CHAPU-DE-COURO Echinodorus folium Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.

) Micheli ALISMATACEAE A droga vegetal constituda pelas folhas secas contendo, no mnino, 2,8% de derivados do cido o-hidroxicinmico, expressos em verbascosdeo (C29H36O15, 624,6). CARACTERSTICAS Caractersticas organolpticas. As folhas secas possuem odor caracterstico e sabor amargo. DESCRIO MACROSCPICA Folhas simples, coriceas, cordiformes, com base cordada e pice agudo a arredondado. Lmina foliar de dimenses variadas, dependendo da condio ambiental, de 10 cm a 35 cm de comprimento e 20 cm a 25 cm de largura na poro mediana; pecolo longo de seco transversal circular a ovalada, com expanses aladas curtas e estriaes longitudinais. A nervao do tipo campildroma, com 12 a 14 nervuras de calibres semelhantes, que partem de um nico ponto na base do limbo, proeminentes na face abaxial. Destas partem nervuras de menor calibre, paralelas entre si, e destas as tercirias, culminando na formao de arolas fechadas com terminaes pouco ramificadas. Tanto a lmina quanto o pecolo so pubescentes, relativamente speros pela presena de tricomas estrelados. Ductos secretores translcidos so abundantes por toda a lmina foliar, por vezes visualizados sem auxlio de lentes. DESCRIO MICROSCPICA Lmina foliar com epiderme uniestratificada recoberta por cutcula delgada dotada de pequenas papilas que aparecem como pontos brilhantes na microscopia ptica, tambm presentes no pecolo. Lmina anfiestomtica, com estmatos no mesmo nvel que as demais clulas epidrmicas, paralelocticos, com clulas-guarda alongadas, contando com dois pares de clulas subsidirias adjacentes, sendo a mais proximal alongada e esguia, por vezes visualizadas com certa dificuldade devido ao pouco contraste obtido em suas paredes. Em vista frontal, em ambas as faces da lmina, esto clulas epidrmicas comuns com formatos e dimenses variadas, cujas paredes anticlinais podem ser relativamente retas at sinuosas, embora este ltimo formato seja mais comum na face abaxial. Sobre as nervuras no ocorrem estmatos e as clulas epidrmicas so retangulares, por vezes muito alongadas em relao ao maior eixo da folha. Tambm sobre as nervuras esto tricomas pluricelulares, estrelados. Em seces transversais verifica-se que as clulas epidrmicas so volumosas e as cmaras subestomticas so amplas. O mesofilo est composto por apenas uma camada de parnquima palidico, com clulas pouco alongadas, e parnquima esponjoso, cujas clulas apresentam pequenas expanses braciformes. As nervuras de maior calibre so biconvexas, com curvatura mais expressiva junto face abaxial, contando com aernquima em abundncia, o qual forma amplas lacunas por toda a extenso da estrutura. Nestas lacunas, dispostas transversalmente, esto trabculas de clulas braciformes com reentrncias espessadas, permitindo a formao de espaos

intercelulares triangulares. Por todo o aernquima esto dispostos ductos secretores. Na nervura principal esto trs feixes vasculares de maior calibre, colaterais, em arco aberto com bordos elevados, com pequena lacuna no protoxilema, parcialmente envoltos por calotas de fibroescleredes, longas e com paredes lignificadas. Dispostos concentricamente, esto entre 8 a 11 feixes vasculares menos calibrosos, tambm em arco aberto, mas contando com esclernquima apenas junto ao floema. As nervuras de menor calibre, dispostas no mesofilo, so colaterais com calota de poucos elementos esclerenquimticos em ambos os plos de tecidos condutores. Uma nica camada de clulas parenquimticas, volumosas e delgadas, compe a bainha dos feixes vasculares. O pecolo apresenta clulas epidrmicas polidricas, alongadas longitudinalmente. Em seco transversal verifica-se que esta poro foliar est preenchida por aernquima, com as mesmas caractersticas da nervura principal, inclusive os ductos secretores e trabculas com clulas braciformes. Diversas clulas deste aernquima esto repletas de gros de amido. Os feixes vasculares mais calibrosos (de um a dois) esto dispostos na regio central do pecolo, com trs grupos concntricos de feixes vasculares, menos calibrosos em direo periferia, semelhantes ao da nervura principal, mas contando com uma lacuna de protoxilema de grandes dimenses. Como na nervura principal, os feixes de menor calibre apresentam esclernquima apenas junto ao plo floemtico. Tanto nos tecidos da lmina foliar quanto do pecolo no foram detectadas reaes positivas para polifenis (cloreto frrico a 10% (p/v)) ou substncias lipdicas (Sudan IV). DESCRIO MICROSCPICA DO P O p atende a todas as caractersticas estabelecidas para a espcie, menos os caracteres macroscpicos. So caractersticas: fragmentos de epiderme da lmina foliar, com estmatos paralelocticos e clulas epidrmicas de contornos sinuosos, recobertas por cutcula ornamentada; feixes de fibroescleredes associados a clulas com pequenas expanses braciformes, do parnquima esponjoso; conjuntos de clulas tabulares, alongadas longitudinalmente; clulas braciformes com reentrncias espessadas, que compem as trabculas da nervura principal e pecolo, ocorrem em abundncia. IDENTIFICAO Proceder conforme descrito em Cromatografia em camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel F254, com espessura de 250 mm, como suporte, e mistura de acetato de etila, tolueno, cido frmico e gua (100:10:10:1), como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma de banda, 10 mL da Soluo (1) e 5 mL das Solues (2), (3) e (4), separadamente, preparadas antes do uso, como descrito a seguir. Soluo (1): turbolisar, exatamente, cerca de 10 g da droga vegetal moda em 100 mL de etanol a 70% (v/v) durante 15 minutos, com intervalos de 5 minutos, de forma que a temperatura no exceda 40 C. Filtrar, eliminar o etanol em evaporador rotatrio sob presso reduzida. Extrair a fase aquosa resultante com trs pores de 25 mL de acetato de etila em funil de separao (125 mL). Deixar em repouso em freezer (-18 C) por 15 minutos, para total separao das fases. Reunir as fraes orgnicas e lavar com 50 mL de gua. Evaporar a frao obtida em evaporador rotatrio sob presso reduzida at resduo. Retomar o resduo com 1 mL de metanol. Soluo (2): pesar cerca de 1 mg de cido cafeico e dissolver em 1 mL de metanol.

