Apostila Introduo `a Biologia Molecular I

Somos Todos Feitos de DNA!

www.odnavaiaescola.
Contedo do Mdulo:

Somos todos feitos de DNA!

Todos os direitos reservados DNA goes to

Cromossomos
Genes
Alelos
Estrutura da molcula de DNA

Todos os organismos vivos so compostos

de clulas. Organismos como bactrias so
formados por apenas uma clula, enquanto
outros mais complexos, como seres humanos,
so formados por bilhes de clulas de tipos
diferentes. No interior das clulas esto os
cromossomos, estruturas delgadas cujo nmero
e forma dependem da espcie em questo. A
espcie humana, por exemplo, possui 22 tipos
de cromossomos autossmicos (1 a 22) e dois
cromossomos sexuais (X e Y). Os cromossomos
esto dispostos individualmente nas clulas
germinativas (vulos e espermatozides
possuem 23 cromossomos), ou em pares nas
clulas somticas (as clulas do nosso corpo
possuem 46 cromossomos). Nosso corpo possui
46 cromossomos porque somos formados pela
juno de um vulo com um espermatozide
e esta juno restabelece o nmero diplide
(duplo) de cromossomos em cada clula de
nosso corpo.
Todos os cromossomos so formados
de DNA, ou podemos dizer que o cromossomo
nada mais do que uma longa fita dupla
de DNA, toda enovelada e dobrada sobre si
mesma, de vrias formas, at atingir o aspecto
de cromossomo. Dizer que um cromossomo
feito de DNA o mesmo que dizer que um
novelo feito de linha.
E gene, o que ? Um gene representa
um pequeno fragmento dessa longa fita de
DNA capaz de codificar uma protena. Num
cromossomo existem milhares de genes
diferentes, capazes de produzir um enorme
nmero de protenas diferentes. Cromossomos
semelhantes so chamados de cromossomos
homlogos. Tambm existem nos cromossomos
regies de DNA que no produzem protena,
que podemos chamar de DNA no codificante.
A funo destas seqncias no totalmente
conhecida.
Do ponto de vista estrutural, o DNA se
apresenta como uma dupla fita dobrada em
forma de hlice. As duas fitas so antiparalelas,
ou seja, esto dispostas em direes opostas.

A espcie humana possui 22 tipos de

cromossomos autossmicos (1 a 22) e dois cromossomos
sexuais (X e Y). Enquanto as mulheres so XX os homens
so XY. Acima est o caritipo de um homem. Todos os
cromossomos esto duplicados.

A molcula de DNA formada por

um acar, uma base nitrogenada e um grupo
fosfato.

Somos todos feitos de DNA!

O que define a direo de cada uma das fitas o local
de ligao entre o grupo fosfato com o aucar (o anel
de desoxirribose). Se a ligao ocorre no carbono 3,
dizemos que a fita est na direo 3-5; se a ligao
ocorre no carbono 5, dizemos que a fita est na direo
5-3. Todas as informaes relativas construo e ao
funcionamento de nosso organismo esto embutidas
em nosso DNA. O que faz com que tenhamos diferentes
caractersticas (ou seja, por que somos diferentes um
do outro?) est no fato de termos diferentes formas
de um mesmo gene, o que o mesmo que dizer que
possumos diferentes alelos. Pense, por exemplo, na
cor amarela. H diferentes tons de amarelo: amarelo
canrio, amarelo-ouro, amarelo escuro. Todos so
similares o suficiente para serem amarelos, mas so,
no entanto, diferentes. O mesmo raciocnio pode ser
feito para os alelos. Todos ns temos os mesmos genes
caractersticos da espcie humana. Por exemplo, todos
ns temos o gene amarelo, mas isso no significa que
meu amarelo o mesmo que o seu. Deste modo, temos
alelos diferentes e o que faz sermos quem somos est
na combinao entre todos os nossos alelos (gentipo)
mais as influncias recebidas do ambiente a nossa
volta (gentipo + ambiente = fentipo). O que difere
um do outro est na seqncia de DNA de cada alelo.
importante tambm observar que o DNA de um indivduo
o mesmo em todas as clulas do corpo. O que faz com
que as clulas presentes no olho sejam diferentes dos
neurnios, por exemplo, so os genes que esto ativos
em cada um desses dois tipos celulares.
Ou seja, dependendo do tipo celular, diferentes
grupos de genes esto ativos e produzindo determinadas
protenas, enquanto outros genes esto desligados. Cada
indivduo possui uma combinao allica diferente exceo
para os gmeos monozigticos (gmeos idnticos) e para
a Dolly, clonada a partir das clulas de outro indivduo.
Imagine, ento, a quantidade de informao necessria
para formar um ser humano, por exemplo. Pois toda
essa informao est armazenada no ncleo das clulas.
Tanta informao assim, para caber dentro do ncleo
de cada clula, deve estar arrumada de uma forma
supercompactada.
Nesta aula teremos a chance de ver que cara tem o
DNA e de entender melhor sua composio,
estrutura e funcionamento. Iremos tambm
entender que o DNA uma molcula
Todas as informaes relativas construo e ao
universal, presente em praticamente todos
funcionamento de nosso organismo esto embutidas em
os organismos vivos.


