AUTO-HEMOTERAPIA EM CES

Brulio Pgo de Faria1; Patricia do Rosario Rodrigues2; Rewan dos Anjos

Calazans3; Priscila Cortizo Costa4;
1
Mdico Veterinrio, Mestrando Programa de Ps-graduao em Cincias
Veterinrias, Universidade Federal do Esprito Santo, CCA-UFES, Alto Universitrio
S/N. CEP 29500-000, Alegre, Esprito Santo, Brasil- email:
braulio_faria@hotmail.com.
2
Zootecnista, Doutoranda do Programa de Ps-graduao em Zootecnia,
Universidade Federal de Lavras - UFLA, Lavras-MG.
3
Mdico Veterinrio autnomo.
4
Mdica Veterinria Professora do Instituto Federal de Educao, Cincia e
Tecnologia do Esprito Santo IFES-Campus Alegre
Recebido em: 30/09/2014 Aprovado em: 15/11/2014 Publicado em: 01/12/2014

RESUMO
A auto-hemoterapia, tambm conhecida como terapia do soro, imunoterapia, autohemotransfuso ou transfuso de sangue autlogo, uma prtica que vem
crescendo em clnica mdica veterinria, porm, se trata de um procedimento
teraputico sem comprovao cientfica, por no existirem muitos estudos clnicos
que comprovem os seus resultados benficos. Este trabalho teve como objetivo
aumentar o conhecimento sobre o efeito da auto-hemoterapia na srie leucocitria
em geral. Os animais amostra foram animais domiciliados onde o sexo no foi
critrio para seleo, clinicamente saudveis com peso na faixa entre 9 e 16 kg e
ficaram sob custdia dos prprios donos durante o experimento. O sangue dos
animais utilizados na pesquisa, foi coletado no volume de 4 mL atravs de puno
de vasos perifricos e inoculado imediatamente na face lateral da coxa do animal. A
pesquisa se baseou na realizao da auto-hemoterapia uma nica vez por animal,
realizando-se o exame clnico, pesagem e coleta de sangue para anlise laboratorial
e avaliao dos animais antes da inoculao do sangue. O sangue foi coletado de
cada animal antes da realizao da auto-hemoterapia (AHT), 24 horas aps e sete
dias aps, para anlises. Ao final da avaliao dos resultados chegou-se
concluso de que a auto-hemoterapia (AHT) tem uma influncia positiva na
contagem leucocitria total e mais especificamente bastes, neutrfilos, eosinfilos e
principalmente moncitos.
PALAVRAS - CHAVE: auto-hemoterapia, ces, leucometria.
AUTO-HEMOTERAPY IN DOGS
ABSTRACT
Auto-hemotherapy is also known as serum therapy, immunotherapy, auto-transfusion
of autologous or blood transfusion is a practice that is increasing in clinical veterinary
medicine, however, it is a therapeutic procedure without scientific evidence, because
there are not many clinical studies to prove its beneficial results. This study aimed to
increase knowledge about the effect of this therapeutic technique in the leukocyte
series in general. The sample animals were animals domiciled, where sex was not a
criterion for selection, clinically healthy, weight in the range between 9kg and 16kg
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and there custody were due their owners during the experiment. The amount of 4 ml
of blood was collected from the animals through a puncture in peripheral vessels and
inoculated immediately in the lateral thigh of the animal. The research was based on
the realization of auto-hemotherapy one time only per animal, been done clinical
examination, weighing and blood sampling for laboratory analysis of the animals
before the inoculation of autologous blood and before each blood sample for
analysis. Blood was collected from each animal prior to the auto-hemotherapy, 24
hours and seven days later for analysis. At the end of the evaluation of the results,
the conclusion was that auto-hemotherapy (AHT) has a positive influence on the total
leukocyte count, and rates increased after the procedure, specifically bats,
neutrophils, eosinophils and mainly monocytes.
KEYWORDS: auto-hemotherapy, dogs, leukocyte exam
INTRODUO
A auto-hemoterapia um procedimento antigo que se baseia no empirismo,
onde o tratamento consiste em aplicaes do sangue autlogo, por via
intramuscular, objetivando estimular o sistema imunolgico, potencializando a sua
ao por meio da ativao do Sistema Mononuclear Fagocitrio (SMF)
(METTENLEITER, 1936).
tambm conhecida como a terapia do soro, imunoterapia, autohemotransfuso ou transfuso de sangue autlogo, SHAKMAN (2010), e consiste
em uma prtica que vem crescendo em clnica na medicina veterinria, porm, se
trata de um procedimento teraputico sem comprovao cientfica, por no existirem
muitos estudos clnicos que comprovem os seus resultados benficos.
A retirada de sangue venoso e a sua re-injeo intramuscular um
procedimento que tem o seu primeiro registro em 1911. Francois Ravaut, nomeou
como auto-hemoterapia, sendo utilizado em diversas enfermidades como febre
tifide e algumas dermatoses (SILVA, 2006).
Consta na escassa literatura existente sobre o assunto, que a prtica foi
introduzida como tentativa teraputica por Ravaut, e desde ento, tem sido utilizada
em diversas patologias, tanto no homem quanto em animais (LEITE, 2008). Calculase que hoje, cerca de 10 milhes de pessoas faam uso da auto-hemoterapia,
apesar da proibio por meio da Anvisa (Agencia Nacional de Sade) conforme
relatado por MATA (2009).
SMELTZER & BARE (2005) descrevem que o SMF compreende macrfagos
com intensa capacidade de fagocitar. Quase todos os tecidos, rgos e cavidades
serosas abrigam uma populao de fagcitos residentes, independente da
localizao ou de seu aspecto, todos esses fagcitos associados aos tecidos
pertencem a uma nica linhagem, conhecida como SMF, e so originadas do
moncito, um leuccito da circulao sangunea.
Cresce o nmero de usurio e tambm a lista de doenas que podem ser
tratadas com a auto-hemoterapia, tanto em humanos como em animais. Os
antibiticos tm seu campo de ao quase que limitado s doenas bacterianas,
enquanto que a imunoterapia especfica e inespecfica abrange horizontes bem
amplos, quase no restando nenhum campo da patologia humana em que a
imunologia no tenha maior ou menor participao em seus mecanismos
patognicos (BACAL et al., 2006).
Desta forma esta pesquisa teve como objetivo avaliar sistematicamente, o
hemograma dos sete animais amostra da pesquisa, tendo como foco maior o
resultado de leucograma, e assim avaliando de forma geral a variao das taxas
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leucocitrias, anterior a aplicao, com 24h e sete dias aps realizao do

