UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO

FACULDADE DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE CINCIAS BSICAS EM SADE
MDULO BASES DA AGRESSO E DEFESA

Vrus DNA que causam

doenas em humanos

Prof. Dr. Renata Dezengrini Slhessarenko

Tpicos

Adenoviridae
Parvoviridae
Poxviridae
Hepadnaviridae
Herpesviridae
Papillomaviridae

ADENOVIRIDAE

Isolados de glndula adenide humana em 1953

Replicam no ncleo de diversos tipos celulares
Gnero: Mastadenovirus (adenovrus humanos)
Distribuio mundial
Humanos so reservatrios
Maioria das infees so assintomticas, resfriados comuns e conjuntivites

Vacina disponvel contra os tipos 4 e 7

Antivirais: usa-se cidofovir, ganciclovir e ribavirina (experimental, sem liberao
pela FDA

Doenas associadas infeco por adenovrus em humanos

Doena

Indivduo

Sorotipos

Faringite febril aguda

crianas

1-3, 5-7

Doena respiratria aguda

militares

3, 4, 7,14, 21

Pneumonia

crianas/militares 1-4, 7

Ceratoconjuntivite epidmica

qualquer

3,4, 8, 11, 19, 37

Cistite hemorrgica aguda

crianas

1,4,7,11, 21

Gastroenterite

crianas/adultos 40, 41, 53

Meningoencefalite

crianas, imd

Hepatite

crianas, transpl

7, 12, 32
1, 2, 5

Orquite, nefrite, cervicite

qualquer

1,19,37

Miocardite, rash, artrite

crianas/adultos ?????

Timecourse infeco respiratria

Transmisso: gotculas resp, fecal-oral, gua contaminada no-tratada, fmites
PI: 2-14 dias, infeces subclnicas frequentes, excreo viral intermitente e
prolongada (fecal)

ADENOVIRIDAE
Estrutura da partcula vrica:
No-envelopado, 70-90 nm
dimetro, capsdeo
icosadrico, 242
capsmeros (12 pentons e
240 hexons), fibra penton
(projeo), 12 protenas
estruturais
DNA fita dupla linear 35,9
kb (25 genes)
Estvel no ambiente,
relativamente resistente a
desinfetantes (lcool,
clorexidine, detergentes),
pH cido e enzimas
proteolticas

ADENOVIRIDAE
Adsoro
Receptores: CAR
(Coxsackievirusadenovirus receptor),
CD40, CD80, integrinas
(vitronectina), cido
sillico
Endocitose mediada por
clatrina e transporte ao
ncleo
Expresso de genes:
duas fases, RNA pol II
celular
Replicao do DNA
DNA polimerase viral
Morfognese no ncleo
Sada aps lise celular
Latncia em tecido
linfide

ADENOVIRIDAE
INTERAES COM O HOSPEDEIRO
1. Inibio de Apoptose
E1A induz ciclo celular e apoptose
E1B inibe apoptose (55kd e 19kd)
2. Induo do ciclo celular: E1A

3. Inibio da ao dos IFNs e pela E1A e VA RNAs

4. Bloqueio da ao do TNF

5. Reduo do reconhecimento de clulas infectadas por CTLs

ADENOVIRIDAE
Diagnstico laboratorial:
Material: soro, sangue total, fezes, urina, secreo ocular ou nasal... Suabe ou
lavado de garganta, suabe de conjuntiva, saliva, lavado do TRI, dependente da
sndrome
Tcnicas rpidas: IFA, HA/HI, EIA, PCR
Tradicionais: Isolamento viral, ME, aglutinao em ltex, FC, neutralizao (TN)
Sorolgicos: IgM por IFA, EIA, western Blot

PARVOVIRIDAE
Parvovrus B19 identificado em 1974 na Inglaterra em
falsos positivos para HBsAg
Trs gentipos, gnero Erythrovirus
Eritema infeccioso (quinta doena)
Infeco intrauterina: hidropsia fetal (3-6 meses de
gestao), aborto
Bocavrus humano identificado em 2005, gnero Bocavirus
Infeces respiratrias agudas em crianas entre 0-2
anos. Adultos: resfriados 1-4 dias
J relatado em fezes, urina, soro, sangue
Principal forma de transmisso: gotculas (via respiratria)
principalmente no inverno, saliva, muco, secrees em
geral
No h vacinas ou antivirais licenciados

