Parasitologia Clinica Selegao de Métodos e Técnicas de Laboratério para o Diagnostico das Parasitoses Humanas 2+ edigdo Gera_po ArtiLio DE CARL Farmacéutico Quimico pela Faculdade de Farmacia da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Mestre em Parasitologia e Doutor em Farmacia e Bioquimica pela Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Professor Titular de Parasitologia Clinica da Faculdade de Farmacia da Pontificia Universidade Catolica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS (PUCRS). Ex-professor Titular de Andlises Parasitolégicas da Faculdade de Farmdcia da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS (UFRGS). Ex-professor Titular de Parasitologia da Universidade do Vale do Rio dos Sinos, Sao Leopoldo, RS (UNISINOS). Pesquisador pelo Conselho Nacional de Pesquisa (CNPq). Ex-bolsista da Universidade de Wisconsin, Madison, EUA (UW). Ex-bolsista do Centro Panamericano de Zoonoses da Oficina Sanitéria Panamericana (OPS/OMS), Buenos Aires, Argentina. Ex-bolsista da Comissao das Comunidades Européias (CEE) da Universidade de Rouen, Rouen, Franca, Ex-bolsista da Japan International Cooperation Agency (JICA) da Japanese Association of Parasite Control (APC). Ex-bolsista da Deutscher Akademischer Austausch Diemst (DAAD) no Instituto de Medicina Tropical Bernhard Nocht, Hamburgo, Alemanha. Ex-bolsista da Universidade de Kyorin, Téquio, Japao. DEDALUS - Acervo - HU AWM 11900003369 A Atheneu Sao Paulo ¢ Rio de Janeiro * Ribeirio Preto * Belo HorizonteSum4rio SECAO 1 — PARASITOS INTESTINAIS, 1 EB Colheita ¢ Preservagdo da Amostra Fecal, 3 Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 3 Colheita, 4 Fezes Emitidas Espontaneamente Amostras Miiltiplas, 5 Fezes Emitidas com o Uso de Laxantes, 7 Estabilidade das Amostras, 7 Preservacaio da Amostra Fecal, 7 Solugdo de Formaldeido Fixador de Schaudinn Fixador de Schaudinn Modificado Fixador Alcool Polivinilico (Fixador APV) Fixador Alcool Polivinilico Modificado (Fixador APV) Fixador Mertiolato-lodo-Formaldeido (MIF) Fixador Acetato de Sédio-Acido Acético-Formaldeido (SAF) Fixador Fenol-Alcool-Formaldeido (PAF) Albumina Fixadora de Mayer Controle de Qualidade (CQ) dos Preservadores, 24 Exames Macrosc6pico ¢ Microscépico da Amostra Fecal Fresca ¢ Preservada, 29 Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 29 Exame Macroscépico, 30 Simples Observagao Tamisagao Identificagao de Proglotes de Taenia spp., 32 Método do Acido Acético Glacial Método da Tinta da China Exame Microscépico, 35 Exame Direto a Fresco de Material Fecal Preparagées Salinas Coloragdes Temporarias, 40 Solugdes de Iodo, 40 Solugdo de lodo de Lugol Solugdo de lodo de Dobell e O°Connor Solugdo de lodo de D’Antoni Modificada Solugdo de Quensel, 44 Solugdo Tamponada de Azul-de-Metileno de Nair, 46Solugdo de Mertiolato-lodo-Formaldeido (MIF), 48 Exame Direto para a Pesquisa de Ovos de Helmintos, 49 Método do Esfregago Espesso de Celofane Técnicas de Concentragao, 51 Técnicas de Flutuagao, 52 Flutuagao em Solugdo Saturada de Cloreto de Sédio Flutuagao em Solugdo de Sulfato de Zinco Flutuagao em Solugdo de Sulfato de Magnésio Centrifugo-Flutuacao em Sulfato de Técnicas de Sedimentagao, 59 Sedimentagdo Espontanea Centrifugo-Sedimentagao pela Formalina-Eter ou Centrifugo-Sedimentagao pela Formalina-Acetato de Etila Centrifugo-Sedimentago pelo Sulfato de Sédio-Acido Cloridrico-Triton-Eter (AMS IID) Centrifugo-Sedimentagao pelo Acetato de Sédio-Acido Acético Corante lodo-Tricrdmico para Sedimento Fecal Proveniente das Técnicas de Concentragao Técnicas de Concentragao Especificas para Coccidios, 73 Centrifugo-Flutuagio em Solugao de Sacarose Centrifugo-Sedimentago pelo Formaldeido-Eter Modificado Centrifugo-Sedimentacao pelo Hidroxido de Potassio Preparacao e Coloragao de Esfregagos Permanentes, 83 Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 83 Coloragdes Derivadas da Hematoxilina, 84 Coloragao pela Hematoxilina Férrica, Segundo Heidenhain, Modificada por Burrows Coloragao