procedimento.
MATERIAL E MTODOS
Para este experimento utilizou-se sete animais da espcie canina sendo
quatro da cidade de Alegre ES, dois de Vila Velha ES e um de Aracruz ES. Os
animais tratados eram domiciliados, clinicamente saudveis, com peso na faixa de 9
kg a 16kg, no qual o sexo no foi critrio para seleo e ficaram sob custdia dos
prprios donos durante o experimento.
Para realizao da auto-hemoterapia, o sangue foi coletado atravs de
puno de um dos vasos perifricos utilizando seringa de 5mL e agulha 25x7
descartveis. Foram colhidos 4 mL de sangue e sem nada acrescentar a este, foi
inoculado imediatamente na face medial proximal do membro plvico esquerdo do
animal.
Realizou-se a auto-hemoterapia uma nica vez por animal, realizando o
exame clnico, pesagem dos animais antes de cada coleta para realizao de trs
exames hematolgicos (antes da auto-hemoterapia, 24 horas e sete dias aps).
Para realizao das anlises laboratoriais, foi utilizada seringa de 5 mL com
agulha 25x7 para coleta, onde o sangue foi dispensado em tubo hematolgico
contendo EDTA. O transporte para o laboratrio foi realizado com a utilizao de
caixa isotrmica contendo gelo reutilizvel rgido, sem contato direto com as
amostras. Os exames foram realizados com no mximo oito horas aps a colheita.
Leucometria global quantifica leuccitos por milmetros cbicos e no h
separao dos tipos leucocitrios (LIMA et al., 1997). O sangue foi diludo em
eppendorf na proporo de 10l de sangue para 190l de soluo de Turk. Aps
alguns minutos de agitao, a soluo foi colocada em cmara de Neubauer para
contagem do nmero total de leuccitos em microscpio.
A leucometria especfica realiza a diferenciao dos tipos de leuccitos (LIMA
et al., 1997), e foi realizada depositando uma amostra de sangue em lmina, sendo
feito imediatamente o esfregao sanguneo. Aps a secagem foi submetida
colorao com o kit Pantico. Seguido desse procedimento, as lminas foram
analisadas em microscpio ptico para a diferenciao das clulas brancas do
sangue.
RESULTADOS E DISCUSSO
O volume total de sangue de 6 a 8% do peso vivo do animal de modo geral,
aproximadamente 25% do volume total de sangue pode ser retirado, sem prejuzo
ao animal, tendo como base o peso inicial dos mesmos (CUBAS et al., 2006).
Analisando o hemograma dos animais antes da aplicao da autohemoterapia, tendo como complemento o exame clnico, observa-se que os animais
estavam sadios, sem processos infecciosos, alrgicos ou inflamatrios.
Realizou-se a comparao entre os resultados dos exames dos animais para
avaliao da ao da auto-hemoterapia quanto aos efeitos nos nveis de leuccitos
presentes na corrente sangunea. Trabalhos com auto-hemoterapia em medicina
veterinria foram utilizados para comparao entre os animais hgidos pertencentes
a este trabalho.
Diferentemente de SANTIN & BRITO (2004), os quais realizaram experimento
utilizando diretamente a auto-hemoterapia como tratamento no caso de
papilomatose bovina onde demonstraram que este tratamento foi eficaz em 50% dos
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casos, porm no realizaram a quantificao celular como foi realizada no presente

