FLVIO BRACALE BRANDESPIM

Caractersticas fisico-qumicas e celulares na secreo lctea de caprinos da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula mamria

So Paulo 2007

FLVIO BRACALE BRANDESPIM

Caractersticas fisico-qumicas e celulares na secreo lctea de caprinos da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula mamria

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Clnica Veterinria da Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da Universidade de So Paulo para obteno do ttulo de Mestre em Medicina Veterinria

Departamento: Clnica Mdica rea de concentrao: Clnica Veterinria Orientador: Prof. Dr. Eduardo Harry Birgel Junior

So Paulo 2007

Autorizo a reproduo parcial ou total desta obra, para fins acadmicos, desde que citada a fonte.

FOLHA DE AVALIAO

Nome: BRANDESPIM, Flvio Bracale Ttulo: Caractersticas fisico-qumicas e celulares na secreo lctea de caprinos da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula mamria

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Clnica Veterinria da Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da Universidade de So Paulo para obteno do ttulo de Mestre em Medicina Veterinria

Data: ____/____/____

Banca Examinadora

Prof. Dr.

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Instituio: ____________________ Julgamento: ____________________

Assinatura: ________________________

Prof. Dr.

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Instituio: ____________________ Julgamento: ____________________

Assinatura: ________________________

Prof. Dr.

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Instituio: ____________________ Julgamento: ____________________

Assinatura: ________________________

Dedico esta dissertao minha querida Ana Paula, uma pessoa que entrou em minha vida para mud-la para sempre, para me mostrar a beleza de estar vivo.

AGRADECIMENTOS Aos meus pais, que sempre sero meus dolos, por terem lutado todos esses anos para dar as melhores oportunidades para mim e meus irmos e por nunca deixarem faltar o que mais importante: amor. Ana Paula, minha eterna companheira, por ter estado do meu lado nessas aventuras todas que vivenciamos at aqui. Sua presena ao meu lado trouxe um brilho para minha vida que jamais terei como retribuir. toda minha famlia: irmos, tios, avs e primos. Ao meu Tio Artur Vicente (in memoriam) por ter sido uma pessoa maravilhosa, um exemplo a ser seguido e por ter me ensinado a dirigir l em Perube. Ao Andr e Nury, amigos inseparveis que fizeram companhia por essas aventuras no mundo da veterinria! Sem eles no teria metade da graa! Nunca esquecerei daquela semana de julho, cuidando das cabras no hospital. Jamais esquecerei vocs! Dona Geny Isabel, Seu Laercio, Dona Ruth e Seu Ulderigo, toda famlia da Ana Paula, que sempre me recebeu com muito carinho l em Santos. A todos os ces que j fizeram parte da minha famlia, verdadeiros amigos que jamais esquecerei. Ao meu orientador, Prof. Dr. Eduardo Harry Birgel Junior, pelos ensinamentos passados nesses anos todos. Ao Prof. Fernando Jos Benesi por toda a ajuda prestada, muito alm de qualquer obrigao, durante a residncia e todo perodo que passei na faculdade. Profa. Dra. Lilian Gregory por tantas conversas divertidas e pelo incentivo durante a graduao.

 Profa. Dra. Alice Della Libera por ser um exemplo a ser seguido, pelos ensinamentos da veterinria e pelas excelentes conversas. Profa. Dra. Solange Gennari e ao Prof. Dr. Rodrigo Soares por terem ministrado a melhor disciplina que freqentei durante o curso de ps-graduao. Ao Prof. Dr. Idrcio Sinhorini por ter me mostrado a beleza da fotografia durante sua disciplina da ps-graduao. Cludia do Laboratrio de Imunologia do Departamento de Clnica Mdica, cuja ajuda foi fundamental para a concluso dos exames microbiolgicos. todos os funcionrios da Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da USP pela ajuda nas aulas e pela agradvel convivncia nesses anos. Aos funcionrios do Hospital de Bovinos e Pequenos Ruminantes (Maria, Elias, Luisinho, Francisco e Edson), que tanto me ajudaram no ano da residncia. Aos funcionrios da biblioteca, que sempre trabalharam com muita eficincia e me trataram muito bem. Carmem pela ajuda com o material de laboratrio. todos os professores da veterinria, cursinho e escola, que to prontamente me ajudaram nesses anos todos, sempre prontos para ensinar algo mais. Aos meus colegas de ps-graduao: Raquel, Fernanda, Fabio, Tio Chico, Daniela, Humberto e Sandra. Aos meus amigos de longa data, Luciano, Martin e Mrio, protagonistas de histrias da infncia e adolescncia.

Ao Rodrigo Norberto. Um grande amigo, uma pessoa cheia de energia e inesquecvel, Graziela (in memorian), uma pessoa cheia de luz e alegria, que nunca ser esquecida. s amigas da 69: Juliana Nogueira e Mariana Abe. Aos amigos da 70, estagirios da minha residncia. A todos os meus colegas da 65 Turma da FMVZ, pessoas inesquecveis que faro parte da minha vida para sempre, principalmente os amigos da turma A. Jamais esquecerei de tudo que vivenciamos nos cinco anos que estudamos juntos, das aulas, dos passeios, de toda nossa histria, que ainda est sendo escrita. Ao Campus de Pirassununga, protagonista de alguns dos momentos mais felizes e inesquecveis da minha vida. cidade de Santos, um lugar paradisaco em que a vida tem mais brilho e energia. Meu futuro lar. CAPES, pela bolsa de mestrado concedida.

Viver a coisa mais rara do mundo. A maioria das pessoas apenas existe. (Oscar Wilde)

RESUMO BRANDESPIM, F. B. Caractersticas fisico-qumicas e celulares na secreo lctea de caprinos da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula Mamria. [Physico-chemical and cellular characteristics on milk secretion of Saanen goats during the mammary gland drying off]. 2007. 157 f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) - Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2007. Para avaliar a influncia do processo de secagem da glndula mamria sobre as caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea foram avaliadas 216 amostras provenientes de 27 glndulas mamrias de 15 cabras da raa Saanen consideradas sadias, sendo que essas mamas foram separadas de acordo com o resultado do exame microbiolgico da secreo lctea, caracterizando dois grupos: com e sem isolamento bacteriano, composto por 17 e 10 mamas, respectivamente. A partir do dia da interrupo da ordenha e em mais sete momentos (1, 3, 5, 7, 10, 15 e 30 dias aps o incio da secagem) foi feita a inspeo e a palpao das glndulas mamrias e posterior avaliao do aspecto da secreo lctea. Imediatamente aps o exame clnico foram colhidas amostras de leite para a realizao do exame microbiolgico e das determinaes das caractersticas fsicoqumicas e celulares (pH, eletrocondutividade, cloreto, lactose, protenas, gordura, slidos totais, ndice cloreto/lactose, California Mastitis Test (CMT) e contagem de clulas somticas). As glndulas mamrias apresentaram sua maior distenso no terceiro dia aps a interrupo da ordenha, mesmo perodo em que foi possvel observar o aparecimento de edema na base dos tetos e em toda a glndula, desaparecendo aps o quinto dia, quando teve incio a involuo do bere e a freqncia de mamas distendidas comeou a declinar, sendo que ao final do processo 37,04% das mamas observadas eram classificadas como no distendidas. A secreo lctea inicial com aspecto de leite foi substituda a princpio por uma de colorao creme clara e mais tardiamente por uma de aspecto aquoso, sendo que ao final do processo as duas ltimas eram mais observadas que a com aspecto de leite. Apenas o pH, a eletrocondutividade, os teores de cloretos, lactose, protenas e ndice cloreto/lactose sofreram uma significativa influncia do processo de secagem, sendo que os valores do pH, eletrocondutividade, cloretos, protenas e ndice cloreto/lactose aumentaram e os valores de lactose declinaram. O CMT tambm sofreu uma influncia do processo de secagem, mais especificamente as respostas

traos e duas cruzes. Estas, de maneira geral, aumentaram no decorrer da secagem, sendo que no ltimo momento de colheita ocorreu uma queda na freqncia da resposta traos e a freqncia da resposta duas cruzes teve uma pequena diminuio no meio do processo. Ainda foi observado que, apesar de existirem diferenas estatsticas significativas entre valores das caractersticas fsicoqumicas e celulares das amostras de secreo lctea com e sem isolamento bacteriano, as diferenas so isoladas e limitadas a algumas caractersticas estudadas, impossibilitando afirmar que o processo de secagem dos dois grupos difere de maneira significativa.

Palavras-chave: Caprinos. Secagem (processo). Glndula mamria de animal. Secreo lctea caprina. Fsico-qumicas (caractersticas). Clulas somticas

ABSTRACT BRANDESPIM, F. B. Physico-chemical and cellular characteristics on milk secretion of Saanen goats during the mammary gland drying off. [Caractersticas fisico-qumicas e celulares na secreo lctea de caprinos da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula mamria]. 2007. 157f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) - Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2007. To evaluate the influence of the mammary gland drying off on the physiochemical and cellular characteristics in the milk secretion they were appraised 216 coming samples of 27 mammary glands of 15 Saanen goats considered healthy, those mammas were separate in agreement with the result of the microbiological test of the milky secretion characterizing two groups: one with 17 mammas without bacterial isolation and other with 10 mammas that presented positive bacterial isolation. Starting from the day of the interruption of the milking and in more seven moments (1, 3, 5, 7, 10, 15 and 30 days after the beginning of the drying off) it was made the inspection and palpation of the mammary glands with subsequent evaluation of the aspect of the milky secretion. Immediately after the exam they were picked samples of milk for the accomplishment of the microbiological test and of the determinations of the physiochemical and cellular characteristics (pH, electrical conductance, chloride, lactose, proteins, fat, total solids, chloride/lactose ratio, California Mastitis Test (CMT) and somatic cell count). The mammary glands presented its largest distention in the third day after the milking interruption, same period in that was possible to observe the edema emergence in the teats base and in the whole gland, that disappeared after the fifth day, when involution of the udder begins and the frequency of distended mammas began to refuse, and at the end of the process 37,04% of the observed mammas they were classified as no distended. The initial milky secretion with aspect of milk was substituted at first for one of coloration cream clear and, so late, for one of aqueous aspect, and in the end of the process those two last they were more observed that the secretion with aspect of milk. Just the pH, electrical conductance, chloride, lactose, proteins and chloride/lactose ratio suffered a significant influence of the drying off, and the values of the pH, electrical conductance, chloride, proteins and chloride/lactose ratio increased and the lactose values refused. CMT also suffered an influence of the drying off, more specifically the answers "lines" and "two crosses." These, in a general way, increased in elapsing of the drying off, and in the last

moment studied it happened a fall in the frequency of the answer "lines" and the frequency of the answer "two crosses" had a small decrease in the middle of the process. It was still observed that in spite of significant statistical differences exist among values of the physiochemical and cellular characteristics of the samples of milky secretion with isolation and without bacterial isolation, the differences are punctual and limited to some studied characteristics, disabling to affirm that the process of drying of the two groups differs in a significant way.

Key-words: Goats. Drying off (process). Physico-chemical (characteristics). Animal mammary gland. . Somatic cells.

LISTA DE QUADROS

Quadro 1.1 Rebanho de caprinos do mundo, divididos por pases FAO

2005........................................................................................................... 34

Quadro 1.2 Rebanho de caprinos, com aptido leiteira do mundo divididos por pases FAO 2005......................................................................... 34 Quadro 1.3 Toneladas de leite caprino produzido no ano de 2005 divididos por pases................................................................................................ 35 Quadro 3.1 Interpretao do exame de plenitude e distenso da glndula mamria (Fonte: modificado de EWBANK, 1963)............................. 69 Quadro 3.2 Interpretao do exame de plenitude e distenso dos tetos............ 69 Quadro 3.3 Interpretao do exame de edema da glndula mamria................. 69 Quadro 3.4 Interpretao do exame de fundo escuro para avaliar o aspecto da secreo lctea.................................................................................. 70 Quadro 3.5 Interpretao do California Mastitis Test (CMT) para caprinos (SCHALM; CARROLL; JAIN, 1971)................................................... 73

LISTA DE FIGURAS

Figura 2.1 Grupo de alvolos da glndula mamria de uma cabra (Fonte: STABENFELDT; DAVIDSON, 2004)................................................. 40 Figura 2.2 Descrio do bere de uma cabra, com os tecidos alveolares, a cisterna glandular e seus grandes ductos, cisterna da teta, e o canal da teta. (Fonte: STABENFELDT; DAVIDSON, 2004).............. 41

LISTA DE GRFICOS

Grfico 4.1 Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes graus de plenitude e distenso da mama de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................... 76 Grfico 4.2 Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes graus de plenitude e distenso do teto de cabras da raa Saanen So Paulo 2007.............................. 79 Grfico 4.3 Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes graus de edema de bere de cabras da raa Saanen So Paulo 2007.................................................... 82 Grfico 4.4 Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes aspectos da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007............................................... 85 Grfico 4.5 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de pH da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................................................ 87 Grfico 4.6 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de eletrocondutividade da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................... 89 Grfico 4.7 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria
nos valores mdios dos teores de cloretos da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007........................................... 91

Grfico 4.8 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula

mamria nos valores mdios dos teores de lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007.................

93

Grfico 4.9 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios do ndice cloreto/lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007. 95 Grfico 4.10 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores medos de gordura da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................................ 97 Grfico 4.11 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de protena da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................................ 99 Grfico 4.12 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de slidos totais da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................ 101 Grfico 4.13 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria no nmero mdio de clulas somticas da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007............... 103 Grfico 4.14 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos valores do pH da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................ 107

Grfico 4.15 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos valores da eletrocondutividade da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007......................................................... 109 Grfico 4.16 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos teores de cloreto da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007. 111 Grfico 4.17 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos teores de lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007 Grfico 4.18 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem no ndice cloreto/lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007. 115 Grfico 4.19 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem no teor de gordura da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007. 118 Grfico 4.20 Avaliao da influncia da condio de sade da glndula mamria durante o processo de secagem no teor de protena da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007.............................................................................................. 120 Grfico 4.21 Avaliao da influncia da condio de sade da glndula mamria durante o processo de secagem no teor de slidos totais da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................................................................................ 122 113

Grfico 4.22 Avaliao da influncia da condio de sade da glndula mamria durante o processo de secagem no nmero de clulas somticas da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................................................................................ 124 Grfico 4.23 Ocorrncia dos resultados do California Mastitis Test (CMT) da secreo lctea de cabras da raa Saanen sem isolamento bacteriano durante o processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007....................................................... 126 Grfico 4.24 Ocorrncia dos resultados do California Mastitis Test (CMT) da secreo lctea de cabras da raa Saanen com isolamento bacteriano durante o processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007....................................................... 127

LISTA DE TABELAS

Tabela 3.1 Constituio

dos

grupos

experimentais

para

avaliar

as

caractersticas fsico-qumicas e celulares na secreo lctea de cabras da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007........................................... 66 Tabela 4.1 Resultados obtidos na avaliao do grau de plenitude e distenso da mama, por palpao, durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen - So Paulo 2007.................................................................................... 77 Tabela 4.2 Resultados obtidos na avaliao do grau de distenso dos tetos, por palpao, durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen So Paulo 2007 80 Tabela 4.3 Resultados obtidos na avaliao do grau de edema da mama durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen - So Paulo 2007............... 83 Tabela 4.4 Resultados obtidos na avaliao do aspecto da secreo lctea presente na mama, durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen So Paulo 2007................................................................................................. 86 Tabela 4.5 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos valores de pH da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 88

Tabela 4.6 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos valores de eletrocondutividade da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007................................................................................... 90 Tabela 4.7 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos teores de cloretos da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria - So Paulo 2007... 92 Tabela 4.8 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos teores de lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 94 Tabela 4.9 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos valores do ndice cloreto/lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.................................................................................... 96 Tabela 4.10 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos valores de gordura na secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 98 Tabela 4.11 Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos valores de protena da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 100

Tabela 4.12 Mdia, desvio padro, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos teores de slidos totais da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. Tabela 4.13 Mdia, desvio padro, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao do nmero de clulas somticas da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007. 104 Tabela 4.14 Freqncia dos graus de intensidade da reao do California Mastitis Test (CMT) na secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007....................... 106 Tabela 4.15 Valores de pH (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007................................................................................... 108 Tabela 4.16 Valores de eletrocondutividade (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.......................................................... 110 Tabela 4.17 Valores de cloretos (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 112 102

Tabela 4.18 Valores de lactose (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 114 Tabela 4.19 Valores do ndice cloretos/lactose (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem isolamento e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria - So Paulo 2007............................................ 116 Tabela 4.20 Valores de gordura (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007................................................................................... 118 Tabela 4.21 Valores de protena (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007.. 120 Tabela 4.22 Valores de slidos totais (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem isolamento e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007................................................................................... 123 Tabela 4.23 Valores do nmero de clulas somticas (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007................................................................................... 125

Tabela 4.24 Freqncias das reaes classificadas como negativas do California Mastitis Test - CMT na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudas segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007........................................... 128 Tabela 4.25 Freqncias das reaes, classificadas como meia e uma cruz, do California Mastitis Test - CMT na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudas segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007........................................... 129 Tabela 4.26 Freqncias das reaes, classificadas como duas e trs cruzes, do California Mastitis Test - CMT na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudas segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007........................................... 130

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

cap. ClCCS CMT CV DNA EST f. FIL FMVZ g% g/dl g/l g/Kg GLM H+ IGF IgG K+ Kw LDL m mg/l l m ml mm

captulo cloro contagem de clulas somticas California Mastitis Test coeficiente de variao cido desoxirribonucleico extrato seco total folhas feedback inhibitor of lactation Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia gramas por cento grama por decilitro grama por litro gramas por quilograma general linear models on hidrognio fator de crescimento semelhante insulina imunoglobulina da classe G on potssio produto inico da gua lipoprotena de baixa densidade metro miligrama por litro microlitro micrmetro mililitro milmetros

cls/ml clulas por mililitro

IGFBP protena

S/cm microSiemens por centmetro mS/cm miliSiemens por centmetro mMol/l milimol por litro N nmero

Na+ nm OHp. pat. pH RNA ST USP v.

on sdio nammetro hidroxila pgina parte potencial hidrogeninico cido ribonucleico slidos totais Universidade de So Paulo volume

LISTA DE SMBOLOS % K C

porcentagem micro kapa beta alfa grau minuto segundo grau Celsius marca registrada normal igual multiplicao asterisco nvel de significncia maior menor ou igual mais ou menos

N = x * p >

SUMRIO 33 39

1 2 2.1 2.2 2.3 2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.4 2.4.1 2.4.2 2.4.3 2.4.4 2.4.5 2.4.6 2.4.7 2.5 3

INTRODUO........................................................................................... REVISO DE LITERATURA.....................................................................

Anatomia da glndula mamria de cabras................................................. 39 Importncia do perodo Seco..................................................................... Fisiologia da glndula mamria durante o perodo seco........................... Involuo ativa........................................................................................ 42 43 46

Involuo constante................................................................................. 48 Lactognese ou Colostrognese............................................................ 49 Caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea................................... Concentrao hidrogeninica (pH)....................................................... 50 50

Eletrocondutividade................................................................................. 52 Cloretos..................................................................................................... 53 Lactose...................................................................................................... 54 Slidos totais............................................................................................ 55 Protena..................................................................................................... Gordura..................................................................................................... 56 57

Caractersticas celulares da secreo lctea............................................. 60 MATERIAIS E MTODO........................................................................... 65

3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.5.1 3.6 3.6.1 3.6.2 3.6.3 3.6.4

Consideraes gerais................................................................................ Grupos experimentais................................................................................ Manejo dos animais................................................................................... Colheitas.................................................................................................... Exame dos animais....................................................................................

65 65 67 67 68

Avaliao da glndula mamria e da secreo lctea.......................... 68 Determinaes realizadas nas amostras de leite...................................... Determinao da concentrao hidrogeninica (pH)........................... Determinao dos valores de eletrocondutividade no leite............ Determinao dos valores de cloretos no leite............................... Determinao dos valores de gordura, lactose, protena e slidos totais.......................................................................................................... 71 72 72 73 74 74 70 70 70 71

3.6.5 3.6.6 3.6.7 3.6.8 3.7 4 4.1

Determinao do ndice cloretos/lactose.............................................. Prova de Schalm e Noorlander California Mastitis Test (CMT)........ Contagem eletrnica do nmero de clulas somticas....................... Exame microbiolgico............................................................................ Anlise Estatstica......................................................................................

RESULTADOS........................................................................................... 75 Avaliao do exame clnico da glndula mamria de cabras da raa Saanen, durante a evoluo do processo de secagem da mama............. 75

4.1.1

Avaliao da influncia do processo de secagem na plenitude e 75

distenso da glndula mamria............................................................. 4.1.2 Avaliao da influncia do processo de secagem na plenitude e distenso dos tetos.................................................................................. 4.1.3 Avaliao da influncia do processo de secagem no edema de glndula mamria..................................................................................... 4.1.4 Avaliao da influncia do processo de secagem na ocorrncia de ejeo espontnea de secreo lctea.................................................. 4.1.5 Avaliao da influncia do processo de secagem no aspecto da secreo lctea........................................................................................ 4.2 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nas caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de cabras da raa Saanen.............................................................................. 4.2.1 Avaliao da influncia do processo de secagem nos valores de pH da secreo lctea...................................................................... 4.2.2 Avaliao da influncia do processo de secagem nos valores de eletrocondutividade da secreo lctea................................................ 4.2.3 Avaliao da influncia do processo de secagem nos teores de cloretos da secreo lctea.................................................................... 4.2.4 Avaliao da influncia do processo de secagem nos teores de lactose da secreo lctea..................................................................... 4.2.5 Avaliao da influncia do processo de secagem no ndice cloreto/lactose da secreo lctea......................................................... 4.2.6 Avaliao da influncia do processo de secagem no teor de gordura da secreo lctea............................................................. 4.2.7 Avaliao da influncia do processo de secagem no teor de 97 95 93 91 89 87 86 85 83 82 80 78

protena da secreo lctea.................................................................... 4.2.8 Avaliao da influncia do processo de secagem no teor de slidos totais da secreo lctea......................................................... 4.2.9 Avaliao da influncia do processo de secagem no nmero de clulas somticas da secreo lctea................................................. 4.2.10 Avaliao da influncia do processo de secagem no resultado do California Mastitis Test da secreo lctea.......................................... 4.3 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano, durante o processo de secagem, nas caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de cabras da raa Saanen.......................................... 4.3.1 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no pH da secreo lctea........................................................................................ 4.3.2 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano na 109 108 108 104 101 100

eletrocondutividade da secreo lctea................................................ 4.3.3 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de cloretos da secreo lctea.................................................................... 4.3.4 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de lactose da secreo lctea...................................................................... 4.3.5 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no ndice cloretos/lactose da secreo lctea...................................................... 4.3.6 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de gordura da secreo lctea..................................................................... 4.3.7 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de protena da secreo lctea.................................................................... 4.3.8 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de

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slidos totais da secreo lctea....................................................... 4.3.9 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no nmero de clulas somticas da secreo lctea................................................... 4.3.10 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no resultado do California Mastitis Test da secreo lctea........................................... 5 5.1 DISCUSSO.............................................................................................. Caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea de cabras durante o processo de secagem................................................................................ 5.2 5.3 Exame Clnico da Glndula Mamria durante o Processo de Secagem... Influncia da presena de isolamento bacteriano nas caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de cabras durante o processo de secagem................................................................................ 6 CONCLUSES.......................................................................................... 146 142 132 138 126 132 124

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS.......................................................... 149

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1 INTRODUO

A cabra foi um dos primeiros animais a ser domesticado pelo homem com o intuito de produzir alimento. Esta domesticao teve incio h dez mil anos, nas montanhas Zagros, localizadas ao oeste do que hoje o Ir (ZEDER; HESSER, 2000). A cabra domstica a Capra hircus que descende, provavelmente, da Capra aegragus da Prsia e sia menor, Capra falconeri do Himalaia e Capra prisca da bacia do Mediterrneo (RIBEIRO, 1997). No Brasil a criao de caprinos teve incio entre os sculos XVI e XVIII com a introduo de uma centena de animais no padronizados, ou seja, sem raa definida. Somente no sculo XIX as raas modernas comearam a aparecer no Pas, com a chegada de cerca de mil animais da raa Alpina, mil da raa Saanen e suas variedades, quinhentos animais Toggenbourg, quinhentos animais da AngloNubiana, duas centenas de Angors e uma centena da raa Murciana. Alguns poucos animais das raas Boer, Cachemire, Dwarf e outras foram trazidos tambm (MACHADO, 1996). O rebanho caprino no ano de 2006 foi estimado em 11.460.735 animais (ANUALPEC, 2006). Deste total, 92,78% esto na regio Nordeste, 2,38% no Sudeste, 1,46% no Norte, 2,27% no Sul e 1,11% no Centro-Oeste. Segundo dados da FAO (2005), o Brasil possua o dcimo quinto maior rebanho caprino do mundo no ano de 2005, com dez milhes e setecentos mil animais (Quadro 1.1) sendo que quatro milhes e meio destes animais so de aptido leiteira (Quadro 1.2), correspondendo a 42,05% do rebanho nacional e colocando o Pas como o oitavo maior rebanho de caprinos leiteiros do mundo.

