ARTIGO INFLUNCIA DO MATERIAL DO ALAMBIQUE NA COMPOSIO QUMICA DAS AGUARDENTES DE CANA-DE-ACAR Ronaldo F. Nascimento, Daniel R.

Cardoso, Benedito dos Santos Lima Neto e Douglas Wagner Franco Instituto de Qumica de So Carlos - USP - Departamento de Qumica e Fsica Molecular - Av. Dr. Carlos Botelho, 1465 - CP 780 - 13560-970 - So Carlos - SP Joo Bosco Farias Departamento de Alimentos e Nutrio - FCF - UNESP - CP 502 - 14801-902 - Araraquara - SP Recebido em 15/9/97; aceito em 26/2/98

THE INFLUENCE OF THE MATERIAL USED IN BUILDING THE DISTILLER IN THE SUGARCANE-SPIRIT CHEMICAL PROFILE. This paper describes variations in the profile of the main volatile organic compounds present in Brazilian sugar cane spirits distilled in copper and stainless steel distillers. The main organic compounds: aldehydes, ketones, carboxylic acids, alcohols and esters, were determined through High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and High Resolution Gas Cromatography (HRGC). The spirits produced in copper distillers exhibit higher contents of aldehydes with respect to the ones produced in stainless steel. The inverse is true with respect to the higher alcohol and ester contents. No significant variation has been observed for the carboxylic acids. Keywords: Brazilian sugar cane spirits; chromatography; distillers; volatiles.

INTRODUO A aguardente de cana-de-acar, tambm conhecida como caninha, por definio um produto alcolico, com graduao alcolica entre 38-54oGL, obtido pela destilao do caldo de cana fermentado1. Embora cachaa se refira ao produto do destilado do melao, na linguagem popular caninha e cachaa so considerados sinnimos. Nos ltimos anos a aguardente brasileira comeou a marcar sua presena no mercado internacional sendo atualmente um dos destilados mais vendidos no mundo2-5. Apesar do grande potencial de exportao, acredita-se que, dos 2 bilhes de litros de aguardente produzidos por ano6, menos de 1% deste total seja exportado por nossas indstrias. A contaminao da aguardente brasileira por ons de cobre considerada um entrave exportao da bebida. A anlise do teor de ons de cobre, em amostras de aguardente oriundas de diversas regies do Brasil6,7, indicou, em alguns casos, contaminaes acima do limite permitido pela legislao brasileira (5 mg/L). Entretanto para a maioria das caninhas estudadas, o teor deste metal oscilou em torno de 4,70 mg/L, portanto abaixo do limite de 5 mg/L permitido pela legislao. O cobre o material mais frequentemente utilizado na fabricao de alambiques8,9,10. Na indstria, o cobre tambm utilizado como catalisador na produo de acetaldedo a partir da desidrogenao do etanol11,12,13, processo durante o qual ocorre a formao de material carbonaceo na superfcie externa do metal11. No processo de destilao da aguardente ocorre a formao de carbonato bsico de cobre, o azinhavre, na superfcie do metal14,17. Este carbonato solubilizado pelos vapores cidos produzidos durante a destilao, e por arraste conduz contaminao do produto final por ons de cobre14-17. Apesar das indstrias de aguardentes no encontrarem barreira fiscal para o excesso de cobre a nvel de mercado interno, o mesmo no ocorre quando se trata do mercado internacional. A legislao de alguns pases no tolera mais que 2 mg/L de cobre nos destilados alcolicos7.
e-mail: douglas@iqsc.sc.usp.br

