ESTUDO DIRIGIDO DE IMUNOLOGIA PARA P2

PROCESSAMENTO E APRESENTAO DE ANTGENOS:

1.

Qual a diferena dos BCRs para os TCRs no que diz respeito ao reconhecimento de antgenos? (AP2 2006-1)

Os BCRs reconhecem antgenos na sua forma nativa. J os TCRs, para que reconheam os antgenos, esses devem ser
processados e seus fragmentos peptdicos devem ser associados a molculas de MHC.
Obs: TCRs so receptores para antgenos, presentes na superfcie de linfcitos T.
2.

Em relao ao MHC de classe I e de classe II, explique as diferenas quanto:

a) A origem dos antgenos:

As molculas de MHC de classe I apresentam aos linfcitos T CD8, antgenos de origem citoplasmtica. Mas antes de serem
apresentados, esses antgenos sero processados e os peptdeos resultantes so associados ao MHC de classe I. Esses peptdeos
podem ser prprios da clula, podem ser de origem tumoral ou podem ser de parasitas intracelulares. O MHC de classe I est
presente na superfcie de quase todas as clulas nucleadas. Dessa forma, todas as clulas que possuem MHC de classe I associada a
peptdeos sero alvo dos linfcitos T CD8, que induziro a morte dessas clulas. Por isso, o linfcito T CD8 conhecido como
citotxico, por destruir clulas.
A molcula de MHC de classe II apresenta aos linfcitos T CD4 peptdeos originados do meio extracelular. O MHC de classe II
est presente na superfcie de todas as clulas apresentadoras de antgenos, como exemplo, macrfagos e fagcitos. Estes iro
englobar organismos ou substncias presentes no meio extracelular, processa-los e associa-los as suas molculas de MHC classe II.
Dessa forma, todas as clulas apresentadores de antgenos (APCs) que possuem molculas de MHC de classe II associadas a
peptdeos, sero alvo dos linfcitos T CD4, que assim sero ativados e participaro da ativao de clulas B (produtoras de
anticorpos).
b) Clulas ativadas e suas respectivas funes:
O MHC de classe I ativa as clulas T CD8. A funo do linfcito T CD8 reconhecer os peptdeos antignicos apresentados pela
MHC de classe I e causar a lise da clula infectada, impedindo assim, a replicao viral.
O MHC de classe II ativa as clulas TCD4. A funo desses linfcitos reconhecer os peptdeos apresentados pelo MHC de
classe II, ativar clulas B, auxiliando assim, a produzir anticorpos.
3.

Qual a relao da molcula de MHC com a histocompatibilidade?

A molcula de MHC a responsvel pela histocompatibilidade. essa molcula que permite ao sistema imune, reconhecer o
que prprio do que no prprio do organismo. Existe uma enorme variedade de MHC na natureza. A cada conjunto de genes que
codifica uma molcula de MHC, chamamos de haplotipo. Existem vrios haplotipos diferentes na natureza. Um indivduo s pode
receber o transplante de rgo de um outro indivduo, se eles tiverem o mesmo haplotipo, caso contrrio, seu sistema imune, ou
melhor, seus MHCs reconhecero o novo rgo como no prprio do organismo e tentar destru-lo, o que conhecemos como
rejeio.
4.

Qual a principal funo da molcula de MHC?

Apresentar na superfcie celular, fragmentos moleculares antignicos ou oriundos de clulas tumorais. Esses fragmentos sero
reconhecidos pelos linfcitos T, o que resulta na ativao da resposta imune.
5.

Como ocorre o processamento e a apresentao de antgenos s clulas T CD8?