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Colocao 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 15

Pas China ndia Paquisto Sudo Bangladesh Nigria Repblica Islmica do Ir Qunia Indonsia Somlia Brasil

Nmero de cabeas 195.758.954 120.000.000 56.700.000 42.000.000 36.900.000 28.000.000 26.500.000 13.882.600 13.182.100 12.700.000 10.700.000

Quadro 1.1 Rebanho de caprinos do mundo, divididos por pases FAO 2005

Colocao 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Pas ndia Sudo Bangladesh Repblica Islmica do Ir Paquisto Somlia Indonsia Brasil Mali Grcia

Nmero de cabeas 23.800.000 20.000.000 17.700.000 12.700.000 7.700.000 6.580.000 5.500.000 4.500.000 3.976.500 3.800.000

Quadro 1.2 Rebanho de caprinos, com aptido leiteira do mundo divididos por pases FAO 2005

Segundo dados do ANUALPEC (2006), pode-se observar uma tendncia de crescimento do rebanho caprino, que vem aumentando desde o ano de 2003, sendo que entre 2005 e 2006 o aumento foi de 6,32%.

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Apesar da grande maioria dos caprinos concentrarem-se na regio Nordeste, estimativas mostram que a regio Sudeste responsvel por 54,3% da produo de leite caprino processada por laticnios, que gira em torno de 7.920.000 litros de leite por ano (COSTA, [200_?]). Isso se deve principalmente a uma cadeia produtiva organizada e utilizao de animais de raas leiteiras especializadas, tais como Saanen, Alpina e Toggenbourg criados em manejo intensivo (BORGES, 2003). O Nordeste, por sua vez, possui grande maioria de animais sem raa definida. Segundo estimativas da FAO (2005) observadas no quadro 1.3, a produo de leite caprino no Brasil durante o ano de 2005 foi de 135.000.000 quilos, apenas a dcima oitava do mundo e 1,08% do total produzido, mostrando a grande diferena entre leite produzido e leite processado. Corroborando essas informaes, Nogueira e De Mello (2005) informaram que no sudoeste paulista 79% do leite produzido comercializado de maneira informal, 12% da produo destinada a intermedirios e apenas 9% tm como destino a indstria de laticnios.
Colocao 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 18 Pas ndia Bangladesh Sudo Paquisto Frana Grcia Espanha Somlia Repblica Islmica do Ir Ucrnia Brasil Toneladas de leite caprino/ano 2.700.000 1.416.000 1.295.000 675.000 587.000 495.000 482.903 393.500 365.000 266.455 135.000

Quadro 1.3 Toneladas de leite caprino produzido no ano de 2005 divididos por pases. (Fonte: FAO 2005)

Ao observarmos o destino do leite de cabra no mercado, podemos detectar uma diviso desigual, com 93% para o mercado de leite fludo, 4% para o leite em p e 3% para queijos, doces e iogurtes (COSTA, [200_?]). Entretanto, Cordeiro (2006) atentou para o surgimento de novos mercados para o leite caprino no Brasil, crescendo cada vez mais sua utilizao na fabricao de sorvetes, cosmticos e, em

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especial, de iogurte, que apresenta grande aceitao, baixo custo de produo e sem necessidade de equipamentos sofisticados, sendo de fcil preparao. Pode-se destacar trs principais mercados para o leite caprino: consumo caseiro; derivados de leite, que apresenta grande aumento da demanda, principalmente em pases desenvolvidos e por fim pessoas que apresentam alergia ao leite bovino ou distrbios gastrointestinais (HAENLEIN, 2004). Cerca de 2,5% de crianas com at 3 anos de idade podem apresentar alergia ao leite bovino (BUSINCO; BELLANTI, 1993). Na Itlia (LOTHE et al.1, 1982 apud HAENLEIN, 2004, p.157) foi encontrado um ndice de 3% em crianas at 2 anos com alergia ao leite bovino, sendo que a substituio do leite bovino pelo caprino resolveu 30% a 40% dos casos. Haenlein (2004) relatou que estudos franceses encontraram resultados positivos em 93% dos casos de alergia ao leite bovino tratados com leite caprino. Dentre as qualidades do leite caprino ainda podemos citar como vantagens para crianas que consomem leite de cabra em substituio ao leite bovino um maior ganho de peso e altura, maior mineralizao do esqueleto e maior concentrao de vitamina A, clcio, tiamina, riboflavina, niacina e hemoglobina no sangue (MACK2, 1952 apud HAENLEIN, 2004, p.157). Em um estudo, Alferez e colaboradores (2001) concluiram que o consumo de leite caprino reduz os nveis de colesterol e da frao de lipoprotena de baixa densidade (LDL) devido grande presena de cadeias mdias de triglicerdeos em sua composio (36% no leite caprino contra 21% no bovino). Haenlein (2004) relatou que a atual produo de leite caprino no mundo muito baixa, podendo ainda aumentar consideravelmente. Segundo este autor, de fundamental importncia o estabelecimento de valores de referncia especficos para o leite de cabra. No Brasil, a legislao deixa a desejar quanto a esse ponto e, apesar da existncia de uma lei especfica que regulamenta a produo de leite caprino (BRASIL, 2000), ainda falta uma regulamentao abrangente tal qual a Instruo Normativa N51 utilizada para bovinos.

LOTHE, L.; LINDBERG, T.; JACOBSON, I. Cows milk formula as a cause for infantile colic. Pediatrics, v. 70, p. 710, 1982.
2

MACK, P.B. A preliminary nutrition study of the value of goats milk in the diet of children. Mena, Arkansas, USA: Yearbook. American Goat Society Publishers, , 1952. p. 106132.

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Dans (200_?) alertou para a necessidade de esforos conjuntos de todos os elos da cadeia produtiva da caprino-ovinocultura para que este setor alcance a devida importncia econmica no cenrio nacional, reforando a necessidade do aumento da escala de produo, constncia e padronizao do leite fornecido, incentivo ao consumo de derivados e pesquisas voltadas para novas tecnologia de produo. Atualmente, a CAPRILAT j paga bnus pela qualidade do leite de cabras de produtores que apresentarem baixa contagem de clulas somticas e altos teores de slidos totais, pagando mais pelo fornecimento de leite no perodo da entressafra e pela rastreabilidade do produto. Na atual conjuntura da caprinocultura, de fundamental importncia que se realizem mais estudos sobre leite caprino para o estabelecimento de padres de qualidade para essa espcie, dando aporte a criadores e laticnios, com informaes tcnicas para melhoramento da indstria lctea, possibilitando o reconhecimento de leite de maior qualidade e melhor remunerao do produtor, fortalecendo o setor. Apesar da existncia de pesquisas sobre o perodo de lactao dos caprinos (GUIMARES et al., 1989; BARROS e LEITO, 1992; LIMA JUNIOR et al., 1994; PRATA et al., 1998; ANDRADE et al., 2001; FERNANDES; TONIN et al., 2002; ARCURI et al.; GOMES, 2004), a reviso de literatura demonstra que as alteraes da composio fsico-qumica e celular da secreo lctea no perodo de secagem da espcie caprina no foram objeto de estudo, sendo as recomendaes de tratamento e preveno das mamites dos caprinos nesse perodo realizadas sem que se conhea as caractersticas da involuo da mama durante a supresso da ordenha. Levando-se em conta que a grande maioria de caprinocultores de leite costuma utilizar um perodo de secagem em seus animais, de fundamental importncia a realizao de um maior nmero de pesquisas acerca do assunto a fim de fundamentar o conhecimento necessrio para que o veterinrio possa garantir ao produtor uma assistncia eficaz e que o leite fornecido seja de qualidade e quantidade suficiente para satisfazer a indstria lctea e o consumidor final. A presente pesquisa teve a finalidade de estudar o processo de secagem de fmeas da raa Saanen, avaliando, conforme o delineamento experimental proposto,

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a involuo da glndula mamria por meio da inspeo e da palpao das mamas e dos tetos e tambm o exame da secreo lctea durante todo o processo. Foram avaliados o aspecto e as caractersticas fsico-qumicas, celulares e microbiolgicas da secreo lctea durante a evoluo do processo de secagem, sendo os seguintes parmetros determinados: potencial hidrogeninico (pH), eletrocondutividade, cloretos, lactose, clculo do ndice cloreto/lactose, slidos totais, protena, nmero de clulas somticas e reaes do California Mastits Test (CMT).

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2 REVISO DE LITERATURA

A reviso de literatura contm informaes sobre a anatomia e fisiologia da glndula mamria e caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea, e com isso, contribuir para a compreenso do trabalho.

2.1 Anatomia da glndula mamria de cabras

O bere uma glndula que se origina da invaginao de brotos ectodrmicos para o interior do mesoderma subjacente, que na cabra fica localizado na regio inguinal junto parede ventral do abdmen, porm sem qualquer comunicao com a cavidade abdominal, exceto pelo canal inguinal por onde os vasos sanguneos, linfticos e a inervao entram e saem do bere. (HAENLEIN; CACCESE, 1992). O bere caprino constitudo por duas metades com uma glndula cada, sendo cada metade drenada por um nico teto. O formato dos tetos varia bastante, podendo ser pequenos e curtos ou grandes e afunilados. A glndula mamria, semelhana das glndulas sebceas e sudorparas, uma glndula cutnea, classificada histologicamente como tubuloalveolar composta (PARK; JACOBSON, 1996). A sustentao de cada metade do bere feita por um aparato suspensrio em forma de bolsa formado por duas lamelas, uma medial e outra lateral. O ligamento suspensrio medial formado por fortes feixes de tecido elstico inseridos no arco plvico. Esses ligamentos so particularmente importantes durante o pico de lactao para evitar a formao de beres pendulares (HAENLEIN; CACCESE, 1992). A lmina lateral est localizada lateralmente veia pudica externa lateral, prxima ao anel inguinal superficial, e d suporte parte lateral do bere, formando septos colagenosos profundos na glndula. A artria pudica externa, originada da artria ilaca externa, a nica fonte de sangue para o bere dos caprinos. O sistema venoso mais evidente que o arterial e pode ser visualizado no bere ou na parede abdominal. O sangue drenado da

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glndula mamria pela veia pudica externa ou pela veia subcutnea abdominal (mamria) que se forma na primeira lactao pela anastomose das veias epigstricas superficiais cranial e caudal. As clulas secretoras so formadas por clulas epiteliais diferenciadas que revestem estruturas cncavas denominadas alvolos, cada um com dimetro que varia entre 0,01 e 0,03mm (HAENLEIN; CACCESE, 1992). Os alvolos so considerados as estruturas fundamentais da secreo de leite da glndula mamria (Figura 2.1). Os alvolos possuem uma forma de sustentao especial em forma de rede invertida, permitindo que a secreo lctea flua cisterna da glndula. Esta funciona como ponto de acumulao dos ductos principais, os quais se ramificam repetidamente at os alvolos, verdadeiro tecido secretor do leite caprino.

Figura 2.1 - Grupo de alvolos da glndula mamria de uma cabra (Fonte: STABENFELDT; DAVIDSON, 2004)

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Apesar da existncia da cisterna (Figura 2.2), que nada mais que um reservatrio de leite durante o perodo compreendido entre mamadas ou ordenhas dirias, a maior quantidade de secreo fica acumulada nos alvolos. Cada alvolo envolvido por clulas mioepiteliais que so responsveis pela descida do leite ao se contrairem e expulsarem a secreo lctea dos alvolos. (STABENFELDT; DAVIDSON, 2004).

Figura 2.2 - Descrio do bere de uma cabra, com os tecidos alveolares, a cisterna glandular e seus grandes ductos, cisterna da teta, e o canal da teta. (Fonte: STABENFELDT; DAVIDSON, 2004)

O canal do teto possui uma estrutura em sua extremidade que, quando fechada, evita qualquer comunicao entre o meio externo e o interior da glndula. Esta estrutura, popularmente chamada de esfncter, composta por tecido fibroso e elstico e no realmente um esfncter por definio, j que no possui um msculo de esfncter verdadeiro (HAENLEIN; CACCESE, 1992). Outro mecanismo de defesa da glndula contra microorganismos a roseta de Fuerstenberg, uma estrutura constituda de diversos desdobramentos recobertos por membranas mucosas, cada

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uma com dobraduras secundrias, que sob presso do leite da cisterna se fecha e evita a sada de leite e a entrada de microorganismos (HAENLEIN; CACCESE, 1992).

2.2 Importncia do Perodo Seco As principais vantagens com relao adoo de um perodo seco ao final da lactao esto diretamente ligadas sade da glndula mamria, produtividade e sade do animal, em geral, na lactao seguinte (DINGWELL et al., 2003). O perodo seco proporciona um descanso glndula mamria a fim de promover uma renovao das clulas secretrias de leite (CAPUCO et al., 1997). O tecido danificado ou as clulas senescentes so substitudos para que a glndula se prepare para uma nova lactao. Em bovinos j sabido da grande importncia desse perodo seco, sendo que a supresso desta fase de descanso da mama leva a uma reduo da produo leiteira na lactao seguinte (SWANSON, 1965). Em caprinos esse assunto ainda motivo de controvrsia, pois Fowler (1991) concluiu que a ausncia do perodo seco no resulta em diminuio da produo de secreo lctea na lactao subseqente. Entretanto, em pesquisa mais recente realizada por Salama (2005), verificou-se que cabras que no tiveram perodo seco apresentaram uma reduo de 16% na produo de leite e que cabras com 27 e 56 dias de perodo seco produziram, respectivamente, 15% e 4% mais leite na lactao subseqente. Ainda sobre as alteraes da secreo lctea relacionadas ao perodo seco, Salama (2005) relatou que cabras sem perodo seco tiveram filhotes com menor peso ao nascer e colostro com menor quantidade de IgG, slidos totais e protenas quando comparadas s cabras submetidas a um perodo seco. Segundo Capuco, Akers e Smith (1997), uma menor produo observada em vacas que no foram submetidas secagem da glndula mamria se deu em razo da menor produo de clulas secretrias no perodo seco, sendo que em estudos realizados por esse autor foi encontrada uma maior proliferao de clulas epiteliais mamrias em vacas com 60 dias de perodo seco quando comparadas a vacas sem perodo seco.

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2.3 Fisiologia da glndula mamria durante o perodo seco

A lactao tem incio logo aps o parto e alcana seu pico aps dois meses e meio em cabras plurparas e aps um ms e meio nas primparas (GARCS et al., 2004). O perodo de lactao em caprinos pode variar de 127 (JAITNER et al., 2006) a 316 dias (MACEDO et al., 2001). Aps o pico de lactao, a produo de leite diminui at que cesse por completo. Paralelamente ocorre um processo de regresso do tecido mamrio at o perodo de secagem, quando esse processo se acentua e uma intensa apoptose das clulas epiteliais mamrias e a reabsoro do leite presente na glndula ocorrem. Com isso se inicia uma substituio do tecido secretor por tecido conjuntivo, que passa a representar grande parte do tecido existente na glndula mamria durante o perodo seco (FRANDSON; WILKE; FAILS, 2005). Acredita-se que o Fator de Crescimento Semelhante Insulina-Tipo I (IGF-I) tenha um importante papel na sobrevivncia das clulas epiteliais mamrias. A ativao da IGF-I nos tecidos modulada pela produo local de protenas de ligao IGF, uma famlia de protenas que pode inibir ou intensificar a atividade da IGF. Durante o incio da involuo da glndula mamria de roedores e sunos, a protena de ligao de Fator de Crescimento Semelhante Insulina-Tipo 5 (IGFBP5) produzida pelo tecido mamrio tem relao com a inibio da sobrevivncia das clulas mediada por IGF, podendo ser este um dos mecanismos para incrementar a apoptose das clulas mamrias no perodo de secagem (HURLEY; FORD, 2003). O perodo seco tem incio cerca de 30 a 45 dias antes do parto e de fundamental importncia para a perfeita recuperao da glndula mamria para a prxima lactao. Boutinaud et al. (2003) relataram que, ao diminuir a freqncia de ordenha das cabras, os alvolos sofreram uma reduo de dimetro relacionada diminuio do nmero de clulas secretrias dos alvolos. O subseqente acmulo de leite na cisterna levou abertura das junes celulares e a um aumento da permeabilidade vascular. Tambm foi observado que a inflamao que ocorre numa das mamas pode acometer a mama contralateral aps trs dias. Ainda com relao ao nmero de ordenhas realizadas, Wilde (1987) constatou que glndulas que sofreram trs ordenhas dirias continham, ao final da lactao, maior

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nmero de clulas epiteliais do que mamas contralaterais ordenhadas duas vezes ao dia, mostrando que o nmero de clulas da glndula mamria sofre um controle local da freqncia da retirada do leite. Em conjunto com as mudanas estruturais da glndula mamria no perodo seco ocorrem diversas mudanas na secreo lctea. Mesmo durante a lactao, quando ocorre um acmulo da secreo lctea na glndula mamria, a taxa de secreo diminui e ocorrem mudanas na composio do leite (TURNER3, 1953 apud FLEET; PEAKER, 1978 p.491). Fleet e Peaker (1978) relataram que na cabra ocorre uma reduo de 57% na produo da secreo lctea logo no segundo dia aps a interrupo da ordenha e que no terceiro dia aps a interrupo a quantidade de leite secretado corresponde a apenas 22% do volume ordenhado antes da interrupo da ordenha. Esta reduo da produo de secreo lctea acompanhada de uma queda do aporte de oxignio, glicose e acetato para a glndula mamria, sendo que no terceiro dia aps a interrupo da ordenha pode ser observada uma reduo de 74% no aporte de glicose, 64% de acetato e 59% no consumo de oxignio. A partir do quarto dia sem ordenha, a reabsoro de leite se inicia e a taxa de secreo considerada nula. Ainda segundo Fleet e Peaker (1978), as mudanas nas caractersticas fsicoqumicas do leite s aparecem a partir do terceiro ou quarto dia, com um aumento do pH, da concentrao de protenas e de ons de sdio e cloro associados a uma diminuio dos teores de potssio, lactose e citrato, nesse mesmo perodo o volume do bere atinge o grau mximo de distenso. O bere retorna ao volume normal, equivalente ao volume da glndula vazia ps-ordenha, aps 30 dias sem ser ordenhado. Com base em seu estudo, Fleet e Peaker (1978) apontaram a distenso do bere aps a interrupo da ordenha como principal fator responsvel pela diminuio da secreo lctea. Segundo Henderson e Peaker (1983), a distenso fsica por si s no a responsvel pela inibio da secreo lctea nos caprinos, pois a infuso de soluo isosmtica de dissacardeo na cisterna da glndula mamria no determinou qualquer alterao na quantidade de leite produzido pela mama. Todavia, nessa mesma pesquisa, os autores observaram que a presena de leite na cisterna da

TURNER, H. G. Dependence of residual milk in the udder of the cow upon total yield: its bearing upon supposed inhibition of secretion. Australian Journal of Agricultural Research, v. 4, p. 118-126, 1953.

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mama determinava diminuio da produo de leite. Baseados nessas observaes, os autores levantaram a hiptese de que o controle realizado por algum componente presente na secreo que tem sua ao desencadeada ou potencializada pela distenso da glndula mamria. Pesquisas realizadas por Wilde (1995) evidenciaram a presena de uma protena no soro lcteo de caprinos, denominada pelo autor de Feedback Inhibitor of Lactation (FIL), que teria a capacidade de reduzir a produo de secreo lctea, pois a introduo desta protena (FIL) na glndula mamria de uma cabra em lactao reduziria a produo de leite. Segundo Linzel e Peaker (1971), durante o perodo seco de cabras no gravdicas os ductos mamrios tornam-se permeveis lactose e ons, ao contrrio do que ocorre no perodo de lactao, quando os ductos so impermeveis passagem desses componentes do leite. Em seus estudos sobre secagem da glndula mamria em bovinos, Smith e Todhunter (1982) decidiram dividir o perodo seco em trs fases: involuo ativa, involuo constante e lactognese/colostrognese. Estudos dessa natureza ainda no foram realizados em caprinos, sendo que desta maneira sero detalhados os achados na espcie bovina. Recentemente, Birgel (2006) realizou estudo em vacas Holandesas com a finalidade de analisar as caractersticas fsico-qumicas e celulares do leite desses animais, assim como as alteraes sofridas pela glndula mamria aps a interrupo da ordenha e no decorrer do perodo seco. A pesquisadora observou que os valores de pH sofreram aumento abrupto do primeiro para o terceiro dia da secagem (6,76 para 7,08), seguido de aumento gradual, sendo que entre o dcimo e o quadragsimo quinto dias de secagem os valores tenderam e a se estabilizar. Os valores de eletrocondutividade do leite nas amostras colhidas entre a ltima ordenha e o terceiro dia de secagem aumentaram de 5,63mS/cm para 8,02mS/cm, respectivamente, e entre o terceiro e o dcimo dias de secagem foram observadas flutuaes nos valores mdios, que voltaram a aumentar aps o dcimo quinto dia. J os teores de cloretos sofreram um aumento abrupto, passando de 132,3331,51 para 242,2051,07mg/dl entre a ltima ordenha e o terceiro dia do processo de secagem, sofrendo variao somente a partir do dcimo quinto dia do incio do processo de secagem, quando estes voltaram a apresentar um leve aumento.