Vrios pesquisadores esforaram-se no intuito de reduzir a contaminao na aguardente por ons de cobre. Alguns usaram carvo ativo17,18, outros resinas de troca inica19, para a extrao de ons de cobre do destilado. Entretanto, aps estes procedimentos o produto final no mais apresentava suas caractersticas tpicas em virtude da reteno tambm dos compostos ditos secundrios, os quais so fundamentais para o aroma e o sabor da bebida20,21,22. A utilizao de ao inox, ao invs de cobre14, na construo dos alambiques foi outra alternativa para contornar o problema. Esta substituio do cobre dos alambiques acabou por destacar a importncia deste metal na qualidade sensorial das aguardentes. Os destilados obtidos em alambiques de ao inox apresentam o caracterstico odor de sulfetos. A reduo na concentrao de compostos sulfurados no produto final pode ser obtida, por exemplo, pela introduo de anis de cobre na parte inferior da coluna de destilao16. Entretanto no existe, ao menos de nosso conhecimento, informaes sobre as alteraes no perfil qumico da aguardente em funo da composio do material do alambique. Procurando contribuir para o esclarecimento das alteraes que se processam na composio do destilado em funo da natureza do material dos alambiques, so relatados neste trabalho os teores dos principais aldedos, acetona, cidos carboxlicos, lcoois e steres, em amostras de aguardentes destiladas em alambiques de cobre e de ao inox. EXPERIMENTAL Equipamentos As anlises das 2,4-dinitrofenilidrazonas dos aldedos e da acetona foram realizadas em um cromatgrafo a lquido Shimadzu (modelo 10-AD), equipado com um injetor-Shimadzu (loop de 20mL) e um detector espectrofotomtrico uv-vis tipo fotodiodo (modelo SPD-M6A). Estes derivados foram separados em uma coluna Shimadzu-C18 (25cm x 4.6 mm, dp=5mm). Os cidos carboxlicos, lcoois superiores e steres foram analisados em um cromatgrafo a gs HP (modelo 5890), equipado com um detector por ionizao em chama (FID), e separados em uma coluna capilar HP- FFAP (50m x 0,2 mm d.i x 0,33 mm de espessura de filme).

QUMICA NOVA, 21(6) (1998)

735

Reagentes Os padres de aldedos, acetona, cidos carboxlicos, lcoois e steres foram sempre de grau analtico (Merck, Aldrich). O metanol, a acetonitrila e o diclorometano foram de grau cromatogrfico-HPLC (Carlo Erba, Mallinckodt e Merck). A gua utilizada foi purificada pelo sistema Milli-Q (Millipore). O reagente 2,4-dinitrofenilidrazina (Aldrich) foi purificado por trs recristalizaes sucessivas em metanol23. Preparao dos derivados carbonlicos das 2,4-dinitrofenilidrazonas Os derivados carbonlicos da 2,4-dinitrofenilidrazina (2,4DNPH) foram obtidos conforme descrito na literatura24-27: 0,40 g de 2,4-DNPH foram dissolvidas em cido sulfrico concentrado (2,0 mL) e gua destilada (3,0 mL). Nesta soluo 0,10 g dos aldedos padres , dissolvidos em etanol (15,0 mL), foram adicionados. Os correspondentes derivados foram isolados via filtrao e purificados por recristalizao (2 vezes) com etanol absoluto. A pureza das hidrazonas (maior que 99%) foi confirmada por determinao do ponto de fuso e analise elementar(C, H, N). A anlise elementar foi efetuada nos laboratrios de microanlise do Instituto de Qumica da USP/SP. Preparo das solues padres Somente foram investigados os principais compostos majoritrios e minoritrios da classe dos: aldedos, cetonas, cidos carboxlicos, lcoois superiores e steres cuja presena na aguardente brasileira e em outros destilados havia sido anteriormente estabelecida25-34. As solues padres dos derivados carbonlicos das 2,4DNPHs foram obtidas por diluio de suas correspondentes solues estoque (1000 mg/L) em meio etanol-gua (40:60 v/ v). As curvas de calibrao foram construdas usando-se quatro pontos, nas seguintes faixas de concentrao: formaldedo-DNPH (0-5 mg/l), acetaldedo-DNPH (0-200 mg/l ), acetona-DNPH (010 mg/L), n-butiraldedo-DNPH (0-10 mg/l), benzaldedo-DNPH (0-10 mg/l) e n-valeraldedo-DNPH (0-5 mg/l). As solues padres dos cidos, lcoois e steres tambm foram obtidas por diluio de suas solues estoque de 1000mg/l em meio etanolgua (40:60 v/v) nas seguintes faixas de concentrao a seguir: cido actico (0-600 mg/L), cido iso-valrico (0-400 mg/L), cido caprico (0-400 mg/L), cido n-caprlico (0-400 mg/L), cido n-cprico (0-400 mg/L) e cido lurico (0-550 mg/L); metanol (50-500 mg/L), n-propanol (50-500 mg/L), isobutanol (0-500 mg/L) e lcool isoamlico (0-600 mg/L); acetato de etila (50-500 mg/L), e caprilato de etila (0-150 mg/L). Preparao da amostra Amostras de trs diferentes vinhos (caldos fermentados) oriundos da destilaria Beija Flor (Rodovia AraraquaraGuarapiranga Km 17) e das Industrias Mller Ltda., foram destiladas, nas mesmas condies experimentais, em dois alambiques, com capacidade de 20 L cada um. De cada um destes trs caldos foram coletadas trs amostras (A, B e C) destiladas simultaneamente em alambiques de cobre e ao inox. Estes alambiques foram fabricados pela firma AFONSO PANZADE Capivari (SP), sendo um construdo com cobre e o outro com ao inox 316 (0,08% C, 17,0% Cr, 12,0% Ni, 2,50% Mo). Foram coletadas para anlise somente as fraes denominadas corpo ou corao, destiladas a temperatura de 96 1 oC. O fluxo de destilado durante o processo foi de 25 5ml/min. A repetibilidade do processo foi estimada (em cada caso) com base na anlise de trs aguardentes, oriundas da destilao do mesmo vinho, no mesmo alambique.