Os antgenos apresentados pelo MHC de classe I so peptdeos de origem intracelular derivaodos de protenas de origem viral,
de outros microorganismos intracelulares, de antgenos tumorais ou da prpria clula. Qualquer microorganismo que for transportado
pra dentro da clula por vesculas fagocticas, ser tratado pela clula como intracelular e ser tambm processado via MHC de
classe I.
As protenas que forma reconhecidas pelo MHC como no prprias sero degradas por proteossomas. Dessa degradao sero
gerados vrios peptdeos. Esses sero transportados do citoplasma at o RER por uma protenas transportadora chamada TAP.
Dentro do RER, esses peptdeos se ligam a molculas de MHC de classe I recm sintetizadas. Essa ligao torna o MHC estvel, o que
o permite deixar o RER e seguir para o complexo de golgi, de onde transportada para a superfcie da clula por vesculas
exocticas.
Na superfcie da clula, a molcula de MHC classe I associada ao peptdeo ser reconhecida pelo linfcito T CD8. O TCR do
linfcito T CD8 reconhece especificamente o peptdeo associado ao MHC. Depois do reconhecimento, o CD8 se liga ao MHC. Se o
peptdeo for reconhecido como prprio do organismo, nenhuma reao imune ocorrer. Mas se o peptdeos for reconhecido como
no prprio, o linfcito T CD8 induzir a morte da clula, ser ativado e desencadear uma resposta imune.
Molculas de MHC esto continuamente apresentando peptdeos de protenas prprias do organismo. Esse processo funciona
como uma forma de checagem do sistema imune. A clula T CD8, para ser ativada quando reconhece o antgenos peptdico como
imprprio e se diferenciar em CTL (linfcito T citoltico) efetor, precisa primeiro, receber sinais de MHCs de Classe I de uma clula T
CD4 ( T helper). Caso no receba esses sinais, O T CD8 no se ativa.

Isabel Titoneli Plo Itaperuna

6.

Como ocorre o processamento e a apresentao de antgenos a clulas T CD 4?

Clulas apresentadoras de antgenos, com as clulas dendrticas e os macrfagos, fagocitam partculas extracelulares. Essas
partculas so internalizadas atravs de uma vescula chamada endossoma. Uma outra vescula, o lisossoma, se funde com o
endossoma, formando o fagolisossoma. O lisossoma contm, no seu interior, enzima proteolticas. O endossoma, no seu interior,
contem uma grande quantidade de MHC de classe II. Sendo assim, no fagolisossoma, encontramos muitas molculas de MHC e
enzimas.
Os peptdeos gerados a partir da degradao dos antgenos exgenos, se ligam a molcula de MHC de classe II e o complexo
MHC de classe II + peptdeo, ser transportado at a superfcie celular da APC, onde ser reconhecido pelo TCR do linfcito T CD4. O
CD 4 se liga ao MHC de classe II. Essa ligao, somada aos sinais co-estimulatrios dados pela APC, resultam na ativao e
proliferao das clulas T CD4.
7.

Qual a importncia da apresentao de antgenos? No seria mais simples se clulas T tambm reconhecessem antgenos
nativos, como as clulas B?

A resposta para esta questo refere-se necessidade de direcionamento ou regulao do processo imune.
Primeiro, necessrio que antgenos exgenos e endgenos sejam tratados de uma forma diferente pelo sistema imune, para
assegurar a eficincia do processo. No primeiro caso, interessa direcionar a resposta efetora diretamente ao antgeno seja ele uma
protena solvel ou uma bactria na superfcie da qual encontram-se os antgenos propriamente ditos. Para isto so ativados
mecanismos mediados por anticorpos e clulas fagocitrias. No caso de antgenos endgenos, necessrio destruir a clula do
prprio organismo onde estes antgenos esto sendo produzidos esta clula infectada uma fonte potencial de uma maior
quantidade do antgeno. A resposta ocorre sob forma de citotoxicidade, com destruio da clula alvo.
Este primeiro grande direcionamento feita atravs da apresentao de antgenos via molculas de MHC classe II (exgenos)
ou I (endgenos), e resulta em seu reconhecimento por clulas Th ou Tc, respectivamente.
No caso de antgenos exgenos, um segundo direcionamento na resposta fundamental. tambm dependente do modo de
apresentao do antgeno o contexto em que ele apresentado, sua quantidade, os sinais secundrios que acompanham sua
apresentao e determina quais as citocinas, e em que quantidades, sero produzidas pelas clulas Th por ele ativadas. Este
coquetel de citocinas, por sua vez, vai determinar qual a classe de anticorpos a serem produzidos e o recrutamento de outros tipos
celulares (tais como macrfagos) para a resposta. Enfim, a resposta novamente direcionada para a forma mais adequada de
eliminao do antgeno.
Concluindo, a apresentao de antgenos a clulas T necessria por permitir o direcionamento da melhor resposta efetora.
AULA 12 - ONTOGENIA E MATURAO DE CLULAS B E T
8.

