Universidade Federal de Santa Catarina

Disciplina: Bioquímica I
Professora: Flávia
Equipe: Arthur Borges
Carlos Willian
Cristine Bez
Fabiana Seidler

Relatório – Aula prática de aminoácidos

 Introdução:
Os aminoácidos são as estruturas fundamentais das proteínas. Cada aminoácido
consiste de um grupo amino (-NH2) básico (alcalino), um grupo carboxílico (-COOH) ácido e
uma cadeia lateral (grupo R) que é diferente para cada um dos 20 diferentes aminoácidos.
Podem ser classificados seguindo dois princípios: pelas propriedades funcionais dos
radicais, classificação mais geral; ou pela necessidade de cada organismo, classificação
específica ao hábito nutricional conforme a espécie.

1) Pela propriedade funcional → por este critério são diferenciados em apolares (valina,
alanina, leucina, triptofano, glicina, isoleucina, fenilalanina, metionina e prolina), polares
(serina, tirosina, cisteina, glutamina, treonina e asparagina) e os tipos que acumulam carga
positiva ou negativa (ácido aspártico, lisina, arginina, histidina e ácido glutâmico).

2) Pela necessidade nutricional → É variável de espécie para espécie, obedecendo a

capacidade que cada um possui de sintetizar os aminoácidos ou adquiri-los através da
alimentação.
Para os seres humanos, são subdivididos em aminoácidos essenciais, aqueles que o
metabolismo não consegue produzir, e somente pela ingestão de alimentos conseguimos
suprir sua carência; e aminoácidos não essenciais, sintetizados pelo organismo a partir de
outros.

1- Reação de ninidrina

Reativos: solução de ninidrina 0,1% em etanol absoluto;

solução ovoalbumina diluída 1:10;
solução de gelatina 2%;
solução de glicina 0,025%

Modo de execução: Para esta reação, preparou-se quatro tubos de ensaio, pipetando,
respectivamente, 10 gotas de solução gelatina, 10 gotas de solução ovoalbumina, 10 gotas de
solução glicina e 10 gotas de água destilada. Adicionou-se logo após 8 gotas de solução
ninidrina a cada um dos tubos, homogeneizando, e aquecendo todos os tubos em banho de
água fervente cerca de 3 minutos. Ao final, os seguintes resultados foram obtidos:
a) Gelatina: reagiu, azul fraco.
b) Ovoalbumina: reagiu, cor azul violácea bastante evidente.
c) Glicina: reagiu, cor azul violácea pouco menos evidente que a ovoalubumina.
d) Água destilada: não reagiu, incolor.
Conclusão: O desenvolvimento de coloração púrpura indica presença de grupamentos amino,
revelando a existência de aminoácidos, peptídeos ou proteínas na amostra.
 2- Reação Xantoproteica

Reativos: solução de gelatina 2%

soluçao de ovoalbumina diluída 1:10
solução de tirosina 0,1%
solução de triptofano 0,1%
ácido nítrico concentrado
solução de NaOH 10N

Modo de execução: Para esta reação, preparou-se cinco tubos de ensaio, pipetando,
respectivamente, 10 gotas de solução ovoalbumina, 10 gotas de solução gelatina, 10 gotas de
solução triptofano, 10 gotas de solução tirosina e 10 gotas de água destilada. Adicionou-se
logo após 1 ml de ácido nítrico concentrado a cada um dos tubos. Aquecendo os tubos de
ensaio em banho maria até o aparecimento de precipitado amarelo, por aproximadamente 7
minutos, e logo após esfriando, adiciona-se 20 gotas de solução de NaOH 10N em cada um
dos tubos. Ao final, os seguintes resultados foram obtidos:
Após aplicação de ácido nítrico:
a) Ovoalbumina: reagiu, aspecto amarelado, com pequena formação de bolhas no lado
superior.
b) Gelatina: reagiu, aspecto amarelo quase inexistente.
c) Triptofano: reagiu, cor amarelada bastante evidente.
d) Tirosina: reagiu, amarelo claro.
e) Água destilada: não reagiu, incolor.
Após a aplicação de NaOH:
a) Ovoalbumina: três camadas, de cima para baixo, respectivamente, nas cores:
laranja, branco e amarelo claro
b) Gelatina: aspecto amarelo quase inexistente.
c) Triptofano: duas camadas, de cima para baixo, respectivamente, nas cores: laranja,
e amarelo
d) Tirosina: duas camadas, de cima para baixo, respectivamente, nas cores: amarelo e
incolor
e) Água destilada: não reagiu, incolor
Conclusão: O desenvolvimento de coloração amarela em meio ácido e vermelho-alaranjada
em meio alcalino indica que os aminoácidos da amostra apresentam o anel benzênico em sua
estrutura.
 3- Reação de Millon

Reativos: solução ovoalbumina diluída 1:10

solução de gelatina 2%
solução de tirosina 0,1%
solução de fenol 0,05%
reativo Millon