Cada uma destas amostras foi analisada em duplicata conforme descrito abaixo. METODOLOGIA DE ANLISE Compostos carbonlicos Uma soluo 0,4% de 2,4-dinitrofenilidrazina (2,4-DNPH) foi preparada dissolvendo-se 0,40g (2 mmol) de 2,4-dinitrofenilidrazina em 100,0 mL de acetonitrila. Em um frasco foram introduzidos, consecutivamente 1,00 mL da soluo de 2,4DNPH, 4,00 mL da amostra e 50,0mL de HClO4 1,0 M. A soluo resultante foi agitada e mantida a temperatura ambiente por 40 min, aps o que alquotas de 25,0mL desta soluo foram injetadas no cromatgrafo a lquido. steres, cidos carboxlicos e lcoois superiores O cido actico, os lcoois metanol, n-propanol, isobutanol, e lcool isoamlico e o acetato de etila foram determinados diretamente sem concentrao prvia da amostra. Para as anlises dos cidos carboxlicos, lcoois e esteres minoritrios houve necessidade de uma pr-concentrao das amostras utilizando extrao lquido-slido, utilizando cartuchos-Supelco (Supelclean ENVII-18, 6 mL, C-18) contendo fase ligada C18. Estes cartuchos foram previamente condicionados com 2,00 mL de metanol e depois com 2,00 mL de soluo gua-etanol (60:40 v/v com pH ajustado para 5,4), procurando reproduzir uma matriz similar ao da soluo da amostra. 50,0 mL da amostra contendo padres internos (0,905 mg de cido nonanico e 0,813mg de hexanol) foram transferidos para um reservatrio e eluidos atravs do cartucho por presso positiva (velocidade do fluxo > 5,0 L/min). Aps a extrao efetuou-se a eluio com um volume de 1,00 mL de diclorometano. Alquotas de 1,00L desta ltima soluo foram injetadas diretamente no cromatgrafo a gs. Anlise quantitativa da frao orgnica Os aldedos e a acetona foram quantificados na forma de 2,4dinitrofenilidrazonas por cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE) empregando-se o mtodo da padronizao externa e a deteco a 365nm24,25,26. Os cidos carboxlicos, os lcoois superiores e os steres foram quantificados por cromatografia gasosa de alta resoluo (CGAR) utilizando-se detector por ionizao em chama (FID) e empregando-se o mtodo do padro interno36. O cido nonanico foi o padro interno utilizado na quantificao dos cidos carboxilcos e o hexanol foi o padro interno usado na quantificao dos lcoois e steres. As concentraes dos padres internos nas solues padres e nas amostras foram de 0,905mg e 0,813mg, respectivamente. As curvas de calibrao foram obtidas por regresso linear, plotando-se a relao rea dos picos dos padres/rea do padro interno versus concentrao. Os coeficientes de correlao foram sempre bem prximos da unidade. Os padres sempre foram preparados em meio hidroalcolico (etanol 40% v/v), procurando-se reproduzir as condies da matriz analisada. A anlise de dimetilsulfeto foi efetuada nas amostras de aguardente via cromatografia a gs (GC), empregando-se um detector fotomtrico de chama (FPD), de acordo com o procedimento descrito na literatura36. Estas amostras foram coletadas em banho de gelo e estocadas em frascos fechados a temperatura inferior a 4oC at o momento da leitura. Condies de anlise para os compostos carbonlicos As anlises das 2,4-dinitrofenilidrazonas dos compostos: formaldedo, 5-hidroximetilfurfural, acetaldedo, acrolena, propionaldedo, furfural, n-butiraldedo, benzaldedo, isovaleraldedo, n-valeraldedo e acetona foram realizadas em um

