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PROGRAMA EQ-ANP

Processamento, Gesto e Meio Ambiente na Indstria


do Petrleo e Gs Natural

Processo de Landfarming para Tratamento


de Resduos Oleosos

Leonardo Jordo da Silva

Dissertao de Mestrado
Orientadores

Profa. Francisca Pessa de Frana, D.Sc.


Fernando Jorge Santos de Oliveira, D.Sc.

Junho de 2009
SILVA, L. J.

Ficha catalogrfica

Silva, Leonardo Jordo da.


Processo de Landfarming para Tratamento de Resduos Oleosos
Leonardo Jordo da Silva. Rio de Janeiro: UFRJ/EQ, 2009.
xvi, 91 p.; il.
Dissertao (Mestrado) Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola de Qumica,
2009. Orientadores: Francisca Pessa de Frana / Fernando Jorge Santos de Oliveira.
1. Landfarming. 2. Biorremediao. 3. Resduos. 4.Dissertao. (Mestrado UFRJ/EQ).
5. Francisca Pessa de Frana / Fernando Jorge Santos de Oliveira. I. Ttulo.

iv
SILVA, L. J.

Dedicatria

Dedico este trabalho aos meus pais pela idealizao


de todos os momentos de minha vida.

v
SILVA, L. J.

No meio da dificuldade encontra-se a oportunidade.

Albert Einstein

vi
SILVA, L. J.

AGRADECIMENTOS

Este trabalho foi desenvolvido no Laboratrio E-109 do Departamento de

Engenharia Bioqumica - Escola de Qumica da Universidade Federal do Rio de Janeiro.

Aos meus pais Luiz Carlos Baiense da Silva e Helena Maria Jordo Silva,

verdadeiros amigos e companheiros de todos os momentos. Aos meus irmos Flvio e

Gustavo fundamentos para tudo o mais na vida. Andrea Ribeiro pelos momentos de

compreenso e carinho.

Profa. Francisca Pessa de Frana, pela orientao sbia e experiente

conferida para o desenvolvimento de todas as etapas deste trabalho. Agradeo, tambm,

a disponibilidade de infra-estrutura.

Ao D.Sc. Fernando Oliveira, pela orientao e colaborao indispensveis para o

desenvolvimento deste trabalho. Agradeo, tambm, pelo exemplo de sabedoria e

perseverana.

Ao M.Sc. Aike Costa da Silva pelos conselhos e pela amizade construda.

Aos amigos (Camila Gonzalez, Diogo Dias, Rafael Bittencourt, Ulrich, Jamile,

Flvia e Paulo Cesar) do Laboratrio E-109 pelos bons momentos.

Refinaria Isaac Sabb (REMAN-PETROBRAS) pelo suporte logstico e

operacional. Aos engenheiros Antonio Lindolpho de Lima, Carlos Enrique e Ivan

Marquezini da REMAN pela disponibilidade de infra-estrutura.

Agncia Nacional do Petrleo ANP e Financiadora de Estudos e Projetos

FINEP por meio do Programa de Recursos Humanos da ANP para o Setor de

Petrleo e Gs PRH-ANP/MCT, em particular ao PRH 13, Escola de Qumica -

Processamento, Gesto e Meio Ambiente na Indstria do Petrleo e Gs Natural pelo

apoio financeiro.

Ao CNPq, FAPERJ e CAPES pelo auxlio financeiro.

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SILVA, L. J.

Resumo de Dissertao de Mestrado apresentada ao Curso de Ps-Graduao em


Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos da Escola de Qumica/UFRJ como
parte dos requisitos necessrios para obteno do grau de Mestre em Cincias, com
nfase na rea de Petrleo e Gs Natural.

PROCESSO DE LANDFARMING PARA TRATAMENTO


DE RESDUOS OLEOSOS

Leonardo Jordo da Silva


Junho, 2009

Orientadores: Profa. Francisca Pessoa de Frana, D.Sc.


Fernando Jorge Santos de Oliveira, D.Sc.

As diversas atividades da indstria do petrleo (perfurao, produo, transporte,


processamento e distribuio) geram considerveis quantidades de resduos slidos,
contendo diversas classes de hidrocarbonetos. A disposio desses resduos no meio
ambiente pode acarretar srios problemas ambientais. Segundo a Resoluo n. 001/86
do CONAMA, impacto ambiental definido como a alterao das propriedades fsico-
qumicas e biolgicas do meio. Portanto, o tratamento desses resduos essencial para
promover uma gesto sustentvel de explorao e aproveitamento dos recursos
minerais. As alternativas de tratamento so variadas, incluindo processos fsico-
qumicos e biolgicos, com objetivo de remover poluentes orgnicos a concentraes
que sejam indetectveis ou, se detectveis, a concentraes inferiores aos limites
estabelecidos como seguros ou aceitveis pelas legislaes. Entre as opes
biotecnolgicas, o processo de landfarming apresenta um destaque considervel em
funo do baixo custo operacional e disponibilidade de tratamento de grandes volumes
de resduos oleosos. Fundamenta-se no potencial de organismos e/ou dos seus produtos
em auxiliar na remoo de hidrocarbonetos, dispostos na camada reativa do solo. Este
trabalho avalia o tratamento de resduos oleosos em uma rea de 1.000 m2 de um
landfarming. Para tal foram empregadas metodologias operacionais de bioestimulao
atravs de umidificao, fertilizao e aerao. Paralelamente foi isolada uma rea
denominada de clula controle. Para avaliar o desempenho do bioprocesso foram
monitorados parmetros relevantes, tais como: pH, umidade, teores de carbono orgnico
total, fsforo, nitrognio, elementos qumicos (Sb, As, Ba, Be, Cd, Pb, Cu, Cr, Fe, Mn,
Hg, Ni, Ag, Se, V e Zn), hidrocarbonetos totais do petrleo (HTP); hidrocarbonetos
policclicos aromticos (HPA); bactrias aerbias heterotrficas (BAE), fungos
filamentosos e bactrias anaerbias heterotrficas (BAN). Os resultados obtidos, em
225 dias de tratamento, foram promissores considerando o tempo e a concentrao
inicial de contaminantes. O teor de HTP decresceu 89,6% no solo tratado com uma
produtividade mdia de degradao de 25,8 mg.Kg-1.dia-1, enquanto o solo controle
apresentou 22,4% de degradao (6,5 mg.Kg-1.dia-1). A concentrao de HPA reduziu
em 88,7% (0,13 mg.Kg-1.dia-1) no solo tratado e no controle a degradao atingiu 25,8%
(0,04 mg.Kg-1.dia-1). Assim, as tcnicas de bioestimulao como fertilizao,
umidificao e aerao foram fundamentais para o aumento da biodegradao de
hidrocarbonetos. A populao de BAE, fungos filamentosos e BAN apresentou valor
mdio de 1,4x107, 2,6x105 UFC.g-1 e 2,2x106 Cels.g-1, respectivamente. O teste de
ecotoxicidade no solo tratado foi um indicativo da eficincia do bioprocesso que pode
ser comprovado pela degradao de compostos policclicos aromticos. Assim foi
possvel tratar aproximadamente 387 toneladas de resduo slido em 7 meses.

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SILVA, L. J.

Abstract of a Thesis presented to Curso de Ps-Graduao em Tecnologia de Processos


Qumicos e Bioqumicos - EQ/UFRJ as partial fulfillment of the requirements for the
degree of Master of Science with emphasis on Petroleum and Natural Gas.

LANDFARMING PROCESS FOR TREATMENT


OF OILY SLUDGES
Leonardo Jordo da Silva
June, 2009

Supervisors: Profa. Francisca Pessa de Frana, D.Sc.


Fernando Jorge Santos de Oliveira, D.Sc.

Various activities of the oil industry such as, drilling, production, processing and
distribution generate significant volumes of solid waste, containing various classes of
hydrocarbons. Provision of such wastes in the environment may lead to serious
environmental problems. According to Resolution No. 001/86 of CONAMA,
environmental impact is defined as the change of physico-chemical and biological
characteristics of the area. Therefore, treatment of wastes is essential to promote
sustainable management of exploration and exploitation of mineral resources.
Alternatives of treatment are varied processes including physical, chemical and
biological agents in order to remove organic pollutants at concentrations that are
undetectable or, if detectable, the concentrations below the limits established as well as
acceptable by the laws. Among biotechnologies, process of landfarming presents a
considerable emphasis on the basis of the low operational cost, and availability of
treatment of large volumes of oily wastes. Landfarming is based on the potential of
organisms and/or their products to assist in the removal of hydrocarbons, reactive layer
in the prepared soil. This work aims the treatment of oily wastes at an area of 1,000 m2.
Methodologies were used for this operational biostimulation through humidification,
fertilization and aeration. Along side was an isolated area known as ground control. To
evaluate the performance of the bioprocess were monitored relevant parameters such as
pH, humidity, levels of total organic carbon, phosphorus, nitrogen, chemical elements
(Sb, As, Ba, Be, Cd, Pb, Cu, Cr, Fe, Mn, Hg, Ni, Ag, Se, V e Zn), total petroleum
hydrocarbons (TPH), polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH), heterotrophic aerobic
bacteria (BAE), filamentous fungi and heterotrophic anaerobic bacteria (BAN) during
225 days. Results of work were promising by considering the time and initial
concentration of contaminants. Content of TPH decreased 89.6% (25,8 mg.Kg-1.dia-1 of
degradation) in the treated soil, while the control soil was negligible degradation of the
order of 22.4% (6,5 mg.Kg-1.dia-1). The concentration of PAH decreased 88.7%
(0,13mg.Kg-1.dia-1) in the treated soil and control the degradation reached 25.8%
(0,04mg.Kg-1.dia-1). Thus, the techniques of biostimulation, i.e. humidification,
fertilization and aeration were essential for increasing biodegradation of hydrocarbons.
Population of BAE, fungi and BAN showed the average value of 1.4x107CFU.g-1,
2.6x105 CFU.g-1 and 2.2x106 Cels.g-1, respectively. The test of ecotoxicity in treated soil
was an indication of efficiency of the process can be proved by the degradation of
polycyclic aromatic. Thus it was possible of treated about 387 tonnes of solid waste in 7
months.

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SILVA, L. J.

NDICE DE FIGURAS

Figura 2.1: Matriz energtica mundial ... 5


Figura 2.2: Estrutura qumica de alguns compostos presentes no petrleo ....... 6
Figura 2.3: Sistema de Landfarming Perspectiva superior ............................. 19
Figura 2.4: Via metablica de degradao de hidrocarbonetos lineares ........... 24
Figura 2.5: Rota de biodegradao do ciclohexano por Pseudomonas sp. e
Nocardia sp. ....................................................................................................... 25
Figura 2.6: Estrutura qumica de alguns HPA ................................................... 26
Figura 2.7: Via degradativa dos hidrocarbonetos aromticos e policclicos
aromticos .......................................................................................................... 27
Figura 3.1: Foto de satlite do Landfarming ................................................................ 37
Figura 3.2: Identificao das clulas do landfarming ........................................ 38
Figura 3.3: Sistema de umidificao do solo ..................................................... 39
Figura 3.4: Sistema de aerao do solo ............................................................. 40
Figura 4.1: Aspecto inicial do solo submetido a etapa de revolvimento ........... 48
Figura 4.2: Aparncia do solo aps adequao do sistema ............................... 49
Figura 4.3: Curva granulomtrica do solo ......................................................... 51
Figura 4.4: Perfil da umidade nas clulas tratadas e controle ............................ 52
Figura 4.5: Perfil dos valores de pH das clulas tratadas e controle ................. 54
Figura 4.6: Perfil de Carbono Orgnico Total (COT) nas clulas tratadas ....... 58
Figura 4.7: Perfil de Fsforo (P) e Nitrognio (N) nas clulas tratadas e
controle .............................................................................................................. 59
Figura 4.8: Relaes C:N e C:P nas clulas tratadas e controle ........................ 60
Figura 4.9: Degradao de hidrocarbonetos totais do petrleo (HTP) nos
solos tratados e controle ..................................................................................... 62
Figura 4.10: Produtividade de degradao de hidrocarbonetos totais do
petrleo .............................................................................................................. 63
Figura 4.11: Degradao de hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPA)
nos solos tratados e controle .............................................................................. 65
Figura 4.12: Produtividade de degradao de hidrocarbonetos policclicos
aromticos .......................................................................................................... 67

x
SILVA, L. J.