pela Hematoxilina Férrica, Segundo Heidenhain, Modificada por Melvin e Brooke Coloragao pela Hematoxilina Férrica, Segundo Heidenhai por Melvin e Brooke Colorag’o pela Hematoxilina Férrica-Acido Fosfotingstico Coloragao pela Hematoxilina Férrica-Acido Cloridrico Coloragdes pelo Tricromico, 99 Método de Wheatley Método de Brooke Método de Yang e Scholten Outros Métodos de Coloragao, 107 Coloraco pela Tionina Solugao de Fenol de Kohn Coloracao pelo Corante Clorazol black E Caracteristicas da Coloragaio Coloracao pelo Corante Polychrome IV Modificada Isolamento e Cultura de Larvas de Nematéides, 115 Geraldo Auilio De Carli Considerages Gerais, 115 Método de Baermann e Moraes, 116 Método de Rugai, Mattos e Brisola, 118 Cultura no Papel-filtro em Tubo de Ensaio, 119 Cultura no Papel-filtro em Placa de Petri, 121 Cultura de Larvas em Carvao, 122Cultura de Larvas de Strongyloides stercoralis em Placa de Agar, 124 5. Demonstracio e Quantificagao de Ovos nas Fezes, 129 Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 129 Método de Stoll e Hausheer, 130 Método de Stoll Modificado, 131 Métodos Coprolégicos Quantitativos Especificos para 0 Diagndstico do Schistosoma mansoni, 132 Método de Bell Método de Barbosa Método de Kato-Katz Método de Teesdale e Amin 6. Artefatos Confundiveis com os Estigios de Diagnéstico dos Pai Geraldo Attilio De Carli sitos, 139 Consideragdes Gerais, 139 Elementos em Transito, 140 Elemento Derivados de Contaminagiio Externa, 142 Protozoarios Helmintos Sangue Artefatos dos Liquidos Organicos Células Humanas Cristais de Charcot-Leyden Células de Leveduras Infeeedes Espirrias Larvas de Insetos 7. Expresso dos Resultados no Exame Parasitolégico das Fezes, 153 Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 153 Expressdo dos Resultados Anexo, 157 Parasitos do Sangue, do Trato Geniturinario e Exame Cultural de Protozoarios SECAO 2 — EXAME DE ASPIRADOS, DOS TECIDOS, DA URINA, DAS SECRECOES E DE MATERIAL DE BIOPSIA, 159 8. Identificagao de Outros Parasitos do Trato Intestinal e Sistema Urogenital, 161 Geraldo Attilio De Carli Tiana Tasea Consideragdes Gerais, 161 Pesquisa de Enterobius vermicularis, 161 Método da Fita de Celofane Adesiva e Transparente Método Alternativo para a Pesquisa de Ovos de Enterobius vermicularis Método do Swab de Vaselina e Parafina (VASPAR) Aspirado Duodenal, 167 Método da Capsula Duodenal (Entero Test")Sigmoidoscopia, 171 Material de Sigmoidoscopia: Exame Direto a Fresco Material de Sigmoidoscopia: Esfregagos Permanentes Corados Endoscopia, 174 Sistema Urogenital, 175 Técnica da Triplice Concentracao da Urina Técnica da Urina Concentrada pela Centrifugacao ‘Técnica da Urina Concentrada pela Membrana Filtrante (Nuclepore") Diagnéstico de Trichomonas vaginalis, 178 Amostra Colheita da Amostra Preservagdo da Amostra Exame Microseépico, 185 Exame Direto a Fresco Corante~ Vaginal Identification of Pathogens (VIP) Coloragao pela Solucao de lodo de D'Antoni Coloragao de Giemsa Revisdo: Exame Microsedpico, 192 Exame das Culturas, 193 Imunodiagnéstico, 194 9. Pesquisa de Parasitos em Escarro, Aspirados, Material de Geraldo Autilio De Carli psia e Tecidos, 201 Consideragdes Gerais, 201 Escarro, 201 Escarro Expectorado: Exame Direto a Fresco e Preparages Permanentes Coradas Aspirados, 205 Figado e Pulmao Nodulos Linfiticos, Medula Ossea e Bago Ulceras Cutaneas Bidpsia ou Curetagem nas Bordas das Lesdes Liquido Cefalorraquidiano Liquido Cefalorraquidiano Cothido por Aspiragao Exame dos Tecidos, 209 Pele Método do Fragmento Superficial da Pele (Retalho Cutaneo) Tecidos Muscular e Subcutaneo Nédulos Linfiticos Reto e Bexiga Raspados e Material de Bidpsia Cérnea SECAO 3 — PARASITOS EMERGENTES E OPORTUNISTAS, 213 10. Métodos de Coloracao para Coccidios Intestinais, 215 Geraldo Attilio De Carli Hércules Moura Tiana Tasca Consideragdes Gerais, 215 Cryptosporidium spp. 218 Diagnéstico Laboratorial da Criptosporidiose Cyclospora cayetanensis, 223Diagnéstico Laboratorial da Ciclosporose Isospora belli, 227 Dia