Latin American Journal of Pharmacy

(formerly Acta Farmacutica Bonaerense)

Lat. Am. J. Pharm. 27 (1): 23-7 (2008)

Trabajos originales
Recibido el 5 de noviembre de 2007
Aceptado el 18 de noviembre de 2007

Associao da Rutina com p-Metoxicinamato de Octila

e Benzofenona-3: Avaliao In Vitro da Eficcia Fotoprotetora
por Espectrofotometria de Refletncia
Maria V.R. VELASCO, Tatiana S. BALOGH, Carla A. PEDRIALI, Fernanda D. SARRUF,
Claudinia A.S.O. PINTO, Telma M. KANEKO & Andr R. BABY *
Laboratrio de Cosmetologia, Departamento de Farmcia, Faculdade de Cincias Farmacuticas,
Universidade de So Paulo, Avenida Prof. Lineu Prestes, 580, bls. 13/15. Conjunto das Qumicas.
Cidade Universitria. 05508-900. So Paulo - SP. Brasil

RESUMO. Existe a tendncia atual de desenvolvimento de fotoprotetores possuindo reduzida concentrao de filtros qumicos e de proteo elevada frente s radiaes UVA e UVB. O presente trabalho
props a obteno e a avaliao da eficcia in vitro de fotoprotetores contendo rutina, um flavonol glicosdico provido de propriedades antioxidantes, associada ou no a filtros solares orgnicos UVA (benzofenona-3) e UVB (p-metoxicinamato de octila). As formulaes foram avaliadas in vitro por espectrofotometria
de refletncia com esfera integrada, quanto aos seguintes parmetros: fator de proteo solar estimado
(FPS), comprimento de onda crtico (nm) e razo UVA/UVB. A eficcia fotoprotetora da rutina a 0,1%
p/p apresentou-se dependente da concentrao e presena dos filtros qumicos UVA e UVB, sendo que
houve sinergismo na elevao do FPS, de 7,34 0,24 para 9,97 0,18, quando o flavonide foi associado
com os filtros nas concentraes mnimas. A rutina no associada aos filtros qumicos exerceu proteo
frente radiao UVA superior formulao ausente de compostos ativos e s suas associaes.
SUMMARY. Rutin Association with Ethylhexyl Methoxycinnamate and Benzophenone-3: In Vitro Evaluation
of the Photoprotection Effectiveness by Reflectance Spectrophotometry. There is a world tendency to the development of sunscreens possessing reduced concentration of UV filters and, yet, with high UVA-UVB protection.
This research work proposes the development and in vitro efficacy evaluation of sunscreens containing rutin, an
antioxidant flavonol, associated or not to UVA (benzophenone-3) and UVB (ethylhexyl methoxycinnamate) filters. Formulations were in vitro assayed by reflectance spectrophotometry with integrated sphere, regarding the
following parameters: estimated sun protection factor (SPF), critical wavelength (nm) and UVA/UVB ratio.
Rutin 0.1% w/w photoprotection efficacy presented dependent of the concentration and presence of the UVA and
UVB filters, and it was verified synergism on the SPF elevation, from 7.34 0.24 to 9.97 0.18, when the
flavonoid was associated with the filters in minimum concentrations. Isolated rutin exerted UVA protection superior to the formulation not added to UV filters and their associations.

INTRODUO
A necessidade do uso de fotoprotetores
uma realidade irrefutvel. A exposio da pele
s radiaes favorece a reduo de concentrao das substncias antioxidantes endgenas,
alteraes nos lipdios das membranas celulares;
inativao de sistemas enzimticos; e modificaes de constituintes proticos, carboidratos e
DNA, propiciando o desenvolvimento de patologias. Dentre estas, esto as reaes inflamatrias, queratose solar, carcinoma, melanoma, sen-

sibilizao cutnea e reaes fototxicas e fotoalrgicas 1,2.

A radiao UVB (290-320 nm) absorvida
pela pele, produzindo eritema, queimaduras e,
eventualmente, cncer de pele. J a radiao
UVA (320-400 nm) apresenta potencial carcinognico de menor magnitude e responsvel
pelo fotoenvelhecimento e formao de rugas.
Porm vem se tornando motivo de apreenso
por estar relacionada com a induo da imunossupresso sistmica 2,3.