736

QUMICA NOVA, 21(6) (1998)

cromatgrafo a lquido, usando-se metanol-gua como fase mvel. Para a separao dos derivados foi empregado uma coluna C-18 usando-se metanol-gua como fase mvel. O gradiente de eluio em etapas utilizado para separao dos derivados encontra-se descrito na figura 1.

Anlise de sulfato A anlise do teor de sulfato presente nas aguardentes foi efetuada diretamente na aguardente destila segundo o mtodo do on Cloronilato de Brio37. RESULTADOS E DISCUSSO A tabela 1 apresenta o sumrio da anlise quantitativa dos aldedos, acetona, cidos, lcoois e steres encontrados nas amostras das aguardentes estudadas. Estas amostras provenientes do mesmo caldo de fermentao, em nmero de trs, foram destiladas ao mesmo tempo e nas mesmas condies experimentais em alambiques de cobre e ao inox.

Figura 1. Cromatograma das 2,4-dinitrofenildrazonas dos padres de aldedos e acetona na coluna Shimadzu C-18 (25 cm x 4,6 mm; 5 m). Vazo de 1,0 mL/min. Gradiente de eluio: metanol-gua (65:35 v/v) durante 15 min, ento metanol ; gua (75:15 v/v) em 18 min, metanolgua (85:15 v/v) em 20 min, metanol-gua (75:25 v/v) em 25 min, metanol-gua (70:30 v/v) em 30 min e metanol-gua (65:35 v/v) em 35 min. Deteco no UV a 365 nm. Identificao dos picos: 1=formaldedo, 2=5-hidroximetilfurfural, 3=acetaldedo, 4=acrolena, 5=furfural, 6=acetona, 7=n-butiraldedo, 8=benzaldedo, 9=nvaleraldedo e 10=isovaleraldedo.