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Com ralao lactose, Birgel (2006) observou que entre a ltima ordenha e o quinto dia houve uma grande queda nos valores, de 4,23g/dl para 1,73g/dl, sendo que entre o quinto e o trigsimo dias os valores continuaram caindo, mas de forma gradual. J em relao quantidade de slidos totais durante o perodo seco de bovinos, foi observado pela autora que entre o primeiro e o stimo dias de secagem houve um aumento gradual dos valores (de 10,73g/dl para 16,35g/dl), sendo que no perodo compreendido entre o stimo e o dcimo dias houve estabilizao para ento ocorrer uma queda at o trigsimo dia (10,81g/dl). Houve aumento gradual nos teores de protena total em amostras colhidas entre o primeiro e o dcimo quinto dias (de 4,22g/dl para 8,95g/dl), sendo que aps o dcimo quinto dia os valores sofreram flutuaes sem que qualquer tendncia pudesse ser detectada. Houve uma significativa influncia do processo de secagem nos valores de gordura do leite. A partir do primeiro dia de secagem, que apresentou o valor mnimo dessa varivel (2,02g/dl), houve um gradual aumento at o stimo dia (7,97g/dl), quando ento houve uma estabilizao dos valores mdios at o dcimo dia, ocorrendo nova queda at o trigsimo dia (3,24g/dl). Tambm houve uma significativa influncia no nmero de clulas somticas do leite. Em amostras colhidas entre a ltima ordenha e o stimo dia de secagem houve um aumento abrupto de 649.450cls/ml para 4.898.850cls/ml, ocorrendo uma estabilizao at o dcimo quinto dia e um novo aumento at o trigsimo dia (6.486.900cls/ml).

2.3.1 Involuo Ativa

Segundo Hurley (2003), durante o processo de secagem da glndula mamria de bovinos ocorre, entre 3 e 7 dias aps a interrupo da ordenha, uma reduo substancial no volume de leite obtido da glndula mamria, sendo que o volume continua a diminuir durante as quatro semanas subseqentes. Com relao composio da secreo lctea, ocorre uma diminuio da concentrao de protenas, gordura e lactose durante as duas primeiras semanas de secagem, enquanto que a concentrao de fatores de proteo como lactoferrina e leuccitos aumenta durante o incio da involuo.

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Ainda sobre o processo de involuo da glndula mamria de bovinos, Hurley (2003) relata que alteraes histolgicas e ultraestruturais j ocorrem a partir de quarenta e oito horas aps a interrupo da ordenha, com formao de grandes vacolos de estase nas clulas epiteliais em decorrncia do acmulo de gordura nas clulas. Os vacolos persistem at a segunda semana de secagem e desaparecem completamente na quarta semana. O volume da luz alveolar diminui durante a involuo, enquanto que a rea de estroma aumenta. Em conformidade com esse experimento, Quarrie, Addey e Wilde (1996) relataram que aps vinte quatro horas de interrupo da retirada do leite da glndula mamria de camundongos j era possvel observar uma grande distenso dos alvolos. Porm, aps quarenta oito horas do incio da estase lctea, j havia sinais de diminuio da distenso, mas com sinais de desorganizao do epitlio secretor decorrentes da apoptose. Fowler (1991) relatou que o volume do parnquima do bere de cabras que pararam de ser ordenhadas passou de pouco mais de 0,616 litros por glndula para pouco menos que 0,365 litros por glndula em duas semanas, mostrando uma reduo de 44,44%. Um dos primeiros eventos que pode ser observado nessa fase de involuo ativa o aparecimento de lisossomos nas clulas epiteliais secretoras. Esses lisossomos so responsveis pela autofagocitose dos constituintes celulares durante a regresso mamria, enquanto que a heterofagocitose ser realizada por macrfagos que migraro para a mama durante a involuo ativa (SMITH; TODHUNTER, 1982). As protenas da secreo originrias do soro sanguneo esto normalmente presentes no soro lcteo, com a concentrao variando pouco nos primeiros dias da involuo. Entretanto, aps sete dias possvel observar um grande aumento da concentrao dessas protenas, refletindo, provavelmente, um aumento da permeabilidade da barreira das clulas secretrias passagem das protenas sricas. Porm, o aumento de protenas no chega aos nveis alcanados em processos inflamatrios, indicando que deva existir algum tipo de controle por parte da glndula mamria sobre a permeabilidade das junes celulares. Outra protena que tem grande aumento em sua concentrao a lactoferrina, que est ligada defesa da glndula mamria, pois um constituinte normal dos polimoformonucleados e possui grande capacidade de ligao ao ferro, competindo com as bactrias (SMITH; TODHUNTER, 1982).

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Em pesquisa realizada por Birgel (2006) com a finalidade de avaliar a influncia do processo de secagem na glndula mamria em fmeas bovinas da raa Holandesa foi constatado que a distenso da glndula aumentou consideravelmente nas primeiras vinte quatro horas aps a interrupo da ordenha, sendo que a freqncia de mamas distendidas (com contedo no bere e certa dificuldade de pregueamento da pele) passou de 2,7% no dia da ltima ordenha para 22,3% no primeiro dia de secagem. At o terceiro dia 20,5% das mamas ainda estavam distendidas. Porm, a partir desse momento, o processo de reabsoro j pde ser observado com maior clareza, sendo que no dcimo dia havia 2,3% de mamas distendidas e nenhuma aos trinta dias de secagem. Com relao distenso dos tetos, logo no dia da interrupo da ordenha havia 25% de tetos distendidos (com flutuao no seu interior, paredes tensas e brilhantes, preservando ainda as pregas de pele) e, aps vinte quatro horas, 9,15% dos tetos estavam extremamente distendidos (luzidios, com paredes tensas e lisas). No terceiro dia, 63,6% dos tetos estavam distendidos e a partir do stimo dia o percentual de tetos distendidos comeou a diminuir. Complementando as informaes do exame clnico do bere durante a secagem, Birgel (2006) relatou que no foi observado qualquer grau de edema na mama durante o perodo e que durante os trs primeiros dias esta caracterstica foi observada em 29,5% dos tetos, diminuindo a freqncia ao longo da secagem e cessando completamente no quadragsimo quinto dia.

2.3.2 Involuo constante

A existncia ou no de um perodo de involuo constante est diretamente relacionada com a durao do perodo seco. Em criaes que tendem a diminuir o perodo seco, a glndula pode ficar um perodo muito curto nesse estado de involuo total, sendo que muitas vezes a mama poder passar do estado de involuo ativa diretamente para a lactognese (SMITH; TODHUNTER, 1982). Durante essa fase de involuo constante, a quantidade de fludo presente na glndula fica extremamente reduzida e os principais constituintes do leite ficam limitados a uma concentrao mnima. As concentraes de imunoglobulinas e

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lactoferrina permanecem elevadas, porm menores que na involuo ativa. A freqncia de novas infeces nesse perodo extremamente baixa devido provavelmente grande concentrao de fatores antibacterianos e ao tampo de queratina presente na abertura do esfncter do teto, que evita a entrada de patgenos (SMITH; TODHUNTER, 1982).

2.3.3 Lactognese ou Colostrognese

Em contraste com a primeira fase, esse perodo caracterizado por um processo de reconstruo da glndula mamria, transformao mediada por hormnios. A principal funo da glndula mamria durante essa fase acumular colostro, secreo que possui grande concentrao de IgGs. Os constituintes principais do leite comeam a se acumular na secreo aproximadamente duas semanas antes do parto, com considervel aumento das concentraes de gordura, casena e lactose cerca de cinco dias antes do parto. A quantidade de fludo se acumula lentamente durante as duas semanas que antecedem o parto, com um considervel aumento cerca de 1 a 3 dias antes do nascimento, sendo que este acmulo est diretamente relacionado com o aumento de citrato na secreo. Neste perodo de duas semanas pr-parto tambm possvel observar a reduo dos nveis de lactoferrina. A concentrao mxima de imunoglobulinas ocorre cerca de 5 a 10 dias antes do parto e tende a cair com o aumento de fludo acumulado na mama (SMITH; TODHUNTER, 1982). Fleet et al. (1975) dividiram a colostrognese de caprinos em duas etapas: um primeiro estgio caracterizado pelo incio da produo de secreo lctea e um segundo caracterizado pela produo abundante de secreo, ocorrendo um pouco antes do parto. No final do perodo seco de fmeas da espcie caprina, a fase preparatria do parto caracterizada por uma distenso da mama e dos tetos, em decorrncia do acmulo de secreo lctea para formao do colostro. Segundo Prina (2007), em animais da raa Saanen at cerca de quatro dias antes do parto a glndula mamria se encontra no distendida ou moderadamente distendida, sendo possvel ainda

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preguear a pele. Sete dos dezoito animais observados apresentavam uma mama no distendida e os onze restantes apresentavam mamas moderadamente distendidas. A partir do quarto dia a proporo de animais com distenso moderada se elevou gradativamente at um dia e meio antes do parto, quanto j totalizavam dezesseis dos dezoito animais. A partir de vinte quatro horas antes do parto, dois dos dezoito animais tiveram a mama classificadas como distendida, ou seja, havia dificuldade de preguear a pele. Doze horas antes do parto o nmero de animais com mama distendida havia passado para seis e um animal j apresentava a mama extremamente distendida. No momento do parto, a metade dos animais apresentava mamas distendidas e dois animais possuiam mamas extremamente distendidas, mostrando que a maior parte da produo de colostro ocorreu cerca de trinta e seis horas antes do parto (em fase de elaborao) 2.

2.4 Caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea

2.4.1 Concentrao hidrogeninica (pH)

Em 1909, Sren P. T. Srensen estabeleceu o pH, ou seja, o logaritmo negativo da concentrao de ons hidrognio como mtodo para expressar a acidez de uma soluo aquosa. Os valores de pH variam entre 0 e 14, sendo que a 25C o pH 7 considerado neutro, valores menores que 7 so prprios de solues cidas e maiores que 7 de solues bsicas. Os cidos so substncias que produzem, em soluo aquosa, ons hidrognio (H+) e, analogamente, bases produzem ons hidroxila (OH-). Os estudos da dissoluo de sais na gua e de seus componentes inicos resultaram na determinao do produto inico da gua (Kw=[H+][OH-]) por Friedrich Kohlrausch e Adolf Heydweiller, o que seria fundamental para a formulao do conceito de pH anos mais tarde (GAMA; AFONSO, 2007).

PRINA, A. P. M. A fase preparatria do parto de cabras da raa Saanen. Manifestaes clnicas indicadoras da pario iminente e avaliao do perfil hormonal. 2007. 141 f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2007.

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Segundo Birgel (2004), a secreo lctea apresenta uma reao anftera, ou seja, pode se comportar como cido ou base. Normalmente, a secreo lctea de caprinos levemente cida (PARK et al., 2006). Os principais fatores que determinam a acidez do leite so os grupos cidos das protenas, os citratos e os fosfatos livres (SCHALM; CARROLL; JAIN, 1971). Um fator que pode alterar essa acidez natural do leite seria a fermentao da lactose por bactrias mesfilas, acarretando uma acidificao do leite pela produo do cido ltico (BARROS; LEITO, 1992). Essa acidificao por bactrias um forte indicativo da falta de higiene ou conservao inadequada do leite, sendo estes fatores importantes que podem ocasionar perdas significativas na produo de leite caprino de qualidade para a indstria de leite e derivados. Durante o processo inflamatrio diversas mudanas ocorrem no tecido mamrio, desencadeando uma alterao na permeabilidade capilar e permitindo que ons bicarbonato passem para a secreo lctea, alcalinizando a secreo de glndulas mamrias com mamite, sendo que as variaes do pH sero proporcionais aos danos sofridos pelas estruturas celulares e vasculares do tecido mamrio (SCHALM; CARROLL; JAIN, 1971). Segundo Birgel (2004), a ao alcalinizante do bicarbonato na secreo pode at sobrepor a ao de bactrias lactolticas que causam a diminuio de pH. J foram realizados diversos trabalhos em relao aos valores de pH da secreo lctea de caprinos durante a lactao. Fernandes (2002) encontrou valores mdios de 6,58 do leite de animais da raa Saanen. Em pesquisa envolvendo diversos rebanhos caprinos, com maioria da raa Saanen, Prata et al. (1998) encontraram um valor mdio de 6,648. Em outras pesquisas envolvendo caprinos da raa Saanen, Torii et al. (2004) observaram valores mdios de pH para a secreo lctea em torno de 6,49, Chornobai3 (1998 apud TORII et al., 2004 p. 905) encontrou valores de pH no leite in natura em torno de 6,7 e Nunes (2002) encontrou um valor mdio de pH de 6,62. Morgan et al. (2003) analisou amostras de secreo lctea provenientes de diversos rebanhos caprinos de pases do mediterrneo e encontrou valores de pH entre 6,12 e 6,89.

Chornobai, C. A. M. Avaliao fsico-qumica de leite in natura de cabras cruza Saanen, ao longo do perodo de lactao. 1998. 100 f. Dissertao (Mestrado), Universidade Estadual de Maring Maring. 1998.

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2.4.2 Eletrocondutividade

Eletrocondutividade a medida da resistncia de um material em particular a uma corrente eltrica, sendo que a resistncia eltrica de uma soluo eletroltica definida pela resistncia de um centmetro cbico da soluo. A condutibilidade medida em Siemens e calculada dividindo-se amperagem pela voltagem. A eletrocondutividade do leite determinada pela concentrao de nions e ctions, sendo que os mais importantes so o sdio (Na+), o potssio (K+) e o cloreto (Cl-). As clulas secretrias da glndula mamria utilizam transporte ativo para deslocar o sdio para o fludo extracelular e potssio para dentro das clulas, que so transportados passivamente das clulas secretrias para o leite. A relao Na:K de 3:1 no fludo extracelular e no sangue e de 1:3 no fludo intracelular e no leite. Os ductos mamrios parecem ser impermeveis a ons e a lactose, mantendo a concentrao de cloreto maior no sangue e no fludo extracelular do que no leite (NIELEN et al., 1992). Segundo Nielen et al. (1992), durante o processo inflamatrio as clulas secretoras sofrem danos e os ons de sdio e cloro do lquido extracelular extravasam para o lmen alveolar, enquanto que os ons de potssio vo para a secreo lctea, aumentando a eletrocondutividade sem que a presso osmtica seja alterada. Outro fator que pode alterar a eletrocondutividade da secreo lctea a porcentagem de gordura do leite, devido a sua caracterstica de no condutora eltrica e da barreira ao movimento dos ons que os glbulos de gordura representam (FERNANDO; RINDSIG; SPAHR, 1982). A literatura rara em relao aos valores de eletrocondutividade da secreo lctea de caprinos. Entretanto, Sharma e Roy (1977) estudaram a influncia da temperatura na eletrocondutividade do leite caprino e encontraram uma mdia de 6,979mS/cm a 30C. Fernandes (2002) encontrou valores de 6,55mS/cm durante a lactao para a raa Saanen e Park (1991), num estudo com caprinos da raa Alpina e Nubiana, encontrou valores mdios de eletrocondutividade da mistura da secreo lctea em torno de 6.948S/cm (6,948mS/cm).

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2.4.3 Cloretos

Nos processos inflamatrios que acometem a glndula mamria possvel constatar um aumento do aporte sanguneo que irriga o rgo que, associado ao aumento da permeabilidade dos capilares e destruio das junes celulares e bombas de transporte ativo de ons, acarreta um aumento da concentrao de cloretos na secreo lctea (AMARAL; NADER FILHO; LEW, 1988). Diversos trabalhos nacionais j foram realizados para estudar a concentrao de cloretos na secreo lctea de caprinos, assim como suas possveis alteraes. Tonin e Nader Filho (2002) relataram um aumento de cloretos no leite de caprinos da raa Saanen em diferentes estgios de lactao, encontrando valores entre 0,175g/100ml (175mg/dl) e 0,217g/100ml (217mg/dl). Em animais ordenhados duas vezes ao dia foi observado um aumento do teor mdio de cloretos do inicio para o meio da lactao 0,175g/100ml (175mg/dl) pela manh e 0,183g/100ml (183mg/dl) pela tarde e 0,211g/100ml (211mg/dl) pela manh e 0,217g/100ml (217mg/dl) pela tarde, respectivamente sendo que animais ordenhados uma vez ao dia apresentaram aumento do teor de cloretos de 0,179g/100ml (179mg/dl) no incio da lactao para 0,201g/100ml (201mg/dl) no final da lactao. Com relao raa Saanen, Fernandes (2002) encontrou valores de 46,62mmol/dl (146,8mg/dl). J Barros e Leito (1992), em cabras das raas Parda Alpina, Saanen e Toggenburg e cabras mestias, encontraram um teor mdio de cloretos de 0,20% (200mg/dl) para Saanen sadias e 0,19% (190mg/dl) para o leite misturado dos quatro tipos de cabras, enquanto que as cabras mestias (Parda Alpina e Saanen) registram 0,24% (240mg/dl) quando estavam sadias e valores mdios significativamente maiores de 0,34% (340mg/dl) de cloretos aps serem inoculadas com Staphyloccocus aureus. Akinsoyinu e Akinnyele (1979), ao estudarem cabras Ans do Oeste Africano entre a segunda e dcima nona semana de lactao, encontraram um valor mdio de cloretos de 2,46g/l (246mg/dl). Prata et al. (1998) encontraram uma mdia de teores de cloreto de 0,172g% (172mg/dl) quando estudaram rebanhos caprinos de diversas raas em lactao. Upadhyaya e Rao (1993) estudou cabras de aptido leiteira da raa Ganjam entre 2 e 4 anos de idade e encontrou valores mdios de cloretos que variaram entre

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0,103% (103mg/dl) e 0,137% (137mg/dl). As amostras foram separadas pelos resultados do CMT: negativo, traos, uma cruz, duas cruzes, e trs cruzes e foram, respectivamente, 0,103% (103mg/dl), 0,103% (103mg/dl), 0,120% (120mg/dl), 0,129% (129mg/dl) e 0,137% (137mg/dl).

2.4.4 Lactose

A lactose, composto de glicose e galactose, o principal carboidrato do leite e sua sntese ocorre nas clulas secretrias de leite. encontrada quase que exclusivamente na glndula mamria e no leite, sendo que durante a lactao pequenas concentraes podem ser observadas no plasma sangneo. Este carboidrato tem fundamental importncia no equilbrio hidrosttico do leite, pois responsvel por aproximadamente 50% da presso osmtica total da secreo lctea, causando um fluxo de gua das clulas e do tecido intersticial para o leite. Durante a lactao o leite isosmtico ao sangue. Segundo Fernandes (2002), a concentrao de lactose tende a diminuir na ocorrncia de certas infeces da mama devido ao consumo pelas bactrias fermentadoras de lactose, sendo este um bom parmetro para verificar a sade da glndula mamria. Muitos estudos j foram conduzidos com a finalidade de determinar a concentrao de lactose na secreo lctea caprina. Fernandes (2002) encontrou valores mdios de 4,30g/dl para a raa Saanen. Prata et al. (1998) encontraram uma mdia de 4,35% (4,35g/dl) de lactose na secreo lctea de rebanhos predominantemente Saanen com diferentes manejos e dietas. Torii et al. (2004) estudou diferentes tipos de volumosos na alimentao de cabras Saanen e encontrou um valor mdio de lactose na secreo lctea de 4,28% (4,28g/dl). Ainda com relao aos estudos realizados com cabras da raa Saanen, Gomes (2004) encontrou um valor mdio de 4,33g/dl durante uma lactao de oito meses. Os valores mdios apresentaram uma queda durante o perodo estudado, chegando ao seu valor mnimo no stimo ms (4,22g/dl) e mximo no primeiro ms (4,67g/dl).

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Leitner, Merin e Silanikove (2004), ao estudarem a secreo lctea de cabras israelenses, detectaram uma diferena significante entre os valores de lactose da secreo lctea sem isolamento bacteriano 47,0g/l (4,7 g/dl) e com isolamento bacteriano 41,7g/l (4,17g/dl). Morgan et al. (2003) analisaram amostras de secreo lctea provenientes de diversos rebanhos caprinos de pases do mediterrneo e encontraram valores de lactose entre 32,9g/kg (3,29g/dl) e 48,0g/kg (4,8 g/dl). Upadhyaya e Rao (1993) estudaram cabras de aptido leiteira da raa Ganjam entre 2 e 4 anos de idade e encontraram valores mdios de lactose que variaram entre 3,98% (3,98g/dl) e 4,73% (4,73g/dl). As amostras foram separadas pelos resultados do CMT, negativo, traos, uma cruz, duas cruzes, e trs cruzes e foram, respectivamente, 4,73% (4,73g/dl), 4,52% (4,52g/dl), 4,23% (4,23g/dl), 3,99% (3,99g/dl) e 3,98% (3,98g/dl).

2.4.5 Slidos Totais

Como slidos totais (ST) ou extrato seco total (EST) entende-se a frao do leite formada pelas protenas, lipdeos, carboidratos, minerais e vitaminas. A quantidade de slidos totais est diretamente relacionada como rendimento da produo de derivados do leite como o queijo, por exemplo. Sabe-se que a diminuio de 0,5% de slidos totais pode significar perda de at cinco toneladas de leite em p para cada milho de litros de leite processados (FONSECA; SANTOS, 2000). Muitos estudos foram realizados com a finalidade de determinar o valor mdio de slidos totais presentes na secreo lctea de caprinos. Prata et al. (1998), estudando animais da raa Saanen, encontraram um valor mdio de 11,51% (11,51 g/dl), ao passo que Gomes (2004), ao estudar cabras durante os primeiros 8 meses de lactao, encontrou valores mdios de 12,70g/dl. A quantidade de slidos totais teve valor mximo no primeiro ms (13,09g/dl) e caiu durante o perodo analisado, sendo que o menor valor encontrado foi 11,61g/dl no stimo ms (GOMES, 2004). Silva et al. (2006) estudaram animais submetidos a diferentes tipos de concentrados e encontraram um valor mdio de 10,85% (10,85g/dl).

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Ainda a respeito da raa Saanen, Chornobai4 (1998 apud TORII et al. 2004 p.905) encontrou valores de slidos totais no leite in natura em torno de 12,4% (12,4g/dl), enquanto que Nunes (2002) e Torii et al. (2004) encontraram valores mdios iguais a 11,07% (11,07g/dl) e 10,13% (10,13 g/dl), respectivamente. Salama (2005) encontrou valores iguais a 13,6% (13,6g/dl) e 12,9% (12,9 g/dl) para caprinos ordenhados uma e duas vezes ao dia, respectivamente. Morgan et al. (2003), ao analisarem amostras de secreo lctea provenientes de diversos rebanhos caprinos de pases do mediterrneo, encontraram valores de slidos totais entre 10,4g/kg (10,4g/dl) e 14,8g/kg (14,8g/dl).

2.4.6 Protena

O leite caprino contm, basicamente cinco protenas, a saber: K-casena, caseina, s-2 casena, -lactoglobulina e -lactoalbumina. As casenas constituem a maior parte das protenas. Estas fraes proticas so insolveis em pH menor que 4,6 e so conhecidas como protena bruta. J as lactoglobulinas, lactoalbuminas, albuminas advindas do soro sanguneo e imunoglobulinas so solveis em pH menor que 4,6 e so conhecidas como protenas do soro lcteo. (REECE, 1997). Segundo Le Mens5 (1985 apud FERNANDES 2002 p. 11), quando comparamos os leites caprino e bovino notamos que o primeiro contm um teor menor de s-casena (21,2% contra 40,0% do bovino) e uma maior quantidade de casena (67,4% contra 43,3% do bovino). O tamanho das micelas de casena tambm difere entre as duas espcies, sendo 50nm no leite caprino e 75nm no bovino (LE JAOUEN6, 1981 apud FERNANDES, 2002 p. 14).