PALAVRAS CHAVE: Benzofenona-3, Eficcia in vitro, Espectrofotometria de refletncia, p-Metoxicinamato

de octila, Rutina.
KEY WORDS: Benzophenone-3; Ethylhexyl methoxycinnamate, In vitro efficacy, Reflectance spectrophotometry, Rutin.
*

Autor a quem correpondncia deve ser enviada: E-mail: andrerb@usp.br; andre_rolim@uol.com.br

ISSN 0326-2383

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VELASCO M.V.R., BALOGH T.S., PEDRIALI C.A., SARRUF F.D., PINTO C.A.S.O., KANEKO T.M. & BABY A.R.

Existem duas categorias clssicas de filtros

solares: orgnicos e inorgnicos, classificados,
respectivamente, como filtros qumicos e fsicos.
Os filtros qumicos so compostos aromticos
conjugados com grupos carboxlicos e, geralmente, possuem um grupo doador de eltrons
como, por exemplo, uma amina ou metoxila na
posio orto ou para do anel aromtico. Estes
so capazes de absorver radiao UV 3-5.
Os flavonides so compostos polifenlicos
de ocorrncia ampla no Reino Vegetal, formados por um ncleo comum fundamental benzopirano ou cromano unido a anel aromtico caracterizado pelo esqueleto de carbono C6-C3-C6.
A rutina (3-o-rutinosdeo-quercetina), flavonide
da classe dos flavonis, tradicionalmente empregada como potente antioxidante, na preveno ou tratamento da insuficincia venosa
ou linftica e da fragilidade ou permeabilidade
capilar, e tambm na preveno aos danos causados pela radiao ultravioleta 6,7.
Recentemente, a permeabilidade cutnea da
rutina foi estudada in vitro em clulas de difuso vertical, empregando como modelo alternativo de biomembrana a muda de pele de Crotalus durissus. Neste estudo, a rutina foi veiculada em um sistema emulsionado e, partindo-se
dos resultados, o flavonide no apresentou
tendncia para a absoro cutnea em um perodo de 52 hs de experimento. Portanto, foi possvel interpretar que a atividade do flavonide
exercida na superfcie ou nas camadas superficiais da pele, atuando topicamente, ao essa
desejada para os filtros solares qumicos. Esse
perfil de comportamento da rutina quanto
ao tpica tambm foi observado para sua aglicona 1,8.
Este trabalho apresentou como objetivo a
anlise da eficcia in vitro da propriedade fotoprotetora da rutina associada ou no com filtros
solares orgnicos UVA e UVB, veiculados em
sistemas emulsionados, por espectrofotometria
de refletncia com esfera integrada.
MATERIAL E MTODOS
As formulaes fotoprotetoras (sistemas
emulsionados O/A) foram elaboradas com as
seguintes matrias-primas: lcool cetoestearlico
(e) fosfato de dicetila (e) fosfato cetlico (10 OE)
e sistema conservante (Croda); EDTA Na 2
(ChemyUnion); propilenoglicol (LabSynth); dimeticone (Dow Corning); rutina (Henrifarma);
p-metoxicinamato de octila e benzofenona-3
(Basf); e gua destilada. A composio quali e
quantitativa (% p/p) das formulaes est descrita na Tabela 1.
24