Soluo (3): pesar cerca de 1 mg de isorientina e dissolver em 1 mL de metanol. Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e deixar secar em capela de exausto. Nebulizar a placa com difenilborato de aminoetanol SR e deixar secar em capela de exausto. A mancha de colorao acastanhada obtida com a Soluo (1), com Rf de aproximadamente 0,90, corresponde em posio quela obtida com a Soluo (2). Logo abaixo dessa, obtida uma mancha esverdeada, com Rf de aproximadamente 0,82, na regio do cromatograma da Soluo (1). No quadrante inferior do cromatograma, a mancha de colorao amarela intensa obtida com a Soluo (1), com Rf de 0,28, corresponde em posio quela obtida com a Soluo (3), referente isorientina. Imediatamente abaixo dela, obtida na regio do cromatograma da Soluo (1) outra mancha de colorao amarela intensa, com Rf de 0,22, que corresponde swertiajaponina. ENSAIOS DE PUREZA Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2,0%. gua (5.4.2.3). No mximo 9,0%. Cinzas totais (5.4.2.4). No mximo 11,0%. Cinzas sulfatadas (5.2.10). No mximo 13,0%. DOSEAMENTO Derivados do cido o-hidroxicinmico Proceder conforme descrito em Espectrofotometria de absoro no visvel (5.2.14). Preparar as solues descritas a seguir. Soluo estoque: pesar, exatamente, cerca de 0,5 g da droga pulverizada (210 m) e adicionar 90 mL de etanol a 50% (v/v) em balo de fundo redondo de 250 mL. Levar a refluxo por 30 minutos. Esfriar e filtrar para balo volumtrico de 100 mL. Lavar o balo de fundo redondo e o filtro com 10 mL de etanol a 50% (v/v) para o balo volumtrico. Completar o volume com etanol 50% (v/v). Soluo amostra: adicionar, volumetricamente, em balo volumtrico de 10 mL, 1 mL da Soluo estoque, 2 mL de cido clordrico 0,5 M, 2 mL da mistura de nitrito de sdio a 20% (p/v) e molibdato de sdio a 20% (p/v) (1:1). Adicionar 2 mL de soluo de hidrxido de sdio a 8% (p/v) e completar o volume com etanol 50% (v/v). Soluo branco: adicionar, volumetricamente, em balo volumtrico de 10 mL, 1 mL da soluo estoque, 2 mL de cido clordrico 0,5 M, 2 mL de soluo de hidrxido de sdio a 8% (p/v) e completar o volume com etanol 50% (v/v). Medir a absorvncia da Soluo amostra, imediatamente aps o seu preparo, no comprimento de onda de 525 nm, utilizando a Soluo branco para o ajuste do zero. Calcular o teor de derivados do cido o-hidroxicinmico,expresso em porcentagem de verbascosdeo, segundo a expresso a seguir. Considerar a absortividade especfica do verbascosdeo igual a 185. em que

TA = teor de derivados do cido o-hidroxicinmico, expresso em verbascosdeo (%); A = absorvncia da Soluo amostra; m = massa da amostra utilizada no ensaio, em gramas, considerando a determinao de gua. EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e do calor.