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A espcie humana possui 22 tipos de cromossomos autossmicos (1 a 22) e dois cromossomos sexuais (X e Y). Enquanto as mulheres so XX os homens so XY. Acima est o caritipo de um homem. Todos os cromossomos esto duplicados.
A molcula de DNA formada por um acar, uma base nitrogenada e um grupo fosfato.
Extrao de DNA de morango Material necessrio 1-1 pedao de morango 2-Tubo eppendorf e palito de dente para macerar 3- Pipeta de plstico 4-Tampo de Extrao 5-Etanol 95% Procedimento: 1-Picar um morango em pequenos pedaos. 2-Colocar um pedao de morango em um tubo de eppendorf (at onde o tubo marca 0,5ml). 3-Macerar bem com um palito. 4-Adicionar 500 ul de Tampo de Extrao. Agitar vigorosamente o tubo eppendorf. 5-Colocar o tubo em banho-maria a 65C por 15 minutos. 6-Colocar o tubo eppendorf no gelo por 5 minutos. 7-Centrifugar por 8 minutos. 8-Recolher o sobrenadante para novo tubo eppendorf. 9- Adicionar lentamente pelas bordas do tubo, 2 vezes a quantidade do sobrenadante de etanol 95 % gelado.
Em 1923 o ingls Frederick Griffith identificou duas linhagens de bactrias que apresentavam colnias lisas (L) e outras de colnias rugosas (R). As bactrias lisas eram virulentas, enquanto as rugosas no. Griffith observou que, quando inoculava um rato com bactrias rugosas no virulentas juntamente com bactrias lisas virulentas mortas, o rato desenvolvia pneumonia, o que no era observado quando estas bactrias eram introduzidas no rato separadamente. O que ser que fazia com que as colnias R se tornassem virulentas? Foi essa mesma pergunta que Griffith fez a si mesmo. Ele chamou de princpio transformante, essa "coisa" que fazia com que as bactrias no virulentas virassem virulentas. Vrios grupos tentaram ento descobrir o que seria este princpio transformante. At os anos 40 do sculo XX, as protenas eram as grandes candidatas ao cargo de princpio transformante. J a substncia inicialmente chamada de nuclei (e mais tarde DNA) era algo que ainda no possua uma funo definida e que parecia, a princpio, ser uma molcula montona, formada sempre pelas mesmas 4 bases nitrogenadas, adenina, timina, guanina e citosina. J as protenas pareciam muito mais dinmicas, maiores e formadas por 20 aminocidos diferentes! E tambm j se sabia que elas eram os componentes estruturais das clulas, ou seja, os tijolos de todos os organismos.
Extrao de DNA de mucosa bucal. Material (por grupo): 1. 1 copo descartvel 2. 1 esptula 3. 15 mL de soluo de sacarose a 3% 4. Pipetas plsticas 5. 1 tubo de ensaio 6. l c o o l gelado etlico 8. Estante para tubos 9. Isopor com gelo 10.Micropipeta (500 L)
7. Banho 550C
Procedimento: 1. Higienizar a boca fazendo bochechos com gua ou, se possvel, escovando os dentes. 2- Colocar aproximadamente 15mL de gua com acar (3%, uma colher de ch de acar em meio copo descartvel). 3- Delicadamente raspar a mucosa bucal com uma esptula. 4- Bochechar vigorosamente por aproximadamente 30 segundos com a soluo utilizada no passo 2. 5- Recolher o volume obtido do bochecho no mesmo copo descartvel. Mergulhar a esptula usada na raspagem da mucosa no volume obtido do bochecho (Desta forma, coletaremos as clulas que ficaram na esptula). 6- Transferir 5 mL do volume obtido no passo 5 para um tubo de ensaio e adicionar uma pitada de sal de cozinha (para aproximadamente 1% final). Homogenizar invertendo o tubo. 7-Adicionar 500 L de detergente neutro diludo 25% (1:4) e homogeneizar vagarosamente. 8- Aquecer a 55oC por 10 min. Resfriar 5 min no gelo. 9- Adicionar lcool gelado (absoluto se possvel) lentamente, pelas bordas do tubo, com o auxlio de uma pipeta, at que se alcance pelo menos 1cm de altura. *Voc j poder observar a frao que corresponde ao seu DNA, insolvel no lcool, se formando no tubo. Se esperarmos mais um pouco, poderemos observar melhor. Responda s seguintes perguntas: 1- Por que o DNA tem o aspecto de novelo? 2- Como voc relacionaria os seguintes termos: DNA, cromossomo, alelo e gene? 3- Qual a funo da temperatura, do sal, do lcool e do detergente na extrao de DNA? 4- Compare os dois mtodos. Quais so as semelhanas e as diferenas?
Oswald Avary
Em 1944, Oswald Avary, junto com Colin MacLeod, conseguiu puricar o princpio transformante. Eles descobriram que o mesmo no se alterava quando submetido tripsina, uma enzima especializada em degradar protena. Por outro lado, quando em contato com enzimas que degradavam nuclei (DNA) o princpio transformante no era mais observado. Assim concluiu-se que o que fazia com que as bactrias de Grifth se tornassem virulentas era a transferncia do DNA das bactrias virulentas para as no virulentas, quando juntas eram utilizadas para infectar um rato. No entanto, ainda levaram mais alguns anos e experimentos para que a comunidade cientca aceitasse que o princpio transformante no cabia s protenas, mas sim ao cido nuclico.
Cracking the Human Genome Site baseado no programa da rede de televiso pblica dos EUA, PBS, com animaes sobre o sequenciamento do genoma humano. Muito bom! http://www.pbs.org/wgbh/ nova/genome/program_t_ qt.html#
Extrao de DNA de Kiwi Todo o processo de extrao de DNA de Kiwi, com todos os detalhes. Faa na sala de aula com seus alunos. http://www.biotech.iastate. edu/publications/lab_protocols/DNA_Extraction_Kiwi. html
Introduction to DNA structure Site contendo vrias imagens grficas sobre a estrutura qumica da molcula de DNA. http://www.blc.arizona. edu/Molecular_Graphics/ DNA_Structure/DNA_Tutorial.HTML
Extrao de DNA de tomate Protocolo passo a passo para a extrao de DNA de tomate http://ucbiotech.org/edu/ edu_aids/TomatoDNA.html
Gene Gateway-Exploring Genes and Genetic Disorders Esta pgina faz parte do site do Departamento de Energia (DOE) dos Estados Unidos, uma das principais agncias financiadoras do Projeto Genoma Humana. Nesta pgina voc poder clicar num dos cromossomos humanos e uma nova janela se abrir mostrando todos os genes conhecidos que esto associados doenas genticas. http://www.ornl.gov/ TechResources/Human_Genome/posters/chromosome/ chooser.html
Mas o que era esse misterioso nuclei? Como era a sua estrutura? Foi em 1953 que Watson e Crick propuseram a estrutura da molcula de DNA num pequeno artigo de duas pginas na renomada revista inglesa Nature. Para desvendar o mistrio, os dois cientistas utilizaram fotografias tiradas pela cientista Rosalind Franklin (sem a sua permisso). Uma verso em espanhol do artigo de Watson e Crick pode ser encontrada na pgina http://www.bioxeo.com/adn.htm A verso em ingls est disponvel no site da revista Nature no link http://www.nature.com/nature/dna50/watsoncrick.pdf
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