A eficcia fotoprotetora in vitro foi avaliada

com espectrofotmetro de refletncia difusa
com esfera de integrao, Labsphere UV1000S
Ultraviolet Transmittance Analyzer. Utilizou-se
como substrato a membrana sinttica composta
por colgeno, Vitro-Skin, que visa mimetizar
as propriedades de superfcie da pele humana.
O substrato sofreu o processo de hidratao
em gua destilada pelo perodo de 1 h a 18,0
C. Alquotas de 70,0 mg das amostras dos fotoprotetores foram aplicadas uniformemente, sob
a forma de filme de 2,0 g/cm2 com espessura
de 5,0 mm, em movimentos circulares sobre a
superfcie do substrato, na direo das extremidades para o centro, com auxlio do dedo indicador protegido com luva. Previamente leitura
no espectrofotmetro de refletncia, as amostras
ficaram em repouso durante 20 min.
Os registros dos valores espectrofotomtricos
da transmitncia foram realizados em intervalo
de comprimento de onda entre 250 e 450 nm,
de 1 em 1 nm. Aps a anlise, determinou-se a
eficcia fotoprotetora in vitro das preparaes
por meio da obteno dos parmetros a seguir:
fator de proteo solar estimado (FPS), comprimento de onda crtico (C) e razo UVA/UVB.
Rplicas de quatro foram empregadas com repeties de cinco leituras por rplica.
RESULTADOS E DISCUSSO
Atualmente, existe a tendncia do desenvolvimento de fotoprotetores possuindo reduzida
concentrao de filtros qumicos e de proteo
elevada frente s radiaes UVA e UVB. Tal fato
se deve ao surgimento de eventos adversos ocasionados pelo uso tpico destes compostos ou
formulaes e mesmo por sua absoro cutnea, o que compromete a eficcia fotoprotetora.
Dentre os eventos adversos ocasionados pelos
filtros solares, tm-se: estmulo de atividades endcrinas, reaes fotoalrgicas e fototxicas,
dentre outras irritaes cutneas 9.
A rutina foi detectada primeiramente na Ruta
graveolens em 1842, e isolada posteriormente da
Caparis spinosa como cido rutnico, denominao essa empregada devido solubilidade em
solues alcalinas. Em 1896, foi estabelecida a
frmula definitiva da rutina (C27H30O16), esquematizada pela Fig. 1a e h hoje um grande interesse por parte dos formuladores pelas suas
propriedades em formulaes cosmticas e farmacuticas 10.
Devido semelhana estrutural dos flavonides com os filtros qumicos, como apresentada
na Figs. 1a, 1b e 1c, adicionalmente s suas propriedades antioxidantes e a similaridade entre

Latin American Journal of Pharmacy - 27 (1) - 2008

Rutina 0,1% + MCO

3,5% + BZF 1,0%

MCO 7,0% +
BZF 2,0%

Rutina 0,1% + MCO

7,0% + BZF 2,0%

lcool cetoestearlico (e) Cetearyl alcohol (and)

fosfato de dicetila (e)
dicetyl phosphate (and)
fosfato cetlico
ceteth-10 phsphate
(10 OE)

Nome
comercial

MCO 3,5% +
BZF 1,0%

INCI

Rutina 0,1%

Nome qumico

Base

Emulses

Crodafos
CES

6,0

6,0

6,0

6,0

6,0

6,0

EDTA Na2

Disodium EDTA

Uniquelan NA2S

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

Dimeticone

Dimethicone

DC 200/350

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

Propilenoglicol

Propylene glycol

6,0

6,0

6,0

6,0

6,0

6,0

Phenova

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Sistema conservante

Phenoxyethanol (and)
methylparaben (and)
ethylparaben (and)
butylparaben (and)
propylparaben (and)
isobutylparaben

Rutina PA

Rutin

Rutina

0,1

0,1

0,1

p-Metoxicinamato
de octila
(filtro UVB)

Ethylhexyl methoxycinnamate

Uvinul MC 80

3,5

3,5

7,0

7,0

Benzofanona-3
(filtro UVA)

Benzophenone-3

Uvinul M 40

1,0

1,0

2,0

2,0

gua destilada (q.s.p.)

Aqua

100,0 100,0 100,0 100,0 100,0

100,0

Tabela 1. Composio quali e quantitativa (% p/p) das formulaes fotoprotetoras. (-): matria-prima no adi-

cionada.

Figura 1. (a) Estrutura qumica da rutina, (b) benzofenona-3 e (c) p-metoxicinamato de octila.

seus espectros de absoro na regio da radiao UV, ilustrado na Figs. 2a e 2b, tais compostos de origem natural so passveis de exercer atividade fotoprotetora.
O mtodo espectrofotomtrico fundamentase na correlao entre a energia de refletncia
difusa e os coeficientes de absoro e disperso
de uma amostra 11. Verificou-se que a presena
da rutina nas formulaes fotoprotetoras (veculos emulsionados do tipo cripto-aninico), associada ou no ao p-metoxicinamato de octila (filtro UVB) e benzofenona-3 (filtro UVA), em pro-

pores distintas, exerceu a atividade fotoprotetora em diferentes graus de sucesso.