Tabela 1. Resultados das anlises quantitativas dos compostos secundrios identificados em aguardentes provenientes do mesmo caldo de fermentao (A) destiladas em alambiques de cobre e inox.Valores de concentrao em mg/La. Compostos formaldedo acetaldedo n-butiraldedo benzaldedo valeraldedo acetona acetato de etila caprilato de etila metanol propanol isobutanol lcool isoamlico cido actico cido caprlico cido cprico cido lurico
a

Cobrea < LD 19,0 1,21 0,19 0,02 0,63 0,03 0,15 0,03 0,41 0,11 16,3 0,12 1,60 0,05 1,82 0,02 58,0 2,5 203,5 5,7 1095 11,4 20,7 0,8 0,12 0,03 0,15 0,01 0,017 0,002

Inoxa < LD 9,00 0,05 0,16 0,02 0,467 0,01 0,198 0,001 0,468 0,025 108 1,25 6,70 0,57 1,16 0,02 78,2 1,0 250 1,13 1546 8,2 21,5 0,7 0,118 0,012 0,130 0,011 0,012 0,003

Condies de anlise para cidos carboxlicos, lcoois superiores e steres As anlises dos padres de cidos carboxlicos, lcoois, steres (cidos actico propinico, isobutrico, n-butrico, isovalrico, n-valrico, isocaprico, n-caprico, n-heptanico, ncaprlico, n-cprico e lurico e metanol, propanol, isobutanol, butanol, 2-butanol, lcool isoamlico, acetato de etila, acetato de amila, acetato de butila, heptanoato de etila, caprilato de etila, caprato de etila, e benzoato de etila, respectivamente) foram realizadas em cromatgrafo a gs (CGAR) empregando-se uma coluna HP-FFAP (Polyethylene Glycol - TPA modified). O programa de temperatura utilizado encontra-se descrito na figura 2. A razo de split foi de 1:15. A vazo do gs de arraste na coluna foi de 1,3 mL/min e para os gases de alimentao do detector, de 30 mL/min de H2 e 300 mL/min de ar, respectivamente.

Mdias de trs amostras analisadas, injees em duplicatas Limite de deteco = 10-4 mg/L < LD = menor que o limite de deteco

Figura 2. Cromatograma dos padres dos lcoois, steres e cidos obtidos por CG-FID em uma coluna capilar FFAP. O programa de temperatura utilizado foi: 50 oC (2min) para 190 oC (5 min) a 10oC/min ento para 230oC (30 min) a 5oC/min. Identificao dos picos: 1= acetato de etila, 2=metanol, 3=2-butanol, 4=n-propanol, 5=acetato de butila, 6=isobutanol, 7=n-butanol, 8=acetato de amila, 9=lcool isoamlico, 10=heptanoato de etila, 11=hexanol (PI), 12=caprilato de etila, 13=cido actico, 14=cido propinico, 15=cido isobutrico, 16=cido n-butrico, 17=cido isovalrico, 18=benzoato de etila, 19=cido n-valrico, 20=cido isocaprico, 21=cido ncaprico, 22=cido heptanico, 23=cido caprlico, 24=cido nonanico (PI), 25=cido cprico e 26=cido lurico.

As anlises de aldedos indicam que o teor de acetaldedo maior nas amostras destiladas em cobre, entretanto a situao inversa para valeraldedo, cujo teor superior nas amostras destiladas em alambique de ao inox. Os teores de nbutiraldedo, benzaldedo e valeraldedo no apresentam variao significativa em funo do material de construo do alambique. As concentraes mdias, expressas em mg/L, dos principais compostos carbonlicos nas amostras destiladas em alambique de cobre e de ao inox so, respectivamente, 19,0 e 9,00 para acetaldedo, 0,191 e 0,163 para n-butiraldedo, 0,632 e 0,467 para benzaldedo, 0,149 e 0,198 para valeraldedo e 0,408 e 0,468 para acetona, (ver tabela 1). Os cromatogramas das figuras 3-4 e 5-6 indicam os picos correspondentes para steres, metanol, lcoois superiores e cidos identificados nas amostras de aguardente destiladas em alambiques de cobre e ao inox. Com relao os steres e lcoois superiores, as diferenas nos teores mdios so mais evidentes para: acetato de etila e lcool isoamlico. Os teores destes compostos so maiores nas amostras destiladas em ao inox. Tambm observa-se diferenas para os compostos ditos majoritrios: caprilato de etila, n-propanol e isobutanol . O teor mdio de metanol para as amostras destiladas em alambique de cobre foi superior ao encontrado para as amostras destiladas em ao inox. Os teores mdios para os diversos cidos no variaram significativamente para ambas as amostras. A concentrao mdia, em mg/L, dos steres, lcoois e cidos, identificados nas amostras

