Clonagem gnica

Clonagem do gene da preproinsulina (PPI)

Insulina: controle dos nveis de glicose no
sangue, metabolismo
De aucares, protenas e lipdeos

Preproinsulina: 110 a.a

Peptdeo sinal, cadeia A, B e C
Proinsulina: remoo do peptdeo sinal para localizao no]
Retculo Endoplasmtico
Insulina: 51 a.a.
clivagem enzimtica do peptdeo C, formao de pontes
dissulfeto.

Expresso recombinante de genes

bactrias

protenas recombinantes
produo de vacinas recombinantes
produtos de interesse farmacutico
produtos de interesse industrial

leveduras
clulas eucariticas em cultura
plantas
animais

Obteno do
Fator de
crescimento de
granulcitos (GCSF)
recombinante
em bactrias

Extrato total proteico de bactrias separado em SDSPAGE

no induzidas
Protena de
70kDa
recombinante

induzidas com IPTG

Obteno de insulina
recombinante

Obteno de camundongos
transgnicos
-gerao de linhagens modelos para
estudo para pesquisa
Transgene: pode estar sobre
controle de um promotor induzvel

10-30% sobrevivncia
Transgene integrado em clulas
somticas e germinativas

hGH

Ovelhas transgnicas:
Produo de protenas
recombinantes no leite

hGH = hormnio do crescimento humano

Expresso de toxinas em
plantas transgnicas