Manuteno das Cepas ATCC

Marins Dalla Valle Martino

Hospital Israelita Albert Einstein
Faculdade de Cincias Mdicas da Santa Casa-SP

ATCC
American Type Culture Collection
http://www.atcc.org/

ATCC

Reconstituir as cepas de acordo com as

orientaes do fabricante

Congelamento a longo prazo

1.repicar a cepa em gar sangue ( ou outro meio
em placa no seletivo)
2.incubar overnight em atmosfera adequada
3.repicar novamente*.
4.a partir desta semeadura, fazer um inculo bem
pesado em um tubo contendo 10 ml de caldo
Brucella com 15% de glicerol*.

Congelamento a longo prazo

5. agitar (15 a 20 s.)
6. Dispensar aproximadamente 1 ml em
10 frascos.
7.congelar a 60 C* ou menos por at 3
anos*.

Congelamento a longo prazo

A. Alguns microrganismos conseguem sobreviver e
manter suas caractersticas de sensibilidade
antimicrobiana por mais tempo.
B.Alguns so mais sensveis ao congelamento
(Streptococcus pneumoniae e Neisseria
gonorrhoeae )
C. Para alguns necessrio adicionar
antimicrobiano: penicilina para N.gonorrhoeae
produtora de penicilinase ( 1g/ml).

Recomendaes - NCCLS
Armazenamento prolongado: -20C ou abaixo.
(-60 C ou nitrognio lquido)
Meios para armazenamento: caldo com soro
fetal 50%, TSB com 15% de glicerol, sangue de
carneiro desfibrinado ou leite desnatado.

Recomendaes - NCCLS
Meios para controle culturas em uso : TSA ou
gar chocolate (fastidiosos), 2-8 C e
subcultivada semanalmente por no mais de 3
semanas sucessivas.
Cepas congeladas devem ser cultivadas pelo
menos por 2 vezes antes do teste

Recomendaes - NCCLS
Cuidados especiais para cepas
E.coli ATCC 35218
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Risco para perda de plasmdeos

Descongelamento
Retirar material da superfcie- sem descongelar.
Qdo descongelar no retornar o frasco para o
freezer
Programar frascos para perodos >s

Recomendaes
Testar pureza da cepa.
Anexar identificao.
Identificao adequada.

Opes
Meios Comerciais.

Tempo de preservao
10 a : em freezer -70C
Fastidiosos: < tempo
-20C: < tempo
Frost free: no

Isemberg HD- Clinical Microbiology Procedures Haandbook- 2.ed,

2004.

NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY

STANDARDS - Performance Standards for Antimicrobial Disk
Susceptibility Tests.; Approved Standard, Eighth Edition, M2-A8 2003.

NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY

STANDARDS Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria
that Grow Aerobically; Approved Standard, Sixth Edition, M7-A6, 2003