Aula prtica 1 CARACTERIZAO DE PROTENAS POR MEIO DE REAES DE PRECIPITAO Objetivos Verificar experimentalmente a precipitao de protenas com e sem

em desnaturao Relacionar as observaes prticas com a teoria de propriedades gerais. Estrutura e isolamento de protenas

I. INSTRUES PARA O PREPARO DA AULA 1. Materiais - 3 tubos de ensaio - 1 pipeta 1 mL - 1 pipeta 2 mL - 4 pipetas 5 mL - 1 bquer 50 mL - 1 basto de vidro - 1 pipeta Pasteur 2. Reativos - Soluo de protenas a 10% (disponibilizar em frasquinhos, 1 para cada equipe) - lcool etlico absoluto (disponibilizar em frasquinhos, 1 para cada equipe) - Clara de ovo in natura - Cloreto de sdio 1 mol/L (disponibilizar em frasquinhos, 1 para cada equipe) - Soluo saturada de sulfato de amnio 76,6g% p/v (disponibilizar em frasquinhos, 1 para cada equipe) 3. Preparo dos reativos 1. Soluo de protenas: prepara um soluo de clara de ovo a 10% v/v em soluo salina (NaCl 0,9g/mL) ou tampo fosfato 10 mol/L pH 7,0. 2. Soluo saturada de sulfato de amnio: pesar 76,6 g de sulfato de amnio em 100 mL de gua. II. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL A. Reao com solventes orgnicos Tubo 1: 1 mL de protenas a 10% + 3 mL de lcool etlico. Anotar o resultado. A. Efeito da adio de sais Tubo 2 (bquer 50 mL): 3 mL de clara in natura + 2 a 3 mL de gua destilada. Agitar com o basto de vidro at a formao de um precipitado esbranquiado. Dissolver com o auxlio de um basto adicionar Nacl 1 mol/L gota a gota at o precipitado redissolver. Tubo 3: 2 ml da soluo anterior + 4 mL da soluo saturada de sulfato de amnio. Observar. Adicionar 4 a 6 mL de gua destilada e observar o efeito.