néstico Laboratorial da Isosporose Métodos de Coloracao para Coccidios Intestinais, 230 i. Método de Henriksen-Pohlenz Método Modificado de Kinyoun (a Frio) (Coloragao do fundo da preparagao: verde de malaquita) Método Modificado de Kinyoun (a Frio) (Coloracao do fundo da prepa Método Modificado da ZiehI-Neelsen (a Quente) Método Modificado de Ziehl-Neelsen-Dimetilsulfoxido (DMSO) Método de Heine Coloragiio Negativa pela Fucsina-Fenicada Método Modificado da Safranina (a Quente) Método Rapido da S: Método Modificado da Safranina (Forno de Microondas) Coloragao de oocistos de Cyclospora cayetanensis Coloragio de Oocistos de Cryptosporidium spp. Coloragao pela Hematoxilina Férrica Modificada Colora Ao: azul-de-metileno) franina 10 de Giemsa Métodos de Coloragao para Microsporidios Intestin Geraldo Attilio De Carli Hercules Moura Tiana Tasca Consideragdes Gerais, 265 Métodos de Coloragao, 270 Coloragao pelo Chromotrope (Trierémico Modificado — Weber-Verde) Colorago pelo Chromotrope ou Modificagao de Ryan (Ryan-Azul) Coloragao pelo Chromotrope a Quente ou Modificagao de Kokoskin Coloracdio de Gram-Chromotrope para Microsporidios Coloragaio Rapida a Quente pelo Gram-Chromotrope Coloragao pelo Chromotrope para Microsporidios Método do Caleoflior Branco para Detecgao de Esporos de Microsporidios, 286 Método da Fuecs Anexo: Taxonomia dos Microsporidios, na-Fenicada-Tricrdmico para a Colora¢ao do Cryptosporidium e de Microsporidios, 289 SECAO 4 — PARASITOS DO SANGUE E DOS TECIDOS 12. Métodos e Técnicas para a Identificacao de Parasitos do ‘angue, 299 Geraldo Attilio De Carli Tiana Tasca Consideragdes Gerais, 299 Preparacao dos Esfregagos Sangilineos, 300 Esfregacos Sangitineos Delgados Esfregacos Sangiiineos Espessos (Gota Espessa) Combinagao de Esfr Coloragdo dos Esfregagos S: Coloracdo de Giemsa Coloracdo de Field Colora (cos Sangilineos Delgados e Espessos angilineos, 303 de LeishmanColoragao de Wright Exame Microscépico, 313 Exame de Esfregago Delgado Exame de Esfregago Espesso Coloragdes Derivadas da Hematoxilina Coloragao pela Hematoxilina de Delafield Hematoxilina de Delafield Segundo Ash e Orihel Colorado pela Hematoxilina de Harris Segundo Mallory Coloragao pela Hematoxilina de Mayer Coloragao pela Hematoxilina de Bohmer Coloragao pela Hematoxilina de Carazzi Métodos e Técnicas de Concentracao, 322 Técnica de Knott Método da Membrana-Filtrante Centrifugagao do Sangue (Creme Leucocitario) Método da Centrifugagao Triplice Técnica das Fito-hemaglutininas Centrifugagao do Micro-hematécrito Procedimento de Feilij Procedimento de La Fuente Método da Centrifugagao do Micro-hematécrito QBC* Método de Rohwedder Técnica da Diferenga de Gravidade Método de Budzko e Kierszenbaum 13. Trypanosoma (Schizotrypanum) cruzi, 331 Mario Steindel Edmundo Carlos Grisard Consideragdes Gerais, 331 Métodos Parasitolégicos, 332 Métodos Diretos Métodos Indiretos Métodos Soroligicos, 335 Métodos Moleculares, 337 14. Leishmanioses, 343 Mério Steindel Edmundo Carlos Grisard Consideragdes Gerais, 343 Métodos Parasitolégicos, 344 Obtengaio do Material Esfregago Corado Histopatologia Cultura Inoculagao em Animais Leishmaniose Visceral, 346 Métodos Imunolégicos Intradermorreagaio de Montenegro (IDRM) Reagao de Imunofluorescéncia Indireta (RIFI) e Ensaio Imunoenzimatico (ELISA) Métodos Moleculares Reagao em Cadeia da Polimerase (PCR)15. Plasmodium spp., 351 Cor Jésus Fernandes Fontes Consideragdes Gerais, 351 Transmissdo dos Parasitos da Maldria, 352 Manifestagdes Clinicas, 352 Patogenia da Malaria, 353 Multiplicagao do Parasito e Destruigao dos Eritrécitos Seqilestro dos Eritrécitos Parasitados e Obstrugdo Microvascular Resposta Inflamatéria Aguda com Redugao da Perfusao Tecidual Lesiio Celular Induzida por Complexos Imunes Diagnéstico Laboratorial, 354 Diagnéstico Microscépico Esfregaco Sangilineo Espesso e Delgado Corados pelo Giemsa Morfologia —P. falciparum, P. vivax, P. malariae e P. ovale Solugao de Azul-de-Metileno Fosfatado Determinagio da Densidade Parasitaria