Figura 4.13: Degradao dos 16 hidrocarbonetos policclicos aromticos


segundo a USEPA .............................................................................................. 68
Figura 4.14: Quantificaes de microrganismos nos solos tratados e controle
durante o processo de landfarming .................................................................... 72
Figura 4.15: Microscopia do solo em preparao a fresco ................................ 74
Figura 4.16: Microscopia de preparaes coradas pelo mtodo de Gram ......... 75
Figura 4.17: Microscopia de preparaes coradas pelo mtodo de Gram de
microrganismos crescidos em meio nutriente .................................................... 75

xi
SILVA, L. J.

NDICE DE TABELAS

Tabela 2.1: Resduos perigosos e fontes geradoras de hidrocarbonetos ............ 8


Tabela 2.2: Vantagens e desvantagens do processo landfarming ...................... 17
Tabela 2.3: Distribuio da populao microbiana em solos e gua
subterrnea ......................................................................................................... 20
Tabela 2.4: Gneros microbianos hidrocarbonoclsticos .................................. 22
Tabela 2.5: Relao entre a forma de respirao microbiana, aceptores de
eltrons e potencial redox .................................................................................. 30
Tabela 3.1: Composio do meio gar Nutriente ............................................. 45
Tabela 3.2: Composio do meio Sabouraud .................................................... 45
Tabela 3.3: Composio da Soluo Redutora .................................................. 46
Tabela 3.4: Composio do meio Fluido ao Tioglicolato ................................. 46
Tabela 4.1: Comparativo dos valores de interveno e de referncia de
qualidade com os resultados obtidos ................................................................. 55
Tabela 4.2: Concentrao de elementos qumicos no solo tratado .................... 56
Tabela 4.3: Relao entre nmero de anis benznicos do HPA e respectiva
degradao ......................................................................................................... 70
Tabela 4.4: Organismos vivos no ensaio de ecotoxicologia .............................. 80

xii
SILVA, L. J.

LISTA DE SIGLAS

ABNT: Associao Brasileira de Normas Tcnicas

ANP: Agncia Nacional do Petrleo

API: American Petroleum Institute

BAE: Bactrias Aerbias Heterotrficas

BAN: Bactrias Anaerbias Heterotrficas

CESTEB: Companhia de Tecnologia de Saneamento Ambiental do Estado de So Paulo

CONAMA: Conselho Nacional de Meio Ambiente

COT: Carbono Orgnico Total

EPI: Equipamentos de Proteo Individual

EQ: Escola de Qumica

HPA: Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos

HTP: Hidrocarbonetos Totais do Petrleo

MMA: Ministrio do Meio Ambiente

MME: Ministrio de Minas e Energia

OECD: Organization for Economic Cooperation and Development

PCB: Bifenilas Policloradas

PETROBRAS: Petrleo Brasileiro S.A.

UFC: Unidades Formadoras de Colnias

UFRJ: Universidade Federal do Rio de Janeiro

USEPA: United States Environmental Protection Agency

VOC: Compostos Orgnicos Volteis

xiii
SILVA, L. J.

SUMRIO

NDICE DE FIGURAS .................................................................................... x


NDICE DE TABELAS .................................................................................... xii
LISTA DE SIGLAS .......................................................................................... xiii
CAPTULO 1: INTRODUO ...................................................................... 1
1.1 Consideraes Gerais ............................................................................. 1
1.2 Objetivos ................................................................................................ 3
1.2.1 Objetivo Geral ............................................................................... 3
1.2.2 Objetivos Especficos .................................................................... 3
CAPTULO 2: REVISO BIBLIOGRFICA .............................................. 4
2.1 O Petrleo .............................................................................................. 4
2.1.1 Origem e Aspectos Gerais ........................................................... 4
2.1.2 Composio Qumica do Petrleo ............................................... 5
2.1.3 Atividades Petrolferas relacionadas a Resduos Slidos ............ 7
2.2 Processos de Tratamento de Resduos Slidos ...................................... 9
2.3 Biorremediao de reas Contaminadas com Resduos Slidos .......... 10
2.3.1 Tecnologias de Biorremediao In Situ ....................................... 12
2.3.2 Tecnologias de Biorremediao Ex Situ ...................................... 13
2.3.2.1 Landfarming ........................................................................ 13
2.3.2.2 Biopilhas ............................................................................. 13
2.3.2.3 Compostagem ...................................................................... 14
2.3.2.4 Biorreatores ......................................................................... 15
2.4 Processo de Landfarming ....................................................................... 15
2.4.1 Histrico e Aspectos Gerais ......................................................... 15
2.4.2 Metodologias de Construo e Operao de Landfarming .......... 18
2.5 Microrganismos Envolvidos em Processos de Biorremediao ............ 19
2.5.1 Mecanismos de Biodegradao de Hidrocarbonetos ................... 23
2.5.1.1 Hidrocarbonetos Alifticos Lineares e Ramificados .......... 23
2.3.4.2 Hidrocarbonetos Cclicos .................................................... 25
2.3.4.3 Hidrocarbonetos Aromticos .............................................. 25
2.6 Fatores que influenciam a Biodegradao ............................................ 28
2.6.1 Propriedades Fsico-qumicas do Substrato e Adaptao
Microbiana ...................................................................................... 28

xiv
SILVA, L. J.

2.6.2 Aceptores de Eltrons ................................................................. 29


2.6.3 Teor de Umidade ........................................................................ 31
2.6.4 Temperatura ................................................................................ 31
2.6.5 pH ............................................................................................... 32
2.6.6 Nutrientes .................................................................................... 33
2.6.7 Concentrao de Microrganismos Degradadores de
Hidrocarbonetos ................................................................................... 34
2.6.8 Biodisponibilidade do Contaminante ......................................... 35
CAPTULO 3: METODOLOGIA .................................................................. 37
3.1 Metodologias Operacionais ................................................................... 37
3.2 Amostragens do Solo ............................................................................ 40
3.3 Anlises Fsicas ...................................................................................... 41
3.3.1 Umidade ....................................................................................... 41
3.3.2 pH ................................................................................................. 41
3.3.3 Granulometria .............................................................................. 41
3.4 Anlises Qumicas ................................................................................. 42
3.4.1 Teores de Carbono Orgnico Total (COT), Nitrognio e
Fsforo .................................................................................................. 42
3.4.2 Hidrocarbonetos Totais do Petrleo (HTP) ................................. 43
3.4.3 Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA) ...................... 43
3.4.4 Elementos Qumicos .................................................................... 43
3.5 Anlises Biolgicas ................................................................................ 44
3.5.1 Quantificao de Microrganismos ............................................... 44
3.5.1.1 Bactrias Aerbias Heterotrficas (BAE) ........................... 44
3.5.1.2 Fungos Filamentosos ........................................................... 45
3.5.1.3 Bactrias Anaerbias Heterotrficas (BAN) ....................... 46
3.5.2 Avaliao Ecotoxicolgica .......................................................... 47
CAPTULO 4: RESULTADOS E DISCUSSO ........................................... 48
4.1 Condicionamento do Landfarming ........................................................ 48
4.2 Determinaes Fsico-Qumicas ............................................................ 51
4.2.1 Curva Granulomtrica .................................................................. 51
4.2.2 Umidade e pH .............................................................................. 52
4.2.3 Elementos Qumicos .................................................................... 55

xv
SILVA, L. J.

4.2.4 Nutrientes: Fsforo (P), Nitrognio (N) e Carbono Orgnico


Total (COT) .......................................................................................... 58
4.2.5 Degradao de Hidrocarbonetos Totais do Petrleo (HTP) ........ 62
4.2.6 Degradao de Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA) 65
4.3 Monitoramento Microbiolgico e Ensaio Toxicolgico ........................ 71
4.3.1 Monitoramento Microbiolgico ................................................... 72
4.3.2 Avaliao Ecotoxicolgica .......................................................... 79
CAPTULO 5: CONCLUSES E SUGESTES .......................................... 82
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ............................................................ 84

xvi
SILVA, L. J. Introduo

CAPTULO 1: INTRODUO

1.1 CONSIDERAES GERAIS

Na indstria do petrleo e derivados crescente a preocupao com os impactos

ambientais decorrentes de suas atividades, que geram volumes considerveis de

resduos slidos, dentre os quais solos contaminados por hidrocarbonetos (CASTRO et

al., 2005). Portanto, a busca por solues que apresentem alto desempenho tcnico, bem

como custos compatveis com a sua escala de aplicao uma necessidade urgente

dentro do setor de petrleo e gs.

Solos contaminados com hidrocarbonetos podem ser tratados por diversos

processos biolgicos, fsicos, qumicos, fsico-qumicos ou trmicos (MARIANO,

2005). A aplicao de processos biolgicos ao tratamento de solos contaminados por

hidrocarbonetos de petrleo de interesse das comunidades cientfica e industrial. Os

bioprocessos de tratamento utilizam organismos, tais como bactrias e fungos, e/ou

vegetais para reduzir ou eliminar compostos perigosos ao meio ambiente (PICADO et

al., 2001).

Entre as principais vantagens do emprego dos processos biolgicos est o seu

baixo custo quando comparado com os processos convencionais. Destaca-se que o

processo ocorre com baixo consumo de energia e que causa poucas mudanas nas

caractersticas fsicas, qumicas e biolgicas no local onde so aplicados (URURAHY,

1998).

Dentre as tecnologias biolgicas de tratamento de solos contaminados, enfatiza-

se o processo de landfarming. Segundo a Agncia de Proteo Ambiental dos Estados

Unidos (United States Environmental Protection Agency USEPA), este mtodo

consiste em dispor o resduo na camada reativa do solo, de forma que a microbiota

1
SILVA, L. J. Introduo

autctone atue como agente de biodegradao de hidrocarbonetos. Este processo

apresenta diferentes designaes, como: land speading, land application, sludge

farming, soil farming, soil incorporation, land disposal e soil cultivation.

As tcnicas operacionais de um landfarming incluem: aerao do solo;

umidificao; adio de nutrientes (nitrognio, fsforo e potssio macronutrientes); e,

em alguns casos, bioaumentao com microrganismos previamente selecionados. Os

microrganismos responsveis pela biodegradao de hidrocarbonetos de petrleo so as

bactrias (aerbias e anaerbias), os fungos e as microalgas (MPHEKGO & CLOETE,

2004).

De acordo com Hamdi et al. (2007a), a tecnologia landfarming apresenta

excelente relao custo-benefcio quando comparada aos demais processos de

tratamento de resduos slidos. No entanto, alguns requisitos operacionais devem ser

rigorosamente obedecidos a fim de obter significativa biodegradao de

hidrocarbonetos e a formao de metablitos no txicos (ABNT NBR ISO 13.894).