A Figura 3 ilustra os resultados dos perfis espectrais das formulaes avaliados in vitro por
espectrofotometria de refletncia com esfera de
integrao.
Nesta pesquisa, os filtros qumicos UVB e
UVA foram selecionados por serem amplamente
empregados em fotoprotetores diversos disponveis no mercado e por apresentarem estudos
cientficos significativos quanto eficcia frente
proteo contra as radiaes UVB e UVA 12.

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Figura 2. Perfis espectrais de diluies da rutina (a), a 5,0; 8,0; 10,0; 12,0 e 15,0 g/mL, e do p-metoxicinamato
de octila (b), a 3,5; 5,0; 7,0; 10,5 e 15 g/mL (solvente: etanol absoluto 99,5%). [Abs]: absorbncia; Wavelength
(nm): comprimento de onda.

Figura 3. Perfis de absoro obtidos por espectrofotometria de refletncia de formulaes fotoprotetoras contendo rutina, associada ou no com filtros solares qumicos
em propores distintas (n = 4). MCO: metoxicinamato de octila. BZF: benzofenona-3.

Aps a anlise dos perfis de absoro das

formulaes verificou-se que a rutina a 0,1%
(p/p) propiciou efeito sinrgico na elevao do
valor do FPS de 7,34 0,24 para 9,97 0,18, na
presena do p-metoxicinamato de octila 3,5%
(p/p) e benzofenona-3 1,0% (p/p), representando aumento de 2,63. Fora do esperado, a associao da rutina 0,1% (p/p) com filtros em concentrao mxima (p-metoxicinamato de octila

7,0% (p/p) e benzofenona-3 2,0% (p/p)) no

apresentou elevao significativa do FPS que foi
de 14,63 2,05 para 14,96 1,41 (apenas filtros
solares na concentrao mxima isolados e associados com rutina, respectivamente).
Quanto proteo frente radiao UVA,
determinaram-se o comprimento de onda crtico
(C) e a razo UVA/UVB. A presena da rutina
0,1% (p/p) isolada propiciou C igual a 385 nm,

Fotoprotetores

FPS

Razo UVA/UVB

Emulso base

1,11 0,01

386

0,77

Emulso com rutina 0,1%

1,23 0,03

385

0,95

Emulso com MCO 3,5% + BZF 1,0%

7,34 0,24

359

0,44

Emulso com rutina 0,1% + MCO 3,5% + BZF 1,0%

9,97 0,18

363

0,46

Emulso com MCO 7,0% + BZF 2,0%

14,63 2,05

361

0,49

Emulso com rutina 0,1% + MCO 7,0% + BZF 2,0%

14,96 1,41

363

0,50

Tabela 2. Proteo frente radiao UVB, por meio do clculo do fator de proteo solar estimado (FPS), e

UVA avaliada por meio da determinao do comprimento de onda crtico (C) e razo UVA/UVB. Legenda.
MCO: p-metoxicinamato de octila. BZF: benzofenona-3 (n = 4).

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resultado estatisticamente superior ao valor de

370 nm, considerado como nvel mnimo de
proteo recomendado pela Unio Europia,
descrito no documento intitulado Avaliao da
Performance de Protetores Solares 13. A razo
UVA/UVB para a mesma formulao gerou valor igual a 0,95, sugerindo proteo UVA superior comparada com aquelas obtidas para as demais preparaes. A associao do flavonide
com os filtros, nas propores distintas empregadas, resultou na diminuio desses parmetros, descritos na Tabela 2.
Pelo exposto, constatou-se que o efeito fotoprotetor da associao do flavonide com os filtros solares orgnicos foi dependente da concentrao destes e, partindo-se dos resultados,
possvel sugerir que ocorreu interao entre os
componentes ativos, ocasionando a reduo da
proteo UVA que a rutina promove.
CONCLUSES
A eficcia fotoprotetora da rutina apresentou-se dependente da concentrao e presena
dos filtros qumicos UVA e UVB, sendo que
houve sinergismo na elevao do FPS quando o
flavonide foi associado com os filtros nas concentraes mnimas. A rutina no associada aos
filtros qumicos exerceu proteo frente radiao UVA superior formulao ausente de
compostos ativos e s suas associaes.
Agradecimentos. CNPq, CAPES e FipFarma. Juliana
Moscardi e Idalina M. N. Salgado-Santos - Instituto de
Bioengenharia da Pele Evic Brasil.
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