Método Semiquantitativo Método Quantitativo Derivado da Avaliag3o Semiquantitativa Método Quantitative Derivado da Contagem de Parasitos e Leucécitos Método Quantitativo Derivado da Area do Esfregago Sangiiineo Espesso com Parasitos Corados Identificagao do P. malariae pelo Esfregago Sangiineo Espesso Pesquisa do Plasmédio em Sangue Corado pelos Fluorocromos Diagnéstico Baseado na Detecgao de Antigenos Circulantes Diagnéstico Baseado na Amplificagio do DNA Parasitirio Automatizag’o Usando Pigmento Hemozoina 16. Babesiose Humana, 365 Silmara Marques Allegretti Rosangela Zacarias Machado Consideracdes Gerais, 365 Métodos Parasitolégicos, 367 Exames Diretos Exames Indiretos Inoculago em Animais Métodos Soroligicos, 369 Reagao de Imunofluorescéneia Indireta (RIFI) Ensaios Imunoenzimaticos (ELISA) Western Blotting (WB) Métodos Moleculares, 369 Reagao em Cadeia da Polimerase (PCR) 17. Angiostrongiliase Abdominal, 373 Omar dos Santos Carvatho Henrique Leonel Lenzi Roberta Lima Caldeira Consideragdes Gerais, 373 Diagnéstico, 374Exame Parasitolégico das Fezes Métodos Imunolégicos Métodos Moleculares Soro do Paciente Vermes Adultos de 4. costaricensis Histopatolégico, 375 18. Filariose de Importancia Médica, 379 Gilberto Fontes Eliana Maria Mauricio da Rocha Consideragdes Gerais, 379 Onchocerca volvulus € Oncocercose, 380 Diagnéstico Clinico Diferencial Diagnéstico Laboratorial Pesquisa de Microfildrias Nodulectomia Exame Oftalmolégico Métodos Sorolégicos Teste de Mazzotti Diagnéstico da Infecgao no Vetor Masonella ozzardi, 383 Diagnéstico Clinico Diagndstico Laboratorial Pesquisa de Microfildrias Esfregago Sangitineo Espesso de Sangue Técnicas de Concentragio Técnica da Filtragao em Membrana de Policarbonato Técnica de Knott Diagnéstico Imunolégico ¢ Molecular Dirofilaria immitis, 388 Diagnéstico Diferencial Diagnéstico Laboratorial Diagnéstico Sorolégico ¢ Molecular Mansonella perstans, 390 Diagnéstico Laboratorial Mansonella streptocerca, 391 Diagnéstico Laboratorial Loa loa, 391 Diagndstico Laboratorial Brugia malayi e Brugia timori, 392 Diagndstico Laboratorial Dracunculus medinensis, 392 Diagnéstico Laboratorial 19. Diagnéstico Laboratorial da Filariose Bancroftiana, 395 Gerusa Dreyer Renato Lins Patricia Dreyer Consideracdes Ge Epidemiologia, 396 395Consideragdes Clinicas, 397 Controle, 399 Diagnéstico de Laboratorio, 399 Pesquisa de Microfiléria ‘Técnicas para Identificagdo da Espécie de Microfiléria Coloragao pela Hematoxilina Segundo Carazzi Periodicidade Teste Provocative com DEC Pesquisa de Verme Adulto Bidpsia Ultra-sonografia Diagndstico Sorolégico Reagdo em Cadeia da Polimerase (PCR) Outros Exames Complementares Contagem Absoluta de Eosinéfilos Exame Parasitolégico das Fezes Sumério de Urina Pesquisa de Linfécitos Contagem de Addis Proteiniria de 24 horas Clearance de Creatinina Linfocintigrafia SECAO 5 — CULTIVO DE PROTOZOARIOS, 419 20. Cultivo de Entamoeba histolytica, 421 Geraldo Attilio De Carli Tiana Tasea Consideragdes Gerais, 421 Meio Trypticase-Yeast Extract-Iron-Serum (TY1-S-33), 422 Meio Trypticase-Yeast Extract-Serum-Gastric Mucin (TYSGM-9), 426 Meio de Balamuth, 432 Meio de Boeck ¢ Drbohlav Locke-Egg-Serum (LES), 433 Meio de Robinson, 434 Cultivo de Amebas de Vida Livre, 439 Geraldo Attilio De Carli Hércules Moura Consideragdies Gerais, 439 Amostras, 440 Cultura em Placa de Agar, 440 Meio de Page (Solugdo Salina para Ameba) Meio Proteose Peptone-Extrato de Levedo-Glicose (PYG) para Acanthamoeba spp., em pH 65 + 0.2 Meio Proteose Peptone-Extrato de Levedo—Glicose (PYG) em pH 6,5 + 0,2 Meio Modificado de Nelson para Naegleria fowleri, 444 Exflagelacdo dos Organismos, 44522, 23. 