Chornobai, C. A. M. Avaliao fsico-qumica de leite in natura de cabras cruza Saanen, ao longo do perodo de lactao. 1998. 100 f. Dissertao (Mestrado), Universidade Estadual de Maring Maring. 1998 LE MENS, P. Proprits physico-chimiques nutritionelles et chimiques. In: LUQUET, F. M. Lait et produits laitiers. Paris, tec. Doc. Lavoisier, 1985, v. 1, pat. 3, cap. 1, p. 349-368 LE JAOUEN, J. C. Milking and the technology of milk and milk products. In: GALL, C. (Ed.). Goat production. London: Academic Press, 1981. p. 345-377.

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Ao analisar caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea de cabras da raa Saanen, Fernandes (2002) encontrou valores de 3,08g/dl. Segundo a autora, esse fator muito mais influenciado pela gentica do animal (raa) do que pela sade da glndula mamria, no sendo um bom indicador da sade do bere. Prata et al. (1998) encontraram 3,27% (3,27g/dl) de protena bruta no leite de caprinos predominantemente da raa Saanen submetidos a diferentes manejos e dietas. J Gomes (2004), ao estudar cabras durante os primeiros 8 meses de lactao, encontrou valores mdios de 2,83g/dl, sendo que o menor e o maior valores encontrados foram 2,55g/dl e 2,97g/dl, respectivamente. Torii et al. (2004) anotaram um valor mdio de protena na secreo lctea de cabras da raa Saanen em torno de 2,84% (2,84g/dl). Silva (2006), tambm em animais da raa Saanen, porm submetidos a diferentes tipos de concentrados, obteve um valor mdio de 3,17% (3,17g/dl) de protena no leite. Park e Humphrey (1986) encontraram uma mdia de 3,42% (3,42g/dl) de protena na secreo lctea de cabras das raas Alpina e Nubiana. Entretanto, num estudo posterior, Park (1991) encontrou na mistura da secreo lctea das duas raas (Alpina e Nubiana) valores mdios em torno de 3,51% (3,51g/dl) de protena. J Benedet (1996), ao estudar caprinos em Santa Catarina, obteve um valor mdio de protena do leite menor, 3,28% (3,28g/dl). Leitner (2004), ao estudar cabras israelenses, encontrou um valor de 34,2g/l (3,42g/dl) de protena na secreo lctea de mamas sadias, valores que tendiam a uma diferena significativa do valor encontrado em mamas infectadas (35,0g/l ou 3,5g/dl). J Salama (2005) encontrou valores de protenas na secreo lctea de 3,28% (3,28g/dl) e 3,20% (3,2g/dl) para caprinos ordenhados uma e duas vezes ao dia, respectivamente.

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2.4.7 Gordura

A gordura do leite constituda principalmente por triglicrides, porm pequenas fraes de fosfolpides, colesteris, cidos graxos livres, monoglicerdios e vitaminas lipossolveis tambm podem ser encontradas. A sntese da gordura do leite de ruminantes originria, principalmente, de cidos graxos formados no rmen, tais como o cido actico e butrico, e portanto diretamente influenciado pela dieta do animal (REECE, 1997). Animais que recebem altas quantidades de concentrado tendem a apresentar uma menor quantidade de gordura no leite devido menor produo de cido actico e maior produo de cido propinico (CALDERON, 1984) A constituio da gordura do leite caprino difere significativamente da gordura do leite bovino, sendo muito mais rico em cidos butrico, caprico, caprlico, cprico, lurico, mirstico, palmtico e linolico. Porm, possui menores teores de cidos esterico e olico. Trs das cadeias mdias de triglicerdeos (caprico, caprlico e cprico) tm nome relacionado com a espcie caprina, devido a sua predominncia no leite desses animais (JENNES, 1980). Segundo Tzibola-Clarice (2003), essa diferena deve-se, principalmente, a diferena existente entre a polimerizao do cido actico no rmen caprino e bovino. O cido cprico, caprlico e outras cadeias mdias de triglicerdeos tornaramse tratamentos mdicos rotineiros para sndromes de m-absoro, esteatorria, hiperlipoproteinemia, resseco intestinal, m nutrio infantil, epilepsia, fibrose cstica e cirurgia de ponte de safena devido a seu metabolismo nico que provm energia direta, ao invs de ser depositada como tecido adiposo. Uma das particularidades dos cidos graxos do leite caprino seu papel na determinao do sabor de cabra da secreo lctea em decorrncia da liberao de cidos graxos de cadeia mdia ramificada ou da rancidez do leite devido a grandes concentraes do cido butrico. Os lipdeos esto relacionados tambm com a produo, consistncia, colorao e sabor do queijo produzido. (CHILLIARD, 2003) Segundo Fernandes (2002), o teor de gordura da secreo lctea de cabras Saanen 3,30g/dl e tende a aumentar de acordo com o nmero de lactaes e com o decorrer da mesma. Prata et al. (1998) tambm estudaram cabras Saanen e

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encontraram uma mdia de 3,74% (3,74g/dl) de gordura na secreo lctea. J Guimares et al. (1989), estudando cabras das raas Saanen, Parda e Toggenburgen e utilizando amostras provenientes de animais em sua primeira lactao, anotaram um valor mdio de 2,85% (2,85g/dl). Porm, quando considerado apenas o final da lactao desses animais, o valor mdio foi de 2,04% (2,04g/dl). Utilizando animais em diferentes estgios de lactao, a mdia encontrada para o perodo de lactao foi de 2,86% (2,86g/dl) e 2,98% (2,98g/dl) para a fase final. Em outro estudo com cabras da raa Saanen, conduzido por Barros e Leito (1992), foi encontrado um valor mdio de 3,5% (3,5g/dl). O teor mdio de gordura do leite de cabras da raa Saanen obtido por Gomes (2004) variou entre 3,25 e 5,39g/dl no sexto e quarto ms, respectivamente, sendo que o teor mdio durante toda a lactao foi de 4,10g/dl. Damasceno et al. (1997) estudaram a influncia de diferentes nveis de concentrados na dieta nos teores de gordura do leite de cabras com variados graus de sangue da raa Saanen e encontraram um valor mdio de 3,5% (3,5g/dl) durante a lactao, enquanto que Chornobai7 (1998 apud Torii et al. 2004) e Nunes (2002) encontraram valores de gordura no leite in natura de cabras Saanen em torno de 3,81% (3,81g/dl) e de 2,74% (2,74g/dl), respectivamente. Silva (2006), estudando animais da raa Saanen submetidos a diferentes tipos de concentrados, obteve um valor mdio de 2,89% (2,89g/dl) de gordura no leite. Park e Humphrey (1986), em rebanhos de caprinos das raas Nubianas e Alpinas, encontraram uma mdia de 4,47% (4,47g/dl) de gordura no leite. J em outro estudo com as mesmas raas, porm no meio da lactao, Park (1991) encontrou valores mdios de gordura na mistura da secreo lctea das duas raas em torno de 3,94% (3,94g/dl). Leitner (2004), em cabras israelenses, anotou valores mdios de gordura na secreo lctea de mamas no infectadas iguais a 38,9 g/l (3,89g/dl), valor que no diferiu de maneira significativa do encontrado em mamas infectadas (38,8g/l ou 3,88g/dl). Boutinaud et al. (2003), ao estudarem a influncia do nmero de ordenhas dirias na composio do leite e na glndula mamria de cabras Saanen sadias,

Chornobai, C. A. M. Avaliao fsico-qumica de leite in natura de cabras cruza Saanen, ao longo do perodo de lactao. 1998. 100 f. Dissertao (Mestrado), Universidade Estadual de Maring Maring. 1998

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encontrou valores mdios de 31,00,7g/kg (3,100,7g/dl) para a gordura no leite. J Benedet (1996), estudando caprinos do estado de Santa Catarina, obteve um valor mdio de gordura do leite de 3,34% (3,34g/dl). Morgan (2003) analisou amostras de secreo lctea provenientes de diversos rebanhos caprinos de pases do mediterrneo e encontrou valores de gordura entre 29,0 e 60,3g/Kg (2,90 e 6,03g/dl).

2.5 Caractersticas celulares da secreo lctea

A primeira linha de defesa contra as infeces da glndula mamria o canal do teto, sendo que durante o perodo seco possvel observar a formao de um tampo de queratina no canal do teto. Na realidade, esse tampo se forma aps um perodo de 24 a 60 horas sem ordenha (NICKERSON, 2003) e serve como uma barreira contra a entrada de bactrias no bere. Porm, a ocluso total do orifcio do teto s ocorre de duas a trs semanas aps a interrupo da ordenha. As bactrias que passarem por essa barreira e chegarem cisterna do teto enfrentaro a segunda linha de defesa da glndula mamria, constituda pelos leuccitos fagocitrios. Os neutrfilos constituem a maior parte das clulas somticas do leite de cabra sem infeco intramamria (50 a 70%). J nos bovinos, os neutrfilos representam apenas 5 a 20% das clulas somticas presentes no leite. Isso sugere que existe uma migrao muito mais rpida de leuccitos no leite caprino do que no leite bovino, contribuindo para uma contagem naturalmente mais alta de clulas somticas nos caprinos (PAAPE; CAPUCO, 1997). A importncia dos neutrfilos fica ainda mais evidenciada levando-se em conta o que disseram Schalm, Jain e Carroll (1975), que afirmaram que uma depleo no nmero de neutrfilos representa um considervel aumento na susceptibilidade a infeces intramamrias. A contagem de clulas somticas na secreo lctea tem sido muito utilizada nos ltimos anos como referncia da sade do bere e da qualidade do leite caprino, servindo como base para programas de sanidade do rebanho e como fator para remunerao extra ao produtor que comercializa o leite caprino com baixa contagem de clulas somticas (CCS). Diversas pesquisas no mbito nacional e internacional

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j foram conduzidas sobre o assunto e deve-se salientar que existem muitas diferenas entre o leite caprino e bovino. Andrade et al. (2001) recomendam a enumerao de clulas presentes no leite como forma de acompanhar o estado sanitrio do bere, sendo um bom indicador de possveis redues na produo de leite e alteraes na composio fsico-qumica. Entretanto, deve-se ressaltar que a contagem de clulas somticas fisiolgica do leite caprino naturalmente maior que no leite bovino. Poutrel et al. (1997) concluram que a contagem de clulas somticas pode ser utilizada para identificar animais com infeco intramamria e que essa infeco tem um papel preponderante na contagem de clulas somticas. Em caprinos, segundo Dulin et al. (1983), especial ateno deve ser tomada na contagem de clulas somticas, pois devido ao tipo de secreo apcrina, na qual a parte apical das clulas secretrias do leite eliminada junto com o leite, diversas partculas citoplasmticas so encontradas na secreo lctea. Essas partculas apresentam um dimetro e morfologia semelhante aos leuccitos e contm grande quantidade de protena e cido ribonuclico (RNA), mas no apresentam cido desoxirribonuclico (DNA). Portanto, os mtodos de contagem utilizados devem sempre ser aqueles baseados especificamente na deteco do DNA, evitando superestimao das contagens. Outros aspectos que devem ser considerados na contagem de clulas somticas devido influncia que exercem so: estgio de lactao, infeco intramamria e infeco pelo vrus da artrite encefalite caprina (DULIN et al., 1983; RYAN; GREENWOOS; NICHOLLS, 1993; ZENG; ESCOBAR, 1995; PAAPE; CAPUCO, 1997). Wilson, Stewart e Sears (1995) afirmaram que mais de 90% das variaes da contagem de clulas somticas em cabras no so devidas a infeces intramamrias, sendo que os fatores que mais contribuem para a alterao da contagem, na ausncia de infeco, so: estgio de lactao, ms do ano e, numa proporo menor, o nmero de partos e a produo de leite. Mesmo assim, 75% das variaes em cabras sem infeco intramamria permaneceram sem explicao, sugerindo que essas variaes poderiam ser explicadas pela presena do vrus da Artrite Encefalite Caprina (CAE), de bactrias anaerbicas e de infeces por micoplasma. Ainda em relao aos fatores que podem alterar a CCS da secreo lctea, McDougall e Voermans (2002) afirmaram que cabras no estro podem

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apresentar uma contagem mais elevada, mas no foi possvel determinar a razo dessa alterao. Paape e Capuco (1997) recomendam que a contagem de clulas somticas no seja usada para identificar infeces intramamria em caprinos justamente devido grande variao decorrente de fatores fisiolgicos. Zeng (1996), em estudo com leite caprino, observou que ao realizar a contagem de clulas por citometria de fluxo em aparelho calibrado para leite de vaca a contagem era 27,3% maior do que quando o mesmo aparelho estava calibrado com leite de cabra. Entretanto, Arcuri et al. (2004) no encontraram diferena na contagem de clulas somticas de leite conservado com Bronopol realizada com o Somacount 300 calibrado com leite de vaca e a microscopia com lminas coradas com Pyronina-y, corante especfico para DNA, concluindo que a contagem automtica poderia ser utilizada na contagem de clulas somticas do leite caprino. Em outro estudo da mesma linha, Zeng et al. (1999) compararam novamente a contagem de clulas somticas no leite caprino em quatro diferentes laboratrios, sendo que um deles calibrou o aparelho com leite caprino e os outros trs usaram o aparelho calibrado com leite bovino, os resultados dos trs laboratrios foram, em mdia, 24,5% (21,7%, 25,3 e 26,5%) maiores do que as mdias obtidas pelo laboratrio que calibrou o aparelho com leite caprino. Diversos estudos foram desenvolvidos no sentido de se obter valores de referncia para a contagem de clulas somticas no leite caprino. Park e Humphrey (1986) estudaram rebanhos de cabras Nubianas e Alpinas em lactao e encontraram uma mdia de 9,08 x 105 cls/ml na contagem de clulas somticas do leite desses animais. No mesmo trabalho, os autores sugeriram que a utilizao de mtodos de contagem de clulas somticas baseadas especificamente no DNA no seria suficiente para garantir a fidelidade dos resultados quando o leite caprino for examinado, indicando que em caprinos possa ser necessria a utilizao de tcnicas mais avanadas para se determinar a contagem de clulas somticas do leite sem erros causados por corpsculos citoplasmticos, concluindo que a contagem das clulas pode no ser um bom indicador da sade da glndula mamria. Park e Humphrey (1996) relataram, ainda, que existe uma grande correlao entre a contagem de clulas somticas e as porcentagens de protena e gordura do leite, indicando que, conforme a produo de leite decai durante a

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lactao, a concentrao dos constituintes slidos do leite aumenta, assim como o nmero de clulas somticas. Boutinaud et al. (2003) utilizaram cabras Saanen sadias para estudar a influncia do nmero de ordenhas dirias na composio do leite e na glndula mamria e detectaram uma tendncia ao aumento da CCS em cabras ordenhadas uma vez ao dia, sendo que nas cabras ordenhadas trs vezes ao dia a contagem se manteve estvel durante o perodo estudado. Andrade et al. (2001) utilizou o leite de cabras da raa Alpina para comparar as diferentes tcnicas utilizadas para a contagem de clulas no leite de bovinos. O rebanho em fase final da lactao apresentou contagem de clulas somticas que de 77.000 a 3.284.000cls/ml em contagem realizada por citometria de fluxo (Somacount 300), sendo que 40% do rebanho apresentou contagem maior do que 1x106cls/ml. A contagem por microscopia direta com azul de metileno e a contagem por citometria de fluxo foram muito semelhantes e no apresentaram diferena estatstica. Fernandes (2002) encontrou uma mdia de 7x105cls/ml para as raas Saanen e Alpina. A contagem mdia encontrada em animais que foram classificados, atravs do CMT, como sendo negativos, traos, uma cruz, duas cruzes e trs cruzes foi: 7,8x105cls/ml, 3,7x106cls/ml, 3,8x106cls/ml, 6,8x106cls/ml e 8,8x106cls/ml, respectivamente. recomendada a associao do CMT com outra prova, como, por exemplo, os exames clnico completo e microbiolgico. Guimares et al. (1989) estudou cabras em diversas lactaes, inclusive a primeira, e encontrou, por microscopia, diferentes valores na contagem de clulas somticas para cada grupo de animais. Animais com apenas uma lactao apresentaram contagem mdia de 1.368x103cls/ml no incio da lactao, 2.663x103cls/ml no meio da lactao e 3.080x103cls/ml na fase final. O grupo composto por cabras com diferentes nmeros de lactaes apresentou uma contagem mdia de 1.211x103cls/ml na fase inicial da lactao, 2.161x103cls/ml no meio da lactao e 2.177x103cls/ml na fase final. Gomes (2004) encontrou um valor mdio de 582.000cls/ml no leite caprino entre um e oito meses em lactao. No mesmo trabalho, a autora relacionou os valores medianos de contagem de clulas somticas com os resultados do California Mastitis Test: negativo (239.000cls/ml), traos (812.500cls/ml), uma cruz (999.000cls/ml), duas cruzes (3.978.000cls/ml) e trs cruzes (9.999.000cls/ml).

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Madureira (2006) estudou a contagem celular do leite de cabras da raa Saanen e encontrou diferentes valores para o incio (159.500cls/ml), meio (508.000cls/ml) e fim (277.000cls/ml) da lactao. Divindo os dados de acordo com os resultados do California Mastitis Test, temos os seguintes valores: 181.000cls/ml (negativo), 578.000cls/ml (traos), 628.000cls/ml (uma cruz), 1.421.500cls/ml (duas cruzes) e 5.542.000cls/ml (trs cruzes). Dulin et al. (1983) compararam as duas metades do bere de cada cabra, sendo que uma delas era infectada e a outra no. Enquanto que as metades infectadas passaram de 0,126x106cls/ml antes da infeco para 1,178x106cls/ml. As metades que no foram infectadas sofreram um aumento significativo de 0,08x106cls/ml para 0,481x106cls/ml, mostrando que uma infeco numa metade do bere influenciou a outra metade. Estudando cabras no meio da lactao Poutrel e Lerondelle (1983) encontraram uma mdia de 614x103cls/ml para beres livres de infeco e 1.293x103cls/ml para beres com isolamento de Stafilococcus coagulase negativo. J Leitner (2004), estudando cabras israelenses, anotou valores mdios de 417x103cls/ml para no infectadas e 1.750x103cls/ml para infectadas.

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3 MATERIAIS E MTODO

3.1 Consideraes gerais

Na presente pesquisa foram avaliadas 27 glndulas mamrias consideradas sadias de 15 cabras da raa Saanen. A seleo dos animais utilizados foi baseada no exame clnico e no histrico dos mesmos antes do incio do experimento, no sendo utilizados animais que apresentaram alteraes das caractersticas macroscpicas do leite, tais como: presena de grumos ou alteraes da cor do leite detectadas na prova do fundo escuro. Tambm foram descartadas cabras que na palpao da glndula mamria, realizada aps a ordenha, apresentaram alteraes de consistncia que pudessem estar relacionadas existncia de quadro de mamite, conforme as recomendaes de Birgel (1982), bem como aqueles que apresentaram episdios recorrentes de mamite ou que tivessem recebido qualquer medicao intramamria h pelo menos 2 meses antes do incio do processo de secagem.

3.2 Grupos experimentais

Ao final da fase experimental, considerando os resultados do exame microbiolgico, as glndulas mamrias foram divididas em dois grupos: - mamas sadias que no apresentaram qualquer distrbio durante o processo de secagem e cujo exame do exame microbiolgico era negativo; - mamas sadias que no apresentaram qualquer distrbio durante o processo de secagem, mas que no exame microbiolgico realizado na secreo lctea foi possvel o isolamento de bactrias. Em 70 oportunidades nas quais bactrias foram isoladas do leite, observou-se a presena de bactrias dos gneros Staphylococcus e Corynebacterium em 51,43% e 48,57% das amostras, respectivamente. Nestas 70 amostras de secreo lctea foram identificadas bactrias das seguintes espcies: Corynebacterium bovis (34 amostras); Staphylococcus hominis hominis (10 amostras), Staphylococcus

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haemolyticus (7 amostras), Staphylococcus hominis novobiocpticus (7 amostras), Staphylococcus caeseolyticus (6 amostras), Staphylococcus epidermidis (4 amostras), Staphylococcus intermedius (1 amostra) e Staphylococcus caprae (1 amostra). Posteriormente, as mamas examinadas foram divididas em dois grupos. As mamas nas quais no foi encontrado isolamento bacteriano em nenhuma oportunidade foram consideradas sem isolamento e as mamas que em algum momento apresentaram isolamento bacteriano foram colocadas no grupo com isolamento. De acordo com o incio da interrupo da ordenha, os animais foram divididos em oito grupos experimentais, procurando avaliar os 30 primeiros dias do perodo seco, bem como a influncia do isolamento bacteriano, sendo a constituio dos grupos experimentais apresentados na Tabela 3.1.

Tabela 3.1 - Constituio dos grupos experimentais para avaliar as caractersticas fsicoqumicas e celulares na secreo lctea de cabras da raa Saanen durante o processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Grupos Experimentais Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco Sem Isolamento Bacteriano 17 17 17 17 17 17 17 17 Com Isolamento Bacteriano 10 10 10 10 10 10 10 10

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3.3 Manejo dos animais

Durante a da fase experimental os animais ficaram alojados em baias com solrio no Centro de Pesquisas e Diagnstico de Enfermidades de Ruminantes do Hospital de Bovinos e Pequenos Ruminantes da Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da Universidade de So Paulo (HOVETFMVZUSP), situado na cidade de So Paulo (latitude 23 32 51, longitude 46 38 10, a 760m de altitude). A alimentao fornecida era constituda de feno de coast-cross, fornecido no perodo da manh e da tarde, rao peletizada com 14% de protena bruta fornecida pela manh e gua ad libitum. Semanalmente, era fornecido aos animais sal mineral de bovinos. A interrupo da ordenha foi realizada de forma abrupta e sem a aplicao de antibiticos intra-mamrios de qualquer natureza, sendo utilizadas somente as mamas que durante o exame clnico realizado no apresentaram qualquer distrbio de secreo durante o processo de secagem. Desta maneira, trs glndulas mamrias que apresentaram grumos na secreo lctea e/ou alteraes perceptveis pela palpao da mama foram excludas dos grupos experimentais.