QUMICA NOVA, 21(6) (1998)

737

destiladas em alambiques de cobre e de ao inox, so respectivamente: acetato de etila 16,3; 108, caprilato de etila 1,60; 6,70, metanol 1,82; 1,16, n-propanol 58,05; 78,2, isobutanol 203,5; 250, lcool isoamlico 1095; 1546, cido actico 20,7; 21,5 cido caprlico 0,119; 0,118, cido cprico 0,15; 0,13, cido lurico 0,017; 0,012. Nas amostras analisadas no foram identificados a nvel de nanograma os seguintes compostos: formaldedo, 5-hidroximetilfurfural, acrolena, furfural, isovaleraldedo, 2-butanol, acetato de butila, n-butanol, acetato de amila, heptanoato de etila, cido propinico, cido isobutrico, cido nbutrico, benzoato de etila, cido isovalrico, cido n-valrico, cido isocaprico, cido caprico, cido heptanico, cido nonanico, (ver tabela 1).

Figura 6. Cromatograma da amostra A de aguardente destilada em alambique de ao inox, concentrada por extrao em fase slida C18. Condies cromatogrficas ver na figura 2. Picos: 3=n-propanol, 5=isobutanol, 8=lcool isoamlico, 10=hexanol (PI), 11=caprilato de etila, 16=cido isovalrico, 20=cido caprico, 22=cido caprlico, 23=cido nonanico (PI), 25=cido lurico.

Figura 3. Cromatograma da amostra de aguardente no concentrada destilada em alambique de cobre. Condies cromatogrficas idnticas s descritas na figura 2. Picos identificados : 1=acetato de etila, 2=metanol, 4=n-propanol, 6=isobutanol, 9=lcool amlico, 11=hexanol (PI), 13=cido actico.

Figura 4. Cromatograma da amostra de aguardente no concentrada destilada em alambique de inox. Condies cromatogrficas idnticas s descritas na figura 2. Picos identificados: 1=acetato de etila, 2=metanol, 4=n-propanol, 6=isobutanol, 9=lcool amlico, 11=hexanol (PI), 13=cido actico.

As aguardentes destiladas em alambique de cobre apresentam teores mdios de aldedos totais (19,72 mg/L) e metanol (1,82 mg/L) nitidamente superiores aos das destiladas em alambique de ao inox, cujos teores so de 9,83 mg/L para aldedos totais e de 1,16 mg/L para o metanol. O inverso observado quanto aos teores de lcoois superiores e steres. O produto oriundo de alambique de cobre apresenta um teor mdio total de lcoois superiores de 1,36 g/L. Este valor inferior ao observado para aguardentes destiladas em ao inox: 1,87 g/L. No que diz respeito ao teor mdio total de cidos e de acetona, as diferenas observadas no foram significativas. As observaes acima, so apoiadas pelas anlises cromatogrficas de seis outras aguardentes, provenientes de outros dois diferentes caldos de fermentao, e destiladas trs a trs em alambiques de cobre (3) e ao inox (3). Nossos resultados sugerem que o material de construo do alambique no somente influencia nos teores mdios totais de cada funo orgnica mas tambm influi no perfil individual destas funes. Estas acentuadas diferenas dos teores de acetaldedo, steres e lcoois nas amostras, oriundas de alambiques fabricados com diferentes materiais, so provavelmente responsveis por grande parte das diferenas de qualidade sensorial apresentadas por estas amostras de aguardentes. As aguardentes destiladas em alambiques de cobre so preferidas pelos apreciadores da bebida16, em funo de seu aroma e sabor.