As diversas classes de hidrocarbonetos apresentam diferenciada susceptibilidade

ao ataque microbiano. Os hidrocarbonetos mais simples, ou seja, os alifticos de cadeia

curta no ramificada so os mais facilmente decompostos. Por outro lado, os

hidrocarbonetos policclicos aromticos requerem maior tempo para a decomposio

(OLIVEIRA & de FRANA, 2004), embora alguns hidrocarbonetos heterocclicos

ramificados, s vezes, sejam mais recalcitrantes que os hidrocarbonetos aromticos.

2
SILVA, L. J. Introduo

1.2 OBJETIVOS

1.2.1 Objetivo Geral

Adequar o processo de landfarming, em escala industrial, s condies de

biorremediao conforme norma tcnica ABNT NBR ISO 13894 (Tratamento no Solo

Landfarming).

1.2.2 Objetivos Especficos

Avaliar a granulometria do solo;

Estabelecer sistemtica de aerao, fertilizao e umidificao do solo;

Monitorar as variveis: umidade e pH no perodo de tratamento;

Quantificar no resduo slido: carbono orgnico total (COT), nitrognio, fsforo,

elementos qumicos (Sb, As, Ba, Be, Cd, Pb, Cu, Cr, Fe, Mn, Hg, Ni, Ag, Se, V

e Zn), hidrocarbonetos totais do petrleo (HTP) e hidrocarbonetos policclicos

aromticos (HPA);

Avaliar a biodegradao de resduos slidos contendo hidrocarbonetos alifticos,

cclicos e aromticos, atravs do processo de landfarming;

Comparar os resultados obtidos com as legislaes americana (USEPA),

brasileira (CETESB) e holandesa;

Quantificar os microrganismos autctones: bactrias aerbias heterotrficas,

fungos e bactrias anaerbias heterotrficas.

3
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

CAPTULO 2: REVISO BIBLIOGRFICA

2.1 O PETROLEO

2.1.1 Origem e Aspectos Gerais

A origem do petrleo est relacionada com a decomposio biolgica da matria

orgnica sob ao de microrganismos quando em condies que no permitam sua

oxidao completa. A interao de condies termo-qumicas apropriadas e

microbiolgicas fundamental para o processo que leva formao do petrleo

(OLLIVIER & MAGOT, 2005).

Os registros mais antigos da utilizao do petrleo datam de perodos anteriores

Era Crist onde este era obtido de exudaes naturais. A explorao comercial do

petrleo comeou a partir de 1859 com a primeira perfurao de um poo na

Pensilvnia, Estados Unidos, por Edwin L. Drake. Ao longo do sculo XIX surgiu o

motor a combusto interna, que foi utilizado em larga escala e promoveu forte impulso

na indstria petrolfera. Estes fatos tornaram o petrleo a principal fonte de energia da

poca, promovendo o desenvolvimento econmico de alguns pases (THOMAS et al.,

2001).

Segundo dados do Ministrio de Minas e Energia (MME), no ano base de 2007,

o petrleo e gs natural corresponderam a 54,9% da matriz energtica mundial (Figura

2.1). Somando com carvo mineral, as principais fontes fsseis representam 80,9%,

com forte potencial de gerao de efluentes a base de hidrocarbonetos, os quais

impactam o ar, solo e gua.

4
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

OUTRAS
RENOVVEIS
BIOMASSA 0,6%
HIDRULICA 10,1%
2,2% PETRLEO
34,4%

NUCLEAR
6,2%

CARVO
MINERAL
26,0%
GS
20,5%

Figura 2.1: Matriz energtica mundial (Fonte: MME, 2007)

A indstria do petrleo e gs natural gera poluentes desde as etapas de

explorao at a distribuio dos produtos comercializveis. Por esta razo, o setor tem

investido na elaborao de processos de preveno aos lanamentos inadequados de

material no meio ambiente, bem como em pesquisas relacionadas com o tratamento de

seus resduos (MARIANO, 2005). Alm disso, as operaes de mitigao e de controle

do aporte de leo no meio ambiente visam ampliar a margem de lucro, diminuindo os

custos relacionados com a imagem negativa e com o pagamento de multas pela indstria

(OLIVEIRA & de FRANA, 2004).

2.1.2 Composio Qumica do Petrleo

Do latim petra (pedra) e oleum (leo), o petrleo no estado lquido uma

substncia oleosa, inflamvel, menos densa que a gua, com cheiro caracterstico e cor

variando entre o negro e o castanho-claro. Na sua composio qumica so

predominantes as molculas de hidrocarbonetos e, em menor proporo, compostos

oxigenados, nitrogenados e sulfurados e metais pesados como o vandio, o nquel e

outros. Suas propriedades fsicas e qumicas dependem do sistema petrolfero inerente

bacia sedimentar de formao (THOMAS et al., 2001).

5
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Os compostos orgnicos constituintes do petrleo e a diviso a que pertencem,

alm de exemplos de estruturas qumicas so observados na Figura 2.2

Figura 2.2: Estrutura qumica de alguns compostos presentes no petrleo.


(Fonte: SEABRA, 2006)

6
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

A proporo destes compostos na composio do petrleo determina a sua

classificao: parafnicos, naftnicos, aromticos intermedirios, parafnico-naftnicos,

aromtico-naftnicos e aromtico-asflticos (THOMAS et al., 2001).

Em funo dessa classificao, pode-se dimensionar a quantidade das diversas

fraes que podem ser obtidas, assim como sua possvel composio e propriedades

fsico-qumicas. Durante o processamento, o petrleo sofre uma srie de

beneficiamentos para a obteno de fraes desejadas, que posteriormente sero

submetidas a processos de tratamentos visando obteno de diferentes produtos finais

(MARIANO, 2005).

2.1.3 Atividades Petrolferas relacionadas a Resduos Slidos

As diversas atividades da indstria do petrleo (perfurao, produo,

transporte, processamento e distribuio) geram resduos slidos e lquidos na forma de

lamas, borras, efluentes lquidos, gasosos, etc. (OLLIVIER & MAGOT, 2005).

Os resduos oleosos gerados nas operaes de perfurao e produo incluem:

fluidos de perfurao; leo cru; produtos qumicos; filtros usados; areia produzida; gua

produzida contaminada com hidrocarbonetos; borras de separadores de gua-leo-gs;

resduos de desidratao; fluidos hidrulicos e lubrificantes. Na etapa de transporte e

distribuio, o leo e os combustveis podem ser decorrentes de vazamentos de

oleodutos e gasodutos assim como da limpeza de tanques de armazenamento (USEPA,

2009).

Na etapa de processamento do petrleo em refinarias ocorre gerao de resduos

slidos nas unidades de separao (colunas de destilao atmosfrica e vcuo ,

separadores de gua-leo, dessalinizadores, etc.), nas operaes de converso

(craqueamento trmico e cataltico, coqueamento, alquilao, hidrotratamento, etc.), no

tratamento de efluentes (Tratamento Bender, Merox, DEA, etc.) e nas operaes

7
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

auxiliares (trocadores de calor, tanques de estocagem, torres de resfriamento, etc.)

(MARIANO, 2005).

Os resduos gerados nas refinarias, de acordo com a ABNT NBR ISO 10.004,

assim como seus constituintes perigosos esto listados na Tabela 2.1.

Tabela 2.1: Resduos perigosos e fontes geradoras de hidrocarbonetos em refinarias de


petrleo
Fonte: ABNT NBR ISO 10.004
Resduo perigoso Constituintes perigosos
Sedimento do tanque de armazenamento de leo cru, das
Benzeno
operaes de refino de petrleo
Benzo[a]pireno,
Borra clarificada do resduo do tanque de leo e/ou slidos dos dibenzo[a,h]antraceno,
separadores/filtros de linha das operaes de refino de petrleo benzo[b]fluoranteno,
benzo[k]fluoranteno, *, **
Catalisador gasto proveniente do hidrotratamento das
Benzeno,
operaes de refino de petrleo, incluindo leitos usados para
arsnio
dessulfurizar as alimentaes para outros reatores catalticos
Lodo resultante da separao secundria de gua/leo Benzeno,
emulsificado de refinaria de petrleo. Qualquer lodo e/ou benzo[a]pireno,
material flotante gerado da separao fsica e/ou qumica de criseno,
gua/leo no processo de efluentes lquidos oleosos de chumbo,
refinarias de petrleo. cromo
Benzo[a]antraceno,
benzo[a]pireno,
benzo[b]fluoranteno,
Resduos de fundo de destilador
benzo[k]fluoranteno,
dibenzo[a,h]antraceno,
indeno[1,2,3-cd]pireno
* metilbenzilciclopentaantraceno; ** 7,12-dimetilbenzo[a]antraceno

De acordo com Paudyn et al. (2007), as refinarias, alm dos hidrocarbonetos

policclicos aromticos (HPA), geram outros compostos txicos tais como cdmio,

brio, mercrio, selnio e prata, compostos orgnicos como as bifenilas policloradas

(PCB) e hidrocarbonetos halogenados.

O mecanismo de formao de HPA deve-se repolimerizao de fragmentos de

hidrocarbonetos formados durante o craqueamento sob condio de baixa oxigenao.

Os fragmentos perdem, com freqncia, uma pequena quantidade de hidrognio, que

forma gua aps combinar-se com oxignio durante as etapas da reao. Os fragmentos
8
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

ricos em carbono combinam-se para formar os HPA, que so molculas mais estveis

com razo C:H elevada (HARMSEN et al., 2007).

A disposio desses resduos no meio ambiente pode acarretar srios problemas

ambientais. Segundo a Resoluo n. 01/1986 do CONAMA, impacto ambiental

definido como a alterao das propriedades fsico-qumicas e biolgicas do meio

ambiente, alterao esta provocada direta ou indiretamente por atividades humanas, as

quais afetam a sade, segurana, bem-estar da populao, atividades scio-econmicas,

biota, condies estticas e sanitrias do meio. Portanto, o tratamento desses resduos

essencial para promover uma gesto sustentvel de explorao e aproveitamento dos

recursos naturais.

2.2 PROCESSOS DE TRATAMENTO DE RESDUOS SLIDOS

O objetivo do tratamento de resduos slidos degradar poluentes a

concentraes que sejam indetectveis ou, se detectveis, a concentraes inferiores aos

limites estabelecidos como seguros ou aceitveis pelas legislaes. Tcnicas biolgicas,

fsicas e qumicas podem ser usadas em srie ou em paralelo para reduzir a

contaminao ambiental por hidrocarbonetos do petrleo a nveis aceitveis (RISER-

ROBERT, 1998).

Os processos fsico-qumicos geralmente baseiam-se nas diferentes propriedades

dos contaminantes, tais como acidez, temperatura, potencial de precipitao e

solubilidade. So exemplos desses processos: neutralizao, oxidao, precipitao,

estabilizao/solidificao, adsoro em carvo ativo, destilao, troca inica, eletrlise,

osmose inversa e extrao por solvente (URURAHY, 1998).

Atualmente as Tecnologias Verdes (Green Technologies), onde esto inseridos

os processos biolgicos, apresentam maior aceitabilidade do que os mtodos fsico-

9
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

qumicos de remediao, visto que apresentam baixo custo, possibilidade de aplicao

para tratamento in situ, e eficincia elevada para a biodegradao de diversos

contaminantes (PEREIRA, 2008).

2.3 BIORREMEDIAO DE REAS CONTAMINADAS COM RESDUOS

OLEOSOS

A biorremediao baseia-se na capacidade de alguns organismos

(microrganismos e/ou plantas) crescerem na presena de contaminantes, removendo

estas substncias devido ao de seu metabolismo ou mesmo acumulando tais

compostos (VIDALLI, 2001).

O uso de microrganismos na biorremediao pode ocorrer por espcies

autctones, alctones ou combinao de ambos, que atravs do metabolismo

correspondente podem formar compostos menos txicos ou promoverem total

mineralizao do contaminante produzindo dixido de carbono e gua. Por ser uma

tcnica aplicada em diferentes tipos de ambientes, a biorremediao envolve diversas

reas do conhecimento humano como a Microbiologia, Engenharia, Ecologia, Geologia

e Qumica (BOOPATHY, 2000).