PARVOVIRIDAE
Dimetro de 18-26 nm, no-envelopados,
capsdeo icosadrico (VP1 e VP2, 32
capsmeros)
Fita simples de DNA com 5 kb, codifica 5
genes, possui sequncias palindrmicas nas
extremidades
Protenas no-estruturais: p11 e NS1
Estveis, pouco mutantes
Resistentes a condies ambientais, pH entre
3-9,0, 56oC por 60 min, meses no ambiente
Inativados por formalina, -propiolactona,
hidroxilamina, hipoclorito de sdio e agentes
oxidantes

Ciclo replicativo dos parvovrus

Receptor do B19: carboidratos (hemcias so anucleadas)

PARVOVIRIDAE

Diagnstico laboratorial:
Material: soro, fgado fetal, sangue, secrees respiratrias, fezes
ME, contra-imunoeletroforese, EIA
PCR e PCR em tempo real (NS1 e NP1): deteco do DNA por vrios
meses aps a infeco
Gestante com exantema: EIA para IgM

POXVIRIDAE
Varola: Erradicada em 1979
Molusco contagioso

(Smallpox and its Eradication; Fenner, Henderson, Arita, Jezek & Ladnyi; World Health Organization, Geneva, 1988, Plate 10.30)

Poxvirus que infectam humanos

Orthopoxvirus

variola (major & minor)

camelpox
cowpox
monkeypox
vaccinia

Molluscipoxvirus
molluscum contagiosum

Yatapoxvirus
Yaba monkey tumor virus
tanapox

Parapoxvirus
pseudocowpox,
orf
(Fields Virology, 4th ed, Knipe & Howley, eds, Lippincott Williams & Wilkins, 2001, Table 84-1)

Vaccinia virus, vitrified

suspension viewed by
cryoelectron microscopy.
"S" and arrowheads
indicate extent and
boundaries of a surface
domain, respectively.
(From Dubochet et al.,J
Virol. 1994 68:1935-41.)

POXVIRIDAE
Fita dupla linear de DNA 130-300 kb, 150-250 genes, capsdeo
complexo, envelopado (IMV e EEV), 350-400x270 nm, replicao
no citoplasma celular

Proteinas estruturais
Enzymes and Factors

Table 2

Non-enzymatic Components

Table 3

Poxvirus DNA metabolism enzymes

Function

Protein

Replication,
Repair,
Recombination

DNA polymerase
DNA pol. processivity factor
topoisomerase I

ssDNA binding protein

DNA ligase
protein kinase

nucleoside triphosphatase
uracil DNA glycosylase
dUTPase

Nucleotide
metabolism

thymidine kinase
thymidylate kinase

ribonucleotide reductase

No. of subunits

Mol. Wt. (kD)

1
1
1

116
49
36

34

63

34

1
1

90
25

16

1
1

19
23

121

Poxvirus immune modulating genes

Poxvirus immune-modulating genes
System
Interferon
(IFN)

Virus gene Activity

Protection against host defense

K3L

Homologue of
eukaryotic initiation
factor 2 (eIF-2

Pseudosubstrate for interferon-induced

protein kinase (PKR)

E3L

Double-stranded RNA
binding protein

Sequesters dsRNA, an activator of

interferon-induced PKR and 2-5A

B8R

Secreted, soluble IFN-

receptor

Binds to and inhibits IFN-

B14R

Serine protease inhibitor

(serpin)

Inhibits proteolytic activation of IL-1,

decreasing inflammatory response

B16R

Soluble IL-1 receptor

Binds to and inhibits IL-1

Tumor necrosis
factor (TNF)

B28R,
A53R

Soluble TNF receptor

Binds to and inhibits TNF- and

Complement

C3L

C4B and C3B binding

protein

Inhibits classical and alternative

complement pathways

Interleukin-1
(IL-1)