24. Cultivo de Giardia lamblia, 449 Geraldo Attilio De Carli Tiana Tasca Consideragées Gerais, 449 Meio Zrypticase-Yeast Extract-Iron-Serum (TY1-S-33) Modificado (Biosate-Iron-Serum) (BI-S-33), 450 Meio de Keister (Modificagao do Meio Trypticase-Yeast Extract-Iron-Serum [TY1-S-33]), 452 Cultivo de Trypanosoma cruzi, Trypanosoma rangeli ¢ Leishmania spp.. 455 Méirio Steindel Edmundo Carlos Grisard Consideragdes Gerais, 455 Cepas-Padrao, 456 Reagentes, 456 Meios de Cultura, 457 Meio Liver Infusion Tryptose (LIT) Meio MacNeal, Novy e Nicolle (NNN) Meio Brain Heart Infusion (BHI) Meio de Schneider (Schneider's Insect Medium) Meio Triatomine Artificial Urine (TAU) Cultivo in vitro do Plasmodium falciparum, 465 Cor Jésus Fernandes Fontes Consideragdes Gerais, 465 Meio de Cultura de Trager e Jansen (RPMI 1640) (Cultura em Jarra de Vidro com Chama de Vela), 466 Outros Sistemas de Cultura, 469 Criopreservagao de Isolados de P. falciparum, 470 Técnica de Criopreservagao Descrita por Christofinis e Miller ‘Técnica de Criopreservacao Descrita por Meryman e Hornblower Recomendacdes para Garantir a Qualidade da Cultura de P. falciparum, 471 Cultivo de Trichomonas vaginalis, 473 Geraldo Attilio De Carli Tiana Tasca Consideragdes Gerais, 473 Meios de Cultura, 474 Meio Trypticase-Yeast Extract-Maltose (TYM) Meio Trypticase-Yeast Extract-Maltose (TYM) Modificado por Klass Meio Trypticase-Yeast Extract-Maltose (TYM) Modificado por Kulda e Hollander Meio Simplified-Trypticase-Serum (STS) Meio Cysteine-Peptone-Liver-Maltose (CPLM) Meio de Feinberg e Whittington (FW) Meio Cysteine-Tryptose-Liver-Maltase (CTLM), American Type Culture Collection (ATTC) ne 745 Meio Semi-Sélido de Lowe para Diagnéstico e Transporte Meio Connaught Medical Research Laboratory 1066 (CMRL Modificado) Procedimentos de Inoculagdo em Meios de Cultura InPouch TV™ Criopreservagio, 48626. 21. Cultivo de Trichomonas tenax e Trichomonas hominis, 491 Geraldo Auilio De Carli Tiana Tasca Consideragdes Gerais, 491 Trichomonas tenax, 492 Meio TTYS-CEEC,, (Tiyptose-Trypticase-Yeast Extract-Serum Chick Embryo Extract, Crude 25%) Trichomonas hominis, 495 Cultivo in vitro de Microsporidios de Importancia Clinica, 497 Marisa Porta Miche Hirschfeld Maria Anete Lallo Consideragdes Gerais, 497 Cultivo de Microsporidios em Culturas Celulares, 499 Cultura de Células Processamento das Amostras Biolégicas ¢ Inoculagao nas Culturas Celulares Metodologia das Culturas Celulares Inoculadas Concentracdo e Purificagdo de Esporos, 504 Armazenamento e Transporte das Amostras, 504 Criopreservagao, 504 28. Cultivo Celular de Cryptosporidium spp., 509 Regina Maura Bueno Franco Ana Maria Aparecida Guaraldo Maria Helena Seabra Soares de Britto Consideragdes Gerais, 509 Requerimentos Necessarios para 0 Cultivo Celular de Cryptosporidium, 512 Isolados do Parasito Escolha da Linhagem da Célula Hospedeira Definigao da Dose e Tipo de Inéculo Infecgao In Vitro Reprodugdo do Ciclo Biolégico do Parasito Visualizagao e Quantificagao dos Parasitos em Desenvolvimento Concentragao e Purificagao dos Oocistos, 513 Técnicas de Purificagao dos Oocistos, 513 Cultura e Infecgao das Células Hospedeiras, S14 Técnica de Excistagdo dos Oocistos para Obtengao de Esporozoitos Livres, 517 Cultura € Infeceao das Células MDBK, 517 Controle de Qualidade, 519 Visualizacdo e Quantificagao de Parasitos nos Sistemas de Cultivo In Vitro, 519 SECAO 6 — IMUNODIAGNOSTICO, 523 29. Imunoensaios, 525, Ana Ligia Bender Consideragdes Gerais, 525 Reagdes de Precipitagao, 525 Imunodifusao Radial Dupla (IDRD) Imunodifusiio Radial Simples (IDRS) Técnicas Envolvendo Separagao Eletroforética, 527, Eletroforese de Proteinas30. Imunoeletroforese Imunofixagao Nefelometria, 528 Turbidimetria, 528 Reagao de Aglutinagao, 528 Reagdo de Aglutinagao Direta Reagao de Aglutinagao Passiva ou Indireta Reagiio de Hemaglutinago, 529 Reagao de Inibigdo da Hemaglutinagiio, 530 Teste de Aglutinagao do Latex, 530 Teste de Aglutinagao de Cristais de Colesterol, 530 Coaglutinagao, $30 Ensaios Liticos, 530 Reagao de Fixagao do Complemento Ensaio de Neutralizagao Ensaios com Marcadores Fluorescentes, 531 Testes Fluorescentes Homogéneos de Modulagaio Direta Testes Fluorescentes Homogéneos de Modulacdo Indireta Testes Fluorescentes Homogéneos de Modulacao Dupla Reago de Imunofluorescéneia Direta (RIFD) Reagao de Imunofluorescéncia