Procedimento de limpeza para colunas em fase reversa (C18 (ODS), EVO-C18,

XB-C18, C12, C8, C5, C4, C2, C1, Biphenyl, Phenyl-Hexyl, F5, PFP):

Caso note um aumento na pressão de trabalho, realize o procedimento de

limpeza. Para isso, remova o sistema de pré-colunas (cartucho + holder), inverta
a posição da coluna (exceto Kinetex de 1,3um ou colunas de quaisquer
outros fabricantes) e utilize uma taxa de fluxo reduzida, indicados na tabela
abaixo:

Diâmetro interno da coluna Taxa de fluxo

2,1mm 0,1mL/min
3,0mm 0,3mL/min
4,6mm 0,5mL/min

Percole de 10 a 20 volumes de colunas de cada passo:

1- 5:95 Acetonitrila/Água (ou Metanol/Água) para remoção do tampão

2- 95:5 Acetonitrila/Água (ou Metanol/Água)

3- Isopropanol

4- 95:5 Acetonitrila/Água (ou Metanol/Água)

5- 5:95 Acetonitrila/Água (ou Metanol/Água)

6- Equilibrar com a fase móvel ou com ~60:40 Acetonitrila/Água para

armazenamento

Para o cálculo do volume de coluna: Vc = 0,6 x π x (DI / 2)2 x L

DI= Diâmetro Interno da coluna, em cm

L= Comprimento da coluna, em cm

Por exemplo: 1 volume de coluna para 250x4,6mm é aproximadamente 2,50mL.

Para regeneração: utilize o mesmo gradiente do procedimento de limpeza acima

durante a noite em fluxo baixo.