Poxvirus ciclo replicativo

Receptor do MCV: fator de crescimento epidermal (EGF)
Endocitose, transcrio e replicao no citoplasma, IMV e EEV

(Fields Virology, 4th ed, Knipe & Howley, eds, Lippincott Williams & Wilkins, 2001, Fig. 84-1)

POXVIRIDAE
Material: leses (bipsia)
ME, isolamento viral, HI,
ELISA, RIA, IFA

VRUS DA HEPATITE B (HBV)

- Hepadnaviridae

- Pouco estudado durante anos: espectro de hospedeiros restrito,

no replica bem em cultivo
- Avanos: primeira vacina recombinante humana

- Hepatotrpicos
- Antgeno austrlia - HBsAg

HEPADNAVIRIDAE
Virions envelopados, capsdeo icosadrico

Capsdeo: HBcAg ou C
Envelope: HBsAg ou S
Fita parcialmente dupla de DNA 3.2-3.4 kb, 4 ORFs (S,C,P,X)
8 Gentipos, A H (gentipos A, D e F mais comuns no

Brasil)
Polimerase/RT no vrion

ESTRUTURA DO VRION
Trs tipos de partcula, todas

possuem o HBsAg
1. Dane (infecciosa): (42-47nm,
104 a 109/ml)
2. Esferas: (15-25nm, at 1012/ml)
3. Filamentos: (20-200 nm)

Prevalncia mundial de carreadores da hepatite B

Worldwide prevalence of
hepatitis B carriers and primary
hepatocellular carcinoma.
(Centers for Disease Control
and Prevention, Atlanta.)

Dados de prevalncia da
Hepatite B no Brasil

?
?
Prev. HBsAg
Muito baixa
<1%
Baixa
1-2%
Moderada
2-7%
Alta
>7%
Desconhecida ?
* Silveira et al., 1999
Souto, 1999

Clinical outcomes of Hepatitis B infections

Infeco neonatal: 80 a
90% resulta em
persistncia
PI: 60-90 dias em mdia
(45-180)
protena regulatria
relacionada a oncogenia:
HBxAg
OMS estima que 80% dos
HCC ocorrem em
infeces crnicas pelo
HBV, destes, 85%
possuem o DNA integrado
Clinical outcomes of acute hepatitis B infection. (Redrawn from White DO, Fenner F: Medical
virology, ed 3, New York, 1986, Academic Press

Ciclo replicativo do HBV

HBsAg adsorve a: human asialoglycoprotein receptor (ASGPR), proteoglicanas
e Carboxipeptidase D nos hepatcitos
DNAccc no ncleo, onde ocorre transcrio. RNA encapsidado/envelopado no
citoplasma, transcrio reversa, sada por exocitose.

Vrus da Hepatite D

CDC website: http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/hepatitis/slideset/hep_d/slide_1.htm

From Murray et. al., Medical Microbiology 5th edition, 2005, Chapter 66, published by Mosby Philadelphia,,

Diagnstico: sorologia,
deteco do RNA

Co-infeco x superinfeco

Fields Virology 4th edition, 2002, Chapter 88, Lippincott, Williams and Wilkins, 2002 Fig. 88-4

HEPADNAVIRIDAE
Diagnstico laboratorial:
Material: sangue, soro, bipsia
Tcnicas: PCR qualitativo, quantitativo, ELISA (HBsAg, HBeAg, HBcAg)
Sorolgicas (IgM e IgG): anti-HBs, anti-HBe, anti-HBc
Clulas permissivas: linhagens de hepatomas transfectadas (HepG2, HuH6,7)

HEPADNAVIRIDAE
Terapia com antivirais: carga viral (20.000 IU/mL), enzimas hepticas elevadas
Interferon alfa-2b e forma pegilada
Inibidores nucleosdicos da transcriptase reversa (NRTIs): adefovir, entecavir,
lamivudina, telbivudina, tenofovir

HERPESVIRIDAE
herpein: leses que parecem rastejar sobre a pele

Descrito desde 3000 a.C. em tbuas sumerianas

Mais de 100 membros identificados

Infeces inaparentes, leves, latentes - infeco por toda a vida

Amplamente distribudos, alto nvel de adaptao aos seus hospedeiros

Propriedades distintivas das subfamlias dos herpesvirus

Medical Microbiology, 4th ed., Murray, Rosenthal, Kobayashi & Pfaller, Mosby, 2002,