Indireta (RIFT) Sistema Avidina-Biotina Citometria de Fluxo, 533 Ensaio de Citometria de Fluxo baseado em Particulas de Multiplex Ensaios de Imunoistoquimica, 533 Imunoperoxidase (IP) Imunocitoquimica (ICQ) Ensaios com Marcadores Radioativos, 534 Radioimunoensaio (RIE) Radioallergosorbent Test (RAST) Ensaios de Quimioluminescéncia (QL), 534 Eletroquimioluminescéneia (ECLIA), 534 Ensaios com Marcadores Enzimaticos, 535 Enzimaimunoensdio (IE) Enzyme Multiplied Immunoassay Technique (EMIT) Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ELISA com Captura de IgM (Cap-IgM) Enzimaimunoensaio com Microparticulas (MEIA), ‘Técnica de Imunoeletrotransferéncia, 536 Western Bloting (WB) Diagndstico Imunolégico das Parasitoses, 539 Adelaide José Vaz Consideragdes Gerais, 539 Imunologia das Parasitoses, 539 Fenémenos Imunolégicos, 540 Modelos de Estudo, 541 Diagnéstico das Parasitoses, 541 Métodos DiretosBiologia Molecular Aplicada as Infecgdes Parasitarias Métodos Indiretos Reagilo Cruzada e Reagdo Inespecifica, 543 Antigenos, Imunoglobulinas/Anticorpos Testes Imunolégicos, 546 Principio de Alguns Testes Imunol6gicos, 546 Precipitagdo Aglutinagao Reagao de Fixagao do Complemento ‘Métodos Utilizando Ligantes, 549 Imunofluorescéneia Imunoenzimaticos Imunoblotting ou Western Blotting Radioimunoensaio (RIE), Quimioluminescéncia e Outros Imunocromatografia ou Testes Rapidos, 552 Parimetros dos Testes Imunolégicos, 553, Simplicidade e Custo dos Testes Imunologicos, $54 Testes Imunolégicos nas Infecgdes Parasitarias, 554 Teste de Hipersensibilidade Imediata, 556 Teste de Hipersensibilidade Tardia, 556 Outros Testes de Imunidade Celular, 557 Mareadores Imunologicos no Diagnéstico de Algumas Infecgdes Parasitarias, 557 Protozodrios Helmintos _ SECAO 7— BIOLOGIA MOLECULAR, 577 31. Métodos Moleculares no Diagnéstico das Parasitoses Humanas, 579 Edmundo Carlos Grisard Mario Steindel Consideragdes Gerais, 579 Reagiio em Cadeia da Polimerase (PCR), 580, Extragdo de DNA Dosagem de DNA Iniciadores Deoxinucleotideos Trifosfatados Tampao Taq DNA Polimerase Termocicladores Reagdo Visualizagao dos Resultados, 585 Aplicagdes Praticas, 586 Genes de Interesse, 587 Cuidados com as Contaminagdes, 587 Consideragdes Finais, 587SECAO 8 — IDENTIFICAGAO HISTOLOGICA, 591 32. Técnicas de Rotina em Histologia, 593 Emilio Antonio Jeckel-Neto Consideragdes Gerais, 593 Fixagao, 594 Protocolo Geral de Preparo de Laminas Histologicas Tipos de Fixagao Fixadores, 595 Solugdes Fixadoras de Rotina Processamento de Tecidos, 596 Congelagao, 597 Inclusdo em Meio Sélido, 597 Protocolo Basico para Incluséio em Parafina Cortes, 601 Coloragao, 604 Corantes Protocolo Basico para Coloragao com Hematoxilina e Eosina Montagem, 606 Protocolo para Montagem de Léminas Permanentes Recomendagdes Gerais, 607 SECAO 9 — CONTROLE DE QUALIDADE E BIOSSEGURANGA, 609 33. Controle de Qualidade em Parasitologia Clinica, 611 Elenice Messias do Nascimento Goncalves Vera Liicia Pagliusi Castitho Consideragdes Gerais, 611 Sistema de Qualidade, 612 Gestio da Qualidade do Laboratério e Sistema de Garantia da Qualidade, 614 Laboratério de Parasitologia Clinica, 615 Controle de Qualidade, 620 Controle de Qualidade Externo (CQE Controle de Qualidade Interno (CQI) 34. Manutengao e Controle de Qualidade de Equipamentos, 631 Tiana Tasca Silvana de Almeida Consideragdes Gerais, 631 Autoclave, 632 Banho de Agua, 633 Balanga, 634 Cabines de Seguranga Biolégica, 634 Centrifuga, 635 Geladeira, 637 Freezer, 638 Estufas Microbiolégicas, 639 Estufa de Esterilizagao, 640 Jarras e Bolsas para Incubagdio em Atmosferas Especiais, 64035. 