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Aula 7 Profa. Dra Ilana L. B. C. Camargo Cincias Fsicas e Biomoleculares IFSC - USP
A escolha dos tipos de biorreator e bioprocesso tambm dependem da classificao do produto microbiano
Classificao do produto microbiano 1) Metablitos primrios (associados ao crescimento) Consistem nos compostos produzidos simultaneamente sntese de clulas microbianas na fase de crescimento. Neste caso, a formao do produto diretamente proporcional formao de biomassa. Ex.: Aminocidos, nucleotdeos, produtos finais de
A escolha dos tipos de biorreator e bioprocesso tambm dependem da classificao do produto microbiano
Classificao do produto microbiano
2) Metablitos secundrios
(no-associados ao crescimento) A formao do produto no est diretamente relacionada razo de crescimento de clulas. Usualmente acumulam durante o perodo de limitao de nutrientes ou de produtos residuais que segue aps fase ativa de crescimento. Estes compostos no tem relao direta com a sntese de materiais celulares e com o
A escolha dos tipos de biorreator e bioprocesso tambm dependem da classificao do produto microbiano
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo: Infinitas!!! -- Enorme flexibilidade de operao Formas mais bsicas: 1. 2. 3. Descontnuo Com um inculo por tanque Com recirculao de clulas Processo por meio de cortes
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo:
Processo
fermentativo
caracterizado
pela
inoculao
incubao de microrganismos, de tal forma, a permitir que a fermentao ocorra sob condies timas. Neste tipo de
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo:
Um inculo por tanque; Processo mais seguro quando se necessita manter as condies de assepsia
(esterilizao ao final de cada batelada);
Bioprocessos
Descontnuo simples batelada sem recirculao de clulas Sistema fechado e de volume constante. Na prtica dificilmente ser aplicado industrialmente Sua baixa eficincia estimula o surgimento das formas alternativas
Lquido fermentado
Processo Downstream
td
td = tc
tf
Fim da fermentao
Fim da carga
tc
td
Tempo
td = tempo necessrio para se descarregar um biorreator tc = tempo necessrio para se limpar e carregar um biorreator tf = tempo necessrio para que haja fermentao em um biorreator
td
td
tf
Fim da fermentao
Fim da carga
td
tf
Dorna/Biorreator D inicia seu funcionamento no instante (D-1) x td que igual ao instante td + tf D = nmero de dornas ou biorreatores (D-1) x td = td + tf F = Vazo mdia de lquido fermentado para tratamento final D = 2 + tf / td e ainda Td = V = Capacidade til de cada biorreator
Tempo
V/F
D = 2 + (F . tf / V)
Bioprocessos
Descontnuo simples batelada - Sem recirculao de clulas Vantagens: -Fcil operao; -Menor risco de contaminao;
Bioprocessos
Descontnuo com recirculao de clulas
H o reaproveitamento como inculo, o microrganismo da batelada anterior (comum em destilarias de lcool): Sedimentao no fermentador (cervejarias) Centrifugao do meio fermentado Tendncia em aumentar o nmero de contaminantes a cada nova batelada Leite de lvedo (suspenso altamente concentrada) com gua e cido sulfrico 2 a 3 h sob agitao: elimina contaminantes e clulas que j se apresentem em fase de degenerao
Bioprocessos
Descontnuo em processo por meio de cortes
out
Bioprocessos
Descontnuo em processo por meio de cortes
Bioprocessos
Descontnuo em processo por meio de cortes Desvantagens: I. Sucesso de cortes pode acarretar srias quedas no rendimento, principalmente quando se trabalha com meio no esterilizado II. O nmero de cortes sucessivos no pode ser previsto o controle do rendimento poder indicar em que momento deve-se suspender o trabalho por meio de cortes e se iniciar nova fermentao com inculo novo Experincia adquirida ao longo do tempo na indstria leva o pessoal a decidir quais modificaes que devem ser feitas no processo, aumentando, dia a dia, o rendimento e/ou a produtividade do mesmo
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo:
Formas mais bsicas: 1. 2. 3. Descontnuo Com um inculo por tanque Com recirculao de clulas Processo por meio de cortes
Bioprocessos
Semicontnuo sem recirculao de clulas
Adiciona-se o meio de fermentao e o inculo in 2 1 3
out
Operao 2
Retira-se parte do meio fermentado, mantendo-se, no reator o restante de mosto fermentado; Adiciona-se ao reator um volume de meio de fermentao igual ao volume de meio fermentado retirado anteriormente
Operao 3
Bioprocessos
Semicontnuo com recirculao de clulas
Quando o meio retirado do fermentador na operao 2, pode-se centrifug-lo e reaproveitar as clulas adicionando-as junto ao novo meio na operao 3
Meio + clulas
out
Bioprocessos
Semicontnuo Vantagens:
a) Possibilidade de operar o biorreator por longos perodos de tempo (meses) sem que seja necessrio preparar um novo inculo; b) Possibilidade condies de, de uma vez conhecidas conseguir as melhores
operao,
produtividade
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo:
Formas mais bsicas: 1. 2. 3. Descontnuo Com um inculo por tanque Com recirculao de clulas Processo por meio de cortes
Bioprocessos
Descontnuo alimentado Batelada alimentada (fed-batch)
Bioprocessos
Descontnuo alimentado Batelada alimentada Fed-batch
1 tcnica em processos microbianos, onde um ou mais nutrientes so adicionados ao fermentador durante o cultivo e em que os produtos ai permaneam at o final da fermentao. A alimentao do meio ou substrato pode ocorrer continuamente (1 etapa) ou em pulsos (vrias etapas).
Bioprocessos
Descontnuo alimentado Batelada alimentada (fed-batch) Vantagens: - Controle de oferta de substratos s clulas: 1) Permite alta concentrao de substratos indutores; 2) Impede o efeito de represso catablica (presena de alta concentrao de substrato inibe a sntese de compostos de interesse ocorre muito com enzimas e antibiticos); 3) Mantm baixa concentrao de substratos inibitrios para formao de produto (cido ctrico) Permite obteno de alta concentrao celular
Desvantagens:
Maior risco de contaminao Maior necessidade de controle do processo (adio nutrientes)
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo:
Formas mais bsicas: 1. 2. 3. Descontnuo Com um inculo por tanque Com recirculao de clulas Processo por meio de cortes
Bioprocessos
Contnuo
O meio adicionado de forma contnua e os produtos de fermentao tambm so continuamente removidos
Bioprocessos
-Contnuo sem recirculao de clulas
Bioprocessos
-Contnuo com recirculao de clulas
Bioprocessos
Contnuo Mais utilizados em bancada para desenvolvimento de processos, no so muito usados industrialmente So mais usados no tratamento de resduos onde no h preocupao com contaminao!!
Bioprocessos
Contnuo Vantagens -Maior produtividade volumtrica - Controle da velocidade de crescimento e manuteno da atividade metablica celular por longos perodos de tempo; -Menor perda de tempo til.
Bioprocessos
Contnuo Desvantagens
Bioprocessos
Formas de conduo de um processo fermentativo:
Formas mais bsicas: 1. 2. 3. Descontnuo Com um inculo por tanque Com recirculao de clulas Processo por meio de cortes
Bioprocessos
Pr-inculo
Biorreao Biorreatores
Inculo
Bibliografia
Schmidell W, Lima UA, Aquarone E, Borzani W. Biotecnologia Industrial: Engenharia Bioqumica. Volume 2. Ed Edgard Blcher LTDA, So Paulo, 2001. Cap. 8-12