Alphaherpesvirinae
Gnero Simplexvirus
Herpes simplex 1 e 2 (HSV-1; HSV-2)

Alphaherpesvirinae
Gnero Varicellovirus
Varicella Zoster Virus (VZV)
Vacina atenuada (Varivax)
FAN-VALA-ACI

http://www.ihmf.org/OnlineLearningZone/DiagnosticAtlas.asp

Betaherpesvirinae

Gnero Cytomegalovirus (HCMV)

Infeces congnitas neonatal (5-10% fatal), pneumonia, retinite

necrozante
Ganciclovir

Gnero Roseolovirus (HHV-6, HHV-7)

Gammaherpesvirinae
- Replicam em clulas linfoblastides, alguns so lticos em cls
epiteliais/fibroblastos
- Latncia em tecido linfide

- Gneros: Lymphocryptovirus (Epstein Barr virus)

Rhadinovirus (HHV-8 ou Herpesvirus associado ao sarcoma de kaposi)
EBV: Kissing disease mononucleose
e Linfoma de Burkit

KSHV (HHV-8)

Estrutura do Vrion
Vrion Envelopado (10-12 glicoprotenas - gB,C,D,E,H,I,L,K,M,N), 120-300 nm,
tegumento (14-25 protenas), capsdeo icosadrico (162 capsmeros, 150 hexons e 12
pentons; VP-5, VP-19, VP-23, 12kd, VP-26)

DNA fita dupla linear 120-230 kb + protenas, HSV mais de 77 genes

Estvel em pH entre 5-13, formalina 3% em 3 horas, 2-7 dias no ambiente
Cloramina 3% inativa em 10 min, hipoclorito de sdio e amnia quaternria: boa ao

Herpesvirus genome structure

HERPESVIRIDAE
Destinos da Clula Infectada:
Infeco LTICA: MORTE CELULAR

Infeco LATENTE

Neurnios/ Linfcitos...

Diferenas da infeco ltica/aguda?

Latncia

Evaso do sistema imune

Manuteno do vrus e do hospedeiro
Reativao e excreo

Ciclo replicativo ltico dos herpesvrus

Infeco
VP16
Genes IE/alpha
(IPC0, 4, 27)

Genes E/beta
(TK, RR, DNApol)

Replicao
do DNA

GenesL/gamma
(glicoprotenas)

virions

HERPESVIRIDAE
Entrada

Ligao ao receptor (HS,

glicosaminoglicanas): gC
principal, tambm gB, gD

interage com co-receptores

HVEM e nectina

Penetrao na superfcie celular

independente de pH: gB, gH e gL

Spear & Longnecker. J. Virol. 77:10179, 2003

HERPESVIRIDAE
DNA no ncleo (circulariza)
Transcrio
Genes immediate-early (IE ou alfa)
Transcrio
Genes early (E ou beta)

Replicao do DNA
Transcrio

Genes late (L ou gamma)

HERPESVIRIDAE
Morfognese e egresso
Encapsidamento no ncleo, mais de 8 protenas com NLS que no fazem
parte do capsdeo envolvidas
3-4 mecanismos de aquisio de envelope, sada envolve vesculas do
golgi, exocitose

Genes
Pirateados
Aprox. 13% dos genes dos
herpesvirus so semelhantes
a genes celulares
Replicao do DNA;
Metabolismo/ repato de
nucleotdeos
Enzimas;
Regulao da expresso
gnica ;
glicoproteinas
Interao com o hospedeiro
Holzerlandt et al. Genome Res.
12:1739, 2002.

Diagnstico laboratorial

Gertrude Elion
Prmio Nobel de 1988 em Medicina,
New Principles for Drug Treatment
http://nobelprize.org/medicine/laureates/1988/press.html

Ativao especfica: Aciclovir e anlogos

Mecanismos de ao

De Clercq, E. Nat. Rev. Microbiol. 2:704, 2004.