3.4 Colheitas

No momento de cada colheita os animais eram retirados da baia e contidos com cabrestos. Imediatamente antes de cada colheita foi realizada a higienizao do bere e dos tetos atravs de pr-dipping com soluo de hipoclorito de sdio e posterior secagem individual com papel toalha. Aps os procedimentos de higienizao, era realizado o teste do fundo escuro. Para a colheita das amostras estreis de leite, era feita a anti-sepsia da extremidade do teto, particularmente do orifcio do teto, utilizando-se um chumao de gaze estril embebido em lcool 70%, de acordo com os padres recomendados em boletim da International Dairy Federation (1981). Aps a limpeza e anti-sepsia, os primeiros jatos de leite foram desprezados, a fim de evitar que resduos de antispticos contaminassem as amostras, e foi realizada a colheita de 2ml de leite em

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frascos de plstico estreis e com tampas de rosca destinados ao exame microbiolgico. As amostras foram conservadas em freezer a -20C para anlises futuras. Dando seqncia colheita das amostras, foram colhidos 50ml de leite de cada teto em frascos de plstico livres de ons. Imediatamente aps as colheitas, as amostras seguiam ao laboratrio para a determinao dos valores do pH, eletrocondutividade, cloretos e realizao do California Mastitis Test (CMT). Na seqncia, foram colhidos cerca de 20ml de leite de cada teto em frascos de plstico contendo duas pastilhas de conservante base de bronopol (2-bromo-2-nitropropano-1,3-diol) e natamycin para a contagem automtica de clulas somticas e determinao dos valores de lactose, protenas, slidos totais e gordura. Os frascos foram acondicionados em caixas apropriadas fornecidas pela instituio responsvel pelas anlises e foram mantidos, at o momento da leitura, em temperatura ambiente, num prazo mximo de sete dias aps a colheita do leite. Estas amostras eram ento encaminhadas via sedex para o Laboratrio de Fisiologia da Lactao do Departamento de Produo Animal do Centro de Tecnologia para o Gerenciamento da Pecuria de Leite da Escola Superior de Agronomia Luiz de Queiroz da USP localizada na cidade de Piracicaba, estado de So Paulo, onde eram processadas.

3.5 Exame dos animais

3.5.1 Avaliao da glndula mamria e da secreo lctea

O exame clnico da glndula mamria durante a evoluo do processo de secagem foi realizado no dia da ltima ordenha e tambm no 1, 3, 5, 7, 10, 15 e 30 dias do processo de secagem. Antes da colheita das amostras de leite, a glndula mamria era submetida a minucioso exame clnico feito por inspeo e palpao da mama, caracterizando a plenitude e a distenso da mama e dos tetos, determinando a consistncia e a presena de edema da glndula mamria. A avaliao era complementada pela

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observao da ocorrncia de ejeo espontnea do leite e verificao do aspecto da secreo lctea, assinalando sua colorao e consistncia. As classificaes utilizadas para caracterizar essas observaes foram descritas nos quadros 3.1, 3.2, 3.3 e 3.4.

Grau 1 2 3 4

Plenitude e Distenso da Glndula Mamria No distendida Moderadamente distendida e possvel de preguear a pele Distendida e difcil de preguear a pele Extremamente distendida e impossvel o pregueamento da pele

Quadro 3.1 Interpretao do exame de plenitude e distenso da glndula mamria (Fonte: modificado de EWBANK, 1963)

Grau 1 2 3 4

Plenitude e Distenso dos Tetos Pequenos e vazios Com contedo (flutuao), mas relaxados Distendidos, pouco brilhantes, mas preservando ainda as pregas Tensos, lisos e luzidios

Quadro 3.2 Interpretao do exame de plenitude e distenso dos tetos

Grau 1 2 3 4

Ocorrncia de Edema da Glndula Mamria Ausente Restrito base do teto ou da glndula Difuso por toda a glndula Estendendo-se at o abdmen

Quadro 3.3 Interpretao do exame de edema da glndula mamria

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Aspecto da Secreo Lctea 1 2 3 4 Leite Leite com colorao creme clara Aquosa Viscosa de cor dourada

Quadro 3.4 - Interpretao do exame de fundo escuro para avaliar o aspecto da secreo lctea

3.6 Determinaes realizadas nas amostras de leite

3.6.1 Determinao da concentrao hidrogeninica (pH)

Imediatamente aps a colheita, as amostras de leite foram levadas ao laboratrio para a determinao da concentrao hidrogeninica. Foi utilizado um medidor de pH da marca Digimed modelo DM 20 calibrado com solues de pH conhecidos (6,86 e 4,0) e regulado para a temperatura ambiente.

3.6.2 Determinao dos valores de eletrocondutividade no leite Para a determinao dos valores de eletrocondutividade do leite foi utilizado o aparelho Mastitron Plus V da empresa MILKU, que mede a capacidade dos ons cloro, sdio e potssio existentes no leite de conduzirem corrente eltrica. Antes do incio das determinaes, o equipamento foi calibrado com uma soluo de cloreto de potssio a 0,1N (a 25C) e o valor lido no equipamento ajustado para 12,9mS/cm. As amostras de leite de cada glndula mamria foram depositadas diretamente no receptculo do equipamento, em quantidade suficiente (aproximadamente 10ml) para cobrir os eletrodos nele presentes, permitindo que ocorresse a passagem de corrente eltrica, sendo a condutividade registrada,

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automaticamente, no visor digital do aparelho e o resultado expresso em mS/cm (miliSiemens por centmetro).

3.6.3 Determinao dos valores de cloretos no leite

A determinao dos valores de cloretos no leite foi realizada por titulao coloumtrica utilizando-se o analisador de cloretos modelo 925 da marca Corning. O aparelho analisador de cloretos apresenta um circuito composto de eletrodos de prata que recebem uma corrente eltrica e liberam ons deste metal numa taxa constante. Essa reao ocorre em meio cido e por essa razo emprega-se uma soluo tampo. Com o aparelho j calibrado, foram adicionados 100l de leite numa soluo tampo cida. Com o acionamento do equipamento, os ons de cloro presentes no leite reagiram com os ons de prata liberados no meio cido, formando um sal (cloreto de prata) e acionando um cronmetro ao mesmo tempo. Com o consumo dos ons de cloro presentes na soluo tampo, aparecem ons de prata no ligados que so reconhecidos por um eletrodo especfico, interrompendo a corrente eltrica responsvel pela liberao dos ons de prata e parando o cronmetro. O tempo de funcionamento do cronmetro diretamente proporcional ao contedo de cloreto na amostra analisada. Os resultados, expressos em mMol/l, foram multiplicados pelo fator de 3,55 a fim de converter os valores para unidade mg/dl.

3.6.4 Determinao dos valores de gordura, lactose, protena e slidos totais

Antes do incio da anlise, as amostras de leite foram mantidas em banhomaria a 38C durante 15 minutos, sendo as determinaes dos valores dos diferentes constituntes do leite realizadas por radiao infravermelha, utilizando-se o equipamento BENTLEY 2000 da empresa Bentley Instruments Inc. A alquota de leite, quando aspirada pelo equipamento, exposta a uma fonte de radiao infravermelha que provoca a emisso de um espectro de ondas, sendo que os

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constituintes do leite (gordura, lactose, protena e slidos totais), que apresentam pico mximo da absorbncia entre 2m e 15m, so identificados e quantificados pelo equipamento, fundamentado na lei de Beer-Lambert, cuja definio diz que a porcentagem de cada constituinte relacionada com a quantidade de energia absorvida, estabelecendo que a absorbncia da luz por uma substncia, numa determinada espessura, diretamente proporcional concentrao de um componente. Os resultados foram expressos em g/dl.

3.6.5 Determinao do ndice cloretos/lactose

O ndice cloretos/lactose foi obtido conforme preconizado por Vanlandingham et al. (1941) mediante a diviso do valor de cloreto expresso em mg/dl pelo valor da lactose expresso na mesma unidade, multiplicando-se o resultado por 100, sendo os resultados apresentados em porcentagem (%). ndice Cloretos x 100 = Lactose*
* o valor de lactose em g/dl deve ser multiplicado por 1000 para converter a unidade em mg/dl

3.6.6 Prova de Schalm e Noorlander California Mastitis Test (CMT)

A avaliao indireta da celularidade do leite de cada glndula foi realizada por meio da prova descrita por Schalm e Noorlander (1957) e denominada de California Mastitis Test (CMT). Desenvolvida a partir do Teste de Whiteside, esta prova baseiase na capacidade que os agentes tensoativos aninicos, como o alquilarisulfonato, tm de destruir as clulas somticas do leite, liberando o DNA presente no ncleo dessas clulas, resultando no aumento da viscosidade e/ou gelificao da mistura. Para melhorar a visualizao da prova, inclui-se um corante base de prpura de bromocresol que permite avaliar o pH da amostra. Para a realizao da prova foram utilizadas placas especiais contendo quatro receptculos. Em dois deles foram colocados 2ml de leite e 2ml do reativo de CMT

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(FATEC) e a mistura foi homogeneizada, por aproximadamente 10 segundos, com movimentos circulares feitos com uma das mos segurando a haste da placa para, a seguir, ser realizada a avaliao subjetiva dos resultados, segundo o grau de intensidade da viscosidade desenvolvida. Esta interpretao est apresentada a seguir (Quadro 3.5), conforme preconizado por Schalm; Carroll; Jain (1971).
Escore Negativo (-) Traos (+)-Levemente positivo +-Fracamente Positivo ++Fortemente positivo +++ Avaliao da reao sem modificao lquido mucoso na periferia do receptculo formao muco-floculenta, sem tendncia a formar cume central formao de gel semi-lquido, com movimento em massas e presena de cume central formao de massa gelatinosa convexa e presa ao fundo do receptculo Estimativa do nmero de clulas somticas por ml 60.000 (at 480.000) 270.000 (at 630.000) 660.000 (240.000 a 1.440.000) 2.400.000 (1.080.000 a 5.850.000) >10.000.000

Quadro 3.5 - Interpretao do California Mastitis Test (CMT) para caprinos (SCHALM;

CARROLL; JAIN, 1971).

3.6.7 Contagem eletrnica do nmero de clulas somticas As amostras de leite, antes do incio da anlise, foram mantidas em banhomaria a 38C, durante 15 minutos, e a seguir foram homogeneizadas manualmente, sendo a contagem de clulas somticas realizada por citometria de fluxo, utilizandose o equipamento SOMACOUNT 300 da empresa Bentley Instruments Inc. Nesta anlise, uma alquota de leite, depois de ser aspirada pelo equipamento SOMACOUNT 300, misturada com o corante brometo de etdio que cora o DNA do ncleo das clulas somticas. As clulas coradas, quando expostas a uma fonte luminosa de laser, fluorescem, e no tubo multiplicador do equipamento so convertidas em impulsos eltricos que sero registrados. Os resultados so expressos em clulas somticas x103/ml.

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3.6.8 Exame microbiolgico

As amostras de leite, aps serem descongeladas, foram semeadas em meio gar-sangue de carneiro e incubadas a 37C. As leituras foram realizadas com 24, 48 e 72 horas de incubao. Os exames bacterioscpicos foram realizados em lminas coradas pelo mtodo de Gram e os microorganismos foram isolados e identificados por provas bioqumicas, de acordo com as tcnicas descritas por Lennette et al. (1985) e classificados de acordo com o Bergeys Manual of Systematic Bacteriology (KRIEG; HOLT, 1984).

3.7 Anlise Estatstica

Para determinar a influncia da fase do processo de secagem nas caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea foram calculados a mdia, o desvio-padro, a mediana, o coeficiente e a amplitude de variao e o intervalo de confiana para cada varivel analisada, como preconizam Berqu, Souza e Gottlieb (1981). Para testar a influncia do processo de secagem em cada um dos fatores estudados utilizou-se o modelo General Linear Models (GLM), que devido ao no balanceamento das variveis estudadas mostrou-se ser o mais adequado, sendo que para a comparao dos pares de mdias foi utilizada a Comparao Mltipla de Tukey. Para a anlise das variveis qualitativas, primeiramente foi calculada a freqncia de ocorrncia para cada varivel e ento foi utilizado o Teste de Igualdade de Duas Propores com nvel de significncia igual a 5%. Complementando a anlise estatstica, a comparao entre os grupos de mamas sem isolamento e com isolamento bacteriano foi utilizado o Teste NoParamtrico de Mann-Whitney, indicado por Sampaio (1998), quando existem apenas dois grupos experimentais independentes, inclusive com tamanhos variados. Os programas utilizados para realizar as anlises descritas acima foram o SPSS V.11, o Minitab V.14 e o Excel XP.

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4 RESULTADOS

4.1 Avaliao do exame clnico da glndula mamria de cabras da raa Saanen, durante a evoluo do processo de secagem da mama

Para avaliar os resultados do exame clnico da glndula mamria durante o processo de secagem foram utilizados os dados obtidos de todas as 27 mamas presentes no estudo. Os dados esto expressos em porcentagens, mostrando a freqncia da ocorrncia de cada resposta ou observao em cada momento.

4.1.1 Avaliao da influncia do processo de secagem na plenitude e distenso da glndula mamria

No grfico 4.1 e tabela 4.1 foram apresentados os resultados relativos palpao do grau de plenitude e distenso da glndula mamria, durante a evoluo do processo de secagem. Nesse perodo observou-se que o grau de plenitude e distenso da mama sofreu significativas variaes. O grau de distenso mximo foi atingido no terceiro dia aps o incio do processo de secagem, quando 62,96% (17/27) estavam distendidas ou extremamente distendidas, sendo que 33,33% (9/27) das mamas estavam extremamente distendidas e apenas 37,04% (das mamas foram classificadas como moderadamente distendidas ou no distendidas. No quinto dia aps a secagem, as glndulas iniciaram o processo de involuo, quando mais de 44,45% (12/27) eram classificadas como moderadamente distendidas ou no distendidas, at atingir a menor distenso no final da secagem, com 37,04% (10/27) das mamas no distendidas e apenas 7,41% (2/27) de mamas distendidas.

Grfico 4.1 -

Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes graus de plenitude e distenso da mama de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.1 -

Resultados obtidos na avaliao do grau de plenitude e distenso da mama, por palpao, durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen - So Paulo 2007 PLENITUDE E DISTENSO DA MAMA Moderadamente distendida Distendida 81,48% (22/27) 51,85% a (14/27) 29,63% a (8/27) 37,04% a (10/27) 48,15% a (13/27) 62,96% ab (17/27) 62,96% ab (17/27) 55,56% a (15/27)
b

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

No distendida 18,52% (5/27) 25,93% cd (7/27) 7,41% ac (2/27) 7,41% ac (2/27) 0,00% b (0/27) 0,00% b (0/27) 3,70% ac (1/27) 37,04% d (10/27)
acd

Extremamente distendida 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 33,33% b (9/27) 29,63% b (8/27) 7,41% a (2/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27)

0,00% (0/27) 22,22% ac (6/27) 29,63% bc (8/27) 25,93% c (7/27) 44,44% bc (12/27) 37,04% bc (10/27) 33,33% bc (9/27) 7,41% ac (2/27)

abcd - letras no coincidentes, na mesma coluna, significam diferena estatstica significante (p0,05)

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78

4.1.2Avaliao da influncia do processo de secagem na plenitude e distenso dos tetos

No grfico 4.2 e tabela 4.2 foram apresentados os resultados relativos palpao do grau de plenitude e distenso dos tetos durante a evoluo do processo de secagem, quando observou-se que o grau de plenitude e distenso dos tetos sofreu significativas variaes. A maior distenso dos tetos ocorreu no terceiro dia aps o incio da secagem da glndula mamria, quando 48,15% (13/27) dos tetos estavam extremamente distendidos ou distendidos, e nenhum teto apresentava a classificao no distendido. No stimo dia aps a secagem, grande parte dos tetos (66,67%) j estava classificada como moderadamente distendidos e no final da secagem mais de 85,18% (23/27) dos tetos estavam moderadamente distendidos ou no distendidos.

Grfico 4.2 - Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes graus de plenitude e distenso do teto de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.2 - Resultados obtidos na avaliao do grau de distenso dos tetos, por palpao, durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen So Paulo 2007 Momentos de colheita No distendido Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco 3,70% a (1/27) 3,70% a (1/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 7,41% ab (2/27) 7,41% ab (2/27) 14,81% b (4/27) PLENITUDE E DISTENSO DO TETO Moderadamente distendido 48,15% a (13/27) 59,26% a (16/27) 51,85% a (14/27) 59,26% a (16/27) 66,67% a (18/27) 51,85% a (14/27) 55,56% a (15/27) 70,37% a (19/27) Distendido 48,15% a (13/27) 33,33% ab (9/27) 33,33% ab (9/27) 22,22% bc (6/27) 25,93% abc (7/27) 37,04% ab (10/27) 33,33% ab (9/27) 11,11% c (3/27) Extremamente distendido 0,00% a (0/27) 3,70% ab (1/27) 14,81% b (4/27) 18,52% b (5/27) 7,41% ab (2/27) 3,70% ab (1/27) 3,70% ab (1/27) 3,70% ab (1/27)

abc - letras no coincidentes, na mesma coluna, significam diferena estatstica significante (p0,05)

80

81

4.1.3 Avaliao da influncia do processo de secagem no edema de glndula

mamria

Como podemos observar no grfico 4.3 e na tabela 4.3, houve uma mudana significativa no edema da glndula mamria durante o processo de secagem. O edema de glndula mamria esteve ausente at o terceiro dia de secagem, quando 14,81% (4/27) das cabras apresentaram edema restrito base do teto e 7,41% (2/27) edema difuso por toda a glndula. No quinto dia de secagem a porcentagem de mamas com edema na base dos tetos aumentou para 37,04% (10/27), sendo que o restante das mamas no apresentou edema. No stimo dia de secagem ainda podiam ser observado edema na base dos tetos de 3,70% (1/27) das mamas. Porm, a partir do dcimo dia de secagem nenhuma mama apresentou edema.

Grfico 4.3 - Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes graus de edema de bere de cabras da raa Saanen So Paulo 2007
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Tabela 4.3 - Resultados obtidos na avaliao do grau de edema da mama durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen So Paulo 2007 EDEMA DA MAMA Momentos de colheita Ausente Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco 100,00% a (27/27) 100,00% a (27/27) 77,78% bc (21/27) 62,96% c (17/27) 96,30% ab (26/27) 100,00% ab (27/27) 100,00% ab (27/27) 100,00% ab (27/27) Restrito Difuso por Estendendo-se base do teto toda a glndula at o abdmen 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 14,81% bc (4/27) 37,04% c (10/27) 3,70% ab (1/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 7,41% a (2/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27)

abc - letras no coincidentes, na mesma coluna, significam diferena estatstica no significante (p>0,05)

4.1.4 Avaliao da influncia do processo de secagem na ocorrncia de ejeo espontnea de secreo lctea

Em nenhum momento, durante todo o processo de secagem, os animais deste experimento apresentaram ejeo espontnea de leite.

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4.1.5 Avaliao da influncia do processo de secagem no aspecto da secreo lctea

O grfico 4.4 e a tabela 4.4 mostram que houve uma significativa mudana no aspecto da secreo lctea durante a evoluo do processo de secagem. No momento da interrupo da ordenha todos as mamas apresentavam uma secreo lctea cujo aspecto era de leite, quadro esse que se manteve at o primeiro dia aps o incio do processo de secagem. Porm, a partir do terceiro dia, 40,74% (11/27) das mamas j apresentavam uma secreo com aspecto de leite de colorao creme clara e a secreo lctea do restante das glndulas mamrias (59,26%) continuava com aspecto de leite. Do terceiro at o dcimo quinto dia aps a ltima ordenha houve um aumento gradativo do percentual de mamas com secreo de aspecto de leite com colorao creme clara, indo de 40,74% (11/27) no terceiro dia at 81,48% (22/27) no dcimo quinto dia. Ao mesmo tempo, foi observada uma queda gradual da quantidade de mamas que apresentavam secreo com aspecto de leite, sendo 59,26% (16/27) no terceiro dia e 7,41% (2/27) no dcimo quinto dia, quando foi possvel observar tambm o aparecimento de secreo de aspecto aquoso em 11,11% (3/27) das mamas. No ltimo dia do processo de secagem, 11,11% (3/27) das glndulas mamrias ainda apresentavam secreo de aspecto de leite, 59,26% (16/27) apresentavam secreo com aspecto de leite com colorao creme clara e 29,63% (8/27) com aspecto aquoso.

Grfico 4.4 - Influncia do processo de secagem da glndula mamria na ocorrncia dos diferentes aspectos da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.4 - Resultados obtidos na avaliao do aspecto da secreo lctea presente na mama, durante a evoluo do processo de secagem da glndula mamria de cabras da raa Saanen So Paulo 2007 ASPECTO DA SECREO LCTEA Momentos de colheita Leite 100,00% a (27/27) 100,00% a (27/27) 59,26% b (16/27) 40,74% b (11/27) 37,04% b (10/27) 37,04% b (10/27) 7,41% c (2/27) 11,11% c (3/27) Leite de colorao creme clara 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 40,74% b (11/27) 59,26% bc (16/27) 62,96% bc (17/27) 62,96% bc (17/27) 81,48% c (22/27) 59,26% bc (16/27) Aquoso 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 11,11% ab (3/27) 29,63% b (8/27) Viscosa de cor dourada 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27) 0,00% a (0/27)

Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

abc - letras no coincidentes, na mesma coluna, significam diferena estatstica significante (p0,05)

4.2 Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nas caractersticas fsicoqumicas e celulares da secreo lctea de cabras da raa Saanen

Para avaliar a influncia do processo de secagem sobre as caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de cabras da raa Saanen foram utilizados os dados das 17 mamas sadias que no apresentaram isolamento bacteriano positivo.

