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Introduo
As mudanas climticas e a elevao nos custos do petrleo aliadas s
necessidades estratgicas de produo de energia tm motivado uma corrida sem
A parede
Toda clula vegetal possui parede celular. Ela determina o tamanho e a forma da
clula, confere resistncia mecnica e proteo contra o ataque de predadores e
patgenos, promove a adeso entre as clulas, delimita o tamanho e propriedades
qumico-fsicas das molculas que tm acesso ao interior da clula, controla o nvel de
umidade e ainda pode funcionar como reserva.
A parede celular composta por uma mistura de polissacardeos, protenas,
compostos fenlicos e sais minerais. Os polissacardeos representam cerca de 90% do
peso seco da parede e consistem em celulose, que compe de 20-40% da parede celular,
hemiceluloses (15-25%) e pectinas (~30%). Essa matriz altamente ordenada e
dinmica podendo tornar-se mais rgida ou mais frouxa conforme as necessidades
ontognicas e comportamentais da clula ou da planta.
Seis a oito molculas de celulose se alinham paralelamente para formar uma
fibra onde ocorre a completa expulso das molculas de gua, tornando a microfibrila
extremamente longa e resistente. Sobre a superfcie das microfibrilas, aderem-se as
Figura 2 - Esquema da parede celular vegetal. A figura mostra a estrutura de uma microfibrila, que
contm 36 molculas de celulose depositadas umas sobre as outras. Uma das molculas de celulose se
apresenta aumentada e prolongada, mostrando as unidades de glucose ligadas entre si por ligaes do tipo
beta-1,4. Uma das molculas de hemicelulose (o glucuronoarabinoxilano) tambm e mostrada em detalhe
na parte de cima da figura.
respectivamente). Parte deste custo se deve ao fato de que para que a hidrlise ocorra de
forma eficiente necessrio aquecer o polissacardeo na soluo cida. A temperatua
ideal para a quebra de hemiceluloses est entre 100 a 120 o C e a concentrao ideal de
cido sulfrico ao redor de 3% (Buckeridge & Dietrich, 1990). No caso especfico da
cana de acar, este custo minimizado devido ao fato de parte do bagao ser queimado
para alimentar as caldeiras e produzir a energia eltrica consumida no processo.
Outra dificuldade advm da necessidade de neutralizao da soluo contendo os
acares para que se possa proceder fermentao. Em geral, para a neutralizao,
utiliza-se hidrxido de clcio (calcrio). No entanto, ao se proceder desse modo, o cido
sulfrico convertido em sulfato de clcio e no pode ser reaproveitado (Ali, Mark &
Daniel, 2006). Esse o principal fator que contribui para o alto custo da tcnica. Para se
obterem nveis aceitveis de comercializao (< US$ 0,36/kg) ser necessria a reduo
dos custos associados principalmente ao consumo e reutilizao do cido e ainda a
melhora na produtividade e eficincia na converso da biomassa (Kaylen et al., 2000;
Goldenberg, 2007).
A fim de melhorar a perspectiva do uso da hidrlise cida em escala comercial, a
empresa brasileira DEDINI Indstria de Base investiu em pesquisas para tornar a o
processo mais rentvel e, atualmente, possui uma usina experimental que tem utilizado
o prprio etanol em mistura com o cido sulfrico como solvente para a lignina. Isso
permite reduzir a utilizao do cido e recuperar o solvente. Outra proposta, feita por
um grupo de cientistas chineses a substituio do processo de neutralizao por um
processo de eletrodilise, que consiste na aplicao de um potencial eltrico entre dois
compartimentos separados por uma membrana semipermevel carregada eletricamente.
Este processo permitiria uma economia de at 55% no consumo do cido sulfrico
(Cheng et al., 2008).
Segundo Rodrigues & Guirardello (2008), os furfurais, que se formam
naturalmente durante a hidrlise cida, poderiam ser aproveitados como matria prima
na produo de solventes e resinas para fabricao de fibra de vidro e outros materiais
plsticos. Sua comercializao pelas usinas poderia se tornar rentvel e contribuir para
reduzir o custo do etanol celulsico.
Outros pesquisadores brasileiros tambm tm se dedicado a buscar solues
compatveis para melhorar o desempenho da hidrlise cida. Em Lorena, Adriane
Milagres estuda mtodos de remoo qumica da lignina para entender seu efetivo
papel na limitao da hidrlise. Em So Carlos, Paulo Seleguin e Glauco Caurin, da
et al. 1999, 2006, Lisboa et al. 2006 e Brando 2008), bem como investigamos os
mecanismos de controle hormonal da degradao da parede celular nesses modelos de
estudo (Santos et al. 2004, Tonini et al. 2006).
A idia introduzir em leveduras os genes que codificam para as enzimas de
hidrlise de galactomananos e xiloglucanos de sementes de Leguminosae. Ento,
poderamos usar as leveduras para degradar o polissacardeo das sementes para produzir
monossacardeos e, a seguir, promover a fermentao alcolica. Alm do faveiro
(Dimorphandra mollisii) o feijo-do-mato (Sesbania virgata) e o jatob (Hymenaea
courbaril) produzem grandes quantidades (acima de 40% do peso seco) de
polissacardeos nas sementes (Buckeridge et al. 2000). Nos casos citados, as espcies
so de larga ocorrncia em vrios biomas sul-americanos e possvel a explorao
sustentada atravs de contatos com cooperativas que j utilizam outras partes de forma
sustentvel.