36. Microscépio de Luz, 641 ‘Termémetros, 642 Pipetas, 643 Pipetas Graduadas Pipetas Automaticas Termocicladores, 647 Aparato para Eletroforese, 647 Cuba e Pentes para Confecgdo de Gel de Agarose Placas, Pentes e Espacadores para Confecgao de Gel de Acrilamida ‘Cubas para Eletroforese Vertical e Horizontal Fonte para Eletroforese Transiluminador, 649 Biosseguranga em Laboratérios de Parasitologia, 651 Marco Fabio Mastroeni Consideragdes Gerais, 651 Biosseguranga: Conceito e Importancia, 652 Perigo e Risco, 653 Niveis de Biosseguranga, 654 Nivel 1 de Biosseguranga (NB-1) Nivel 2 de Biosseguranga (NB-2) Nivel 3 de Biosseguranga (NB-3) Nivel 4 de Biosseguranga (NB-4) Laboratérios Clinicos, 655 Equipamentos de Protegao, 655 Cabines de Seguranga Biolégica (CSB), 656 Cabines de Seguranga Biolégica Classe I Cabines de Seguranga Biologica Classe I Cabines de Seguranga Biologica Classe III Classificagaio dos Microrganismos Segundo o Risco Apresentado, 657 Classe de Risco 1 Classe de Risco 2 Classe de Risco 3 Classe de Risco 4 Parasitos Associados a Acidentes de Laboratério, 659 Protozoarios do Sangue e dos Tecidos Protozodrios Intestinais Nematéides Cestéides Trematédeos Boas Priticas de Laboratorio, 664 Consideracdes Finais, 666 SECAO 10 — IDENTIFICACAO E DIAGNOSTICO, 669 A Microscopia como um Instrumento de Estudo na Parasitologia, 671 Sebastido Roberto Taboga Patricia Simone Leite Vilamaior Consideragdes Gerais, 671 Aspectos Fundamentais da Microscopia de Luz, 67231. 38. Microscopia de Contraste de Fase ¢ de Contraste Interferencial, 674 Microscopia de Polarizagao, 675 Microscopia de Campo Escuro, 676 Microscopia de Fluoreseéncia, 677 Microscopia de Varredura Confocal a Laser, 678 Aplicagdes da Microscopia de Luz nas Andlises Quantitativas e de Padrdes Texturais, 679 Microscopia Eletrénica, 679 Microscopia Eletrénica de Transmissao Microscopia Eletrénica de Alta Voltagem Microscopia Eletrénica de Varredura Microscopia de Luz, 685 Suzana Bencke Amato Consideragdes Gerais, 685 Componentes do Microscépico de Luz, 686 Fonte de Luz Condensador Poder de Resolugao Mesa ou Platina Objetivas Abertura Numérica das Objetivas Objetivas de Imersdo A Importancia do Uso de Laminula com Espessura Correta, 688 Oculares, 689 Aumento Final Dado pelo Microscépio, 689 Huminagao Kéhler, 689 Morfometria Feita com Mierémetro Ocular, 690 Blastocystis hominis, 693 Tiana Tasca Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 693 Diagnéstico de Laboratorio, 695 Observagdes Pneumocystis jirovecii, WM. Cecilia Bittencourt Severo Lutz Carlos Severo Consideracdes Gerais, 701 Imunidade contra Pneumocystis, 702 Abordagem Diagnéstica, 702 Colheita do Espécime Clinico Diagnéstico Etiolégico Outras Técnicas de Diagnéstico, 704 Método Rapido de Coloragao pela Prata, 70440. Mifases de Importancia Médica — Moseas e Entomologia Forense, 709 Aricio Xavier Linhares Patricia Jacqueline Thyssen Consideragdes Gerais, 709 Classificagdo das Miiases, 710 Dipteros Cujas Larvas Provocam N ses Primarias, Obrigatérias ou Especificas Dipteros Cujas Larvas Provocam Milases Secundirias, Facultativas, Semi-especificas ou Ocasionais, Dipteros Cujas Larvas Podem Provocar Pseudomiiases ou Miiases Acidentais Importancia, 711 Sistemética e Caracteristicas Gerais de Dipteros Associados a Miiases, 712 Caracteristicas Gerais, Biologia e Ecologia dos Principais Agentes Causadores de Miiases, 714 Familia Calliphoridae Familia Drosophilidae Familia Fannidae Familia Muscidae Familia Oestridae Familia Piophilidae Familia Psychodidae Familia Sarcophagidae Entomologia Forense ~ Breve Hist6rico, 724 Aplicagdes da Entomologia Forense, 724 Estimativa do Intervalo Pés-morte, 725 0 Calculo do Intervalo Pés-morte, 726 41. Preparo de Amostras Biolégicas para Microscopia Eletronica de Varredura, 731 Tiana Tasca Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 731 Preparagao das Amostras, 731 Fixagaio Quimica para Microscopia Eletrénica Imagens de Amostras Biolégicas Obtidas Com 0 Uso do MEV 42, Diagnéstico e Identificacao de Parasitos, 743 Geraldo Attilio De Carli Tiana Tasca Consideragdes Gerais, 743 Protozoiirios Intestinais, 743 Amebas Flagelados Ciliados Coceidios Microsporidios Protozoarios com Diferentes Localizagdes, 748 Amebas Flagelados Coceidios Microsporidios Protozodrios do Sangue e dos Tecidos, 748Helmintos Intestinais, 749 Nematéides Intestinais Nematéides dos Tecidos Nematéides do