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UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

INSTITUTO BIOMDICO
MIP BACTERIOLOGIA

ANTIBIOGRAMA

ANTIBIOGRAMA
1. Introduo
Apesar da identificao, o conhecimento e a determinao do papel dos
microrganismos como responsveis pelas enfermidades infecciosas serem fatos
relativamente recentes, o interesse por conhecer as causas da infeco e o modo de
combat-las comearam muito antes, desde o princpio da humanidade.
No sculo XX, a necessidade de melhorar as condies sociais das
comunidades incentivou o trabalho de vrios cientistas, notadamente Paul Ehrlich, que
em 1910 anunciou a descoberta doSalvarsan (o arsnico que salva) para tratar a
sfilis. Por sua vez, em 1928 Alexander Fleming observou e estudou a ao inibitria
de um fungo, o Penicillium rubrum, sobre estafilococos. Estava descoberta a ao da
penicilina como agente antibacteriano.
Desde ento, vrios estudos foram desenvolvidos a respeito da ao
inibitria de substncias qumicas sobre o crescimento bacteriano. Nos ltimos anos,
porm, a resistncia bacteriana tem causado alarme na comunidade cientfica
mundial, com a necessidade de alternativas teraputicas que possam resolver os
problemas atuais.
Nesta apostila voc vai conhecer as principais categorias de agentes
antimicrobianos qumicos, algumas de suas caractersticas e como eles atuam sobre
as bactrias.

2. Agentes Antimicrobianos
a) - lactmicos
Pertencem a este grupo os frmacos que apresentam o anel - lactmico
em sua estrutura. Interferem na sntese da parede celular ligando-se a receptores de
superfcie (penicillin-binding proteins- PBPs), bloqueando a transpeptidizao final.
Esto includas nesse grupo as penicilinas, cefalosporinas, carbapenmicos e os
monobactmicos.

b) Aminoglicosdeos
So frmacos de escolha no tratamento das infeces por Gramnegativos. Ligam-se irreversivelmente aos ribossomos bacterianos inibindo a sntese
protica. Devido ao seu potencial ototxico e nefrotxico, devem ser usados com
restries. So exemplos a gentamicina, estreptomicina, amicacina e neomicina.

c) Macroldeos
So agentes bacteriostticos ativos principalmente contra bactrias Grampositivas e tambm contra Mycoplasma, Legionella pneumophila, Chlamydia
trachomatis, e Campylobacter jejuni, substituindo a penicilina em pacientes
hipersensveis a esta droga. Atuam inibindo a sntese protica. So exemplos a
eritromicina, a azitromicina e a claritromicina.

d) Quinolonas

So antimicrobianos anlogos sintticos (fluorados) do cido nalidxico, um


antissptico urinrio. Possuem atividade bactericida contra muitas bactrias Grampositivas e Gram-negativas, agindo por inibio da DNA-girase, o que impede a
abertura do DNA para a transcrio. Os exemplos mais conhecidos so o ciprofoxacin
e norfloxacin.

e) Miscelnea
Cloranfenicol : um agente bacteriosttico, que atua inibindo a sntese
protica especialmente nos microrganismos Gram-negativos e anaerbios.

Tetraciclinas : so agentes bacteriostticos que agem por inibio da sntese


protica. Tm amplo espectro, e so usadas preferencialmente no tratamento de
infeces urinrias.

Sulfonamidas/Trimetoprim: as sulfonamidas agem sobre o metabolismo


bacteriano por inibio competitiva da utilizao do c. p-aminobenzico (PABA). O
Trimetoprim age numa fase seguinte da sntese de cidos nuclicos, num
possvel sinergismo antibacteriano.

Vancomicina : um glicopeptdeo que possui atividade bactericida contra


estafilococos, alguns clostrdios e bacilos, inibindo estgios iniciais da sntese do
peptideoglicano.

3. Mecanismos De Resistncia aos Antimicrobianos


O uso indiscriminado dos antimicrobianos determinou o desenvolvimento
de mecanismos de resistncia bacteriana, que freqentemente resultam em falhas
teraputicas. Entre esses mecanismos podemos citar:

Produo de enzimas que hidrolisam ou alteram o medicamento tornando-o


inativo.
Alterao do stio de ao da droga.
Preveno da penetrao alterando a permeabilidade ou os receptores de
membrana.
Bombas que geram um efluxo ativo do antimicrobiano para fora da clula
bacteriana.