Explique como ocorre a seleo negativa de linfcitos B imaturos. Qual a importncia dessa seleo?

Cerca de apenas 10% do total de clulas B produzidas na medula diariamente ganha a circulao sangnea, isto , sai da
medula ssea. Os outros 90% morrem na ainda na medula. Acredita-se que parte dessa perda se deva ao processo de seleo
negativa que ocorre para eliminar as clulas capazes de reconhecer antgenos prprios presentes na medula ssea. Este processo de
seleo consiste na morte por apoptose de linfcitos B imaturos que reconhecem, por meio da IgM de membrana, auto-antgenos na
medula ssea, evitando, assim, a produo de auto-anticorpos por parte daquelas clulas.
Um outro fenmeno que ocorre nessa fase do desenvolvimento dos linfcitos B o chamado edio do receptor. A edio
vai acontecer em alguns dos linfcitos B imaturos que apresentam imunoglobulinas auto-reativas. Esse fenmeno consiste na da
regio varivel de uma das cadeias leves das imunoglobulinas, fazendo com que elas passem a apresentar outra especificidade
(diferente daquela que reconhecia antgenos prprios), e portanto tenha chances de escapar da morte por apoptose.
A seleo negativa de linfcitos B evita a produo de auto-anticorpos.
9.

Por que o sistema imune no reconhece os peptdeos do prprio organismo com antgenos?

Por causa da seleo negativa dos timcitos. Quando existem ligaes fracas entre o TCR dos timcitos e os auto-antgenos
apresentados pelo MHC, ocorre a seleo positiva desses timcitos. Quando essas interaes so fortes, os timcitos sero
negativamente selecionados. Este processo eliminar os clones de clulas T que, reconheceriam auto-antgenos.

