiza primer seguido de um trecho curto de DNA Reparo do DNA

Replicao do DNA mitocondrial Replicao do DNA nuclear (fita contnua) Desconhecido. Provavelmente reparo e replicao do DNA

Uma vez que um primer, na ponta do cromossomo, tenha sido removido, ele no pode ser substitudo porque no h um trecho adjacente de DNA replicado para fornecer um grupo 3-OH para a adio de nucleotdeos de DNA pela polimerase. Isso produz um espao na ponta do cromossomo, sugerindo que o cromossomo deva se tornar progressivamente mais curto a cada rodada de replicao. A enzima telomerase a responsvel pela replicao das pontas dos cromossomos (telmeros). Os telmeros possuem muitas cpias de uma sequncia rica em G repetida. A telomerase(composta por RNA e ptns) prea com a sequncia curta e repetida do telmero e fornece um molde para a sntese de cpias dessas repeties do telmero. A telomerase move-se no DNA e mais repeties so sintetizados no telmero. Aps isso, pode ocorrer replicao convencional com a produo de primer de RNA na ponta 5 do molde ampliado ou a ponta do molde ampliado pode dobrar-se sobre si mesma, formando uma alaterminal por pareamento no convencional de bases.Essa ala pode fornecer um grupo 3-OH para a ligao de nucleotdeos de DNA.

Resumindo e Comparando: A replicao do DNA, tanto em procariontes como em eucariontes, usa um mecanismo semiconservativo e emprega a sntese de filamentos de replicao contnua e descontnua. As diferenas mais bvias so que os eucariontes tm: 1) mltiplas origens de replicao,; 2) mais tipos de DNA plomerases, com funes diferentes; e 3) montagem de nucleossomos logo aps a replicao do DNA.