De acordo com Ollivier & Magot (2005) existem alguns mtodos aplicados

biorremediao para acelerar a biodegradao de hidrocarbonetos. Estes mtodos

podem ser divididos em bioestimulao e bioaumentao:

1. Bioestimulao: definida como a melhoria dos fatores ambientais e, dentre eles,

destacam-se o pH, o teor de umidade, a temperatura, a correo de nutrientes

(fontes de carbono orgnico, fsforo, nitrognio, etc.) e de aceptores finais de

eltrons;

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SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

2. Bioaumentao: acelerao e aumento da eficincia de degradao do poluente pela

insero de linhagens hidrocarbonoclsticas alctones que vo agir

concomitantemente com os microrganismos autctones.

Segundo Bento et al. (2005), a melhor performance da bioaumentao pode ser

atingida pelo emprego dos microrganismos previamente selecionados aumentando

assim a populao e diversidade microbiana. A partir desse pressuposto, o aumento da

comunidade microbiana especfica, em conjunto com a adio de nutrientes, promove

uma reduo substancial no tempo de tratamento. Neste artigo foi obtido, atravs da

bioaumentao, uma maior degradao de hidrocarbonetos das fraes leves (75,2%) e

pesadas (72,7%) para um solo contaminado com leo diesel.

Por outro lado, DelArco & de Frana (1999) utilizaram um consrcio

microbiano obtido de um landfarming e associado aos microrganismos autctones para

o processo de biorremediao de um sedimento arenoso, contendo leo rabe leve. A

adio do inculo, no comeo do experimento, resultou num aumento de 31% da

eficincia de remoo da frao pesada do leo, quando comparada amostra sem

bioaumentao. Isto demonstra que a introduo de uma cultura exgena tambm pode

estimular o processo de biodegradao.

As tecnologias de biorremediao podem ser divididas em duas categorias, in

situ e ex situ. Os processos so classificados como in situ quando as operaes so

realizadas nos locais contaminados, ou seja, sem que haja a remoo do material.

Quando o tratamento ocorre fora do local atingido, classifica-se o processo como ex

situ (USEPA, 2009).

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SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

2.3.1 Tecnologias de Biorremediao In Situ

O bioventing e o biosparging so tratamentos semelhantes, usando injeo de ar

atmosfrico. A aerao objetiva o suprimento de oxignio ao ambiente, favorecendo o

crescimento de microrganismos aerbios que utilizam este elemento como aceptor final

de eltrons, viabilizando a biodegradao do poluente (TRINDADE et al., 2005). A

diferena entre as duas tcnicas est relacionada com o local onde o ar injetado; na

zona saturada do solo, no caso do bioventing, e na zona insaturada, no caso do

biosparging. Essas tcnicas apresentam baixo custo, requerem o uso de poucos

equipamentos e tcnicos. No entanto, apresentam a dificuldade de aplicao em solos

argilosos, principalmente quando estes tm elevado grau de compactao e elevado teor

de umidade, o que dificulta a passagem do ar devido ao aumento da perda de carga

(BOOPATHY, 2000).

A fitorremediao definida como o uso de vegetais superiores para facilitar a

aerao do local, degradar, reter ou eliminar os contaminantes do solo. Neste processo

pode atuar o vegetal e/ou microrganismos colonizadores. No primeiro caso, o

crescimento das razes e sua penetrao no solo favorecem a aerao, podendo ocorrer a

adsoro do contaminante em seus tecidos (ALEXANDER, 1999), assim como

metabolizao das substncias txicas.

A atenuao natural ou a biorremediao intrnseca uma tcnica que consiste

na opo de no se intervir no local impactado, deixando que os fenmenos naturais

atuem como agentes de remediao. Embora parea um mtodo cmodo, a

biorremediao intrnseca requer constante monitoramento e adequao das anlises

requeridas ao acompanhamento do processo que auxiliam na avaliao da eficcia do

tratamento (VIDALLI, 2001).

12
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

2.3.2 Tecnologias de Biorremediao Ex Situ

2.3.2.1 Landfarming

O landfarming o processo de biorremediao onde os resduos contaminados

com hidrocarbonetos so misturados na camada superficial do solo, em local

previamente preparado. Esta tecnologia visa favorecer a biorremediao por viabilizar a

reduo da concentrao dos contaminantes no solo por ao de microrganismos atravs

de operaes adequadas de manejo e gesto do solo (PAULA et al., 2006).

Para que este processo apresente a eficincia requerida, faz-se necessrio a

adio de nutrientes, especialmente fsforo, nitrognio e potssio, pois o aumento da

concentrao de carbono orgnico no solo aumenta a demanda de nutrientes pelos

microrganismos (PAUDYN et al., 2007).

Alm disso, podem ser feitas outras adequaes no solo que incluem a adio de

gua para aumentar a umidade, e a adio de xidos de clcio e/ou magnsio para

corrigir o pH. Em geral, ocorre maior degradao de hidrocarbonetos em solo de pH

neutro, pois as bactrias so reconhecidas como principais agentes da biodegradao

(MPHEKGO & CLOETE, 2004). Considerando-se que nosso trabalho refere-se ao

processo de landfarming, o mesmo ser descrito com mais detalhes no item 2.4.

2.3.2.2 Biopilhas

O processo de biopilha uma variante do landfarming, onde esto includos

tambm sistemas de adio de gua e nutrientes, aerao e impermeabilizao da rea

de disposio do material contaminado com materiais sintticos; alm disso, a

disposio de material feita em forma de pilha, havendo sistemas para coleta da lixvia

e para tratamento dos gases gerados (ALEXANDER, 1999).

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SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

De acordo com Seabra (2006), as biopilhas so construdas de tal forma que

passe, sob elas, um duto perfurado com a finalidade de recolher o material lixiviado e

succionar o ar das colunas do solo promovendo vcuo, que fora, por sua vez, a

renovao do ar no interior do sistema, atravs da entrada de uma nova corrente. Esta

tecnologia pode incluir, ainda, um sistema de irrigao com o objetivo de manter as

condies ideais de umidade e at mesmo adicionar populaes hidrocarbonoclsticas

alctones, aumentando a eficincia do tratamento.

Convm destacar que o emprego de materiais orgnicos oriundos dos resduos

slidos urbanos pode favorecer a degradao de hidrocarbonetos nas biopilhas, por

aumentar a populao microbiana. No entanto, no primeiro momento, pode ocorrer a

degradao preferencial de carboidratos ao invs de hidrocarbonetos (SEMPLE et al.,

2001).

2.3.2.3 Compostagem

Outra variante do landfarming a compostagem. Nesta tecnologia ocorre a

adio de um agente estruturante ao solo, a fim de aumentar a sua permeabilidade,

consequentemente promovendo maior velocidade de transferncia de oxignio.

Normalmente, utilizam-se os seguintes materiais como agentes estruturantes: palha,

pedaos de grama e madeira, folhas, bagao de cana e serragem. Devido natureza

orgnica destes materiais, os agentes estruturantes atuam como fontes de carbono

capazes de favorecer o rpido estabelecimento de uma populao numerosa (RISER-

ROBERT, 1998). Porm, s vezes, a biodegradao do poluente prejudicada pela

utilizao destes agentes pelos microrganismos lignolticos, levando a problemas de

competio entre os grupos microbianos (SEMPLE et al., 2001).

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SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

2.3.2.4 Biorreatores

Biorreatores de vrios tipos tm sido desenvolvidos principalmente para o

tratamento de efluentes lquidos, entretanto tais sistemas atualmente tambm esto

sendo usados para resduos slidos (URURAHY, 1998). Os custos so mais altos do

que os tratamentos in situ, pois h gastos adicionais com o transporte do material

contaminado, construo de equipamentos para uma particular descontaminao, mo-

de-obra adicional e energia. Podem ser extremamente teis em degradar compostos

altamente recalcitrantes (RISER-ROBERT, 1998).

Geralmente, nos biorreatores os microrganismos podem ser utilizados de duas

formas distintas: livres ou imobilizados. No entanto, somente a primeira forma tem sido

utilizada para tratar resduos slidos. Nela, os microrganismos so mantidos em

suspenso, podendo crescer livremente no seio do meio lquido ou aderidos ao solo que

est em suspenso. Estes biorreatores podem ser agitados mecanicamente ou por injeo

contnua de ar (ALEXANDER, 1999).

O tipo mais comum no tratamento de solo contaminado consiste em sistemas

que operam em fase semi-slida, com uma porcentagem de gua variando entre 40 e

90% (v/v) (URURAHY, 1998).

2.4 PROCESSO DE LANDFARMING

2.4.1 Histrico e Aspectos Gerais

A utilizao do solo para o tratamento de resduo teve incio na Europa no final

do sculo XIX com a tcnica de irrigao de reas cultivadas com guas residurias

sanitrias. No incio dos anos 50, o processo de tratamento no solo despertou interesse

nas empresas de refino de petrleo dos Estados Unidos, sendo as primeiras a

15
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

desenvolver e praticar o tratamento no solo para seus resduos e, para este processo de

tratamento especfico, elas deram o nome de landfarming (GENOUW et al., 1994).

Outro pas que desenvolveu o tratamento no solo foi a Alemanha, sendo que no

ano de 1960 j estavam em operao 60 reas para tratamento de resduo no solo, e at o

ano de 1987 esse processo ocupava uma rea de 20.000 hectares (LINE et al., 1996).

No Brasil, o landfarming foi introduzido pela PETROBRAS quando, no ano de

1982, colocou em funcionamento uma unidade na Refinaria Henrique Lage, na cidade

de So Jos dos Campos, Estado de So Paulo. Desde ento, a PETROBRAS iniciou a

implantao de landfarming em outras refinarias (CASTRO et al., 2005).

No ano de 1984, a Central de Tratamento de Efluentes Lquidos (CETREL), em

Camaari (BA), implantou duas unidades de landfarming em uma rea de 20 hectares

para o ps-tratamento do resduo originado dos tratamentos qumico e biolgico dos

efluentes gerados no complexo industrial de Camaari (ALVES et al., 1996).

De acordo com o American Petroleum Institute (API), em 1983, pelo menos um

tero das refinarias norte-americanas operava com landfarming em escala industrial.

A Holanda, em 1989, iniciou o funcionamento do primeiro landfarming para

tratar 500 m3 de resduo contaminado com HPA e leo mineral. Nesse pas a legislao

vigente prescreve as medidas de preveno contra a percolao de contaminantes para o

subsolo, lenol fretico e guas superficiais (MARIJKE & van VLERKEN, 1998).

Jatar et al. (1993) avaliaram a aplicao de landfarming em condies de clima

tropical, na Venezuela. Trabalharam em uma rea de 1 hectare e usaram tcnicas de

umidificao, homogeneizao, bioaumentao e fertilizao. O teor de HTP reduziu

em 80% aps um perodo de 9 meses de tratamento.

Segundo Al-Awadhi et al. (1996), durante a crise do Golfo, o Kuwait sofreu

ataques blicos, resultando em perdas de seus poos de petrleo, o que levou formao

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SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

de 300 lagos de leo em uma rea de 49 km2, com penetrao no subsolo at a

profundidade de 2,5 m. Foi estimado um derrame de 9x106 m3 de leo, equivalente a

25x106 m3 de solo contaminado. A recuperao via biorremediao da rea contaminada

com leo iniciou-se em novembro de 1992, com a implantao de 16 unidades de

landfarming. Aps 15 meses de operao, a reduo da carga poluente atingiu 80%.