Em termos de escala de produo, a quantidade de etanol passvel de ser
produzida relativamente pequena em relao ao que a cana-de-acar pode produzir.
No entanto, as vantagens ambientais suplantam muito s econmicas no caso de se
formar sistemas agro-florestais em que florestas sejam regeneradas (ou mantidas) em
meio ao canavial. Esta estratgia, que denominamos caminho do meio (Buckeridge,
2007), tem o potencial de produzir um etanol que poderia ser certificado como
ambientalmente correto e poderia assegurar fatias de mercado (por exemplo, na Europa
e Japo) de combustvel que tenha padro de produo com baixo impacto ambiental.
No caso da cana-de-acar, uma possibilidade fazer um screening das
paredes celulares das diversas variedades buscando diferenas de composio que
possam nos auxiliar a compreender as variaes estruturais e produzir mutantes que
permitam maior acesso celulose.
Como o grande propulsor da busca por novas tecnologias para obteno de
etanol a mudana climtica global, nosso grupo tambm estuda os efeitos das
mudanas climticas sobre a cana-de-acar e outras espcies de interesse para a
obteno de energia renovvel em regies amaznicas, como a Senna reticulata (matapasto) e Euterpe oleracea (aa). Um dos objetivos entender os mecanismos de
acmulo de biomassa e avaliar outros aspectos bioqumicos e ecofisiolgicos afetados
por mudanas climticas.
Plantas de cana-de-acar incubadas em atmosfera de gs carbnico de 720 ppm
(concentrao esperada para 2050, caso as emisses de combustveis fosseis continuem
Isso indica que deve haver um baixo turnover de polissacardeos da parede. No entanto,
os genes existem e devem ser expressos em condies especficas como durante a
senescncia foliar. Se obtivssemos controle sobre estes genes poderamos induzir a
planta a expressar estas enzimas na poca da colheita, reduzindo a necessidade de se
introduzir enzimas fngicas para desmontar a parede.
Outra idia a de introduzir na cana genes heterlogos que sejam ativos apenas
em condies especficas, durante o processamento da biomassa. J foram produzidas
plantas transgnicas, nas quais foi inserido o gene da -amilase que converte o amido
em glicose e uma celulase para a degradao da celulose. Num outro estudo, uma
endoglucanase E1 de Acidothermus cellulolyticus que funciona otimamente a 81o C e
pH 5 foi expressa no apoplasto de vrias plantas incluindo Arabidopsis e arroz. A
enzima mostrou-se ativada em extratos brutos e quando adicionada aos colmos de arroz
aps a colheita e aps um pr-tratamento cido, mas no causou degradao da celulose
in planta (Dai et al, 2000). Estudos em andamento em nosso laboratrio indicam que a
presena de hemicelulose e lignina previnem o acesso da E1 celulose (dos Santos et al.
2008c). Sendo assim, torna-se necessrio estudar in vitro a ao de enzimas que
degradam lignina como lacases e peroxidases, bem como enzimas ativas sobre
hemiceluloses (feuloil-esterases, xilanases, liquenases, etc). Posteriormente, a expresso
dessas enzimas pode ser estudada em Arabidopsis e cana, direcionando-as para
compartimentos celulares que permitam que sua ao seja disparada apenas no
momento desejado. Para tanto, precisamos prospectar as enzimas produzidas pela
plantas de interesse e/ou relacionadas, assim como os mecanismos de sinalizao
envolvidos na regulao da expresso desses genes. Dessa forma estaramos aptos a
tentar controlar esses mecanismos de sinalizao em nosso favor. J prevendo esta
possibilidade, nosso grupo, em colaborao com outros, est realizando experimentos
para verificar quais enzimas, em quanto tempo, e em qual ordem e propores, devem
ser utilizadas a fim de degradar a parede da cana-de-acar com a maior eficincia
possvel.
Uma outra possibilidade modificar o tipo de hemicelulose presente na parede e
ativar a sntese dos polissacardeos reduzindo a quantidade de lignina a fim de produzir
a cana-energia que, como conseqncia da maior quantidade de polissacardeos,
possuir mais energia conversvel em etanol. Essa planta poder ser usada para hidrlise
com coquetis enzimticos de alta eficincia ou mesmo por fungos geneticamente
modificados ou ainda por enzimas expressas pela prpria planta.
Apesar do alto grau de conhecimento que necessitamos ter para que se torne
possvel tal situao, a manipulao e/ou introduo de genes para a degradao da
parede in vivo possvel. Acreditamos que o etanol de quarta gerao se tornar vivel
em cerca de 10 anos, pela utilizao de modificaes genticas que alterem a parede
celular e fisiologia da planta de forma a prepar-la para melhor adaptao a diferentes
condies com aquelas advindas das mudanas climticas globais.
Para que esta quarta gerao de etanol seja realizada, metas como o
seqenciamento completo do genoma da cana e alguns fungos-chave, o mapeamento
dos genes de parede, a compreenso dos mecanismos de controle fisiolgico
(hormnios, fatores de transcrio), bem como na compreenso da relao entre
estrutura e eficincia de enzimas e substratos, devem se tornar linhas de pesquisa
prioritrias, hoje.
A Figura 7 resume as rotas do etanol celulsico integradas entre si, considerando
a possibilidade de se alterar, com tecnologias de quarta gerao, o balano entre
biossntese e degradao e produzir plantas que tenham mais celulose e, portanto, um
maior nvel de empacotamento de energia nas ligaes glicosdicas (veja Buckeridge
2007 para maiores detalhes).
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