trabalho.
Os exames realizados com 24 horas e sete dias aps a inoculao do sangue
autgeno foram realizados para conferir se durante o procedimento de autohemoterapia houve alguma contaminao de cunho bacteriano o que teria gerado
um incio de resposta celular e/ou uma reao de hipersensibilidade causado por
algum fator externo (TIZARD, 2002).
A mdia do nmero de hemcias de todos os animais antes do experimento
foi de 6,4 1,13 x106/L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi de 6,4
1,12 x106/ L apresentando diminuio dos valores aps sete dias com a mdia de
6,3 1,14 x106/L (Figura 1).

Animai
x106/

FIGURA 1. Hematimetria antes, 24 horas e 7 dias aps a auto-hemoterapia dos

sete animais do experimento
No entanto pelo teste Anova (teste de anlise de varincia) no houve
diferena significativa entre os trs momentos da coleta de sangue. Na reviso de
literatura no se encontrou nenhum trabalho que fornecesse valores individuais ou
contagem total de hemcias, impossibilitando a comparao. Com os atuais
resultados pode-se afirmar que no houve modificao na hematopoiese dos
animais que foram submetidos a hemoterapia nesse experimento.
Quanto aos valores mximos e mnimos hematimtricos os animais
apresentaram mnimos de 5,9 x 106/L; 5,9 x 106/L; 5,1 x 106/L e mximos de 8,2
x106/L; 8,0 x106/L; 8,0 x106/L para antes, 24 horas e sete dias aps a autohemoterapia respectivamente.
A mdia do nmero de leuccitos de todos os animais antes do experimento
foi de 9,2 1,43 x103/L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi de 9,4
1,35 x103 / L apresentando aumento dos valores aps sete dias com a mdia de
12,0 1,18 x103/L (Figura 2).

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x103 /

Animais

FIGURA 2. Leucometria global antes, 24 horas e 7 dias aps a auto-hemoterapia

dos sete animais do experimento.
Como observado na Figura 2, o nmero de leuccitos apresenta-se em aclive
no valor da leucometria em todos os animais do experimento, mas principalmente
dos valores antes da auto hemoterapia quando comparado com sete dias aps da
terapia. Este fato est comprovado pelo teste de Friedman cujos resultados
apresentaram diferenas significativas para 5%.
Quanto aos valores mximos e mnimos da leucometria global dos animais
foram mnimos de 4,8 x103/L; 5,9 x103 /L e 10,0 x103/L e mximos de 15,0
x103/L; 15,1 x103/L; 16,3 x103/L para antes, 24 horas e sete dias aps a autohemoterapia respectivamente.
METTENLEITER (1936) descreve que a administrao intramuscular de
sangue autgeno, tem efeito estimulante sobre o sistema mononuclear fagoctico e
SOUZA (2009) reporta que, em seu experimento aps sete dias as taxas
leucocitrias comearam a reduzir os valores, tendo este tempo como pice da
contagem de leuccitos. Este fato foi comprovado e demonstrado no presente
trabalho (Figura 2) referente a leucometria global.
A mdia do nmero de bastes (neutrfilos jovens) antes do experimento foi
de 93 12,7 /L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi de 94 14,9 /
L, apresentando aumento dos valores aps sete dias com a mdia de 300
11,6/L (Figura 3).