Castro et al. (2005) estudaram a otimizao do landfarming da RPBC (Refinaria

Presidente Bernardes), e a correo do pH do solo e fertilizao da camada reativa

resultaram em aumento da populao microbiana, e consequente maximizao da

biodegradao de hidrocarbonetos.

Paudyn et al. (2007) estabeleceram quatro sistemticas de operao em um

landfarming canadense, sob condio de baixa temperatura: atenuao natural; aerao

em intervalos de quatros dias; aerao diria; e adio de fertilizante mais aerao em

intervalos de 4 dias. O resultado do efeito sinrgico de adio de fertilizante acrescida

de aerao foi a reduo de 90% de HTP em 700 dias. Ressaltam ainda que compostos

orgnicos recalcitrantes como pristano e fitano foram degradados.

Os aspectos positivos e negativos relacionados ao processo de landfarming esto

apresentados na Tabela 2.2.

Tabela 2.2: Vantagens e desvantagens do processo landfarming


Fonte: MPHEKGO & CLOETE, 2004
Vantagens Desvantagens
- Requer pequeno capital para - Limitado em relao remoo de
implantao e operao; compostos orgnicos recalcitrantes;
- Possibilidade tratar grande volume de - Necessidade de grande rea;
resduo slido; - Pode acarretar problemas de emisso de
- Pode ser aplicado ex situ; compostos orgnicos volteis e
- Resulta em pequeno impacto ao meio contaminao do lenol fretico;
ambiente; - Presena de metais pesados pode inibir
- Eficincia energtica. as atividades de biodegradao.

17
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Em funo desses fatos, a tecnologia landfarming fomenta o interesse das

comunidades cientfica e industrial, com o objetivo de maximizar a eficincia do

processo.

2.4.2 Metodologias de Construo e Operao de Landfarming

O landfarming uma tecnologia de biorremediao na qual os resduos so

espalhados e misturados camada reativa do solo, de forma controlada, a fim de que a

prpria microbiota do solo atue como agente de degradao. O processo realizado em

grandes reas, j que a biodegradao se d na camada superior do solo, onde a

aerobiose garantida. Os hidrocarbonetos no solo podem sofrer volatilizao e

biodegradao (MPHEKGO & CLOETE, 2004).

A norma ABNT NBR ISO 13.894 (Tratamento no Solo Landfarming)

estabelece que o projeto, construo, operao e manuteno da unidade devem ser

realizados de forma a elevar ao mximo a degradao, a transformao e/ou

imobilizao de contaminantes da camada reativa do solo.

Esta norma preconiza, ainda, alguns requisitos relativos topografia, solos e

geologia, recursos hdricos, vegetao, vias de acesso, distncia a ncleos

populacionais, entre outros aspectos.

Portanto, todo um preparo da rea exigido, a fim de que se reduzam, ao

mximo, os riscos de contaminao de lenis freticos por lixiviao de poluentes

(USEPA).

A construo de um landfarming previne ou minimiza a transferncia de

contaminantes para reas adjacentes devido a existncia de uma barreira lateral e

camada impermeabilizante, que pode ser de polietileno de alta densidade ou argila

compactada. A Figura 2.3 apresenta o sistema sob perspectiva superior.

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SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Figura 2.3: Sistema de Landfarming Perspectiva superior


Fonte: Adaptado de MPHEKGO & CLOETE, 2004

As tcnicas operacionais envolvem adio de nutrientes, umidificao, aerao e

correo do pH do solo. Os macronutrientes adicionados so compostos a base de

nitrognio, fsforo e potssio sob a forma de fertilizantes comerciais e/ou uria

(MPHEKGO & CLOETE, 2004). A correo do pH do solo pode ser feita pela adio

de xidos de clcio e magnsio. A aerao do solo viabilizada atravs de arado

acoplado a trator (MARIN et al., 2005).

A USEPA desenvolveu um guia para implantao, operao e monitoramento de

landfarming. Este algoritmo contempla questes relativas s caractersticas fsico-

qumicas e biolgicas do sistema, assim como condies climticas do local de

instalao.

2.5 MICRORGANISMOS ENVOLVIDOS EM PROCESSOS DE REMEDIAO

A microbiota altamente heterognea do solo inclui a presena de um grande

nmero de microrganismos capazes de utilizar hidrocarbonetos como fonte de carbono e

energia. Dentre os vrios agentes que possuem a habilidade de degradar hidrocarbonetos

19
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

esto as bactrias e fungos. Porm, a contribuio de cada um varia com os fatores

ambientais e as propriedades fsico-qumicas do solo (OLLIVIER & MAGOT, 2005).

A distribuio da populao microbiana no solo est tipicamente associada ao

contedo de matria orgnica natural, a qual serve como estoque de micronutrientes

(ferro, mangans, zinco, cobre, molibdnio, cloro e boro) e macronutrientes (carbono,

nitrognio, potssio, clcio, magnsio, fsforo e enxofre). medida que a profundidade

aumenta, a populao e a diversidade microbiana reduzem devido diminuio dos

teores de matria orgnica e oxignio (MOREIRA & SIQUEIRA, 2002). Essa tendncia

pode ser observada pela Tabela 2.3.

Quando a populao microbiana exposta aos compostos orgnicos do poluente

ocorrem mudanas genticas e um crescimento seletivo desta populao em relao aos

microrganismos degradadores os quais se apresentam em maiores propores. Em

ambientes no poludos, geralmente os microrganismos degradadores constituem menos

do que 1% da populao microbiana. J em ambientes contaminados esta proporo

de 1 a 10% (ATLAS, 1995).

Tabela 2.3: Distribuio da populao microbiana em solos e gua subterrnea


Densidade Microbiana
Microrganismos
Superfcie (Cels/g)
Bactrias 108 109
Actinomicetos 107 108
Fungos 105 106
Algas 104 105
Subsolo (Cels/g)
Bactrias 103 107
gua Subterrnea (Cels/mL)
Bactrias 102 105
Fonte: TRINDADE, 2002

A diversidade metablica e o curto tempo de gerao das bactrias caracterizam-

nas como boas iniciadoras das reaes de biodegradao de hidrocarbonetos. Dentre os

20
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

gneros de bactrias degradadoras de hidrocarbonetos (hidrocarbonoclsticas)

predominam Pseudomonas, Acinetobacter, Nocardia, Flavobacterium, Alcaligenes e

Micrococcis (BOOPATHY, 2000).

Os fungos so considerados mais eficientes sob condies adversas do processo,

como valores extremos de pH, limitao de nutrientes e baixo teor de umidade.

Adicionalmente estes no apresentam prioridade quanto ao ataque ao substrato, embora

os mecanismos de biodegradao sejam praticamente idnticos ao bacteriano. Dentre os

fungos filamentosos, algumas linhagens de Penicillium sp. e Aspergillus sp. so citadas

como sendo capazes de degradar uma maior quantidade de hidrocarbonetos

(ATAGANA et al., 2006).

Em alguns estudos envolvendo a utilizao de hidrocarbonetos de petrleo por

leveduras, relatou-se que diferentes espcies do gnero Candida demonstraram

preferncia em degradar hidrocarbonetos de cadeias lineares. Outros trabalhos

relevaram que leveduras pertencentes aos gneros Sporobolomyces e Rhodotorula

foram capazes de degradar hidrocarbonetos alifticos, cclicos e aromticos

(DELARCO & de FRANA, 1999). Atlas (1995) citou outros gneros de leveduras

com esta mesma habilidade: Saccharomyces e Trichosporium.

Oliveira (2001) verificou que um consrcio microbiano constitudo por

linhagens dos gneros Pseudomonas, Serratia, Bacillus, Candida, Aspergillus,

Penicillium e Streptomyces foi capaz de degradar 100% dos n-alcanos, compreendidos

entre o decano e o eicosano, e 40% dos hidrocarbonetos policclicos aromticos

avaliados (1-metil-naftaleno, 2-metil-naftaleno, fluoreno, pireno, criseno, fenantreno,

benzo(a)antraceno e benzo(b)fluoretano).

21
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Lima (2002) avaliou a biodegradao de hidrocarbonetos em processos de

landfarming e identificou os seguintes gneros microbianos: Proteus, Pseudomonas,

Acinetobacter, Alcaligenes, Shigella, Klebsiella e Enterobacter.

A partir do exposto, torna-se clara a habilidade de utilizao de hidrocarbonetos

por diversas espcies de microrganismos. A Tabela 2.4 apresenta os principais gneros

potencialmente degradadores de petrleo e seus derivados.

Tabela 2.4: Gneros microbianos hidrocarbonoclsticos


Fungos
Bactrias
Actinomicetos Leveduras Bolores
Achromobacter Actinomyces Candida Acremonium Graphium
Acinetobacter Endomyces Debaryomyces Aspergillus Humicola
Aeromonas Nocardia Rhodotorula Aureobasidium Lulwortria
Agrobacterium Sporobolomyces Beauveria Mortierella
Alcaligenes Yarrowia Botrytis Mucor
Arthrobacter Picchia Ceriporiopsis Oxyoirus
Bacillus Chrysosporium Paecilomyces
Brevibacterium Cladosporium Penicillium
Burkholderia Cochliobolus Phialophora
Chromobacterium Colorospora Phoma
Comamonas Coniothyrium Pleurotus
Corynebacterium Coriolopsis Rhizopus
Cytiphaga Cryphonectria Scolecobasidium
Flavobacterium Cylindrocarpon Scopulariopsis
Gluconobacter Dendosporium Sprotrichum
Micrococcus Dendryphiella Spicaria
Mycobacterium Drechslera Tolypocladium
Pasteurella Fusarium Trametes
Proteus Geotrichum Trichoderma
Pseudomonas Glicocladium Varicosporina
Rhodococcus Gongronella Verticilium
Sarcina
Serratia
Streptomyces
Vibrio
Xanthomonas

Fonte: URURAHY, 1998; CRAVO, 1998; DELARCO, 1999; OLIVEIRA, 2001;


TRINDADE, 2002; SILVA, 2005; PEREIRA, 2008.

22
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

2.5.1 Mecanismos de Biodegradao de Hidrocarbonetos

A biodegradabilidade dos componentes do petrleo dependente primeiramente

de sua estrutura qumica, sendo influenciada tambm pelo estado fsico e pela

toxicidade dos compostos. O aumento das cadeias implica em uma maior complexidade

estrutural e, consequentemente, em uma diminuio do nmero de microrganismos

capazes de degradar estes compostos. Algumas das maiores estruturas moleculares so

insolveis e a maioria das bactrias pode somente utilizar os compostos dissolvidos em

gua (ATLAS, 1995).

A degradao pode ocorrer atravs do metabolismo de respirao aerbia ou

anaerbia. Na primeira atuam inicialmente as enzimas oxigenases para inserir tomos de

oxignio na molcula de hidrocarboneto e, posteriormente, este elemento funciona

como aceptor final de eltrons, sendo os produtos finais do metabolismo dixido de

carbono, gua ou compostos resultantes da degradao parcial dos hidrocarbonetos

(OLLIVIER & MAGOT, 2005).

A degradao anaerbia utiliza outros compostos como sulfato e nitrato como

aceptores finais de eltrons, podendo ocorrer a formao de metano, sulfeto e nitrito

(STREVETT et al., 2002).

Diante da evidncia de se encontrar um nmero extenso de microrganismos

capazes de consumir hidrocarbonetos, estudos mais aprofundados envolvendo aspectos

bioqumicos e mecanismos de degradao vm sendo desenvolvidos. A seguir sero

abordados alguns destes mecanismos.