Dentre as bactrias que desenvolveram tal capacidade de driblar a ao


dos antibiticos, podemos citar:
Enterococcus sp.: podem desenvolver altos nveis de resistncia aos
aminoglicosdeos fazendo com que sua erradicao em infeces graves
(endocardites, septicemias) exija o uso destes em associao com um -lactmico.
Foram os primeiros microrganismos onde se observou resistncia vancomicina.
MRSA (Staphylococcus aureus resistente meticilina) : atualmente j se sabe
de pelo menos dois mecanismos envolvidos, a modificao do stio alvo e a inativao
por enzimas, o que compromete o uso de drogas como a meticilina e oxacilina no
tratamento das infeces estafiloccicas.

VISA (Staphylococcus aureus intermedirio para a vancomicina): aps o


surgimento dos MRSA em 1980, a droga de escolha para o tratamento de infeces
estafiloccicas graves passou a ser a vancomicina. Em 1997 foi divulgado o primeiro
caso de baixa susceptibilidade vancomicina. O mecanismo de resistncia parece ser
por alteraes no stio alvo e o impacto clnico grave fazendo com que a terapia
contra VISA seja feita com associao de antimicrobianos e cirurgias agressivas.

4.ANTIBIOGRAMA (Teste de sensibilidade aos antimicrobianos)


-mtodo de difuso
Esta atividade visa determinar a sensibilidade de uma bactria frente a
vrios antimicrobianos para auxiliar na escolha da droga mais adequada para o
tratamento de uma infeco.
-Material necessrio:
Cultura recente do microrganismo teste
Discos com antimicrobianos
Pinas estreis
Placas com gar Mueller-Hinton
Rgua graduada
Swabs estreis
1 dia: Inoculao e aplicao dos discos:
Inocular a cultura a ser testada na superfcie da gar, com o auxlio de um
swab. Colocar sobre o inculo discos de papel de filtro impregnados com os
antimicrobianos adequados, de modo eqidistante. Identificar a placa e incubar a 37C
por 18-24 h.
2 dia: Interpretao dos resultados:
Ocorrer difuso das substncias, e suas concentraes diminuem
gradativamente medida que se afastam dos discos. A eficincia de uma droga
demonstrada pelo aparecimento de um halo de inibio do crescimento bacteriano. O
dimetro do halo medido em milmetros e o resultado comparado com os valores
da tabela padro.
PADRONIZAO DO MTODO DE DIFUSO
1. INCULO cultura pura, recente, diluda at a obteno de turvao semelhante
ao tubo n 0,5 da escala de McFarland

2. MEIO DE CULTURA gar Mueller Hinton, recente, em camada de 4-5 mm de


espessura, pH 7,2-7,4. Em alguns casos pode ser enriquecido com 5% de sangue de
carneiro.
3. SEMEADURA espalhar o inoculo na superfcie do meio, friccionando o swab em
vrias direes. Com o auxlio de uma pina estril, aplicar os discos sobre o meio
recm-semeado. Procurar manter distncia de 2,0 cm entre os discos. Incubar as
placas em posio invertida por 18-24 horas a 37C em atmosfera adequada.
4. LEITURA medir o dimetro dos halos de inibio com o auxlio de uma rgua
graduada.
5. INTERPRETAO consultar tabelas padronizadas que contm os valores, em
mm, dos dimetros dos halos de inibio para as drogas comercialmente disponveis.
6. CONTROLE DE QUALIDADE usar como controle de qualidade do teste os
seguintes microrganismos, de acordo com as drogas utilizadas:
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Escherichia coli ATCC 25922
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Tabela 1. Alguns valores dos tamanhos dos halos de inibio e suas interpretaes.
ANTIMICROBIANO
c. Nalidxico
Ampicilina
Cloranfenicol
Eritromicina
Gentamicina
Oxacilina
Penicilina
Sulfa-Trimetoprim
Teicoplanina
Tetraciclina

LEITURA
(mm)

INTERPRETAO
R
I
S
13
14-18 19
11

12-13

14

12

13-17

18

13

14-22

23

12
10

13-14
12-12

15
13

28

29

10

11-15

16

10

11-13

14

14

15-18

19