Modo de execução: Para esta reação, preparou-se cinco tubos de ensaio, pipetando,
respectivamente, 10 gotas de solução ovoalbumina, 10 gotas de solução gelatina, 10 gotas de
solução tirosina, 10 gotas de solução fenol e 10 gotas de água destilada. Adicionou-se logo
após 2 gotas do reativo Millon a cada um dos tubos, homogeneizando, e aquecendo todos os
tubos em banho de água fervente cerca de 3 minutos, com exceção do tubo contendo a
solução fenol que foi aquecida por um minuto. Ao final, os seguintes resultados foram
obtidos:
a) Ovoalbumina: reagiu, a proteína existente desnaturou
b) Gelatina: reagiu, aspecto rosado pouco evidente
c) Tirosina: reagiu, aspecto rosado bastante evidente
d) Fenol: reagiu, aspecto vermelho-alaranjado bastante evidente
e) Água destilada: não reagiu, incolor.
Conclusão: Esta reação é devida a presença do grupo hidroxifenil. Nas proteínas o único
grupo deste tipo é encontrado no aminoácido tirosina. O teste de Millon usa como reagente
o nitrato de mercúrio, dissolvido numa solução de ácido nítrico. O grupo hidroxifenil produz
um fenolato de mercúrio de cor avermelhada.

4- Reação de Hopkins-Cole

Reativos: solução ovoalbumina diluída 1:10

solução de gelatina 2%
solução de triptofano 0,1%
reativo de Hopkins-Cole
ácido sulfúrico concentrado
Modo de execução: Para esta reação, preparou-se cinco tubos de ensaio, pipetando,
respectivamente, 10 gotas de solução ovoalbumina, 10 gotas de solução gelatina, 10 gotas de
solução triptofano e 10 gotas de água destilada. Adicionou-se logo após 35 gotas do
reativo de Hopkins-Cole a cada um dos tubos, homogeneizando. Em seguida adicionou-se a
cada um dos tubos, 1 gota de ácido sulfúrico a cada um dos tubos. Ao final, os seguintes
resultados foram obtidos:
a) Ovoalbumina: reagiu, aspecto alaranjado
b) Gelatina: não reagiu, incolor
 c) Triptofano: reagiu: reagiu, formou anéis de densidade visíveis, alaranjados
d) Água destilada: não reagiu, incolor.
Conclusão: É específica para a quantificação do aminoácido triptofano, somente
aminoácidos que contêm um grupamento indólico. O anel indólico reage com o ácido glioxílico
na presença de um ácido forte (ácido sulfúrico) para formar um produto cíclico laranja.

5- Reação de Sakaguchi

Reativos: solução ovoalbumina diluída 1:10

solução de gelatina 2%
solução de arginina 0,1%
solução de alfa-naftol 0,04% em etanol absoluto
solução de NaOH 2,5N
solução de hipoclorito de sódio 0,5%

Modo de execução: Para esta reação, preparou-se cinco tubos de ensaio, pipetando,
respectivamente, 10 gotas de solução ovoalbumina, 10 gotas de solução gelatina, 10 gotas de
solução arginina e 10 gotas de água destilada. Adicionou-se logo após 3 gotas de NaOH 2,5
a cada um dos tubos. Em seguida, adicionou-se 2 gotas de alfa-naftol a cada um dos tubos,
homogeneizando. Logo após adicionou-se 12 gotas de hipoclorito de sódio em todos os
tubos, homogeneizando.
a) Ovoalbumina: reagiu, aspecto cor de pêssego
b) Gelatina: reagiu, aparecimento de bolhas
c) Arginina: reagiu, aparecimento de bolhas
d) Água destilada: não reagiu, incolor.
Conclusão: Os aminoácidos com grupo guanidina desenvolvem em meio alcalino. Um
complexo verde com o α – naftol que, em presença de hipoclorito de sódio (NaClO) passa a
avermelhado.
 6- Pesquisa de aminoácidos

Reativos: solução ovoalbumina diluída 1:10

solução de gelatina 2%
solução de cistina 0,5%
solução de NaOH 2,5N
solução de acetato de chumbo 5%

Modo de execução: Para esta reação, preparou-se cinco tubos de ensaio, pipetando,
respectivamente, 10 gotas de solução ovoalbumina, 10 gotas de solução gelatina, 10 gotas de
solução cistina e 10 gotas de água destilada. Adicionou-se logo após 23 gotas de NaOH 2,5
a cada um dos tubos, e aquecendo-os em banho de água fervente cerca de 3 minutos. Em
seguida adicionou-se em todos os tubos 5 gostas de acetato de chumbo, aquecendo-os em
banho de água fervente por cerca de 30 segundos.
a) Ovoalbumina: reagiu, aspecto marrom escuro
b) Gelatina: não reagiu, incolor
c) Cistina: reagiu, aspecto marrom claro pouco evidente
d) Água destila: não reagiu, incolor.
Conclusão: há como se identificar a presença de enxofre nas soluções através da pesquisa
de aminoácidos, por conseguinte a cistina (aminoácido natural, formado pela
dimerização da cisteína em condições oxidantes) é o único que apresenta o grupo
tiol em sua composição.

Cistina

Fontes pesquisadas:
http://www.guia.heu.nom.br/aminoacidos.htm
http://www.brasilescola.com/biologia/aminoacidos.htm
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/