2.5.1.1 Hidrocarbonetos Alifticos Lineares e Ramificados

Os hidrocarbonetos alifticos so os compostos do petrleo preferencialmente

degradados pelos microrganismos. O incio do processo se d por ao de enzimas

23
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

monoxigenases, capazes de oxid-los aos alcois correspondentes que so

posteriormente transformados em aldedos e cidos graxos (RISER-ROBERT, 1998).

DelArco (1999) ressalta que existem outras rotas menos importantes como a

que transforma n-alcanos em produtos hidroxilados, que depois so convertidos em

lcoois correspondentes. Outra via metablica consiste em oxidaes subterminais que

geram lcoois secundrios, que so oxidados a steres e depois clivados, formando um

cido e um lcool que depois sero novamente oxidados. Estes compostos so

metabolizados atravs do ciclo de Lynen ou -oxidao. A Figura 2.4 apresenta a rota

bioqumica de degradao de hidrocarbonetos lineares.

+ +
AH2 A NAD NADH + H O
RCH2 CH2 CH3 RCH2 CH2 CH2 OH RCH2 CH2 CH2
NAD
+ H
O2 H2 O H2 O

+
AMP ATP NADH + H
FAD PPi CoA O
O FADH2 O
RCH2 CH2 CH2 RCH2 CH2 CH2
RCH2 CHCH OH
CoA CoA
H2 O

+
O NAD NADH + H+ O CoA O
RCH2 CCH2 RCH2 + H3 C CO_C oA
RCH2 CHCH2
CoA CoA CoA
OH O

Figura 2.4: Via metablica de degradao de hidrocarbonetos lineares


Fonte: RISER-ROBERT, 1998

Segundo Oliveira (2001), iso-alcanos de cadeia ramificada so menos

susceptveis ao ataque microbiano do que os n-alcanos equivalentes devido ao

impedimento estrico oferecido s enzimas oxidativas, em especial quando estas

ramificaes ocorrem em posio e constituem compostos ramificados quartenrios.

24
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

2.5.1.2 Hidrocarbonetos Cclicos

A degradao de formas no substitudas de cicloalcanos ocorre mais facilmente

do que as formas substitudas e quanto maior o nmero de anis condensados, maior a

recalcitrncia do cicloalcano. A degradao das cicloparafinas se d por meio da ao

de enzimas monoxigenases com a formao de um intermedirio hidroxilado, que

subsequentemente oxidado a cetonas, lactonas e cidos carboxlicos, como

exemplificado na Figura 2.5.

OH O O
COOH
O (CH2)4
COOH

Figura 2.5: Rota de biodegradao do ciclohexano por Pseudomonas sp. e Nocardia sp.
Fonte: OLLIVIER & MAGOT, 2005

Numa etapa posterior, o cido carboxlico convertido em acetil CoA (coenzima

A), que ser percurso para as vias metablicas do ciclo de Krebs e fosforilao

oxidativa (MADIGAN et al., 2008).

2.5.1.3 Hidrocarbonetos Aromticos

Os hidrocarbonetos aromticos so constituintes de quase todas as fraes do

refino de petrleo e alguns destes compostos so largamente usados como solventes e

outros constituem importantes matrias-primas para a indstria petroqumica. Benzeno,

tolueno, etil-benzeno e xilenos (ismeros orto-, meta- e para-) (BTEX) constituem os

mais significativos componentes desta classe de hidrocarbonetos, que devido a sua

elevada toxicidade levam a preocupaes ambientais (OLIVEIRA, 2001).

25
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Os hidrocarbonetos aromticos no so to facilmente biodegradveis como os

alcanos, posto que apresentam elevada estabilidade termodinmica devido

significativa energia de ressonncia do anel (ALEXANDER, 1999).

Dentre os aromticos, os hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPA) so os

compostos mais preocupantes, pois levam a afeitos carcinognicos e mutagnicos, alm

de apresentarem elevada recalcitrncia (PICADO et al., 2001). A Figura 2.6 apresenta a

estrutura qumica de alguns HPA.

Figura 2.6: Estrutura qumica de alguns HPA


Fonte: PEREIRA, 2008

26
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

A degradao abrangente dos HPA se d pela clivagem de um, dois ou mais

anis. Os grupos substituintes laterais do anel so modificados inicialmente por

hidroxilao, desmetilao ou descarboxilao para produo de uma ou duas molculas

bsicas. Essas so, ento, clivadas por um segundo grupo de enzimas e, posteriormente,

so degradadas a molculas que sero percussoras de outras vias metablicas.

As bactrias, geralmente, empregam dioxigenases para incorporar duas

molculas de oxignio no substrato para formar dioxetanos, que so ento oxidados a

cis-dihidrodiis formando produtos dihidroxilados. Os fungos produzem

monooxigenases para incorporar um tomo de oxignio no substrato formando xidos

arenos, o que seguido de atuao enzimtica para produzir trans-dihidrodiis e fenis

(RISER-ROBERT, 1998). Essa degradao apresentada na Figura 2.7.

Figura 2.7: Via degradativa de hidrocarbonetos policclicos aromticos


Fonte: RISER-ROBERT, 1998

27
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Posteriormente, ocorrem dois mecanismos de clivagem do anel: na posio orto

ou meta. O mecanismo mais comum o que envolve a posio orto, seguido por uma

srie de reaes enzimticas at chegar aos produtos finais: cidos orgnicos de baixo

peso molecular e aldedos (que so incorporados ao ciclo dos cidos tricarboxlicos)

(PEREIRA, 2008).

2.6 FATORES QUE INFLUENCIAM A BIODEGRADAO

As condies ambientais so de fundamental importncia para a sobrevivncia e

crescimento microbiano. Se condies tais como pH, temperatura, umidade e aerao

no so adequadas, o desempenho da microbiota afetado de modo adverso

(BOOPATHY, 2000). A manipulao e a otimizao destes fatores so fundamentais

para a obteno de bons resultados.

2.6.1 Propriedades Fsico-qumicas do Substrato e Adaptao Microbiana

O acmulo de um dado composto no meio ambiente poder ser influenciado pela

sua estrutura, concentrao e toxicidade. Os compostos que no podem ser

transformados tendero a persistir no ambiente (ALEXANDER, 1999).

A biodegradabilidade relativa dos hidrocarbonetos em ordem decrescente de

degradabilidade dada por: Alcanos lineares (C10 a C19); Gases (C2 a C4); Alcanos (C5 a

C9); Alcanos Ramificados; Alcenos; Alcenos Ramificados; Aromticos; Cicloalcanos;

Poliaromticos; e Asfaltenos (RISER-ROBERT, 1998).

Os produtos da biodegradao geralmente so transientes, mas alguns deles

podem se acumular no ambiente. Os alcanos C2 a C6 podem ter efeito inibitrio para

alguns microrganismos, pois os hidrocarbonetos de baixo peso molecular solvatam e

destroem as estruturas da membrana celular e pericelular lipdica dos microrganismos.

28
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

O acmulo de compostos lipoflicos na membrana de microrganismos apresenta efeitos

nas propriedades estruturais e funcionais, ocorrendo a perda de sua integridade e um

aumento na permeabilidade de ons (MARIN et al., 2005).

Observaes quanto ao efeito txico de aromticos, cicloalcanos, alcanos,

lcoois e fenis podem ser explicados pela interao desses compostos com os

constituintes da membrana celular (HEJAZI et al., 2003).

Uma forma de viabilizar a biodegradao a adaptao dos microrganismos

fonte de carbono. Este processo visa reduzir o tempo de tratamento, aumentar a

eficincia de remoo e evitar inibio do crescimento (OLLIVIER & MAGOT, 2005).

Oliveira & de Frana (2004) relacionaram o sucesso da biorremediao de um

solo arenoso contaminado com leo cru ao uso de cultivo microbiano que havia sido

adaptado por um perodo de cinco anos ao leo. Os autores reportaram que a adaptao

microbiana foi capaz de selecionar linhagens mais resistentes ao leo e que podiam

degradar os hidrocarbonetos alifticos e policclicos aromticos com maior velocidade.

2.6.2 Aceptores de Eltrons

Um dos principais fatores que governam a biodegradao o tipo e a

biodisponibilidade de aceptores de eltrons. Na Tabela 2.5 apresentada a relao entre

a forma de respirao microbiana, os aceptores de eltrons, as caractersticas e o

potencial de oxi-reduo. O potencial de oxi-reduo mede a tendncia de uma

substncia doar ou receber eltrons e, por conseguinte, uma medida quantitativa da

energia livre envolvida na transferncia de eltrons. Doadores e aceptores de eltrons

so denominados redutores e oxidantes, respectivamente (MADIGAN et al., 2008).

29
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Tabela 2.5: Relao entre a forma de respirao microbiana, aceptores de eltrons e


potencial redox
Forma de Aceptor de Potencial
Produto Caracterstica
Respirao Eltrons Redox (mV)
Aerbios
Aerbia O2 H2O facultativos e +400
estritos
Aerbios,
Reduo de facultativos e +77
Fe3+ Fe2+
Ferro III anaerbios (em pH 2-3)
estritos
Reduo do Aerbios
NO3- NO2-, N2O, N2 -100
Nitrato facultativos
Reduo de Anaerbios
SO42- HS- -160 a -200
Sulfato estritos
Archaea
Metanognica CO2 CH4 -300
metanognica
Fonte: MADIGAN et al., 2008

O oxignio molecular atua como aceptor de eltrons durante a biodegradao

aerbia, enquanto nitrato, sulfato ou dixido de carbono o aceptor de eltrons para a

biodegradao anaerbia. Quando o oxignio molecular est disponvel como aceptor

de eltrons, tende a ser preferencialmente utilizado em relao aos outros possveis

aceptores presentes, pois a opo termodinamicamente mais favorvel (STREVETT et

al., 2002). Na Tabela 2.5, verifica-se que O2/H2O o mais eletropositivo; mais energia

disponibilizada quando o O2 usado do que quando outro aceptor de eltrons

empregado.

Em ambiente rico em matria orgnica, os processos aerbios consomem

rapidamente o oxignio, estabelecendo uma condio de anaerobiose. Se mais de um

aceptor de eltrons est presente, somente um predominantemente suprir mais energia

aos microrganismos nativos e estes tendero a dominar o ambiente. Essa sucesso de

espcies microbianas funo do pH e do potencial redox. medida que o potencial

30
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

diminui, ocorre transio da predominncia de aerbios para facultativos e, em seguida,

anaerbios (MOREIRA & SIQUEIRA, 2002).

2.6.3 Teor de Umidade

A umidade do solo essencial para a biodegradao uma vez que a maioria dos

mecanismos de degradao ocorre na interface gua-hidrocarboneto. A gua

importante para o movimento dos microrganismos unicelulares que, por isso, so

restritos aos filmes de gua, enquanto fungos filamentosos e actinomicetos podem

atravessar os vazios insaturados, atravs do crescimento micelial (MOREIRA &

SIQUEIRA, 2002). Ademais, a gua serve como meio de transporte para alguns

nutrientes e compostos orgnicos que se difundem para a clula microbiana e atravs da

qual os produtos metablicos so processados.

O teor de umidade tambm influencia a aerao e o pH, pois quando a matriz do

solo est completamente preenchida com gua, a difuso dos gases severamente

restringida, comprometendo as atividades metablicas dos microrganismos aerbios,

visto que condies anxicas so criadas (HARSEM et al., 2007).

2.6.4 Temperatura

A temperatura um dos fatores ambientais mais importantes que afetam o

desenvolvimento de microrganismos. Para a maioria dos microrganismos, mesfilos, a

medida que a temperatura aumenta, as reaes enzimticas e qumicas na clula

ocorrem em maiores taxas e o crescimento torna-se mais rpido, enquanto que em

temperaturas mais baixas h um declnio da velocidade das reaes qumicas e

bioqumicas (MADIGAN et al., 2008).