Isabel Titoneli Plo Itaperuna

10. Qual a importncia dos processos de ontogenia e maturao dos linfcitos T e B?

A ontogenia e a maturao dos linfcitos T e B se constituem em processos biolgicos, chave para o estabelecimento da
gerao de diversidade de anticorpos e TCRs e, ao mesmo tempo, para o estabelecimento da tolerncia ao prprio (self-tolerance).
Aula 13 Ativao dos linfcitos T
11. Quando podemos dizer que os linfcitos T esto totalmente maduros?
Quando eles so capaz de reconhecer antgenos.
12. Qual a relao existente entre a comunicao entre os elementos do sistema imune e a rejeio em transplantes?
Em pessoas que sofrem transplantes de rgos. Para que no haja rejeio, necessrio atuar com medicao sobre
elementos do sistema no sentido de bloquear a seguinte comunicao entre seus elementos: Existe um corpo estranho ao sistema
que deve ser eliminado. O sistema no sabe que, naquele caso, o corpo estranho bom e vai salvar o organismo. Mas o sistema
sabe que deve reagir ao que estranho a si prprio para manter a auto-preservao.
13. Como os linfcitos T so ativados? Explique a importncia do primeiro e do segundo sinal e as respectivas molculas envolvidas.
Tanto na ativao dos linfcitos T quanto na ativao dos linfcitos B, observamos que so necessrios dois tipos de sinais. O
primeiro sinal dado por reconhecimento dos antgenos pelos receptores antignicos (TCR ou BCR), e o segundo sinal dado por
molculas presentes na superfcie dos linfcitos, que aumentam a intensidade da ativao dos linfcitos T ou B. Dois tipos de
enzimas que adicionam e removem grupos fosfatos de resduos de aminocidos estaro atuando, para que ocorra a sinalizao
intracelular. Isto porque a sinalizao ocorre mediante a dinmica de fosforilao e desfosforilao de resduos de aminocidos de
protenas na membrana e no citoplasma da clula. Os dois tipos de enzimas so: as quinases e as fosfatases.
Os elementos fundamentais para a gerao de linfcitos T efetores e de memria so:
1- as protenas do complexo TCR (CD3, cadeias e o TCR ou ), envolvidas no primeiro sinal de ativao;
2- outras molculas envolvidas no segundo sinal de ativao, dentre elas as molculas CO-ESTIMULADORAS.
As MOLCULAS CO-ESTIMULADORAS proporcionam o segundo sinal que necessrio para a ativao dos linfcitos T. Essas
molculas esto expressas na superfcie das clulas apresentadoras de antgenos (APCs) e interagem com seus contra-receptores na
superfcie dos linfcitos T. Essa interao, em conjunto com aquela resultante do primeiro sinal, leva ao estmulo do linfcito T. Na
ausncia do co-estmulo, as clulas T, cujos TCRs reconhecem antgenos apresentados por APCs, falharo em responder ao estmulo
antignico. Essas clulas T, se privadas do co-estmulo, ou morrem por apoptose, ou entram em estado de anergia. Neste ltimo
caso, as clulas no respondero mais aos antgenos para os quais seus TCRs so especfi cos, quando novamente em contato com
APCs. A anergia explica em parte o estado de tolerncia (ausncia de resposta) que pode ser desenvolvido contra antgenos em
determinadas situaes.
A afinidade de ligao dos peptdeos apresentados pelo MHC ao TCR baixa (da ordem de 10 5 a 106). Estima-se que a
interao entre uma molcula de TCR com um peptdeo na molcula de MHC dure cerca de apenas dez segundos. Em geral, uma APC