Sangue e dos Tecidos Cestéides Intestinais Cestdides dos Tecidos ‘Trematédeos Diagnéstico dos Protozoarios, 752 Amebas Intestinais, 753 Entamoeba histolytica ¢ Entamoeba dispar Entamoeba coli Entamoeba hartmanni Endolimax nana Jodamoeba biitschlit Blastocystis hominis Entamoeba polecki Ameba com Diferente Localizago, 762 Entamoeba gingivalis Flagelados Intestinais, 762 Chilomastix mesnili Giardia lamblia Enteromonas hominis Retortamonas intestinalis Dientamoeba fragilis Ciliados Intestinais, 766 Balantidium coli Coceidios Intestinais, 767 Cryptosporidium parvum Cyelospora cavetanensis Isospora belli Sarcocystis spp, Microsporidios, 771 Trichomonas spp., 773 Trichomonas vaginalis Trichomonas hominis Trichomonas tenax Protozoarios do Sangue e dos Tecidos, 775 Toxoplasma gondii Trypanosoma cruzi Leishmania spp. Critérios para a Differenciago das Espé: Esfregago Delgado Esfregago Espesso Plasmodium falciparum Plasmodium vivax Plasmodium malariae Plasmodium ovale Diagnéstico dos Helmintos, 784 Nematéides Intestinais, 786 Ascaris lumbricoides Trichuris trichiura do Género Plasmodium, 778Capillaria philippinensis Enterobius vermicularis Ancylostoma duodenale Necator americanus Strongyloides stercoralis Trychostrongylus spp. Nematdides dos Tecidos, 798 Trichinella spiralis Toxocara canis ¢ Toxocara cati Angiostrongylus costaricensis ‘Nematéides do Sangue e dos Tecidos, 800 Wuchereia bancrofti Mansonella ozzardi Onchocerca volvulus Cestéides Intestinais, 802 Taenia solium e Taenia saginata Hymenolepis nana Hymenolepis diminuta Diphyllobotrium latum Dipylidium caninum Cestéides dos Tecidos (Forma Larval), 809 Echinococcus granulosus Taenia solium (Forma Larval) ‘Trematédeos Intestinais, 811 Fasciolopsis buski Metagonimus yokogawai ‘Trematédeos do Figado e Pulmdes, 812 Clonorchis Opisthorchis viverrini Dicrocoelium dendriticum Fasciola hepatica Fasciola gigantica Paragonimus westermani Trematédeos do Sangue, Figado, Sistema Urindrio e Pulmdes, 817 Schistosoma haematobium Schistosoma japonicum Schistosoma mekongi Schistosoma mansoni Schistosoma intercalatum Infecgdes Parasitarias Nao Usuais ~ Trematédeo do Trato Respiratorio Superior, 820 Mammomonogamus laryngeous Pranchas Coloridas dos Estagios de Diagnéstico da Parasitologia Humana, 824 Parasitos Humanos de Importancia Clinica, 832 Protozoirios Nematdides Cestéides ‘Trematédeos Artrépodes, 835 Piothos Pulgas Sarcoptes scabei Dermatobia hominisSEGAO 11 - APENDICE, 841 Apéndice 1 — Solugdes, Corantes, Reagentes, Fixadores, 843 Geraldo Attilio De Carli Consideragdes Gerais, 843 Anticoagulantes, 844 Solucao de Alsever Solugdes Acido-Citrato-Dextrose (ACD) ¢ Citrato-Fosfato-Dextrose (CPD) Solugdio de Citrato de Sédio Solucao de Heparina Corantes, 846 Alaranjado de Acridina Corante de Burrow Eosina Salina Fucsina Acida-Fast Green Hematoxilina Acida de Ehrlich Corante de Sargeaunt Coloragdes Temporarias para Protozoirios Corante de Thonson Preparagdes Permanentes para Ovos ¢ Larvas de Helmintos, 849 Fixadores/Preservadores, 851 Fixador de BIE Liquido de Bouin ou Picroformaldeido Fixador de Carnoy Alcool Formaldeido-Acido Acético (AFA) Alcool Glicerinado Fixador de Looss Formaldeido Fixador de Hollande Fixador de Gilson Fixador de Travassos Fixador de Zenker Solugdo de Bayer Meios de Montagem, 855 Gelatina Glicerinada Meio de Hoyer Meio de Montagem de Grey e Wess Solugdes Salinas Balanceadas, 856 Solugdes de Hanks (HBSS) e Farle (EBSS) Solugdes Tamponadas, 857 Massa Molecular Soluc&o Molar (M) Solucdo Tampao de Fosfatos (Sorensen) Solucao Tampao de Fosfatos 0,2 M Tampao PBS (Phosphate Buffer Solution) em pH 7,2¢ 2 — Livros, Atlas, Abstracts ¢ Periddicos, 863, Attilio De Carli Parasitologia Geral, Parasitologia Clinica e Medicina Tropical, 863 Livros Atlas: Abstracts Periddicos lice 3 — Leucécitos Fecais: Técnica de Reconhecimento e Significagao Clinica, 873 ni Antonio Bemvenuti do Attilio De Carli Etiopatogenia, 873 Exame Microscépico, 874 Colheita das fezes A Correlagaio Clinica, 876 lice Remissivo, 879