31
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Em ambientes de baixa temperatura a volatilizao de hidrocarbonetos

desfavorecida, assim, os compostos de menor cadeia carbnica tendem a permanecer no

solo e, por conseguinte, viabilizar a solubilizao da membrana dos microrganismos, o

que diminui a eficincia do processo. Em temperaturas mais elevadas pode ocorrer a

inativao de enzimas e/ou inviabilidade de alguns microrganismos, o que tambm

limita o tratamento por biorremediao (ATLAS, 1995). No se podem determinar

valores adequados de temperatura, pois existem relatos da biodegradao eficiente em

ambientes glaciais, tropicais, temperados e desrticos (PAUDYN et al., 2007; HEJAZI

et al., 2003), e isto se deve a presena de microrganismos autctones que atuam nas

condies ambientais oferecidas.

2.6.5 pH

O pH um fator determinante da taxa de crescimento dos microrganismos. Alm

disso, esse parmetro pode influenciar a solubilidade de micro e macronutrientes, a

mobilidade do material txico e a reatividade dos minerais. O ferro, o alumnio e o

mangans apresentam caractersticas txicas em pH abaixo de 5,0. O fsforo est menos

biodisponvel em valores extremos de pH (MOREIRA & SIQUEIRA, 2002).

As bactrias so consideradas agentes iniciadores da biorremediao e sua

atividade metablica situa-se na faixa de pH de 6,5 a 8,0. O controle desse parmetro no

solo pode maximizar a biodegradao (OLLIVIER & MAGOT, 2005).

DelArco (1999) descreve que o pH um parmetro de seleo de grupos

microbianos, alm de um fator de otimizao da biorremediao. A autora descreve que

valores de pH cido favoreceram o crescimento de fungos filamentosos e leveduras, e

valores de pH na faixa de 6,0 a 7,0 favoreceram o crescimento de bactrias.

32
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

Em processos de biorremediao in situ, a microbiota nativa pode ser o agente

do tratamento. Neste caso, estes microrganismos esto adaptados ao pH do local,

viabilizando a biodegradao por tcnicas de bioestimulao que no necessariamente

incluem a correo do pH. No entanto, cabe destacar que durante o metabolismo de

hidrocarbonetos ocorre a formao de intermedirios cidos que podem alterar o pH do

meio, desfavorecendo a biodegradao.

2.6.6 Nutrientes

Os microrganismos so formados da combinao de elementos que so os

componentes de seu material gentico, molculas estruturais, enzimas e plasma

intracelular. O metabolismo microbiano e o crescimento so dependentes da

disponibilidade de nutrientes essenciais (ALEXANDER, 1999).

Devido grande diversidade de bactrias, a proporo de elementos nutricionais

requeridos para crescimento varia muito, sendo carbono, hidrognio, enxofre, nitrognio

e fsforo os principais elementos necessrios. Os compostos orgnicos biodegradveis

so fontes de carbono que os microrganismos podem utilizar como recurso energtico

para o crescimento. Outros nutrientes (clcio, nitrognio, fsforo, etc.) so geralmente

encontrados em concentraes adequadas em muitos solos (PELTOLA et al. 2006).

A introduo de hidrocarbonetos no solo promove o aumento da concentrao de

carbono orgnico e a sua remoo por ao microbiana exige a presena de nutrientes

essenciais para o crescimento microbiano, como o nitrognio e o fsforo. Oliveira & de

Frana (2004) relatam que a adio de nutrientes bastante frequente em processos de

biorremediao de solos contaminados com hidrocarbonetos de petrleo, pois

viabilizam a sntese de fosfolipdios e cidos nuclicos. Alm disso, os autores

33
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

destacam que as fontes de nutrientes devem ser usadas em concentraes limitadas para

que no haja inibio do crescimento microbiano e nem aumento do custo do processo.

As fontes mais comuns de nutrientes so sais de fsforo e nitrognio

encontrados em fertilizantes agrcolas, e at mesmo em subprodutos da indstria

petroqumica. A adio de nutrientes feita de modo a se estabelecer relaes carbono e

nitrognio (C:N) e/ou carbono e fsforo (C:P) adequadas biodegradao (HAMDI, et

al., 2007a). No entanto, uma adio descontrolada pode promover a eutrofizao do

local, contribuindo para o desequilbrio ambiental.

2.6.7 Concentrao de Microrganismos Degradadores de Hidrocarbonetos

O sucesso da biorremediao dependente da diversidade da populao de

microrganismos presentes, mais especificamente da disponibilidade de microrganismos

hidrocarbonoclsticos (PAUDYN et al., 2007). Existe uma relao direta entre a taxa de

degradao e o concentrao da populao microbiana, j que quanto maior o nmero

de microrganismos capazes de degradar o composto, mais rpida ser a sua degradao.

O tamanho da populao microbiana maior na superfcie do solo, visto que nesta

regio a temperatura, umidade, aerao e energia so relativamente mais favorveis para

o desenvolvimento dos microrganismos (VIDALLI, 2001).

De acordo com Oliveira (2001), em ecossistemas no contaminados, os

microrganismos degradadores de hidrocarbonetos geralmente constituem menos do que

0,1% da populao microbiana. No entanto, em ambientes contaminados, eles podem

representar a totalidade da comunidade microbiana presente. Entretanto, quando a

concentrao da populao microbiana degradadora de compostos orgnicos baixa em

determinados solos, uma opo para o aumento desta a adio de microrganismos

34
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

autctones (endgenos) ou alctones (exgenos) adaptados s condies do solo a ser

tratado (PAULA et al., 2006).

Os actinomicetos tambm desempenham importante papel na biodegradao de

hidrocarbonetos. Sob o ponto de vista nutricional, so microrganismos pouco exigentes

e capazes de utilizar uma grande variedade de substncias como fonte de carbono,

inclusive hidrocarbonetos aromticos (MADIGAN et al., 2008).

Os fungos promovem a biodegradao de hidrocarbonetos no solo, em especial

os fungos filamentosos, que so encontrados com mais frequncia no solo. Alguns

grupos de bactrias associadas s cianobactrias parecem formar um consrcio eficiente

para a degradao de hidrocarbonetos (ATAGANA et al., 2006). As cianobactrias

fornecem oxignio e nitrognio, assim como outros elementos essenciais para as

atividades das bactrias heterotrficas aerbias. O emprego de consrcios microbianos

possibilita a biodegradao de uma variedade de compostos complexos, posto que

diferentes microrganismos contribuem atravs de seu sistema enzimtico (MARIN et

al., 2005).

2.6.8 Biodisponibilidade do Contaminante

A degradao de compostos orgnicos pode ser influenciada pela

biodisponibilidade do contaminante populao microbiana do solo. Essa dependncia

pode estar relacionada tanto s propriedades qumicas dos compostos orgnicos quanto

s caractersticas do solo. Alm disso, outro fator que influencia a biodisponibilidade a

transferncia de massa do contaminante, ou seja, a taxa com que o substrato pode

alcanar a clula microbiana. A textura e a estrutura do solo influenciam na

biodisponibilidade do hidrocarboneto, visto que os solos que apresentam partculas

35
SILVA, L. J. Reviso Bibliogrfica

maiores resultam em maior porosidade viabilizando a disperso dos microrganismos no

interior dos poros (RIBEIRO et al., 2004).

A taxa de degradao de alguns compostos orgnicos adsorvidos pode ser

influenciada pela densidade da populao microbiana que se encontra na superfcie das

partculas do solo e/ou na fase lquida. Essa taxa pode ser aumentada pela produo de

biossurfactantes, uma vez que estes favorecem a biodisponibilidade permitindo maior

solubilizao e emulsificao do composto (BAPTISTA, 2007).

Atualmente, h uma tendncia mundial para a adoo de bioprodutos, devido

sua origem natural, baixa toxicidade e fcil biodegradabilidade. Estes fatos propiciaram

a execuo de estudos mais aprofundados sobre os biossurfactantes, o que est alinhado

com a atual poltica ambiental de preservao dos recursos naturais.

36
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

CAPTULO 3: MATERIAIS E MTODOS

3.1 METODOLOGIAS OPERACIONAIS

O presente trabalho foi desenvolvido em uma unidade industrial de tratamento

de resduos, localizada na Regio Amaznica. O sistema constitudo por um galpo de

estrutura metlica coberto, com laterais abertas, dimenses externas de 50 m de largura

por 100 m de comprimento. A profundidade mdia da camada reativa de 0,450,05 m,

depositada sobre uma camada de argila compactada, a fim de evitar a percolao de

substncias txicas e consequente contaminao de aquferos subterrneos. O galpo

possui sistema de exausto de ar e dispersores de gua. O sistema foi construdo

obedecendo os requisitos da norma da ABNT NBR ISO 13.894 (Tratamento no Solo

Landfarming, 1997).

Esta unidade recebe resduos oleosos proveniente das operaes de refino de

petrleo para tratamento atravs do processo landfarming. A Figura 3.1 apresenta a foto

de satlite da unidade em estudo.

Figura 3.1: Foto de satlite do Landfarming


Fonte: Programa GoogleEarth, acessado em 9 de fevereiro de 2009

37
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

A unidade foi dividida em 25 clulas de limites imaginrios, identificadas

conforme o esquema da Figura 3.2. Cada clula apresenta dimenses de 10 m de largura

por 20 m de comprimento, perfazendo uma rea de 200 m2. Foram escolhidas 5 clulas,

designadas por A, B, C, D, E, para realizao da pesquisa.

Z P O F E

X Q N G D

W R M H C

V S L I B

U T K J A

Figura 3.2: Identificao das clulas do landfarming

Para viabilizar o bioprocesso, todo material presente nestas clulas foi removido

para a lateral do galpo com auxlio de p-carregadeira. A remoo material foi feita at

atingir a camada de impermeabilizao. Em seguida, foram segregados materiais

imprprios para o processo de landfarming (por exemplo: pedaos de madeira, colunas

de concreto, material cermico diverso, material metlico, etc.). Aps essa seleo e

retirada de entulhos, o solo retirado foi revolvido para homogeneizao e ento

retornado para as clulas de origem de modo a apresentar 0,450,05 m de profundidade

(ATAGANA et al., 2006).

A partir da adequao do bioprocesso aos estudos pretendidos, o solo das clulas

A, B, C, D e E foi submetido tcnica de bioestimulao atravs de umidificao,

aerao e adio de fertilizante (Ouro Verde, N:P:K de 10:10:10). Paralelamente, foi

38
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

isolada uma rea correspondente a clula P, denominada de clula controle, na qual no

ocorreu a bioestimulao.

Uma rotina de procedimentos foi estabelecida atravs de umidificao

(irrigao) e revolvimento do solo (aerao) na frequncia de trs e duas vezes por

semana, respectivamente. A adio de fertilizante foi realizada mensalmente para atingir

a concentrao de 0,125Kg.m-2.

A umidificao foi realizada atravs de dispersores, promovendo a insero de

aproximadamente 3.500 litros de gua, por aplicao, para a rea em estudo (1.000 m2),

conforme apresentado na Figura 3.3.

(a) Dispersor de gua (b) Solo umedecido


Figura 3.3: Sistema de umidificao do solo

A aerao do solo foi promovida por revolvimento utilizando-se um arado

acoplado a trator, e empregando movimentos circulares (Figura 3.4).

39
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

(a) Arado acoplado a trator (b) Solo aps aerao


Figura 3.4: Sistema de homogeneizao do solo

A adio de fertilizante foi realizada mensalmente antes da operao de aerao.

