Pesar 10 gramas de amostra e adicionar 30 mL de metanol:gua (3:1);
Agitar por uma hora temperatura ambiente; Filtrar a amostra atravs de papel filtro Whatman n1 ou equivalente; Prepara a coluna da seguinte forma: a. Passar pela coluna 5,0 mL de metanol; b. Em seguida passar 5,0 mL da mistura metanol:gua (3:1); 5. Passar 1,0 mL da amostra foltrada obtida em 3 pela coluna; 6. Em seguida passar 6,0 mL de metanol:gua (3:1); 7. Dispensar o solvente eluido; 8. Passar pela coluna 3,0 mL de metanol; 9. Dispensar o solvente eluido; 10. Passar 10 mL de metanol + Acido Actico 0,5%; 11. Recolher o eluido em tubo de ensai; 12. Secar a amostra assim obtida em Banho de Maria a 40C; 13. Adicionar ao tubo com a amostra seca 1,5 mL de metanol:gua (3:1); 14. Agitar por dois minutos; 15. Secar o tubo em Banho de Maria com nitrognio; 16. Repetir passo 13 ate 15.