INTERNATO – SETOR: DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

ESTUDO DIRIGIDO - SEMANA 01

TEMA A SER REVISADO: CULTURA DE BACTÉRIAS

Nome: Cássia Kely Cadore

1) Culturas bacterianas são rotineiramente solicitadas em suspeitas de infecções no

trato urinário, principalmente de felinos. Explique quais cuidados devem ser
considerados para coleta, armazenamento e transporte de amostra urinária para
cultura bacteriana.
Coletar o material de forma asséptica, fazer a antissepsia do local de
coleta com álcool 70%, coletar por cistocentese, manter a amostra e encaminha-
la sob refrigeração (2ºC a 8ºC) por até 6 horas. Após este período a amostra
torna-se inapropriada para análise.

2) Uma das principais solicitações médico-veterinárias quando se trata de cultura

bacteriana é a cultura de leite. Explique como o material deve ser coletado para
que não haja contaminação do mesmo, e como deve ser feito o armazenamento e
transporte da amostra.
Primeiro é necessário a identificação dos tubos (os quais devem ser
esterilizados). Em seguida fazer a Limpeza dos tetos fazendo o pré-dipping e
secagem, feita a limpeza é hora da desinfecção com álcool 70%, passar gaze
com álcool 70% no orifício do teto, sempre na mesma direção. Na hora da coleta
desprezar 3 ou mais jatos de leite antes de coletar a amostra, após desprezar os
primeiros jatos, coleta a amostra. É recomendável que a coleta seja de jatos de
leite longos, e não é necessário encher o tubo todo. A amostra deve ser
armazenada imediatamente no gelo ou refrigerada. É aceitável mantê-las a cerca
de 4ºC por até 72 horas e quando for armazenar por mais tempo, é necessário
congelá-las.

3) As culturas bacterianas demoram alguns dias para serem processadas, levando

em consideração o crescimento das colônias e isolamento das mesmas. Qual
método pode ser utilizado para visualização de bactérias cujo resultado é mais
 rápido, principalmente em situações de suspeitas de infecções bacterianas
otológicas e dermatológicas? Cite suas etapas e tempo de ação de cada líquido
utilizado no processo.
O método é o exame citológico. Em infecções otológicas realiza o exame
citológico do exsudato ótico, o qual é coletado por um swab auricular no fundo
do canal do ouvido e quando apropriado, da cavidade do ouvido médio. No
exame citológico em casos de infecções bacterianas dermatológicas pode ser
realizado através do raspado, esfregaço (direto, por impressão ou com swab),
deve escolher o local em que esta acometido, fazer fricção com lamina de bisturi
até a pele ficar irritada, armazenar o material em laminas microscópica e deve
ser enviado para o laboratório em até 30 minutos.
Nesse exame o material coletado e colocado em uma lâmina com uma gota
de óleo mineral. Em seguida acrescenta solução de hidróxido de Potássio (KOH)
a 10% por 5 minutos, depois coloca uma lamínula sobre o material. O material
depois de colhido e seco é corado com o corante Diff-Quick e pós a coloração, a
lâmina é secada com papel absorvente e observada em microscópio óptico
(x100).

4) Qual a diferença entre T.S.A. e M.I.C.?

TSA significa teste de sensibilidade a antimicrobiano, que é o
antibiograma. Nesse teste tem o MIC que é a concentração mínima inibitória que
representa o diâmetro do halo de inibição, ou seja, é a concentração mínima de
antibiótico capaz de inibir o crescimento microbiano, o halo de maior diâmetro é
o indicado para tratar o paciente.

5) Como se faz a identificação das bactérias isoladas em uma cultura? Explique

sobre as provas realizadas para identificação das mesmas.
Na identificação de cocos Gram-Positivos realiza a prova de catalase,
observa a formação de bolhas colocando a colônia suspeita sobre uma gota da
agua oxigenada a 3%, a que forma bolhas é positiva, Staphylococcus spp., e a
que não forma bolhas é a Streptococcus spp. Em seguida para a identificação dos
Staphylococcus spp realiza a prova coagulase em tubo, a reação positiva é
indicada pela formação de coagulo no tubos após 24 horas de incubação a 37ºC,
 assim a positiva é Staphylococcus aureus e a negativa é Staphylococcus
coagulase negativo.

6) Sabe-se que é comum o uso indiscriminado de antibióticos. Quais cuidados você

deve ter enquanto médico veterinário para indicar um antibiótico? Caso o
paciente esteja fazendo uso de algum antimicrobiano, qual deve ser sua conduta
para avaliação da eficácia do mesmo?
O médico veterinário tem que indicar o antibiótico correto para tal
infecção, ou seja é necessário a realização de um antibiograma para saber
realmente se a infecção é causada por uma bactéria resistente ou sensível ao
antibiótico receitado, pois o uso indiscriminado de antibióticos sem necessidade
pode acabar causando uma resistência da bactéria dificultando e atrasando a
melhora do paciente. Caso paciente esteja utilizando algum antibiótico, o correto
é fazer um antibiograma para saber se o paciente precisa continuar ou não
usando o antibiótico ou se é necessário outro.

7) Como uma cultura bacteriana deve ser processada dentro de um laboratório?

Explique sobre os cuidados analíticos necessários para evitar contaminações
secundárias.
Há métodos simples, como a exposição de placas, em que utiliza a
placa de ágar Sabouraud, que deve ser exposta ao ar durante 15 minutos, para
que os microrganismos se depositem sobre o meio de cultura e tem também
outras formas como esfregar o swab na superfície que se quer, transferir o swab
para a placa de ágar nutriente, incubar a 37°C as placas de ágar nutriente e a
temperatura ambiente as placas de Sabouraud, é necessário em média 3 a 5 dias
pra ter o crescimento das bactérias. Todo recipiente com cultura ou meio estéril
deverá ser manuseado com cuidado de modo a não ficarem abertos e expostos ao
ambiente. Em caso de abri-los, é somente próximo ao bico de Bunsen em tempo
suficiente para a semeadura, colheita do material ou simples inspeção, sendo
assim uma forma de evitar contaminação por microrganismos do ar. Uma vez
semeados, devem ser incubados em estufas, as placas de Petri devem
permanecer com as tampas voltadas para baixo.