nosso DNA, localizado no ncleo da clula.

Extrao de DNA de morango

Material necessrio
1-1 pedao de morango
2-Tubo eppendorf e palito de dente para macerar
3- Pipeta de plstico
4-Tampo de Extrao
5-Etanol 95%
Procedimento:
1-Picar um morango em pequenos pedaos.
2-Colocar um pedao de morango em um tubo de eppendorf (at onde o tubo marca 0,5ml).
3-Macerar bem com um palito.
4-Adicionar 500 ul de Tampo de Extrao. Agitar vigorosamente o tubo eppendorf.
5-Colocar o tubo em banho-maria a 65C por 15 minutos.
6-Colocar o tubo eppendorf no gelo por 5 minutos.
7-Centrifugar por 8 minutos.
8-Recolher o sobrenadante para novo tubo eppendorf.
9- Adicionar lentamente pelas bordas do tubo, 2 vezes a quantidade do sobrenadante de etanol
95 % gelado.

Em 1923 o ingls Frederick Griffith identificou duas linhagens de bactrias que apresentavam colnias
lisas (L) e outras de colnias rugosas (R). As bactrias lisas eram virulentas, enquanto as rugosas no.
Griffith observou que, quando inoculava um rato com bactrias rugosas no virulentas juntamente com
bactrias lisas virulentas mortas, o rato desenvolvia pneumonia, o que no era observado quando estas
bactrias eram introduzidas no rato separadamente. O que ser que fazia com que as colnias R se
tornassem virulentas? Foi essa mesma pergunta que Griffith fez a si mesmo. Ele chamou de princpio
transformante, essa "coisa" que fazia com que as bactrias no virulentas virassem virulentas. Vrios
grupos tentaram ento descobrir o que seria este princpio transformante. At os anos 40 do sculo XX,
as protenas eram as grandes candidatas ao cargo de princpio transformante. J a substncia inicialmente
chamada de nuclei (e mais tarde DNA) era algo que ainda no possua uma funo definida e que parecia,
a princpio, ser uma molcula montona, formada sempre pelas mesmas 4 bases nitrogenadas, adenina,
timina, guanina e citosina. J as protenas pareciam muito mais dinmicas, maiores e formadas por 20
aminocidos diferentes! E tambm j se sabia que elas eram os componentes estruturais das clulas,
ou seja, os tijolos de todos os organismos.

Para ver imagens de clulas se dividindo, acesse o link

http://www.bio.davidson.edu/courses/movies.html


Extrao de DNA de mucosa bucal. Material (por grupo):