exibe entre 1.000 e 10.000 molculas de MHC portando peptdeos. Assim, uma APC pode interagir com o mesmo nmero de TCRs na
membrana da clula T. Sabemos que o tempo decisivo no processo de comunicao. Portanto, para que um linfcito T possa ser
ativado, esse tempo mnimo (chamado limiar) deve ser alcanado. Se o tempo limite no for alcanado, a incompleta sinalizao
pode gerar nenhuma ativao, ativao parcial, ou ainda inativao funcional. A interao da clula T naive com o antgeno
apresentado pela APC estimula a clula a entrar no ciclo de diviso celular (G0 a G1), culminando com a expresso do receptor da
citocina IL-2 de alta afinidade e na secreo de IL-2. A IL-2 ativa a clula a completar seu ciclo de proliferao e a se diferenciar em
clula efetora ou de memria.
14. Qual a importncia da estimulao dos linfcitos T?
A estimulao dos linfcitos T um dos eventos-chave para que a resposta imune adaptativa se estabelea. As relaes
celulares que se passam durante este processo se pautam no princpio geral da comunicao. Conhecer os mecanismos bioqumicos
que regem a estimulao das clulas T estratgico para que estabeleam condutas teraputicas racionais.
Aula 14 Ativao dos linfcitos B.
15. Explique resumidamente como ocorre a ativao dos linfcitos B para produo de anticorpos.
O reconhecimento de antgenos pelos linfcitos B no depende da apresentao dos mesmos molcula de anticorpo na
superfcie do linfcito B por uma APC. Se os antgenos so proticos em geral, o seu reconhecimento na forma nativa acontecer,
porm haver a necessidade da presena de clulas T helper (CD4). Esse tipo de antgeno classificado como T dependente. Se os
antgenos no so proticos (polissacardeos e lipdeos, por exemplo), no haver a necessidade da presena de clulas T para a
estimulao dos linfcitos B e, portanto, esses antgenos so classificados como T independentes (antgenos TI). A resposta de
linfcitos B a antgenos TI produz anticorpos da classe IgM e algumas subclasses de IgG, e em geral, so de mais baixa afinidade
quando comparados com anticorpos produzidos por antgenos T dependentes.
A ativao de linfcitos B por antgenos levando produo de anticorpos pode ser dividida nas seguintes fases:
1- Na fase de reconhecimento, quando ocorre a interao do antgeno com molculas de IgM e IgD na superfcie do linfcito B.
Isso acontece nos rgos linfides secundrios. A partir deste reconhecimento os linfcitos so ativados.
2- Na fase de ativao, quando a clula B passa por processos semelhantes queles descritos para os linfcitos T e so
levados a proliferarem.
3- Na fase de proliferao, quando ocorre a expanso dos clones de linfcitos B estimulados pelo antgeno. nessa fase que
os linfcitos iniciam sua diferenciao.
4- Na fase de diferenciao, quando os linfcitos B se diferenciam em clulas produtoras de anticorpos (plasmcitos) ou
clulas B de memria.
16. Como o linfcito B ativado a partir de reconhecimento antignico?
Assim como ocorre nos linfcitos T, o clustering fundamental para o incio da ativao dos linfcitos B, e ele se inicia quando
duas ou mais molculas de Ig na superfcie do linfcito B so trazidas juntas. O clustering na superfcie do linfcito B acontece a
partir do fenmeno que chamamos cross-linking, que se verifi ca quando duas ou mais molculas de Ig anteriormente distantes fi
sicamente so aproximadas entre si na superfcie do linfcito B.