Antivirais

PAPILLOMAVIRIDAE
HISTRIA
Relatos de papilomas existem desde o sculo IX
1896: extrato de verrugas induziam papilomas
Ciuffo em 1907 demonstrou etiologia
Associao a leses laringeais e genitais em 1923 e 1924
1842: associava-se atividade sexual x cncer cervical
Papanicolau em 1946

00.099. Papillomaviridae
Family
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus
Genus

00.099. Papillomaviridae
00.099.0.02. Alphapapillomavirus
00.099.0.03. Betapapillomavirus
00.099.0.04. Gammapapillomavirus
00.099.0.05. Deltapapillomavirus
00.099.0.06. Epsilonpapillomavirus
00.099.0.07. Zetapapillomavirus
00.099.0.08. Etapapillomavirus
00.099.0.09. Iotapapillomavirus
00.099.0.10. Thetapapillomavirus
00.099.0.11. Kappapapillomavirus
00.099.0.12. Lambdapapillomavirus
00.099.0.13. Mupapillomavirus
00.099.0.14. Nupapillomavirus
00.099.0.15. Xipapillomavirus
00.099.0.16. Omikronpapillomavirus
00.099.0.17. Pipapillomavirus
00.099.0.00. Unassigned

PAPILLOMAVIRIDAE
Small DNA tumor viruses
Espcie-especficos
Epiteliotrpicos: associados a leses proliferativas do
epitlio escamoso
Perodo de incubao ~ 3 a 4 meses

No possuem SOROTIPOS
HPV mais de 100 diferentes tipos
Novo tipo = >10% de divergncia nas ORFs E6, E7 e L1

PAPILLOMAVIRIDAE

Gentipos 2, 4, 29
Gentipo 1

http://www.telemedicine.org/warts/
http://www.oncolink.upenn.edu/classroom/colp/slide30.html

Gentipos 3,10,28,49

Gentipos 6, 11 e 42

http://www.telemedicine.org/warts/
http://www.oncolink.upenn.edu/classroom/colp/slide30.html

Gentipos 6, 11, 16, 18, 31,

33, 35, 39, 42, 45, 51, 52,
56, 58, 59, 68

http://www.telemedicine.org/warts/
http://www.oncolink.upenn.edu/classroom/colp/slide30.html

Worldwide Prevalence of HPV in Cervical Cancer, by Genotype

Genotipo
Prevalncia

HPV-16

54%

HPV-18

15%

HPV-45

9%

HPV-31

6%

HPV-33

3%

Total:

87%

Fonte: Organizao mundial da sade

PAPILLOMAVIRIDAE
55 nm dimetro, no-envelopados, capsdeo icosadrico
formado por 72 capsmeros pentamricos (protenas L1 e
L2)
Genoma DNA circular fita dupla (~7.9 kb), associado a
histonas, uma fita codificante (10% no-codificante)

REPLICAO DOS PAPILLOMAVIRUS

Adsoro: L1 a receptores (integrina - maioria das
clulas e receptores de heparina queratincitos),
endocitose e liberao do DNA no ncleo celular
3 formas de replicao:
Infeco inicial: clulas da camada basal, 50-100
cpias
Passagem para clulas em diviso - persistncia
Replicao vegetativa em clulas diferenciadas (10100mil cpias)

Expresso dos genes early e late: dependncia do ciclo celular

Papilomavrus : papel das protenas virais na induo de

tumores

Diagnstico
Clnico, Histopatologia, VLP-ELISA, IHQ, Hibridizao e PCR
Crvice normal

Leso intraepitelial escamosa

Epitlio basal diferenciao Epitlio basal alterado Diferenciao alterada

VACINAS

Human Papillomavirus L1 Virus-Like Particle Vaccine

Referncias:
Santos, N.S.O.; Romanos, M.T.V.; Wigg M.D. Virologia Humana.
Flores, E.F. Virologia Veterinria (ciclos replicativos das famlias virais)
CDC: www.cdc.gov/ - index alfabtico (doenas, diagnstico)
Virology online: www.virology-online.com

Viral zone: www.viralzone.expasy.org