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4.2.1 Avaliao da influncia do processo de secagem nos valores de pH da secreo lctea A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.5 e na tabela 4.5 demonstrou a significativa influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores do pH da secreo lctea, pois a partir do quinto dia do perodo seco observou-se um gradual aumento nos seus valores. Nas amostras colhidas entre a ltima ordenha e o terceiro dia do perodo seco verificou-se que os valores de pH na secreo oscilaram entre 6,660,09 e 6,710,06 sem que diferenas estatsticas fossem observadas. A partir do quinto dia do perodo seco, observou-se um gradual aumento dos valores do pH, sendo que os valores encontrados no stimo (7,090,15), dcimo (7,090,29), dcimo quinto (7,330,26) e trigsimo dias do perodo seco (7,480,31) foram estatisticamente maiores do que os observados nos trs primeiros dias do processo de secagem.

abcd - letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.5 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de pH da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.5 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos valores de pH da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de colheita Dia da Supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco Amplitude Desvio Nmero Mediana CV (%) Mdia de Variao Padro de mamas 17 17 17 17 17 17 17 17 6,67a 6,66 a 6,71 a 6,95 ab 7,09 bc 7,09 c 7,33 cd 7,48 d 0,06 0,09 0,06 0,16 0,15 0,29 0,26 0,31 6,68 6,64 6,71 6,9 7,06 7,13 7,35 7,55 0,90 1,30 0,90 2,20 2,10 4,10 3,60 4,10 6,57 - 6,79 6,52 - 6,88 6,60 - 6,87 6,73 - 7,25 6,80 - 7,33 6,62 - 7,65 6,84 - 7,77 6,41 - 7,73

abcd letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.2 Avaliao da influncia do processo de secagem nos valores de eletrocondutividade da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.6 e na tabela 4.6 demonstrou a significativa influncia do processo de secagem da glndula mamria secagem nos valores de eletrocondutividade da secreo lctea, pois a partir do dcimo quinto dia do perodo seco observou-se um gradual aumento nos seus valores. Entre a ltima ordenha e o dcimo dia do perodo seco, verificou-se que os valores de eletrocondutividade oscilaram entre 6,960,66mS/cm e 7,461,30mS/cm sem que diferenas estatsticas fossem observadas, sendo que os valores obtidos em amostras colhidas no trigsimo dia do perodo seco (9,722,12mS/cm) foram

89

estatisticamente maiores do que os observados em amostras colhidas entre o dia de supresso da ordenha e o dcimo dia do perodo seco.

ab letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.6 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de eletrocondutividade da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.6 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos valores de eletrocondutividade da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Nmero Mdia de mamas (mS/cm) 17 17 17 17 17 17 17 17 7,10 a 6,96 a 7,39 a 6,98 a 6,72 a 7,46 a 8,16 ab 9,72 b Amplitude Desvio Mediana CV (%) de Variao Padro (mS/cm) (mS/cm) (mS/cm) 0,66 0,66 0,89 0,75 0,61 1,30 1,50 2,12 7,2 7,1 7,5 7,1 6,8 7,2 8,2 10,1 9,30 9,50 12,00 10,70 9,10 17,40 18,40 21,80 6,00 - 8,30 5,70 - 8,10 5,20 - 9,20 4,90 - 8,20 4,80 - 7,50 5,20 - 11,50 5,90 - 10,70 5,10 - 12,50

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

ab letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.3 Avaliao da influncia do processo de secagem nos teores de cloretos da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.7 e na tabela 4.7 demonstrou a significativa influncia do processo de secagem da glndula mamria nos teores de cloretos da secreo lctea, pois a partir do dcimo dia do perodo seco ocorria um gradual aumento nos seus valores. Entre a ltima ordenha e o dcimo dia do perodo seco, verificou-se que os teores lcteos de cloretos oscilaram entre 175,5226,73mg/dl e 200,4755,05mg/dl sem que diferenas estatsticas fossem observadas, sendo que os valores obtidos em amostras colhidas no trigsimo dia do perodo seco (272,2053,53mg/dl) foram

91

estatisticamente maiores do que os observados em amostras colhidas entre o dia de supresso da ordenha e o dcimo dia do perodo seco.

ab - letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.7 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios dos teores de cloretos da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.7 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos teores de cloretos da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Nmero de mamas 17 17 17 17 17 17 17 17 Mdia (mg/dl) 176,04 a 175,52 a 185,75 a 192,33 a 184,29 a 200,47 a 229,19 ab 272,20 b Desvio Mediana Padro (mg/dl) (mg/dl) 27,35 26,73 33,72 36,32 32,40 55,05 53,20 53,53 181,05 177,5 186,38 184,6 175,73 198,8 236,08 285,78 CV (%) Amplitude de Variao (mg/dl)

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

15,50 129,58 - 237,85 15,20 126,03 - 230,75 18,20 126,03 - 252,05 18,90 131,35 - 259,15 17,60 131,35 - 237,85 27,50 111,83 - 321,28 23,20 140,23 - 312,40 19,70 168,63 - 340,80

ab letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.4 Avaliao da influncia do processo de secagem nos teores de lactose da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.8 e na tabela 4.8 demonstrou a significativa influncia do processo de secagem da glndula mamria nos teores de lactose da secreo lctea, pois a partir do dcimo dia do perodo seco ocorria uma gradual diminuio nos seus valores. Entre a ltima ordenha e o stimo dia do perodo seco, verificou-se que os teores lcteos de cloretos oscilaram entre 4,100,50g/dl e 4,320,36g/dl sem que diferenas estatsticas fossem observadas. A partir do dcimo dia do perodo seco observou-se uma gradual diminuio dos teores de lactose, sendo que os valores

93

encontrados no dcimo (2,981,06g/dl) e trigsimo dias do perodo seco (1,620,94g/dl) foram estatisticamente menores do que os observados nos sete primeiros dias do processo de secagem.

abc - letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.8 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios dos teores de lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

94

Tabela 4.8 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao, dos teores de lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Desvio Mediana Padro (g/dl) (g/dl) 0,50 0,54 0,42 0,36 0,34 0,50 1,06 0,94 4,13 4,22 4,2 4,36 4,32 4,07 3,18 1,50 Amplitude de Variao (g/dl)

Momentos de colheita

Nmero de mamas

Mdia (g/dl) 4,10 a 4,28 a 4,24 a 4,32 a 4,23 a 4,00 ab 2,98 bc 1,62 c

CV (%)

Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

17 16 17 16 17 17 17 17

12,30 2,51 - 4,68 12,70 2,70 - 4,88 9,80 8,30 8,00 3,20 - 4,84 3,54 - 4,81 3,70 - 4,73

12,50 3,14 - 4,73 35,50 0,86 - 4,18 58,16 0,29 -2,97

abc letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.5

Avaliao

da

influncia

do

processo

de

secagem

no

ndice

cloretos/lactose da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.9 e na tabela 4.9 demonstrou a significativa influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores do ndice cloretos/lactose da secreo lctea, pois a partir do dcimo quinto dia do perodo seco observou-se um gradual aumento nos seus valores. Entre a ltima ordenha e o dcimo dia do perodo seco, verificou-se que os valores do ndice cloretos/lactose oscilaram entre 4,231,04% e 5,232,10% sem que diferenas estatsticas fossem observadas, sendo que os valores obtidos em amostras colhidas no trigsimo dia do perodo seco (24,1319,79%) foram

95

estatisticamente maiores do que os observados em amostras colhidas entre o dia de supresso da ordenha e o dcimo dia do perodo seco.

ab letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.9 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios do ndice cloreto/lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

96

Tabela 4.9 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos valores do ndice cloreto/lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Desvio Mediana Padro (%) (%) 1,07 1,04 1,30 1,29 1,13 2,10 9,01 19,79 4,35 4,30 4,44 4,04 4,05 4,88 7,16 18,84 Amplitude de Variao (%) 2,81 6,86 2,58 6,11 2,89 7,54 2,93 7,24 2,99 6,32 2,47 9,79

Nmero Momentos de colheita de mamas Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco 17 16 17 16 17 17 17 17

Mdia (%) 4,40 a 4,23 a 4,49 a 4,50 a 4,44 a 5,23 a 10,50 ab 24,13 b

CV (%) 24,30 24,50 28,90 28,80 25,60 40,10

85,80 3,35 36,32 82,00 6,04 66,65

ab letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.6 Avaliao da influncia do processo de secagem no teor de gordura da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.10 e na tabela 4.10 demonstrou que o processo de secagem da glndula mamria no influenciou os teores de gordura na secreo lctea, sendo que no perodo estudado os valores oscilaram entre 2,071,49g/dl e 3,491,39g/dl sem que qualquer diferena estatstica fosse observada.

97

a - letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05) Grfico 4.10 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores medos de gordura da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

98

Tabela 4.10 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos valores de gordura na secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Nmero Mdia de mamas (g/dl) 17 16 17 16 17 17 17 17 3,31 a 2,84 a 2,07 a 2,76 a 3,49 a 2,81 a 3,41 a 2,76 a Desvio Mediana Padro (g/dl) (g/dl) 1,61 1,55 1,49 1,19 1,39 1,25 1,75 3,36 3,01 2,50 1,72 2,61 3,07 2,70 3,31 1,21 CV (%) 48,80 54,60 71,70 43,20 39,90 44,60 51,40 Amplitude de Variao (g/dl) 1,99 - 8,74 1,30 - 8,05 0,55 - 6,18 1,29 - 6,19 1,42 - 5,79 1,13 - 6,21 1,05 - 8,20

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

121,60 0,03 - 12,94

a letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.7 Avaliao da influncia do processo de secagem no teor de protena da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.11 e na tabela 4.11 demonstrou a significativa influncia do processo de secagem da glndula mamria nos teores de protena da secreo lctea, pois observou-se um gradual aumento nos seus valores durante o perodo estudado. No ltimo dia de ordenha, antes do incio do processo de secagem foram encontrados valores mdios de protena iguais a 2,890,87g/dl. Com a evoluo do processo de secagem observou-se uma gradual aumento nos teores de protina, sendo que os valores encontrados no dcimo quinto e trigsimo dias do perodo

99

seco,

iguais

4,471,40g/dl

5,272,07g/dl

respectivamente,

foram

estatisticamente maiores do que os verificados no ltimo dia de ordenha.

abc letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.11 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de protena da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

100

Tabela 4.11 - Mdia, desvio padro, mediana, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos valores de protena da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Nmero de mamas 17 16 17 16 17 17 17 17 Mdia (g/dl) 2,89 a 2,95 ab 3,11 ab 3,64 ab 4,02 abc 4,16 abc 4,47 bc 5,27 c Desvio Mediana Padro (g/dl) (g/dl) 0,87 1,03 0,64 0,61 0,78 0,95 1,4 2,07 2,72 2,79 3,04 3,59 3,9 3,85 3,94 4,83 CV (%) 30,20 34,90 20,60 16,80 19,30 22,90 31,30 39,30 Amplitude de Variao (g/dl) 2,28 - 6,15 2,2 - 6,65 2,54 - 5,45 2,99 - 5,69 3,05 - 6,31 2,97 - 6,71 2,87 - 7,56 2,64 - 9,27

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

abc letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

101

4.2.8 Avaliao da influncia do processo de secagem no teor de slidos totais da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.12 e na tabela 4.12 demonstrou que o processo de secagem da glndula mamria no influenciou os teores de slidos totais na secreo lctea, sendo que no perodo estudado os valores oscilaram entre 9,814,91g/dl e 11,682,08 g/dl sem que qualquer diferena estatstica fosse observada.

a- letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

Grfico 4.12 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria nos valores mdios de slidos totais da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

102

Tabela 4.12 - Mdia, desvio padro, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao dos teores de slidos totais da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Nmero de mamas 17 16 17 16 17 17 17 17 Mdia (g/dl) 11,25a 11,02 a 10,29 a 11,60 a 12,55 a 11,68 a 11,28 a 9,81 a Desvio Mediana Padro (g/dl) (g/dl) 2,27 2,39 2,28 1,93 1,92 2,08 3,02 4,91 10,69 10,58 10,04 11,16 12,42 11,27 10,86 7,8 CV (%) 20,10 21,70 22,10 16,60 15,30 17,80 26,80 50,10 Amplitude de Variao (g/dl) 8,84 - 19,04 8,6 - 19,11 7,18 - 17,44 9,8 - 17,85 10,17 - 18 9,79 - 18,57 7,08 - 18,16 4,68 - 21,56

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

a letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

4.2.9 Avaliao da influncia do processo de secagem no nmero de clulas somticas da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.13 e na tabela 4.13 demonstrou que o processo de secagem da glndula mamria no influenciou o nmero de clulas somticas na secreo lctea, sendo que no perodo estudado os valores oscilaram entre 1.576,10 1.410,00 e 3.440,10 2.151,80 x 103cls/ml sem que qualquer diferena estatstica fosse observada.

103

a - letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05) Grfico 4.13 - Avaliao da influncia do processo de secagem da glndula mamria no nmero mdio de clulas somticas da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

Tabela 4.13 - Mdia, desvio padro, coeficiente de variao (CV) e amplitude de variao do nmero de clulas somticas da secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Nmero de mamas 17 16 17 16 17 17 17 17 Mdia (cels/mlx103) 3.034,60 a 2.836,10 a 2.142,90 a 2.221,70 a 2.335,20 a 1.613,30 a 1.576,10 a 3.440,10 a Desvio Padro (cels/mlx103) 2.503,00 2.339,80 1.731,90 1.897,20 2.031,10 1.649,50 1.410,00 2.151,80 Mediana (cls/mlx103) 2.106,00 2.342,00 1.885,00 1.896,50 1.291,00 839,00 1.181,00 2.996,00 CV (%) 82,50 82,50 80,80 85,40 87,00 102,20 89,50 62,60 Amplitude de Variao (cels/mlx103) 105,00 - 6.602,00 980,00 - 7.174,00 45,00 - 5.420,00 66,00 -6.328,00 9,00 - 5.915,00 11,00 - 4.404,00 64,00 - 5.748,00 688,00 - 8.000,00

Momentos de colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

a - letras no coincidentes significam diferena estatstica significante (p 0,05)

104

105

4.2.10 Avaliao da influncia do processo de secagem no resultado do California Mastitis Test da secreo lctea

De acordo com a tabela 4.14 houve uma significativa influncia do processo de secagem nos resultados traos e duas cruzes que, de modo geral, aumentaram de freqncia durante a secagem. A freqncia da reao traos aumentou at o dcimo quinto dia, enquanto que a reao duas cruzes oscilou um pouco durante a secagem mas terminou com uma freqncia maior que a inicial. Foi possvel observar que o dia da supresso da ordenha apresentou o maior nmero de mamas com a reao trs cruzes (59,26%), sendo que essa freqncia caiu at o quinto dia da secagem, momento no qual atingiu seu menor percentual (33,33%), voltando a aumentar no stimo e dcimo dia (40,74 e 48,15% respectivamente) para ento cair at 39,13% no ltimo dia da secagem. A quantidade de reaes negativas oscilou durante o todo processo de secagem, sendo que no dia da supresso da ordenha 22,22% dos animais eram negativos para o teste de CMT, freqncia que diminuiu para 14,81% ao final da secagem. No ltimo dia de secagem mais de 70% das mamas apresentavam reao duas ou trs cruzes.

Tabela 4.14 - Freqncia dos graus de intensidade da reao do California Mastitis Test (CMT) na secreo lctea de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 REAO DO CALIFORNIA MASTITS TEST (CMT) Momentos de colheita negativo --22,22%a (6/27) 18,52%a (5/27) 22,22%a (6/27) 14,81%a (4/27) 11,11%a (3/27) 18,52%a (5/27) 11,11%a (3/27) 14,81%a (4/27) traos (+) - 0,00%a (0/27) 3,70%ab (1/27) 3,70%ab (1/27) 11,11%ab (3/27) 14,81%b (4/27) 14,81%b (4/27) 18,52%b (5/27) 3,70%ab (1/27) uma cruz +-18,52%a (5/27) 22,22%a (6/27) 14,81%a (4/27) 22,22%a (6/27) 7,69%a (2/27) 7,41%a (2/27) 14,81%a (4/27) 11,11%a (3/27) duas cruzes ++0,00%a (0/27) 11,11%ab (3/27) 18,52%bc (5/27) 18,52%bc (5/27) 22,22%bc (6/27) 11,11%ab (3/27) 11,11%ab (3/27) 37,03%c (10/27) trs cruzes +++ 59,26%a (16/27) 44,44%a (12/27) 40,74%a (11/27) 33,33%a (9/27) 40,74%a (11/27) 48,15%a (13/27) 44,44%a (12/27) 33,33%a (9/27)

Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

abc - letras no coincidentes na mesma coluna significam diferena estatstica significante (p 0,05)

106

107

4.3 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano, durante o processo de secagem, nas caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de cabras da raa Saanen.

4.3.1 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no pH da secreo lctea

O grfico 4.14 e a

tabela 4.15 evidenciam a existncia de influncia do

resultado do exame microbiolgico nos valores do pH da secreo lctea entre os grupos avaliados pois nas amostras colhidas no trigsimo dia do perodo seco observou-se que os valores de pH encontrados nas amostras colhidas de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias (7,150,49) foram estatisticamente menores do que os observados em mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias (7,480,31). Na comparao entre os grupos experimentais nos demais momentos avaliados (ltima ordenha e primeiros quinze dias do perodo seco) no foram observadas diferenas estatsticas significantes.

Grfico 4.14 - Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos valores do pH da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

108

Tabela 4.15 - Valores de pH (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco pH N 17 17 17 17 17 17 17 17 Sem Isolamento 6,67 0,06 (6,68) a 6,66 0,09 (6,64) a 6,71 0,06 (6,71) a 6,95 0,16 (6,90) a 7,09 0,15 (7,06) a 7,09 0,29 (7,13) a 7,33 0,26 (7,35) a 7,48 0,31 (7,55) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 6,73 0,12 (6,69) a 6,72 0,12 (6,71) a 6,82 0,19 (6,77) a 7,09 0,35 (7,10) a 7,26 0,41 (7,45) a 7,34 0,41 (7,44) a 7,36 0,42 (7,44) a 7,15 0,49 (7,42) b

ab letras coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica no significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.2 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano na eletrocondutividade da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados na grfico 4.15 e na tabela 4.16 no evidenciou a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos valores de eletrocondutividade da secreo lctea dos grupos avaliados. Nos primeiros trinta dias do perodo seco observou-se que os valores de eletrocondutividade na secreo lctea variavam entre 6,720,61 e 9,722,12mS/cm para o grupo composto de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 6,630,54 e 8,692,63mS/cm para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea.

109

Grfico 4.15 - Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos valores da eletrocondutividade da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

110

Tabela 4.16 - Valores de eletrocondutividade (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco ELETROCONDUTIVIDADE (mS/cm) N 17 17 17 17 17 17 17 17 Sem Isolamento 7,10 0,66 (7,20) a 6,96 0,66 (7,10) a 7,39 0,89 (7,50) a 6,98 0,75 (7,10) a 6,72 0,61 (6,80) a 7,46 1,3 (7,20) a 8,16 1,5 (8,20) a 9,72 2,12 (10,10) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 6,68 0,61 (6,45) a 6,63 0,54 (6,55) a 6,93 0,79 (6,95) a 7,18 1,23 (7,3) a 7,82 1,68 (8,05) a 8,51 2,04 (8,65) a 8,59 2,02 (9,6) a 8,69 2,63 (8,15) a

a - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.3 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de cloretos da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.16 e na tabela 4.17 no evidenciou a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos valores de cloretos da secreo lctea dos grupos avaliados. Nos primeiros trinta dias do perodo seco observou-se que os teores lcteos de cloretos variavam entre 175,5226,73 e 272,253,53mg/dl para o grupo composto de mamas sadias e nos quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 162,4122,19 e 238,5671,22 mg/dl para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea.

111

Grfico 4.16 - Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos teores de cloreto da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

112

Tabela 4.17 - Valores de cloretos (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco CLORETOS (mg/dl) N 17 17 17 17 17 17 17 17 Sem Isolamento 176,04 27,35 (181,05) a 175,52 26,73 (177,5) a 185,75 33,72 (186,38) a 192,33 36,32 (184,6) a 184,29 32,40 (175,73) a 200,47 55,05 (198,8) a 229,19 53,20 (236,08) a 272,2 53,53 (285,78) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 165,08 24,00 (166,85) a 162,41 22,19 (165,08) a 176,26 34,03 (174,84) a 192,77 49,40 (210,34) a 211,58 65,32 (230,75) a 225,43 68,41 (230,75) a 238,56 71,22 (270,69) a 235,72 78,37 (228,09) a

a - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.4 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de lactose da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.17 e na tabela 4.18 evidencia a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos teores lcteos de lactose dos grupos avaliados. Nas amostras colhidas no quinto, stimo e dcimo dias do perodo seco, observou-se que os valores de lactose encontrados nas amostras colhidas de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias (respectivamente iguais a 4,320,36g/dl; 4,230,34g/dl e 4,000,50g/dl) foram estatisticamente maiores do que os observados em mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o

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isolamento de bactrias (respectivamente iguais a 3,470,84g/dl; 2,881,51g/dl e 1,951,64g/dl). O comportamento das curvas durante a evoluo do processo de secagem nos dois grupos avaliados foram diferentes, j que a partir do terceiro dia de secagem os valores de lactose de mamas sadias sem isolamento bacteriano sofriam uma abrupta diminuio da secreo de lactose, enquanto no grupos de amostras sem isolamento bacteriano esta diminuio nos valores de lactose podia ser observada somente a partir do dcimo dia do incio do processo de secagem.

Grfico 4.17 - Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem nos teores de lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

114

Tabela 4.18 - Valores de lactose (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco LACTOSE (g/dl) N 17 16 17 16 17 17 17 17 Sem Isolamento 4,1 0,50 (4,13) a 4,28 0,54 (4,22) a 4,24 0,42 (4,2) a 4,32 0,36 (4,36) a 4,23 0,34 (4,32) a 4,00 0,50 (4,07) a 2,98 1,06 (3,18) a 1,53 0,99 (1,38) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 3,96 0,72 (4,29) a 4,13 0,68 (4,35) a 4,11 0,41 (4,17) a 3,47 0,84 (3,64) b 2,88 1,51 (2,76) b 1,95 1,64 (1,81) b 1,94 1,45 (1,44) a 2,18 1,41 (1,68) a

ab - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.5

Avaliao

da

influncia

do

isolamento

bacteriano

no

ndice

cloretos/lactose da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.18 e na tabela 4.19 evidencia a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos valores do ndice cloretos/lactose dos grupos avaliados. Nas amostras colhidas no dcimo dia do perodo seco observou-se que os valores do ndice cloretos/lactose encontrados nas amostras colhidas de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias (5,242,10%) foram estatisticamente menores do que os observados em mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias (29,3635,54%).

115

Na comparao entre os grupos experimentais nos demais momentos avaliados no foram observadas diferenas estatsticas significantes, sendo que os valores do ndice cloretos/lactose na secreo lctea variavam entre 4,241,04% e 24,1319,79% para o grupo composto de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 4,111,23% e 20,9721,16% para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea.

Grfico 4.18 - Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem no ndice cloreto/lactose da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

116

Tabela 4.19 - Valores do ndice cloretos/lactose (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem isolamento e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 NDICE CLORETOS/ LACTOSE (%) N 17 16 17 16 17 17 17 17 Sem Isolamento 4,40 1,07 (4,35) a 4,24 1,04 (4,30) a 4,49 1,30 (4,44) a 4,51 1,30 (4,04) a 4,44 1,14 (4,05) a 5,24 2,10 (4,89) a 10,50 9,01 (7,16) a 24,13 19,79 (18,84) a N 10 10 10 10 10 9 8 10 Com Isolamento 4,42 1,57 (3,87) a 4,11 1,23 (3,75) a 4,37 1,17 (4,09) a 6,06 3,19 (5,78) a 14,68 19,27 (8,60) a 29,36 35,54 (14,27) b 15,81 14,67 (12,72) a 20,97 21,16 (15,94) a

Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco

ab - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

117

4.3.6 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de gordura da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados na grfico 4.19 e na tabela 4.20 evidencia a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos teores lcteos de gordura dos grupos avaliados. Nas amostras colhidas no terceiro e dcimo dias do perodo seco, observouse que os teores lcteos de gordura encontrados nas amostras colhidas de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias (respectivamente iguais a 2,071,49g/dl e 2,811,25g/dl) foram estatisticamente menores do que os observados em mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias (respectivamente iguais a 3,771,99g/dl e 4,261,48g/dl). Na comparao entre os grupos experimentais nos demais momentos avaliados no foram observadas diferenas estatsticas significantes, sendo que os valores de gordura na secreo lctea variavam entre 2,761,19g/dl e 3,491,39g/dl para o grupo composto de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 3,571,72g/dl e 4,202,38g/dl para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea.

