PROCEDIMENTO OPERACIONAL

PADRO (POP)
N 01
REVISO:
00

CLORETOS - LABTEST

PGINA
01/04

1. FINALIDADE
Sistema para a determinao colorimtrica de cloretos em amostras de soro,
plasma, urina e lquor atravs de reao de ponto final.

2. PRINCPIO
Os ons cloreto presentes na amostra reagem com tiocianato de mercrio
formando cloreto de mercrio e ons de tiocianato. Os ons tiocianato quando
combinados com os ons frrico formam tiocianato frrico, de colorao amarela com
intensidade proporcional concentrao de cloretos.

3. SIGNIFICADO CLNICO
Hipocloremia
Fibrose Cstica
Diureses Macias
Hiperfuno Adrenocortical

4. INFLUNCIAS PR-ANALISTICAS
Concentrao de Bilirrubina at 38mg/dL, Hemoglobina at 180mg/mL e
Triglicrides at 1800 mg/dL no produzem interferncias significativas.
Concentraes de Triglicrides acima de 1800 mg/dL produzem resultados falsamente
elevados. Neste caso o bando de amostra no aplicvel.
Para avaliar a concentrao aproximada de hemoglobina em uma amostra hemolisada
pode-se proceder do seguinte modo: Diluir 0,05 mL da amostra em 2,0 mL de NaCl 150
mmol/L (0,85%) e medir a absordncia em 405 ou 415 nm, acertando o zero com gua
deionizada ou destilada.
Hemoglobina (mg/dL) Absordncia
405
x 601
Hemoglobina (mg/dL) Absordncia
415
x 467

5. AMOSTRAS
Preparo do paciente
No aplicvel.
Amostras utilizadas
Usar soro ou plasma, urina e lquor.
Os anticoagulantes EDTA, Oxalato, Citrato e Heparina.
Estabilidade e armazenamento da amostra
O plasma e o soro devem ser separados at 1 hora aps a coleta.
estvel durante 7 dias na temperatura 15-25C e vrios meses a -10C.

6. METODOLOGIA
Labtest

7. REAGENTES
1) Reagente de Cor Armazenar entre 15-30C



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O reagente pode apresentar precipitado em temperaturas inferiores a 15C. Neste
caso, aquecer a 37C e agitar at a dissoluo completa. Manusear com cautela: reagente
txico. No pipetar com a boca. Contm tiocianato de mercrio 2 mmol/L; nitrato
frrico 17 mmol/L e cido ntrico 30 mmol/L.
2) Ativador Armazenar entre 15-30C
Contm nitrato de mercrio 1,1 mmol/L e cido ntrico 0,9 mmol/L.
3) Padro 100 mEq/L Armazenar entre 15-30C.
Aps o manuseio sugere-se armazenar bem vedado para evitar evaporao.
Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies indicadas, so
estveis at a data de expirao impressa no rtulo. Durante o manuseio os reagentes
esto sujeitos a contaminao de natureza qumica e microbiana que podem provocar
reduo da estabilidade.

8. CURVA DE CALIBRAO
No aplicvel.

9. LINEARIDADE
O resultado de medio linear entre 70 e 130 mEq/L. para valores maiores,
diluir a amostra com gua destilada ou deionizao, realizar nova medio e multiplicar
o resultado obtido pelo fator de diluio.

10. CONTROLE DE CALIBRAO
Utilizao de amostras controles com valor:
situado na faixa de referncia (nvel de deciso)
e
em outra faixa de significncia clnica

11. MATERIAIS NECESRIOS
1) Fotmetro capaz de medir, com exatido, absorbncia entre 450 e 510nm.
2) Pipetas para medir amostras e reagente volume: 3,5mL; 0,1mL e 0,01mL.
3) Cronmetro.

12. PROCEDIMENTO TCNICO
Soro, plasma e lquor.
Urina: diluir amostra 1:2 com gua deionizada. Multiplicar o resultado obtido
por 2.
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padro
Reagente de Cor (n 1) 3,5 mL 3,5 mL 3,5 mL
Ativador (n 2) 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL
Amostra ----- 0,01 mL -----
Padro (n 3) ----- ----- 0,01 mL




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Misturar e esperar 2 minutos. Determinar as absorbncias do teste e padro em
470 nm ou filtro verde-azul (450 a 500), acertando o zero com o branco. A cor estvel
por 2 horas.
O procedimento sugerido para a medio adequado para fotmetros cujo
volume mnimo da soluo para leitura igual ou menor que 3,6 mL. Deve ser feita
uma verificao da necessidade de ajuste do volume para o fotmetro utilizado. Os
volumes de amostra e reagente podem ser modificados proporcionalmente sem prejuzo
para o desemprenho do teste e o procedimento de clculo se mantm inalterado. Em
caso de reduo dos volumes fundamental que se observe o volume mnimo
necessrio para a leitura fotomtrica. Volumes da amostra iguais ou menores que 0,01
mL so crticos em aplicaes manuais e devem ser usados com cautela porque
aumentam a impreciso da medio.

13. CLCULO
(

)
(

14. INTERVALO DE REFERNCIA
Soro ou plasma (todas as idades): 97 a 106 mEq/L
Urina: 170 a 254 mEq/24horas
Lquor: 118 a 132 mEq/L

15. REFERNCIAS
Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Philadelphia:
Saunders Company, 1994; 1366-1367.
Schales O, Schales S. J Biol Chem 1941;140:879.
Skeggs L. Metodologia Technicon.
Tonks DB. Quality Control in Clinical Laboratories, Warner-Chilcott
Laboratories, Diagnostic Reagents Division, Scarborough, Canada, 1972. Zall
DM, Fischer D, Garner, MQ.Anal Chem 1956; 28:1665.
Zall DM, Fischer D, Garner, MQ.Anal Chem 1956; 28:1665.
Westgard JO, Barry PL, Hunt MR. Clin Chem 1981; 27: 493-501.
Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular, Base de Dados
de Variacin Biolgica. Disponvel em:
<http://seqc.es/article/articleview/330/1/170> (acesso em 04/2006)
Basques JC. Especificaes da Qualidade Analtica. Labtest Diagnstica 2005.
Labtest: Dados em Arquivo.



PROCEDIMENTO OPERACIONAL
PADRO (POP)
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REVISO:
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CLORETOS - LABTEST

PGINA
04/04

16. APROVAO



__________________________________________ Data:___/___/___
SETOR TCNICO: Larissa Mendes de Souza




____________________________________________ Data: ___/___/___
RESPONSVEL TCNICO: Fernanda Diniz de Sousa





______________________________________________ Data: ___/___/___
GERENTE DE QUALIDADE: Prof M. Dora Lcia Carrara Moreti