1. 1 copo descartvel

5. 1 tubo de ensaio

8. Estante para tubos

2. 1 esptula

6. l c o o l
gelado

9. Isopor com gelo

3. 15 mL de soluo de sacarose a 3%

etlico

7. Banho 550C

4. Pipetas plsticas

10. Micropipeta (500 L)

11. Detergente neutro

25%

Procedimento:
1. Higienizar a boca fazendo bochechos com gua ou, se possvel, escovando os dentes.
2- Colocar aproximadamente 15mL de gua com acar (3%, uma colher de ch de acar em
meio copo descartvel).
3- Delicadamente raspar a mucosa bucal com uma esptula.
4- Bochechar vigorosamente por aproximadamente 30 segundos com a soluo utilizada no passo
2.
5- Recolher o volume obtido do bochecho no mesmo copo descartvel. Mergulhar a esptula usada
na raspagem da mucosa no volume obtido do bochecho (Desta forma, coletaremos as clulas que
ficaram na esptula).
6- Transferir 5 mL do volume obtido no passo 5 para um tubo de ensaio e adicionar uma pitada
de sal de cozinha (para aproximadamente 1% final). Homogenizar invertendo o tubo.
7-Adicionar 500 L de detergente neutro diludo 25% (1:4) e homogeneizar vagarosamente.
8- Aquecer a 55oC por 10 min. Resfriar 5 min no gelo.
9- Adicionar lcool gelado (absoluto se possvel) lentamente, pelas bordas do tubo, com o auxlio
de uma pipeta, at que se alcance pelo menos 1cm de altura.
*Voc j poder observar a frao que corresponde ao seu DNA, insolvel no lcool, se formando
no tubo. Se esperarmos mais um pouco, poderemos observar melhor.
Responda s seguintes perguntas:
1- Por que o DNA tem o aspecto de novelo?
2- Como voc relacionaria os seguintes termos: DNA, cromossomo, alelo e gene?
3- Qual a funo da temperatura, do sal, do lcool e do detergente na extrao de
DNA?
4- Compare os dois mtodos. Quais so as semelhanas e as diferenas?

Oswald Avary

Em 1944, Oswald Avary, junto com Colin MacLeod, conseguiu puricar o

princpio transformante. Eles descobriram que o mesmo no se alterava
quando submetido tripsina, uma enzima especializada em degradar
protena. Por outro lado, quando em contato com enzimas que degradavam
nuclei (DNA) o princpio transformante no era mais observado. Assim
concluiu-se que o que fazia com que as bactrias de Grifth se tornassem
virulentas era a transferncia do DNA das bactrias virulentas para as no
virulentas, quando juntas eram utilizadas para infectar um rato. No entanto,
ainda levaram mais alguns anos e experimentos para que a comunidade
cientca aceitasse que o princpio transformante no cabia s protenas,
mas sim ao cido nuclico.

Cracking the Human Genome

Site baseado no programa da
rede de televiso pblica dos
EUA, PBS, com animaes
sobre o sequenciamento do
genoma humano. Muito bom!
http://www.pbs.org/wgbh/
nova/genome/program_t_
qt.html#

Introduction to DNA
structure
Site contendo vrias imagens grficas sobre a estrutura qumica da molcula
de DNA.
http://www.blc.arizona.
edu/Molecular_Graphics/
DNA_Structure/DNA_Tutorial.HTML

Extrao de DNA de Kiwi

Todo o processo de extrao
de DNA de Kiwi, com todos
os detalhes. Faa na sala de
aula com seus alunos.
http://www.biotech.iastate.
edu/publications/lab_protocols/DNA_Extraction_Kiwi.
html

Extrao de DNA de tomate

Protocolo passo a passo para
a extrao de DNA de tomate
http://ucbiotech.org/edu/
edu_aids/TomatoDNA.html

Gene Gateway-Exploring
Genes and Genetic Disorders
Esta pgina faz parte do site
do Departamento de Energia
(DOE) dos Estados Unidos,
uma das principais agncias
financiadoras do Projeto Genoma Humana. Nesta pgina
voc poder clicar num dos
cromossomos humanos e
uma nova janela se abrir
mostrando todos os genes
conhecidos que esto associados doenas genticas.
http://www.ornl.gov/
TechResources/Human_Genome/posters/chromosome/
chooser.html

Mas o que era esse misterioso nuclei? Como era a sua estrutura?
Foi em 1953 que Watson e Crick propuseram a estrutura da molcula
de DNA num pequeno artigo de duas pginas na renomada revista
inglesa Nature. Para desvendar o mistrio, os dois cientistas utilizaram
fotografias tiradas pela cientista Rosalind Franklin (sem a sua
permisso). Uma verso em espanhol do artigo de Watson e Crick
pode ser encontrada na pgina http://www.bioxeo.com/adn.htm A
verso em ingls est disponvel no site da revista Nature no link
http://www.nature.com/nature/dna50/watsoncrick.pdf
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