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Animais
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FIGURA 3. Valores absolutos de Bastes (neutrfilos) antes, 24 horas e 7 dias aps

a auto-hemoterapia dos sete animais do experimento.
Como observado na Figura 3, o nmero de bastes apresenta-se em aclive
no valor absoluto de bastes em todos os animais do experimento, com exceo do
animal um, que apresentou valor zero para o resultado do exame aps sete dias.
Esta diferena est comprovada pelo teste de Friedman cujos resultados
apresentaram diferenas significativas para 5%.
Analisando a Figura 3 observa-se que houve variao individual entre os
animais, no entanto a variao de zero a 300 clulas/L considerada normal por
THRAL et al., (2007), REBAR et al., (2003) e FELDMAN et al., (2000) tendo os
animais 2, 5 e 7 apresentando valores maiores que os de referncia.
MEYER (2003) obteve um resultado parecido quando analisando os valores
absolutos de bastes, aps iniciar o tratamento observou que em 80% dos animais
tratados com auto-hemoterapia houve aumento dos bastonetes durante a semana
seguinte, sugerindo que este aumento ocorreu devido a estmulo na produo das
clulas de defesa. Assim neste trabalho a variao no nmero de bastes pode ter
ocorrido pelos mesmos motivos que no experimento conduzido por MEYER (2003).
A mdia do nmero de neutrfilos de todos os animais antes do experimento
foi de 6072.714 1999.836/L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi
de 5740.714 2035.864/L apresentando aumento dos valores aps sete dias com
a mdia de 7271.42 1542.557/L (Figura 4).

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Animais
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FIGURA 4. Valores absolutos de neutrfilos antes, 24 horas e 7 dias aps a autohemoterapia dos sete animais do experimento.
Como observado na Figura 4 ela apresenta-se em relativo aclive no valor
absoluto de neutrfilos em todos os animais tratados quando comparados aos
resultados dos exames antes e sete dias aps da terapia, com exceo do animal
trs que demonstrou valor absoluto de neutrfilos maior antes da auto-hemoterapia.
Este fato est comprovado pelo teste de Friedman cujos resultados apresentaram
diferenas significativas para 5%.
Na reviso de literatura no se encontrou trabalho com animais da espcie
canina que fornecesse valores individuais ou contagem total de neutrfilos, em
animais submetidos a auto-hemoterapia, impossibilitando a comparao direta.
Porm SILVA et al. (2009) mostraram em seu trabalho com ratos Wistar (Rattus
norvergicus albinus) que este aumento pode ser por influncia do processo
inflamatrio ocorrido no local da aplicao. Durante o processo inflamatrio inicial os
neutrfilos j presentes na corrente sangunea foram mobilizados, nas 24 horas
aps, a queda na quantidade pode-se explicar pelo tempo de maturao de
neutrfilos jovens, os bastes, que aps totalmente maturados, foram encontrados
na circulao aos 7 dias, como neutrfilos. Com os atuais resultados pode-se afirmar
que houve modificao na cintica dos leuccitos nos animais que foram submetidos
auto-hemoterapia nesse experimento.
A mdia do nmero de linfcitos de todos os animais antes do experimento foi
de 2110.14 492.55 /L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi de
2030.28 441.60/L apresentando aumento dos valores aps sete dias com a
mdia de 2339.42 362.75/L (FIGURA 5).

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Animais
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FIGURA 5. Valores absolutos de Linfcitos antes, 24 horas e 7 dias aps a autohemoterapia dos sete animais do experimento.
Segundo o teste estatstico de Friedman (p) foi igual a 0,3679, ou seja maior
que 0,05 sendo considerado no significativo, ou seja, no houve variao
significativa da mdia do nmero de linfcitos.
Na reviso de literatura no se encontrou nenhum trabalho que fornecesse
valores individuais ou contagem total de linfcitos, em animais submetidos a autohemoterapia, impossibilitando a comparao. Com os atuais resultados estatsticos
pode-se afirmar que no houve modificao relevante na hematopoese dos animais
que foram submetidos a auto-hemoterapia nesse experimento
A mdia do nmero de eosinfilos de todos os animais antes do experimento
foi de 811.8571 492.15 /L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi
de 979.2857 499.31/L apresentando aumento dos valores aps 7 dias com a
mdia de 1531.143 486,33/L (Figura 6).