Figura 5. Cromatograma da amostra A de aguardente destilada em alambique de cobre, concentrada por extrao em fase slida C-18. Condies cromatogrficas ver na figura 2. Picos: 3=npropanol, 5=isobutanol, 8=lcool amlico, 10=hexanol (PI) e 11=caprilato de etila, 16=cido isovalrico, 20=cido caprico, 22=cido caprlico, 23=cido nonanico (PI), 24=cido cprico e 25=cido lurico.

Figura 7. Histograma comparando os teores mdios dos principas compostos secundrios majoritrios, presentes na composio qumica das aguardentes estudadas provenientes do caldo fermentado (B) e controlados por lei 7,21. lcoois superiores soma de: propanol , isobutanol e lcool isoamlico; Metanol: Concentrao multiplicada 100 vezes.

738

QUMICA NOVA, 21(6) (1998)

As maiores concentraes dos aldedos, com exceo do valeraldedo, nas amostras destiladas em alambique de cobre com relao as destiladas em ao inox, provavelmente se deva a conhecida reao de desidrogenao dos lcoois a aldedos11. Alm de sua participao na formao de aldedos, o cobre age de forma a reduzir o teor de compostos sulfurados volteis no destilado36,38,39, e portanto o desagradvel odor tpico de sulfetos. As anlises efetuadas indicam que o principal componente desta classe de compostos o dimetilsulfeto (DMS). O teor de DMS nas amostras destiladas em alambiques de ao inox (250mg/L) superior ao das amostras destiladas em alambiques de cobre (150mg/L). Foi tambm constatado que as amostras destiladas em alambiques de cobre apresentam teor de sulfato (17 mg/L) cerca de 4 vezes superior ao das mesmas amostras destiladas em alambiques de ao inox (4 mg/L). Torna-se novamente evidente a influncia do material com que foi fabricado o alambique na qualidade do produto final e a importncia do conhecimento das reaes que ocorrem durante o processo de destilao. Estudos nesta direo esto em andamento em nosso Laboratrio e os resultados sero relatados posteriormente. AGRADECIMENTOS FAPESP, CNPq, CAPES, Ancona Ltda. e Indstrias Mller de Bebidas Ltda. pelos auxilios financeiros. Aos professores Dr. Hans Viertler, Dr. Joo Camasseto, Dr. Tercio Barbosa Ferreira (in memorian), Dr. Joo Batista Fernandes e Dr. Paulo Cesar Vieira pela doao de diversos reagentes utilizados como padres. REFERNCIAS

14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27.

1. Ministrio da Agricultura, Complementao de Padres de Identidade e Qualidade para Destilados lcolicos, Braslia, Portaria no 371, Doc. de 18/09/74. 2. Impact International, 1996, october & november. 3. Veja, 1994, 26 de outubro, 70. 4. Folha de So Paulo, 1997, 19 de maio , 9. 5. Drinks International, 1994, July/August, 40. 6. Franco, D. W.; Lima, B. S; O Engarrafador Moderno. 1994, 5, 33. 7. Lima Neto, B. S.; Bezerra, C. W. B.; Polastro, L. R.; Campos, P.; Nascimento, R. F.; Furuya, S. M. B.; Franco, D. W; Qum. Nova. 1994, 17, 220. 8. Lucena, V. G.; Brasil Aucareiro . 1959, 6, 14. 9. Ducan, P. S.; Piggott, J. R.; Science of Technology of Whiskies , Longman Scientific Technical, Ed.; New York, (1989). 10. Ventutini, N; La mia grappa: tutto quelo che bisogna sapare per fare e sceglieri la grappa migliore, Padova; MEB, Ed., (1987). 11. Gonzalez, E. A. U; Dissertao de Mestrado; Universidade Federal de So Carlos; So Carlos, SP, 1987. 12. Caldeira, A. C.; Figueiredo, A. M.; Odloak, D.; Neto, I. M.; 1o Congresso Brasileiro de Alcoolquimca, So Paulo, SP, 1981, p. 321. 13. Fahmy, S. L.; Schmal, M.; 1 o Seminrio de Catlise,

28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39.