118

Grfico 4.19 - Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano durante o processo de secagem no teor de gordura da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

119

Tabela 4.20 - Valores de gordura (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco GORDURA (g/dl) N 17 16 17 16 17 17 17 17 Sem Isolamento 3,31 1,61 (3,01) a 2,84 1,55 (2,5) a 2,07 1,49 (1,72) a 2,76 1,19 (2,61) a 3,49 1,39 (3,07) a 2,81 1,25 (2,7) a 3,41 1,75 (3,31) a 2,76 3,36 (1,21) a N 10 10 10 9 10 10 10 10 Com Isolamento 3,62 1,77 (3,29) a 3,57 1,72 (3,63) a 3,77 1,99 (3,52) b 3,74 1,44 (3,44) a 3,65 1,14 (3,59) a 4,26 1,48 (4,16) b 4,01 1,79 (3,56) a 4,2 2,38 (3,69) a

ab - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.7 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de protena da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.20 e na tabela 4.21 evidencia a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos teores lcteos de protena dos grupos avaliados. Nas amostras colhidas no quinto e dcimo quinto dias do perodo seco, observou-se que o teor lcteo de protena encontrado nas amostras colhidas de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias (respectivamente iguais a 3,640,61g/dl e 4,471,40g/dl) foram estatisticamente menores do que os observados em mamas que no apresentavam qualquer

120

distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias (respectivamente iguais a 4,701,59g/dl e 6,12 1,85g/dl). Na comparao entre os grupos experimentais nos demais momentos avaliados no foram observadas diferenas estatsticas significantes, sendo que os valores de protena na secreo lctea variavam entre 2,890,87g/dl e 5,272,07g/dl para o grupo composto de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 3,281,39g/dl e 5,071,70g/dl para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea.

Grfico 4.20 - Avaliao da influncia da condio de sade da glndula mamria durante o processo de secagem no teor de protena da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.21 - Valores de protena (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco PROTENA (g/dl) N 17 16 17 16 17 17 17 17 Sem Isolamento 2,89 0,87 (2,72) a 2,95 1,03 (2,79) a 3,11 0,64 (3,04) a 3,64 0,61 (3,59) a 4,02 0,78 (3,90) a 4,16 0,95 (3,85) a 4,47 1,4 (3,94) a 5,27 2,07 (4,83) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 3,40 1,2 (3,19) a 3,28 1,39 (2,99) a 3,61 0,8 (3,50) a 4,70 1,59 (4,47) b 4,47 1,24 (4,71) a 5,07 1,7 (4,94) a 6,12 1,85 (6,19) b 4,71 1,58 (4,53) a

ab - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.8 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no teor de slidos totais da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.21 e na tabela 4.22 evidencia a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nos teores lcteos de slidos totais dos grupos avaliados. Nas amostras colhidas no terceiro dia do perodo seco observou-se que os teores lcteos de slidos totais encontrados nas amostras colhidas de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias (10,292,28g/dl) foram estatisticamente menores do que os observados em mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias (12,512,45 g/dl).

122

Na comparao entre os grupos experimentais nos demais momentos avaliados no foram observadas diferenas estatsticas significantes, sendo que os valores de slidos totais na secreo lctea variavam entre 9,814,91g/dl e 12,551,92g/dl para o grupo composto de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 11,683,47g/dl e 12,753,46g/dl para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea.

Grfico 4.21 - Avaliao da influncia da condio de sade da glndula mamria durante o processo de secagem no teor de slidos totais da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

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Tabela 4.22 - Valores de slidos totais (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem isolamento e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1 Dia do Perodo Seco 3 Dia do Perodo Seco 5 Dia do Perodo Seco 7 Dia do Perodo Seco 10 Dia do Perodo Seco 15 Dia do Perodo Seco 30 Dia do Perodo Seco SLIDOS TOTAIS (g/dl) N 17 16 17 16 17 17 17 17 Sem Isolamento 11,25 2,27 (10,69) a 11,02 2,39 (10,58) a 10,29 2,28 (10,04) a 11,60 1,93 (11,16) a 12,55 1,92 (12,42) a 11,68 2,08 (11,27) a 11,28 3,02 (10,86) a 9,81 4,91 (7,80) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 12,02 2,60 (11,85) a 11,98 2,75 (11,90) a 12,51 2,45 (12,67) b 11,68 3,47 (12,23) a 11,92 2,45 (11,46) a 12,10 3,49 (11,65) a 12,75 3,46 (12,60) a 11,98 5,13 (13,73) a

ab - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.9 Avaliao da influncia da presena de isolamento bacteriano no nmero de clulas somticas da secreo lctea

A anlise dos resultados apresentados no grfico 4.22 e na tabela 4.23 o no evidenciou a existncia de influncia do resultado do exame microbiolgico nmero de clulas somticas da secreo lctea dos grupos avaliados. Nos primeiros trinta dias do perodo seco observou-se que o nmero de clulas somticas variou entre 1.576.1001.410.000cls/ml e 3.440.1002.151.800cls/ml para o grupo composto de mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea e entre 2.692,601.609,100cls/ml e 4.814,402.409.300cls/ml para o grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem,

124

porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea sem que diferenas estatsticas fossem observadas.

Grfico 4.22 - Avaliao da influncia da condio de sade da glndula mamria durante o processo de secagem no nmero de clulas somticas da secreo lctea de cabras da raa Saanen So Paulo 2007

125

Tabela 4.23 - Valores do nmero de clulas somticas (expressos pela mdia desvio padro e mediana) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento de cabras da raa Saanen, distribudos segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 Momentos de Colheita Dia da supresso da ordenha 1. Dia do Perodo Seco 3. Dia do Perodo Seco 5. Dia do Perodo Seco 7. Dia do Perodo Seco 10. Dia do Perodo Seco 15. Dia do Perodo Seco 30. Dia do Perodo Seco Nmeros de clulas somticas (x103/ml) N 17 16 17 16 17 17 17 17 Sem Isolamento 3.034,60 2.503,00 (2.106,00) a 2.836,10 2.339,80 (2.342,00) a 2.142,90 1.731,90 (1.885,00) a 2.221,70 1.897,20 (1.896,50) a 2.335,20 2.031,10 (1.291,00) a 1.613,30 1.649,50 (839,00) a 1.576,10 1.410,00 (1.181,00) a 3.440,10 2.151,80 (2.996,00) a N 10 10 10 10 10 10 10 10 Com Isolamento 3.910,70 2.115,50 (3.633,50) a 3.394,90 2.519,90 (2.625,00) a 3.475,60 1.563,40 (3.807,00) a 2.912,10 1.759,30 (3.000,00) a 3.021,20 1.715,50 (2.735,50) a 2.881,60 1.911,40 (2.479,50) a 2.692,60 1.609,10 (3.092,50) a 4.814,40 2.409,30 (4.423,50) a

a - letras no coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica significante (p 0,05); N nmero de glndulas mamrias avaliadas; ( ) valor entre parntesis correspondem mediana

4.3.10 Avaliao da influncia do isolamento bacteriano no resultado do California Mastitis Test da secreo lctea

A anlise dos grficos 4.23 e 4.24 e das tabelas 4.24, 4.25 e 4.26 mostra que houve influncia da presena de isolamento bacteriano no resultado do California Mastitis Test. No final do processo de secagem, o grupo composto por mamas sadias e nas quais no era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea apresentou freqncias de respostas trs cruzes iguais a 25,53% (dcimo quinto dia) e 17,65% (trigsimo dia), significativamente menores que as freqncias apresentadas pelo grupo composto de mamas que no apresentavam qualquer distrbio durante o processo de secagem, porm nas quais era possvel o isolamento de bactrias na secreo lctea, iguais a 80% (dcimo quinto dia) e 60% (trigsimo dia).

Grfico 4.23 - Ocorrncia dos resultados do California Mastitis Test (CMT) da secreo lctea de cabras da raa Saanen sem isolamento bacteriano durante o processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007
126

Grfico 4.24 - Ocorrncia dos resultados do California Mastitis Test (CMT) da secreo lctea de cabras da raa Saanen com isolamento bacteriano durante o processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007

127

128

Tabela 4.24 - Freqncias das reaes classificadas como negativas do California Mastitis Test (CMT) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudas segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 REAO DO CMT Momentos de Colheita negativo Sem isolamento Dia da supresso da ordenha 1. Dia do Perodo Seco 3. Dia do Perodo Seco 5. Dia do Perodo Seco 7. Dia do Perodo Seco 10. Dia do Perodo Seco 15. Dia do Perodo Seco 30. Dia do Perodo Seco 23,53% a (4/17) 25,00% a (4/16) 29,41% a (5/17) 23,53% a (4/17) 18,75% a (3/16) 23,53% a (4/17) 17,65% a (3/17) 17,65% a (3/17) Com isolamento 20,00% a (2/10) 10,00% a (1/10) 10,00% a (1/10) 0,00% a (0/10) 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10) 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10)

a - letras coincidentes, na mesma linha, significam diferena estatstica no significante (p> 0,05)

129

Tabela 4.25 - Freqncias das reaes, classificadas como meia e uma cruz, do California Mastitis Test (CMT) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudas segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 REAO DO CMT Momentos de Colheita traos (+) - Sem isolamento Dia da supresso da ordenha 1. Dia do Perodo Seco 3. Dia do Perodo Seco 5. Dia do Perodo Seco 7. Dia do Perodo Seco 10. Dia do Perodo Seco 15. Dia do Perodo Seco 30. Dia do Perodo Seco 0,00% a (0/17) 0,00% a (0/16) 5,88% a (1/17) 11,76% a (2/17) 25,00% a (4/16) 23,53% a (4/17) 29,41% a (5/17) 5,88% a (1/17) Com isolamento 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10) 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10) 0,00% a (0/10) 0,00% a (0/10) 0,00% a (0/10) 0,00% a (0/10) uma cruz +-Sem isolamento 29,41% a (5/17) 31,25% a (5/16) 23,53% a (4/17) 35,29% a (6/17) 12,50% a (2/16) 11,76% a (2/17) 17,65% a (3/17) 17,65% a (3/17) Com isolamento 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10) 0,00% a (0/10) 0,00% b (0/10) 0,00% a (0/10) 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10) 0,00% a (0/10)

ab - letras no coincidentes, na mesma linha diferena estatstica significante (p 0,05)

para reao (+)-- e para reao +-- , significam

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Tabela 4.26 - Freqncias das reaes, classificadas como duas e trs cruzes, do California Mastitis Test (CMT) na secreo lctea de mamas sem e com isolamento bacteriano de cabras da raa Saanen, distribudas segundo a evoluo do processo de secagem da glndula mamria So Paulo 2007 REAO DO CMT Momentos de Colheita duas cruzes ++ Sem isolamento Dia da supresso da ordenha 1. Dia do Perodo Seco 3. Dia do Perodo Seco 5. Dia do Perodo Seco 7. Dia do Perodo Seco 10. Dia do Perodo Seco 15. Dia do Perodo Seco 30. Dia do Perodo Seco 0,00% a (0/17) 6,25% a (1/16) 11,76% a (2/17) 5,88% a (1/17) 12,50% a (2/16) 5,88% a (1/17) 11,76% a (2/17) 41,18% a (7/17) Com Isolamento 0,00% a (0/10) 10,00% a (1/10) 30,00% a (3/10) 40,00% b (4/10) 40,00% a (4/10) 20,00% a (2/10) 10,00% a (1/10) 30,00% a (3/10) trs cruzes +++ Sem isolamento 47,06% a (8/17) 37,50% a (6/16) 29,41% a (5/17) 23,53% a (4/17) 31,25% a (5/16) 35,29% a (6/17) 23,53% a (4/17) 17,65% a (3/17) Com Isolamento 80,00% a (8/10) 60,00% a (6/10) 60,00% a (6/10) 50,00% a (5/10) 60,00% a (6/10) 70,00% a (7/10) 80,00% b (8/10) 60,00% b (6/10)

ab - letras no coincidentes, na mesma linha diferena estatstica significante (p 0,05)

para reao ++- e para reao +++, significam

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5 DISCUSSO

At hoje foram poucos os pesquisadores que se propuseram a estudar o perodo seco das cabras, o que pde ser observado na reviso bibliogrfica. Entretanto, alguns estudos sobre a fisiologia do processo de secagem em caprinos foram desenvolvidos na dcada de setenta (FLEET et al., 1975; 1978). Novos estudos s foram realizados na dcada de noventa, quando Fowler (1991) estudou a importncia e os efeitos do perodo seco na produo de leite de cabras. Nesta pesquisa, o autor utilizou um perodo seco extremamente longo, de cerca de vinte e sete semanas, destoando bastante do perodo comumente usado pelos produtores (cerca de trinta a quarenta dias). Mais recentemente, Salama (2005) estudou o perodo seco de cabras para determinar sua durao ideal, avaliar a qualidade do colostro e a produo lctea dos animais. No presente trabalho, optou-se por estudar oito momentos do processo de secagem da glndula mamria. A princpio, foram colhidas amostras no momento da ltima ordenha e os valores das caractersticas fsico-qumicas e celulares do leite nesse momento foram comparados com os valores referentes ao perodo de lactao normal de caprinos relatados na reviso bibliogrfica, j que a lactao um perodo amplamente estudado por pesquisadores nacionais e internacionais. Visto que as caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea durante o perodo seco ainda no haviam sido estudadas em caprinos, pesquisas realizadas na espcie bovina foram utilizadas para analisar esse perodo.

5.1 Caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea de cabras durante o processo de secagem

Poucas pesquisas foram realizadas no perodo de secagem da glndula mamria de caprinos e nenhuma delas teve como objetivo avaliar as caractersticas fsico-qumicas da secreo lctea. Portanto, as alteraes observadas sero discutidas em comparao com os valores conhecidos no perodo de lactao de caprinos.

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No dia da ltima ordenha, os seguintes valores foram obtidos: pH = 6,670,06; eletrocondutividade = 7,100,66mS/cm; cloretos = 176,0427,35mg/dl; lactose = 4,100,50g/dl; ndice cloreto/lactose = 4,401,07%; gordura = 3,311,61g/dl; protena = 2,890,87g/dl; slidos totais = 11,252,27g/dl e clulas somticas = 3.034.6002.503.000cls/ml. Com exceo da eletrocondutividade, esses valores ficaram dentro dos parmetros observados durante o perodo de lactao de caprinos relatados na reviso bibliogrfica: pH = 6,49-6,70; eletrocondutividade = 6,55-6,97mS/cm; cloretos = 103,00-217,00mg/dl; lactose = 3,19-4,73g/dl; gordura = 2,74-4,47g/dl; protena = 2,83-3,70g/dl; slidos totais = 10,13-12,70g/dl e clulas somticas = 77.000-3.284.000cls/ml (SHARMA; ROY, 1977; AKINSOYINU; AKINNYELE, 1979; PARK; HUMPHREY, 1986; GUIMARES et al., 1989; PARK, 1991; BARROS; LEITO, 1992; UPADHYAYA; RAO, 1993; BENEDET; CARVALHO, 1996; DAMASCENO et al., 1997; CHORNOBAI1, 1998 apud TORII et al., 2004 p. 905; PRATA et al., 1998; ANDRADE et al., 2001; FERNANDES, 2002; NUNES, 2002; TONIN; NADER FILHO, 2002; BOUTINAUD et al., 2003; MORGAN et al., 2003; GOMES, 2004; TORII et al., 2004; MADUREIRA, 2006; SILVA et al., 2006). Da anlise dos resultados obtidos pode-se concluir que houve uma significativa influncia do processo de secagem nos valores de pH, eletrocondutividade, cloretos, lactose e protenas, sendo que a gordura, slidos totais e clulas somticas no sofreram influncia do processo de secagem. A seguir cada parmetro ser discutido com detalhes. Os valores de pH da secreo lctea durante o perodo de secagem apresentaram duas fases de crescimento: entre o terceiro e o stimo dias e entre o dcimo e o trigsimo dias. No terceiro dia da secagem, o valor mdio de pH j era 6,710,06 e estava fora do intervalo de valores considerados normais para cabras em lactao, entre 6,49 e 6,70 (PRATA et al., 1998; CHORNOBAI1, 1998 apud TORII et al., 2004 p. 905; FERNANDES, 2002; NUNES, 2002; TORII et al., 2004). Esses resultados foram semelhantes aos obtidos por Birgel (2006) na secagem de vacas holandesas, quando os valores de pH tambm apresentaram um crescimento,

Chornobai, C. A. M. Avaliao fsico-qumica de leite in natura de cabras cruza Saanen, ao longo do perodo de lactao. 1998. 100 f. Dissertao (Mestrado), Universidade Estadual de Maring Maring. 1998

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sendo que nas cabras esse aumento foi oservado at o final do processo de secagem e nas vacas o valor de pH se estabilizou aps o dcimo dia de secagem. No dia do incio do processo de secagem, o valor mdio da eletrocondutividade da secreo lctea era 7,100,66mS/cm, um pouco acima do limite superior do intervalo considerado normal, 6,55 a 6,979mS/cm. Porm, logo no primeiro dia de secagem este valor sofreu uma ligeira queda para 6,960,66mS/cm e continuou oscilando at o stimo dia do processo de secagem, quando atingiu 6,720,61mS/cm e ento comeou a aumentar, sendo que apenas no dcimo dia estave fora dos limites de normalidade da lactao (SHARMA; ROY, 1977; PARK, 1991; FERNANDES, 2002). Birgel (2006) detectou que em vacas a eletrocondutividade sofre um aumento logo incio da secagem, se estabiliza e sofre um novo aumento no final do processo. Entretanto, nesse estudo um aumento mais significativo s foi observado no final do processo de secagem. Em relao ao teor de cloretos da secreo lctea, pode-se afirmar que logo no incio do processo de secagem h uma ligeira queda seguida de um aumento muito sutil que se segue at o dcimo dia, quando um aumento mais pronunciado pode ser observado, levando a uma alterao significativa dos valores. Levando-se em conta os valores de referncia para o teor de cloretos na lactao de caprinos aqui considerados que se situam entre 103,0 217,0mg/dl, s houve uma diferena desses teores com relao lactao a partir do dcimo quinto dia, pois at o dcimo dia os valores observados se encontravam dentro dessa faixa considerada (AKINSOYINU; AKINNYELE, 1979; BARROS; LEITO, 1992; UPADHYAYA; RAO, 1993; PRATA et al., 1998; FERNANDES, 2002; TONIN; NADER FILHO, 2002). Birgel (2006) observou que em bovinos o aumento de cloretos se d de forma abrupta no incio do processo, se estabilizando logo aps, para apresentar um leve aumento no final do processo, entretanto, como j ocorrera com a eletrocondutividade, os caprinos s apresentaram um aumento significativo no final do processo. No dia da ltima ordenha o valor mdio de lactose da secreo lctea era de 4,100,50 g/dl, e oscilou at o quinto dia do processo de secagem (4,320,36g/dl), quando ento comeou a cair lentamente at o dcimo dia (4,000,50g/dl), sempre dentro da faixa de valores considerada normal para a lactao que vai de 3,194 a 4,73 g/dl (UPADHYAYA; RAO, 1993; BENEDET; CARVALHO, 1996; PRATA et al.,

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1998; FERNANDES, 2002; MORGAN et al., 2003; GOMES, 2004; TORII et al., 2004) No dcimo quinto dia ocorre uma queda abrupta dos valores de lactose para 2,981,06g/dl, seguida de outra queda abrupta no trigsimo dia quando os valores chegaram a 1,620,94g/dl, uma reduo de cerca 61% dos teores de lactose da secreo lctea se for comparado o incio e o final do processo de secagem. Em contrapartida , no processo de secagem de fmeas bovinas Birgel (2006) observou uma queda muito mais precoce dos teores de lactose, que entre a ltima ordenha e o quinto dia caram de 4,23g/dl para 1,73g/dl de lactose, sendo que no restante do processo a queda continuou, de forma gradual. Foi possvel observar um grande coeficiente de variao para a varivel lactose nos dois ltimos dias de colheita (dcimo quinto e trigsimo), ficando acima dos 30%, valor mximo aceito por Sampaio (1998) para experimentaes envolvendo animais. O ndice cloretos/lactose s aumentou aps o dcimo dia, o que j era esperado j que a lactose e o cloreto s comearam a sofrer modificaes mais evidentes a partir desse momento. Levando-se em conta que o cloreto e a lactose so os principais responsveis pela isotonicidade do leite (SCHALM; CARROLL; JAIN, 1971), o ndice pode ser utilizado como indicador de uma possvel alterao nessa caracterstica do leite. Birgel (2006), observou as principais alteraes no ndice cloreto/lactose entre o primeiro e quinto dia da secagem de bovinos, diferentemente do que foi constatado nesse estudo. O ndice cloretos/lactose apresentou alguns valores de coeficiente de variao bastante altos a partir do dcimo dia de secagem, assim como havia ocorrido com a lactose. Os valores de gordura da secreo lctea de cabras variaram bastante durante todo o processo de secagem, entretanto nenhum padro foi observado. O menor valor atingido foi no terceiro dia (2,071,49g/dl) sendo esta a nica ocasio, durante toda a secagem em que os valores de gordura ficaram fora da faixa considerada normal para a secreo lctea de caprinos que vai de 2,74 a 4,47 g/dl (PARK; HUMPHREY, 1986; GUIMARES et al., 1989; PARK, 1991; BARROS E LEITO, 1992; BENEDET; CARVALHO, 1996; DAMASCENO et al., 1997;

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CHORNOBAI2, 1998 apud TORII et al., 2004 p. 905; NUNES, 2002; BOUTINAUD et al., 2003; MORGAN et al., 2003; GOMES, 2004; SILVA et al., 2006). Diferentemente dos caprinos, os bovinos apresentam um gradual aumento dos teores de gordura durante a secagem at o stimo dia de secagem, quando ento esses teores sofrem uma diminuio para valores pouco acima do incio do processo (BIRGEL, 2006). Durante todo o processo de secagem, o teor de gordura apresentou nveis de coeficiente de variao muito acima do esperado para uma experimentao animal, sendo isso um fator que pode ter prejudicado a anlise desse parmetro nesse estudo. Esse problema pode estar relacionado ao fato das amostras terem sido processadas em um aparelho calibrado com leite de bovino e no de caprino, j que Zeng (1996) j havia alertado sobre problemas de processamento de amostras de leite caprino com aparelho de infravermelho calibrado com leite bovino. Durante todo o processo de secagem da glndula mamria pode-se observar um aumento gradual dos teores de protena. No ltimo dia de ordenha, antes de se iniciar o processo de secagem, o valor mdio era de 2,890,87g/dl. Os valores foram crescendo at alcanar o valor de 5,272,07g/dl no trigsimo dia de secagem, o que representa um aumento de 82,35% no teor de protenas da secreo lctea. At o quinto dia o teor de protena ainda se encontrava dentro do intervalo de normalidade para leite caprino compreendido entre 2,83g/dl e 3,7g/dl (PARK; HUMPHREY, 1986; PARK, 1991; PRATA et al., 1998; BENEDET, 1996; FERNANDES, 2002; MORGAN et al., 2003; GOMES, 2004; TORII et al., 2004; SILVA et al., 2006). Segundo Birgel (2006) os bovinos apresentam uma gradual elevao do teor de protenas do leite entre a interrupo da ordenha e o dcimo quinto dia do processo de secagem, quando sofreram uma estabilizao, e sofreram pequenas flutuaes at o final da secagem. Nesse caso o comportamento das duas espcies foi mais semelhante j que houve um aumento dos teores de protena na secreo lctea de 82% para caprinos e 112,08% para bovinos. Em trs oportunidades (primeiro, dcimo quinto e trigsimo dia) pode ser observada uma elevao do coeficiente de variao acima do esperado para ensaios com animais. Assim como j ocorrera com a gordura os teores de slidos totais da secreo lctea de caprinos variaram muito durante a secagem da mama e apenas no ltimo