Animais
x103 /

FIGURA 6. Valores absolutos de eosinfilos antes, 24 horas e 7 dias aps a autohemoterapia dos sete animais do experimento.
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Como observado na Figura 6 ela apresenta-se em relativo aclive do valor

absoluto de eosinfilos em todos os animais do experimento quando comparados os
resultados dos exames antes e sete dias aps da terapia, com exceo do animal
cinco que demonstrou valor absoluto de eosinfilos maior antes da auto-hemoterapia
e 24 horas aps e no aos sete dias como os demais. Isso pode ter acontecido por o
animal ficar, durante o experimento, aos cuidados do proprietrio, sendo o ambiente
um fator importante. No ambiente no controlado o animal pode ter sido exposto a
algum alrgeno pouco antes do tratamento, elevando discretamente numero de
eosinfilos. Este fato est comprovado pelo teste de Friedman cujos resultados
apresentaram diferenas significativas para 5%.
Na reviso de literatura no se encontrou nenhum trabalho que fornecesse
valores individuais ou contagem total de eosinfilos, em animais submetidos a autohemoterapia, impossibilitando a comparao. Com os atuais resultados pode-se
afirmar que houve modificao na hematopoiese dos animais que foram submetidos
a hemoterapia nesse experimento.
A mdia do nmero de moncitos de todos os animais antes do experimento
foi de 536.57 326.39/L enquanto que aps 24 horas da auto-hemoterapia foi de
572.42 319.03/L apresentando aumento dos valores aps 7 dias com a mdia de
875 396.26/L (Figura 7).

Animais
x103 /

FIGURA 7. Valores absolutos de Moncitos antes, 24 horas e 7 dias aps a autohemoterapia dos sete animais do experimento.
Como observado na Figura 7 ela apresenta-se em relativo aclive do valor
absoluto de moncitos em todos os animais do experimento quando comparados os
resultados dos exames antes e 7 dias aps da terapia, com exceo do animal trs
que demonstrou valor absoluto de moncitos maior antes da auto-hemoterapia e no
aos 7 dias como os demais. Apesar do animal estar clinicamente sadio e os exames
laboratoriais estarem dentro dos padres de normalidade, o animal trs pode ter tido
alguma ferida de pele j cicatrizando, por exemplo, a qual mobilizou uma quantidade
maior de moncitos para o tecido, o qual passam a se chamar macrfagos, e
moncitos jovens foram recrutados para a corrente sangunea, gerando a pequena
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alterao nos valores. Este fato est comprovado pelo teste de Friedman cujos
resultados apresentaram diferenas significativas para 5%.
Tendo os resultados apresentados em forma de grficos, comparado com
LEITE, et al. (2008) sugerem que realmente acontece uma reao na resposta
imune ao se realizar auto-hemoterapia, porm no se tm descrito na literatura as
razes, nem como ocorre essa resposta. MATA (2009) relatou em seu trabalho que
as clulas de resposta imune que mais seriam afetadas na auto-hemoterapia seriam
os moncitos que aps ativados em seus tecidos se transformam em macrfagos.
Sabendo-se que quando o organismo acometido por algum patgeno a sua
primeira linha de defesa a resposta imune fagoctica. Esta resposta se caracteriza
pela capacidade de alguns tipos de leuccitos de chegar a leso e combater os
agentes infecciosos atravs da fagocitose, que a ingesto dos patgenos. Quase
todos os tecidos, rgos e cavidades serosas abrigam uma populao de fagcitos
residentes, independente da localizao ou de seu aspecto, todos esses fagcitos
associados aos tecidos pertencem a uma nica linhagem e so originadas de um
leuccito circulante, denominado moncito (SMELTZER & BARE, 2005).
Segundo STITES et al., (2004), sempre que os macrfagos se deparam com
certos mediadores da inflamao, sinais de leso tecidual, contato direto com certos
microrganismos ou partculas inertes, contato com produtos de degradao do
tecido do hospedeiro ou com componentes proticos do sistema complemento ou do
sistema da coagulao sangunea, a clula passa por um processo citado como
ativao do macrfago, que se particulariza por um rpido aumento de seu
metabolismo, mobilidade e atividade fagoctica.
Ento o aumento de valores absolutos de moncitos apresentados pelos
animais da pesquisa pode ser inerente a esta ativao por contato direto com
componentes proticos do sistema complemento ou do sistema da coagulao
sangunea, uma vez que durante o procedimento foi injetado sangue total na
musculatura do animal.
CONCLUSO
Na avaliao dos resultados do presente trabalho concluiu-se que com a
auto-hemoterapia a contagem leucocitria total aumentou, mais especificamente sob
os bastes (neutrfilos jovens), neutrfilos, linfcitos, eosinfilos e mais
significativamente nos moncitos.
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