Instituto de Pesquisas Tecnolgicas do Estado de So Paulo S/A, p. 271. Faria, J. B.; Campos, M. A. P; Alimentos e Nutrio 1989, 1, 117. Kirk, R. E.; Othmer, D. F.; Encyclopedia of Chemical Technology, Vol. 7. Interscience, ED; New York, 1951; 3a ed, p 102-103. Faria, J. B.; Loureno, E. J.; Alimentos e Nutrio. 1990, 2, 93. Lucena, V. G.; Brasil Acareiro. 1959, 6, 406. Rankie, B. C.; Journal of Science of Food and Agriculture. 1961, 12, 3. Oliveira, A. J.; Tese de Doutorado; Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz; Piracicaba, SP, 1970. Aquarone, E.; Lima, U. de Almeida & Borzani, W.; Alimentos e bebidas produzidas por fermentao; Edgar Blcher, Ed.; So Paulo, 1983; Biotecnologia, 5, p. 243. Mutton, M. J. R.; Mutton, M. A; Aguardente de Cana Produo e Qualidade, FUNEP, Ed.; Jaboticabal, 1992. Masuda, M., Nischinura, K.; Journal of Food Science. 1981 , 47, 101. Shriner, R. L, Fuson, R. C., Curtin, D. Y., Morril, T. C. Identificao Sistemtica de Compostos Orgnicos ; Guanabara Dois, Ed.; Rio de Janeiro, 1983. Blau, K.; Halket, J. Handbook of Derivatives for Chromatography, 2a ed.; Wiley, Ed.; England, 1993. Nascimento, R. F.; Marques, J. C.; Neto, B. S. L.; Keukeleire, D. D.; Franco, D. W. Journal of Chromatography A. (in press). Nascimento, R. F.; Lima Neto, B. S.; Franco, D. W.; Engarrafador Moderno. 1997, 2, 74. Andrade, J. B.; Reis, J. N.; Rebouas, M. V.; Pinheiro, H. L. C.; Andrade, M.; Qumica Analtica. 1996, 15, 144. Stevens, R. K.; Journal of Association of Official Analytical Chemistry. 1965, 48, 802. Masuda, M.; Yamamoto, M.; Asakura, Y.; Journal of Food Science. 1985 , 50, 264. Ding, M.; Koizumi, H.; Suzuki, Y.; Analytical Sciences. 1995 , 11, 239. Nyknen, L.; Puputti, E.; Suomalainen, H.; Jornal of Food Science. 1968 , 33, 88. Metcalfe, L. D.; Schmitz, A. A.; Armour Industrial Chemical Co. 1961, 33, 363. Boscolo, M.; Dissertao de Mestrado; Universidade de So Paulo; So Carlos, SP, 1996. Bezerra, C. W. B.; Dissertao de Mestrado; Universidade de So Paulo; So Carlos, SP, 1994. Antoenelli, A; Galli, M.; Cromatographia. 1995, 41, 722-725. Nascimento, R. F.; Tese de Doutorado; Universidade de So Paulo; So Carlos, SP, 1997. Bertolacini, R. J.; Barney, J. E.; Analytica Chemistry 1957 , 29, 281. Litchev, V.; American Journal o Enology and Viticulture 1989 , 40, 31. Faria, J. B.; Deliza, R.; Rossi, E. A.; Cincia e Tecnologia de Alimentos 1993 , 13, 89.

QUMICA NOVA, 21(6) (1998)

739