Chornobai, C. A. M. Avaliao fsico-qumica de leite in natura de cabras cruza Saanen, ao longo do perodo de lactao. 1998. 100 f. Dissertao (Mestrado), Universidade Estadual de Maring Maring. 1998

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dia de ordenha (9,814,91g/dl) ficou fora dos valores considerados normais para lactao de caprinos (10,13 - 12,7 g/dl). J quando a espcie considerada a bovina os valores tendem a aumentar entre o primeiro o stimo dia de secagem, j no perodo compreendido entre o stimo e dcimo dia houve uma estabilizao para ento ocorrer uma queda at o trigsimo dia (BIRGEL, 2006). Apenas no final do processo de secagem (trigsimo dia) o coeficiente de variao dos slidos totais ficou fora do limite aceito por Sampaio (1998). A CCS da secreo lctea no dia da interrupo da ordenha (3.034,60x103cls/ml) se encontrava dentro da faixa considerada normal para caprinos (GUIMARES et al., 1989; ANDRADE et al., 2001; FERNANDES, 2002; GOMES, 2004; MADUREIRA, 2006). A contagem diminuiu at o dcimo quinto dia e sofreu um aumento abrupto at o trigsimo dia da secagem. No processo de secagem de bovinos Birgel (2006) relatou que a contagem de clulas somticas do leite j sofre um grande aumento do incio at o stimo dia, para ento sofrer pequenos aumentos at o final do processo, mostrando uma grande diferena com relao aos caprinos. Em todos os momentos observados o coeficiente de variao ficou muito acima do considerado normal em ensaios com animais, sendo este um fator que pode ter alterado a interpretao dos dados relativos CCS. Os resultados do Califonia Mastits test (CMT) mostrou uma concordncia parcial como os valores encontrados na CCS, j que no incio do processo 59% das mamas apresentavam uma classificao trs cruzes. Esse percentual foi diminuindo, acompanhando a queda da CCS at o stimo dia, porm a partir do dcimo dia o percentual de mamas com classificao trs cruzes voltou a aumentar e caiu no trigsimo dia, justamente quando houve o maior aumento da CCS, entretanto mais de 70% das mamas apresentaram reao duas ou trs cruzes no final da secagem. Nos parmetros determinados na ESALQ (lactose, gordura, protena e slidos totais e contagem de clulas somticas) pode ser observado um problema com elevados coeficientes de variao, principalmente nas amostras provenientes do final do processo de secagem, ficando uma dvida se esse seria o mtodo ideal de se trabalhar com leite caprino na ocasio da determinao desses parmetros, j que no local no se utiliza a calibrao dos aparelhos com leite caprino, j que os aparelhos utilizados como o contador por citometria de fluxo (SOMACOUNT 300) e aparelho de infravermelho (BENTLEY 2000) j foram utilizados por outros autores (ARCURI et al., 2004; ZENG, 1996; DUBLIN et al. 1982; ZENG et al., 1999) sem

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problema, porm todos fizeram ressalva quanto calibrao dos mesmos, que pode interferir no resultado final. De maneira geral o que foi observado foi que, com exceo da eletrocondutividade, os parmetros estavam dentro do descrito na bibliografia consultada no incio do processo de secagem, momento que o animal poderia ser considerado ainda em lactao. A interrupo da ordenha causou um acmulo de secreo lctea nos alvolos e na cisterna da glndula. Esse acmulo desencadeou uma srie de reaes que resultou na alterao dos componentes da secreo lctea, algumas mais precoces e outras mais tardias. Logo no incio da secagem alguns parmetros j se alteraram, o pH de forma mais evidente e o teor de protenas de maneira bem mais discreta, entretanto modificaes na lactose, protena, cloretos e eletrocondutividade ocorreram apenas aps a primeira semana do processo de secagem. Parmetros como a contagem de clulas somticas tiveram um comportamento bem distinto, diminuindo no incio do processo de secagem para aumentar no final, j os teores de slidos totais e apresentaram variaes sem que qualquer padro pudesse ser determinado. gordura

5.2 Exame clnico da glndula mamria durante o processo de secagem

Apesar da citao desse procedimento em praticamente todos os trabalhos com glndula mamria e leite de caprinos e bovinos, poucos so os trabalhos que do destaque a essas observaes, com isso mostrou-se de fundamental importncia a publicao dos resultados observados nesse estudo para servir de base para futuros estudos relacionados ao assunto em questo. Durante o processo de secagem o exame fsico da glndula mamria objetivou avaliar a plenitude e a distenso da mama e dos tetos, presena de edema da glndula mamria, ocorrncia da ejeo espontnea do leite e aspecto da secreo lctea, assinalando a sua colorao e consistncia. Com a interrupo da ordenha se inicia o processo de secagem e a involuo da glndula mamria, entretanto a produo de leite no cessa imediatamente, ocorrendo um acmulo de leite nos alvolos e na cisterna da glndula que, associado com outros fatores resulta na inibio da produo de leite pelas clulas

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alveolares, induzindo ao processo de involuo da glndula mamria. (FLEET et al., 1975; FLEET; PEAKER, 1978;; SMITH; TODHUNTER, 1982; HURLEY; FORD, 2003) O grau de distenso mximo das mamas foi atingido no terceiro dia aps o incio do processo de secagem, quando 33,33% (9/27) das mamas estavam extremamente distendidas sendo impossvel de preguear a pele da mama e mais de 50% estavam pelo menos distendidas e era difcil preguear a pele da mama, indicando um acmulo considervel de secreo lctea no bere. No quinto dia aps a secagem as glndulas j se encontravam em processo de involuo, e mostravam uma reabsoro da secreo, com isso mais de 44,45% das mamas j estavam com uma classificao de moderadamente distendida ou no distendida. Esta diminuio pode ser atribuda a reabsoro da gua que constitui cerca de 80% da secreo lctea, assim como havia concludo Birgel (2006) no processo de secagem de vacas. Dando continuidade a esse processo de involuo com reabsoro de lquidos e apoptose do tecido mamrio, as mamas diminuram de volume at atingir a menor distenso no final da secagem, com 37,04% (10/27) das mamas no distendidas, 55,56% (15/27) moderadamente distendidas e apenas 7,41% (2/27) distendidas. Prina (2007) encontrou, de um total de dezoito, oito cabras (44,44%) com mamas no distendidas e dez cabras (55,56%) com mamas moderadamente distendidas dezesseis dias antes do parto, indicando que uma pequena involuo ainda pode ocorrer aps os trinta dias de secagem, entretanto isto indica que distenso da mama tende a se manter relativamente estvel at quinze dias antes da pario, quando a colostrognese tm incio. (em fase de elaborao)3 Acompanhando essas transformaes do bere encontramos um paralelo nas modificaes de distenso sofridas pelos tetos. A maior distenso dos tetos ocorreu no terceiro dia aps o incio da secagem da glndula mamria quando mais de 40% dos tetos estavam distendidos ou extremamente distendidos e nenhum teto apresentava a classificao no distendido, mostrando que havia um acmulo significativo de leite nessas estruturas. No stimo dia grande parte dos tetos (66,67%) j estavam moderadamente distendidos e no final da secagem mais de 85,00% dos tetos estavam moderadamente distendidos ou vazios mostrando que a

PRINA, A. P. M. A fase preparatria do parto de cabras da raa Saanen. Manifestaes clnicas indicadoras da pario iminente e avaliao do perfil hormonal. 2007. 141 f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2007

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secreo lctea havia sido reabsorvida. Prina (2007) observou treze cabras de dezoito (72,22%) com tetos vazios e quatro de dezoito (22,22%) com tetos com contedo mas relaxados e apenas uma das dezoito (5,56%) com tetos distendidos, mostrando novamente resultados semelhantes com o incio do processo seco. Durante todo o processo de secagem os tetos do grupo sem isolamento bacteriano apresentou um grau de distenso um pouco maior que o grupo com isolamento.(em fase de elaborao)3 O edema de glndula mamria esteve ausente at o terceiro dia de secagem quando 14,81% apresentaram um edema restrito base do teto e 7,41% um edema difuso por toda a glndula, sendo que no quinto dia a porcentagem de animais com edema na base dos tetos aumentou para 37,04% enquanto os outros animais no apresentaram edema, mostrando a presena de um extravasamento de fludos para o tecido extracelular durante a secagem dos animais, decorrente, provavelmente, de um processo inflamatrio resultante do acmulo de secreo lctea no bere. No stimo dia ainda podiam ser observados 3,70% dos animais com edema na base dos tetos, porm a partir do dcimo dia todas as mamas no apresentaram mais edema, mostrando que a partir do momento em que a involuo das mamas se iniciou e os fludos foram reabsorvidos a presena de edema foi diminuindo. Com relao secreo lctea dos animais que foram secados, foi observado que no momento da interrupo da ordenha todas as mamas apresentavam uma secreo lctea cujo aspecto era de leite, esse quadro se manteve at o primeiro dia aps o incio do processo de secagem. Aps o terceiro dia, quando j havia um acmulo de secreo lctea no bere, 40,74% dos animais j apresentavam uma secreo com aspecto de leite de colorao creme clara e o restante dos animais (59,26%) continuavam com secreo com aspecto de leite. No decorrer do processo de secagem pode ser observada uma transformao da secreo, adquirindo cada vez mais um aspecto com colorao creme clara, ainda foi possvel observar que algumas mamas passaram a apresentar uma secreo de aspecto aquosa, indicando um processo de involuo mais adiantado, entretanto mesmo no final dos trinta dias estudados alguns animais ainda apresentavam uma secreo com aspecto de leite. Dezesseis dias antes do parto, Prina (2007) observou uma grande variedade de secrees, entretanto a mais observada foi a secreo aquosa creme clara em cinco das dezoito cabras (27,78%), seguida pela viscosa de cor dourada em quatro

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das dezoito cabras (22,22%), entre viscoso e fludo de cor amarelo escuro e leite em trs de dezoito (16,67%) cabras cada uma. Esses resultados indicam certa concordncia com esse estudo, principalmente quando observamos que at dezesseis dias antes do parto ainda existem cabras que mantm a secreo da mama com aspecto de leite. (em fase de elaborao)4 No presente estudo, em nenhum momento em que foram feitas as colheitas, os animais apresentaram ejeo espontnea do leite, mesmo em animais com grande distenso da glndula mamria, diferentemente do que ocorre em bovinos, onde, segundo Birgel (2006) possvel observar, nos trs primeiros dias do processo de secagem, at 29,5% dos tetos, com ejeo espontnea de leite, porm esse percentual diminui com o passar do tempo, podendo ser observada em apenas 2,3% dos tetos no trigsimo dia e em nenhum caso no quadragsimo quinto dia. Talvez essa diferena esteja ligada com a formao do tampo de queratina no teto dos animais, apesar de que a formao completa do mesmo s ocorra aps 24 a 60 horas sem ordenha (NICKERSON, 2003). As mamas examinadas durante a secagem mostraram uma distenso bastante pronunciada logo no incio do processo de secagem, porm, sua regresso j se iniciou aps o quinto dia. Esse acmulo de secreo pode ser observado tambm por outras manifestaes na glndula mamria, como a ocorrncia de edema entre o terceiro e stimo dia, entretanto esse acmulo de leite no levou ocorrncia de ejeo espontnea de leite.

PRINA, A. P. M. A fase preparatria do parto de cabras da raa Saanen. Manifestaes clnicas indicadoras da pario iminente e avaliao do perfil hormonal. 2007. 141f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2007

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5.3 Influncia do isolamento bacteriano nas caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de cabras durante o processo de secagem

Durante o processo de secagem, diversas alteraes morfo-funcionais ocorrem na glndula mamria, portanto, a comparao realizada nesse trabalho, pareando dados de mamas com isolamento bacteriano e sem isolamento bacteriano, pretendia determinar se a presena de bactrias na secreo lctea poderia interferir no processo de secagem, exacerbando o processo inflamatrio e comprometendo a secagem da mama. Desde a ltima ordenha at o dcimo quinto dia de secagem os valores de pH da secreo lctea de mamas que apresentaram isolamento bacteriano tiveram um valor ligeiramente maior do que as amostras provenientes de mamas sem isolamento, entretanto em nenhum desses momentos houve uma diferena estatisticamente significante entre os dois pares de mdias. Ao contrrio de todo o processo, o valor mdio de pH das amostras sem isolamento bacteriano, no trigsimo dia, foi maior do que o valor mdio das amostras com isolamento, e nesse caso sim pode-se observar uma diferena estatstica entre os valores. Quanto eletrocondutividade da secreo lctea, pode-se dizer que nos dois grupos o valor mdio final foi maior do que o valor da ltima ordenha realizada antes do incio do processo de secagem, com um aumento de 36,9% para o valor das amostras sem isolamento bacteriano e 30,0% para amostras com isolamento. O que diferiu realmente entre os dois grupos foi o comportamento da eletrocondutividade durante a secagem, j que as amostras com isolamento mostraram um aumento progressivo durante todo o processo, sendo que esse comportamento era, ora mais intenso, ora menos intenso, porm as amostras sem isolamento tiveram um pequeno crescimento no incio da secagem, mas a partir do terceiro dia a eletrocondutividade diminuiu at o stimo dia, quando comeou a aumentar de forma considervel. Em nenhum dos momentos estudados houve diferena estatstica entre as mdias. O teor de cloretos teve um comportamento muito parecido com a eletrocondutividade, sendo que os valores das amostras sem isolamento tiveram um aumento de 54,62% do comeo at o fim do processo de secagem, e as amostras com isolamento tiveram um aumento de 42,79%. Como ocorreu com a

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eletrocondutividade as amostras com isolamento tiveram, de um modo geral, um crescimento constante, s podendo ser observada um queda muita pequena dos valores entre o dcimo quinto e trigsimo dia. J as amostras sem isolamento tiveram um crescimento bem discreto at o quinto dia, quando decaiu at o stimo dia, para ento ter um grande crescimento at o final. A principal diferena com a eletrocondutividade foi a queda dos valores mais tardia e curta, j que com a eletrocondutividade a queda se iniciou no terceiro dia e foi at o stimo e os valores de cloreto apenas caram entre o quinto e stimo dia. Os dois grupos apresentaram uma queda significativa dos valores de lactose durante a secagem. O incio do processo foi muito semelhante e at o terceiro dia os valores permaneceram praticamente estveis, sendo que as amostras sem isolamento apresentavam, valores um pouco maiores, a partir do terceiro dia os valores de lactose das amostras com isolamento comearam a cair drasticamente at o dcimo dia, quando estabilizaram e permaneceram sem muitas variaes at o final, j os valores de lactose das amostras sem isolamento s comearam a cair, de forma muito discreta, a partir do quinto dia, e de uma forma mais acentuada a partir do dcimo dia. No quinto, stimo e dcimo dia pode ser observado uma diferena estatstica entre os dois grupos. Em todos os momentos da secagem, observados durante esse trabalho, o teor de gordura do grupo de amostras com isolamento bacteriano foi superior ao do grupo sem isolamento, entretanto o nico momento em que houve uma diferena estatstica foi no terceiro dia. A mdia de gordura na secreo lctea sem isolamento sofreu uma reduo de 16,61%, enquanto que o teor de gordura das amostras com isolamento sofreu um aumento de 16,02%. Os valores mdios do grupo com isolamento mostrou uma tendncia ao aumento desde o incio do processo, porm as mdias do grupo sem isolamento oscilou bastante durante o processo, no mostrando tendncia alguma. Analogamente gordura, os teores de protena da secreo lctea do grupo com isolamento foram maiores do que os do grupo sem isolamento durante o processo de secagem, com exceo do perodo compreendido entre o dcimo quinto e trigsimo dia, quando houve uma queda dos teores de protena do grupo com isolamento para valores inferiores ao do outro grupo. Durante todo o processo de secagem os valores mdios de protena das amostras sem isolamento sofreram um aumento gradual, enquanto que os valores mdios de protena das amostras

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com isolamento bacteriano apresentaram dois momentos de crescimento, sendo o primeiro da ltima ordenha at o quinto dia, e o segundo do stimo at o dcimo quinto dia, quando sofreu nova queda at o trigsimo dia. Apesar da diferena entre os dois grupos, em ambos pode ser observado um aumento do teor de protenas no decorrer do processo de secagem, de 82,35% no grupo sem isolamento e de apenas de 38,52% no grupo com isolamento bacteriano. Esse menor aumento do grupo com isolamento se deve principalmente queda ocorrida entre o dcimo quinto e trigsimo dia, j que at o dcimo quinto dia o aumento j era de 80%. Os nicos dias em que houve uma diferena estatisticamente significativa entre os dois grupos foram no quinto e no dcimo quinto dia, justamente no final das duas fases de crescimento do teor de protena do grupo com isolamento. Com exceo do perodo compreendido entre o quinto e o dcimo dia os valores de slidos totais na secreo lctea do grupo com isolamento foram maiores do que os teores do grupo sem isolamento. Nos dois casos houve uma queda dos valores se comparado o primeiro e ltimo dia do processo de secagem, porm a maneira como isso ocorreu difere nos dois grupos. Enquanto que o grupo com isolamento bacteriano apresentou uma oscilao dos valores durante o processo, sem qualquer indicao de uma tendncia, os valores de slidos totais do grupo sem isolamento sofreu uma queda inicial at o terceiro dia, seguida de um aumento brusco at o stimo dia para finalizar com nova queda entre o stimo e o trigsimo dia. A diminuio do teor de slidos totais do grupo de mamas com isolamento foi da ordem de apenas 0,33%, enquanto que das mamas sem isolamento foi de 12,8%. Ao se comparar o nmero de clulas somticas da secreo lctea do primeiro e ltimo dia observa-se um aumento desse nmero em ambos os grupos, sendo de 13,36% no grupo sem isolamento e 23,10% no grupo com isolamento. Apesar desse aumento, no incio do processo tanto o grupo sem isolamento como o com isolamento apresentaram uma queda da CCS at o dcimo quinto dia de, respectivamente, 48,0 e 31,14%. Em todos os momentos observados a CCS do grupo com isolamento foi maior que a do grupo de mamas sem isolamento, porm no houve diferena significativa em nenhum desses momentos. Foi observada uma influncia da presena do isolamento bacteriano no resultado do California Mastitis Test, sendo que esta diferena estatisticamente significante ocorreu apenas em dois momentos do processo de secagem da glndula mamria (dcimo quinto e trigsimo dia). Essa diferena limitou-se a

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resposta do CMT trs cruzes, sendo que nas duas ocasies citadas o grupo de mamas sem isolamento bacteriano apresentou valores significativamente menores do que o grupo de mamas com isolamento bacteriano positivo. A influncia do isolamento bacteriano ficou restrita a apenas alguns momentos das determinaes de pH, lactose, ndice cloretos/lactose, protena, gordura, slidos totais e CMT.

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6 CONCLUSES

1) A partir do momento em que a ordenha foi interrompida a glndula mamria sofreu diversas modificaes morfo-funcionais que levaram a um acmulo de secreo lctea, cujo ponto mximo de distenso ocorreu aps trs dias do inco da secagem, porm j a partir do quinto dia sinais de reabsoro de leite j podiam ser observados, sendo que no trigsimo dia aps a interrupo da ordenha 37,04% das mamas foram classificadas como no distendias estando, portanto, com o processo de involuo completo. 2) Quando ocorreu o grau mximo de acmulo de secreo na mama pode ser observado certo grau de edema na glndula mamria, sendo este classificado como restrito a base dos tetos e difuso por toda a glndula no incio, porm no quinto dia o nico tipo de edema observado foi o restrito base dos tetos, no stimo dia de secagem a porcentagem de mamas com edema j havia cado bastante e desaparecido completamente aps o dcimo dia. 3) O incio do processo de secagem foi caracterizado por uma secreo de aspecto leite (100%) que foi sendo substitudo a partir do terceiro dia por uma secreo com aspecto de leite com colorao creme clara (40,74%) e ao final do processo, mais especificamente aps o dcimo quinto dia, por uma secreo de aspecto aquosa (11,11%) e leite de colorao creme clara (81,48%). 4) A contagem de clulas somticas declinou at o dcimo quinto dia de secagem, quando sofreu um aumento abrupto para valores um pouco maiores que os observados no dia da interrupo da ordenha. 5) No incio do processo pouco mais da metade das mamas apresentavam CMT duas cruzes ou mais, porm no final do processo esse porcentual j era maior que 70%, sendo que at o ltimo dia de secagem ainda existiam mamas com reao negativa ao CMT.

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6) A anlise dos resultados obtidos pode concluir que houve uma significativa influncia do processo de secagem no pH, eletrocondutividade, cloretos, lactose e protena da secreo lctea, sendo que a gordura, slidos totais e clulas somticas no sofreram uma influncia significativa. 7) A partir do terceiro dia de secagem j podia ser observado um aumento dos valores de pH da secreo lctea, entretanto os valores de eletrocondutividade e de cloretos s comeou a aumentar aps o stimo dia de secagem. Passados cinco dias da interrupo da ordenha os valores de lactose comearam a diminuir e sofreram uma queda abrupta a partir do dcimo dia, com isso o ndice cloreto/lactose sofreu um aumento a partir do dcimo dia de secagem. 8) Os teores de gordura e de slidos totais tiveram uma leve diminuio durante o perodo seco, porm oscilaram muito durante o processo. O teor de protena da secreo aumentou gradativamente no decorrer da secagem. 9) As alteraes das caractersticas fsico-qumicas e celulares da secreo lctea de caprinos durante a secagem da glndula mamria ocorrem de forma mais tardia, se comparada com as mudanas ocorridas em bovinos. O pH ficou acima do normal j no terceiro dia, entretanto o teor de protenas s ficou acima do considerado normal a partir do stimo dia de secagem, a eletrocondutividade teve um elevao temporria para fora da faixa de normalidade entre o terceiro e quinto dia, caiu e s ficou acima dos valores normais novamente a partir do dcimo dia, os cloretos e a lactose ficaram acima e abaixo, respectivamente, dos limites considerados normais apenas depois do dcimo quinto dia de secagem e a contagem de clulas somticas s ficou ligeiramente acima dos valores normais no ltimo dia de secagem. A gordura da secreo lctea oscilou muito e apenas no terceiro dia ficou abaixo dos valores considerados normais, enquanto que os slidos totais s ficaram fora da faixa de normalidade no trigsimo dia. 10) Entre o terceiro e trigsimo dia de secagem foram obtidos os seguintes valores das caractersticas fsico-qumicas e celulares do leite caprino: pH entre 6,71 e 7,48; eletrocondutividade entre 6,72mS/cm e 9,72mS/cm; cloretos entre 184,29mg/dl e 272,20mg/dl; lactose entre 4,32g/dl e 1,62g/dl; ndice cloreto/lactose entre 4,44% e

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24,13%; gordura entre 2,07g/dl e 3,49g/dl; protena entre 3,11g/dl e 5,27g/dl; slidos totais entre 9,81g/dl e 12,55g/dl; clulas somticas entre 1.576x103cls/ml e 3.440x103cls/ml. 11) A influncia da presena de isolamento bacteriano nas caractersticas fsicoqumicas e celulares da secreo lctea durante o processo de secagem foi parcial e ficou restrita a apenas alguns momentos das determinaes de pH, lactose, ndice cloretos/lactose, protena, gordura, slidos totais e CMT, no permitindo que se afirme que a secagem de glndulas mamrias sem isolamento bacteriano difere da secagem de mamas com secreo lctea que apresentaram isolamento bacteriano positivo.

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