Isabel Titoneli Plo Itaperuna

O sinal ser transduzido pelas molculas de Ig e Ig que, juntamente com a molcula de imunoglobulina, formam o complexo
receptor BCR. A partir da, ocorrer uma cascata de sinalizao que ativar fatores de transcrio que induzem a expresso de genes
que iro gerar protenas necessrias para ativao funcional de linfcitos B. Essa cascata de sinalizao ativa fatores de transcrio
que induzem expresso de genes cujos produtos so requeridos para ativao funcional de linfcitos B.
O primeiro sinal o de reconhecimento do antgeno pela molcula de Ig na superfcie do linfcito. O segundo sinal de
ativao mediado por protenas receptoras de complemento. Esse complexo chamado de co-receptor do linfcito B. Ocorrer um
processo de transduo de sinais, ser gerada uma cascata, que resultar na expresso de genes e produo de protenas
necessrias para a ativao do linfcito B. A participao do complemento na produo de anticorpos muito importante.
17. Explique a cooperao dos linfcitos T e b para produo de anticorpos.
Os linfcitos T helper ou auxiliadores (CD4+ MHC classe II restritos) participam da ativao dos linfcitos B no processo que
leva produo de anticorpos, por meio de estmulos provenientes da interao de molculas (receptores e contra-receptores) na
superfcie de ambas as clulas. A dinmica de circulao de linfcitos e a anatomia dos rgos linfides secundrios, proporcionam o
encontro de antgenos e linfcitos.
No curso da resposta imune, cerca de 24 a 48 horas aps a entrada do antgeno no organismo, observa-se que os linfcitos T
naive reconhecem antgenos apresentados pelas APCs profi ssionais em zonas dos rgos linfides ricas em linfcitos T. Os linfcitos
B reconhecem os antgenos nos folculos (se voc tiver dvidas, reveja a Aula 3) e, ativados, migram em direo a zonas ricas em
linfcitos T. As interaes T B ocorrem na regio de interface entre os folculos e nas regies ricas em linfcitos T.
Os linfcitos B reconhecem os antgenos na forma nativa, os internalizam, processam em vesculas endossomiais e os
apresentam como peptdeos em molculas de MHC classe II. Assim, os linfcitos B passam a apresentar antgenos s clulas T.
Assim, os linfcitos T so ativados pelo primeiro sinal (reconhecimento antignico) e pelo segundo sinal (interao entre molculas
co-estimuladoras. Os linfcitos T helper que so estimulados pelo primeiro e segundo sinais, proliferam e se diferenciam. Durante a
interao clula T com clula B, ocorre a cascata de sinalizao intracelular que levaro ativao dos fatores de transcrio,
proporcionando mais ativao. A produo de citocinas por parte dos linfcitos T, durante a interao com os linfcitos B, outro
fator importante para proporcionar a estimulao dos linfcitos B que so expostos a elevadas concentraes de citocinas pelo seu
contato direto com os linfcitos T. As citocinas so importantes para aumentar a capacidade de proliferao de linfcitos B para
produo de diferentes isotipos de imunoglobulinas.
18. O que ocorrer com os linfcitos B, depois de ativados?
Iro se diferenciar em plasmcitos (clulas secretora de anticorpos). Aps cerca de duas a trs semanas de estabelecida a
resposta imune, a medula ssea passa a ser o principal local de residncia das clulas produtoras de anticorpos. As clulas
secretoras de anticorpos so morfologicamente distintas dos linfcitos B. Os plasmcitos so maiores e secretam abundantes
quantidades de anticorpos. Embora os anticorpos circulem, as clulas secretoras de anticorpos raramente o fazem e tm vida curta.
Algumas das clulas B ativadas que no se desenvolvem em clulas secretoras de anticorpos se desenvolvem em clulas B de
memria, que adquirem a capacidade de sobreviver por longos perodos de tempo, aparentemente sem a necessidade de
estimulao antignica.
19. Onde so geradas as clulas de memria?
Nos centros germinativos dos folculos linfides.
20. Como ocorre o controle da resposta Imune Humoral, ou seja, o controle da produo de anticorpos? (AP2 2006-1)
Esse controle se faz em vrios nveis. Um deles pela prpria estrutura do sistema, que permite a sobrevivncia nos centros
germinativos apenas das clulas estimuladas pelos antgenos. Um outro nvel de controle aquele que chamamos controle do tipo
feedback e se faz mediante a ligao da poro Fc de anticorpos na prpria clula B, que apresenta receptor para Fc de IgG
chamado FCRIIB (ou CD32). Esse um controle fi siolgico para regular a produo de anticorpos, e feito pela transduo de
sinais que bloqueiam vias ativadoras da sua produo.
Aula 16 - Mecanismos efetores da imunidade humoral e celular
21. Quais os mecanismos de ao dos anticorpos?
1. neutralizao de antgenos ligao de anticorpos a eptopos estratgicos no antgeno, impedindo que este se ligue a
receptores na clula-alvo;
2. opsonizao ligao de anticorpos na superfcie de patgenos favorecendo a sua fagocitose;
3. citotoxidade celular dependente de anticorpos ligao de anticorpos superfcie da clula-alvo que se ligam a receptores
de Fc de clulas NK, macrfagos, neutrfi lo ou eosinfi lo e que induzem morte da clula-alvo.
22. Como os anticorpos podem neutralizar antgenos? Explique dando exemplo de mecanismos efetores de anticorpos via Fab e via
Fc.
Muitos organismos infecciosos invadem as clulas hospedeiras ligando-se s molculas presentes na superfcie da clula
hospedeira. O anticorpo se liga a eptopos estratgicos no antgeno, impedindo que ele se ligue a receptores na clula alvo. Como
conseqncia disso, o antgeno neutralizado. Os anticorpos neutralizantes podem proteger o indivduo contra alguns antgenos.
Entretanto, no resolveo problema da remoo do patgeno do corpo. Os anticorpos no neutralizantes, que se ligam aos patgenos,
podem participar, tambm, da destruio desses organismos pela sua frao Fc. A regio Fc dos anticorpos, pode associar-se a
outros mecanismos efetores do sistema imune, tais como fi xar o complemento pela via clssica ou se ligar a receptores de Fc de
clulas, como por exemplo macrfagos, neutrfilos, clulas NK, eosinfilos, basfilos e mastcitos.
Quando o micrbio est recoberto (opsonizado) por anticorpos da classe IgG ou fragmentos do complemento C3b e C4b
resulta uma fagocitose muito mais eficiente. Fagcitos mononucleares e neutrfilos expressam receptores para a poro Fc dos
anticorpos IgG e receptores CR1 para os fragmentos do complemento. A frao Fab se liga ao antgeno e a frao Fc se liga ao
receptor de Fc, na superfcie do fagcito.

Isabel Titoneli Plo Itaperuna