3.2 AMOSTRAGENS DO SOLO

Para verificar o desempenho do bioprocesso foi estabelecida uma frequncia

mensal de amostragem da camada reativa do solo do landfarming seguindo a norma

ABNT NBR ISO 10.007 (Amostragem de Resduos, 2004). Em cada clula foram

realizadas cinco amostragens, em 5 pontos eqidistantes, correspondente a 1 Kg por

ponto, seguida de mistura das amostras para homogeneizao e quarteamento para obter

uma amostra final significativa. Em seguida, o solo foi acondicionado em frascos de

polipropileno estreis para determinaes das grandezas inorgnicas e microbiolgicas,

e em frascos de vidro para quantificao de compostos orgnicos. Convm enfatizar que

todas as amostras foram mantidas em ambiente de baixa temperatura (aproximadamente

4C) para preservar as propriedades fsico-qumicas e biolgicas do solo.

Todo o pessoal envolvido nas operaes estavam munidos de equipamentos de

proteo individual (EPIs), tais como: mscara de vapores orgnicos; capacete; jaleco

40
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

de manga comprida; cala longa; botas; culos de segurana; e luvas. Os aspectos

ergonmicos foram obedecidos de forma a maximizar a confiabilidade humana nas

atividades operacionais, conforme descrito na ABNT NBR ISO 13.894.

3.3 ANLISES FSICAS

As determinaes fsicas do solo, em termos de umidade e pH foram

determinadas no Laboratrio de Microbiologia Aplicada Indstria do Petrleo da

Universidade Federal do Rio de Janeiro.

3.3.1 Umidade

As amostras de solo foram transferidas para placas de Petri previamente taradas;

aps a pesagem, o conjunto foi levado para estufa (Biomatic, modelo 1451) a 801C,

por quarenta e oito horas. Em seguida, resfriou-se os conjuntos em dessecador contendo

slica gel ativa e ento determinou-se o peso do solo seco. O contedo da umidade foi

calculado pela relao da perda de massa com a massa inicial da amostra (base mida),

multiplicando-se por 100 para se obter o resultado em percentagem. As determinaes

de massa foram executadas em balana analtica (ADA, 210/L).

3.3.2 pH

Em um becher de capacidade de 50 mL foram transferidos 10 g de solo medido

em balana analtica (ADA, 210/L). Com auxlio de uma proveta de capacidade de 50

mL, adicionou-se 25 mL de gua deionizada ao becher e procedeu-se a homogeneizao

da suspenso atravs de agitador magntico (QUIMIS, Q.241-1) por um perodo de 20

minutos. A suspenso homogeneizada foi submetida a repouso, por um perodo de 30

minutos, para separao das fases, e o decantado foi transferido para um becher com

41
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

capacidade de 25 mL. Determinou-se o pH em potencimetro (DIGIMED, DM-20)

previamente calibrado com solues tampo de pH = 4,00 e 7,00.

3.3.3 Granulometria

A distribuio granulomtrica do solo foi determinada no Laboratrio de

Geotecnia da Universidade Federal do Rio de Janeiro. O ensaio foi executado seguindo-

se a norma ABNT NBR ISO 7181 (Solo Anlise granulomtrica, 1984), a qual

compreende a homogeneizao da amostra, secagem ao ar, peneiramento em uma srie

de peneiras, e por fim, sedimentao em soluo de orto-polifosfato de sdio.

3.4 ANLISES QUMICAS

As seguintes determinaes analticas foram realizadas: teor de Carbono

Orgnico Total (COT), Nitrognio Total e Fsforo; Hidrocarbonetos Totais do Petrleo

(HTP); Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA); e Elementos Qumicos

(Antimnio, Arsnio, Brio, Berlio, Cdmio, Chumbo, Cobre, Cromo Total, Ferro

Total, Mangans, Mercrio, Nquel, Prata, Selnio, Vandio, e Zinco). Essas

quantificaes foram realizadas pelo Laboratrio Analytical Solutions SA com base nas

metodologias analticas da Agncia de Proteo Ambiental dos Estados Unidos (U. S.

Environmental Protection Agency USEPA), uma vez que esse um rgo de

referncia internacional.

3.4.1 Teores de Carbono Orgnico Total (COT), Nitrognio e Fsforo

A quantificao de COT, nitrognio e fsforo foi determinada pelo mtodo

USEPA 9056A (Determination of Inorganic Anions by Ion Chromatography) usando

cromatografia gasosa acoplada ao detector por ionizao de chamas.

42
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

3.4.2 Hidrocarbonetos Totais do Petrleo (HTP)

A quantificao de Hidrocarbonetos Totais do Petrleo (HTP) foi realizada pelo

mtodo USEPA 8015B (Nonhalogenated organics using GC/FID) de cromatografia

gasosa acoplada ao detector por ionizao de chamas. Os compostos alvos para anlise

de HTP compreendem n-alcanos na faixa de C10 a C36 incluindo pristano e fitano,

demais hidrocarbonetos resolvidos do petrleo (HRP) e mistura complexa no resolvida

(UCM Unresolved Complex Mixture).

A extrao e preparao dos extratos para anlise cromatogrfica foram

executadas de acordo com os mtodos USEPA 3540C (Soxhlet Extraction) e USEPA

3630C (Silica Gel Column Cleanup), respectivamente.

3.4.3 Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA)

Para determinao de Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA) foram

utilizadas as metodologias USEPA 3540C (Soxhlet Extraction) e USEPA 3630C (Silica

Gel Column Cleanup) e USEPA 8270C (Semivolatile Organic Compounds by Gas

Chromatography/Mass Spectrometry - GC/MS). Esses mtodos viabilizam a extrao,

preparao e quantificao de HPA.

Os compostos analisados foram: Naftaleno, Acenaftileno, Acenafteno, Fluoreno,

Fenantrano, Antraceno, Fluoranteno, Pireno, Benzo[a]antraceno, Criseno,

Benzo[b]fluoranteno, Benzo[k]fluoranteno, Benzo[a]pireno, Indeno[1,2,3-cd]pireno,

Dibenzo[a,h]antraceno e Benzo[ghi]perileno.

3.4.4 Elementos Qumicos

A concentrao dos elementos qumicos (Antimnio, Arsnio, Brio, Berlio,

Cdmio, Chumbo, Cobre, Cromo Total, Ferro Total, Mangans, Nquel, Prata, Selnio,

Vandio e Zinco) foi determinada por Plasma Indutivamente Acoplado (ICP-AES), de


43
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

acordo com o mtodo USEPA 3050B, usando digesto cida em microondas. O

elemento qumico Mercrio foi quantificado usando a tcnica analtica de vapor frio,

descrita no mtodo USEPA 7471B.

3.5 ANLISES BIOLGICAS

Foram realizadas anlises microbiolgicas dos microrganismos autctones

atravs de quantificaes de Bactrias Aerbias Heterotrficas (BAE), Fungos

Filamentosos e Bactrias Anaerbias Heterotrficas (BAN).

Foi realizada uma avaliao ecotoxicolgica, ao fim do perodo de tratamento.

Este ensaio foi realizado no Laboratrio de Tecnologia Ambiental da Escola de Qumica

da UFRJ.

3.5.1 Quantificao de Microrganismos

3.5.1.1 Bactrias Aerbias Heterotrficas (BAE)

A avaliao da concentrao de Bactrias Aerbias Heterotrficas (BAE) foi

feita pela tcnica pour plate (APHA, 1992). Uma amostra inicial de solo (10 g) foi

adicionada a 100 mL de uma soluo salina (0,85% NaCl), e colocada sob agitao em

mesa oscilatria termostatizada (TECNAL, TE-420) a 150 RPM por 30 minutos. Em

seguida, a partir da suspenso foram preparadas diluies em soluo salina (0,85%

NaCl) variando de 10-1 a 10-8 e de cada diluio alquotas de 1mL foram transferidas

para placas de Petri adicionando-se em seguida 20 mL do meio de cultura gar

Nutriente (Tabela 3.1) acrescido de 50 mg.L-1 de Nistatina (Neo Qumica). As placas

foram incubadas a 371C durante 48 horas, e aps este perodo, as colnias foram

contabilizadas e os resultados expressos em UFC (Unidades Formadoras de Colnias)

por grama de solo seco. Posteriormente, os microrganismos foram visualizados atravs

44
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

de Microscpio Nikon Eclipse E200 Evolution VF com cmera fotogrfica acoplada

Cooled Color e armazenado em software Media Cybernetics.

Tabela 3.1: Composio do meio gar Nutriente


Componentes g.L-1
Peptona de Carne (VETEC, cd. 5115) 10,0
Extrato de Carne (MERCK, 1.03979) 3,0
K2HPO4 (VETEC, cd. 135) 1,0
Agar Agar (Reagen, 10366) 20,0
NaCl (VETEC, cd. 106) 8,5
* pH = 7,0 ; Esterilizao a 110C por 20 minutos

3.5.1.2 Fungos Filamentosos


A quantificao de Fungos Filamentosos foi realizada pela tcnica pour plate

(APHA, 1992), seguindo a mesma metodologia apresentada no item anterior (item

3.5.1.1). Entretanto foi utilizado o meio de cultura Sabouraud (Tabela 3.2) acrescido de

0,1 g.L-1 de Cloranfenicol. As placas foram incubadas a 371C durante 72 horas, e os

resultados expressos em UFC por grama de solo seco.

Tabela 3.2: Composio do meio Sabouraud


Componentes g.L-1
Peptona de Carne (VETEC, cd. 5115) 10,0
Sacarose (VETEC, cd. 228) 3,0
Agar Agar (Reagen, 10366) 20,0
NaCl (VETEC, cd. 106) 8,5
* pH = 6,0 ; Esterilizao a 110C por 20 minutos

45
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

3.5.1.3 Bactrias Anaerbias Heterotrficas (BAN)

A contagem de Bactrias Anaerbias Heterotrficas (BAN) foi realizada atravs

da tcnica do Nmero Mais Provvel (NMP) (HARRISON JR., 1982), e os resultados

expressos em Cels.g-1 de solo seco. Para tanto, alquotas de 1 mL da suspenso (0,1 g de

solo/g de gua destilada) foram distribudas em frascos do tipo penicilina com

capacidade para 10 mL contendo 9 mL de soluo redutora (Tabela 3.3), de modo a

obter diluies de 10-1 a 10-10. Logo aps, uma alquota de 1 mL de cada diluio foi

transferida para frascos do tipo penicilina contendo 9 mL de meio de cultura Fluido ao

Tioglicolato (Tabela 3.4). Os frascos foram incubados por 15 dias a 371C, e o

crescimento avaliado visualmente pela turvao do meio.

Tabela 3.3: Composio da Soluo Redutora


Componentes Teor
cido ascrbico (MERCK, 1.00127.0100) 0,18 g.L-1
Tioglicolado de Sdio (MERCK, 1.08191) 0,124 g.L-1
Resazurina (VETEC, cd. 1277)** 4,0 mL.L-1
NaCl (VETEC, cd. 106) 8,5 g.L-1
* pH = 7,0 ; Esterilizao a 121C por 15 minutos
** Soluo de Resazurina na concentrao de 0,025% (m/v)

Tabela 3.4: Composio do meio Fluido ao Tioglicolato


Componentes Teor
Glicose (MERCK, 8342) 5,0 g.L-1
Peptona 4,0 g.L-1
Extrato de Levedura (MERCK, 1.03753) 1,0 g.L-1
Resazurina (VETEC, cd. 1277) ** 4,0 mL.L-1
NaCl (VETEC, cd. 106) 8,5 g.L-1
* pH = 7,0 ; Esterilizao a 110C por 20 minutos
** Soluo de Resazurina na concentrao de 0,025% (m/v)

46
SILVA, L. J. Materiais & Mtodos

3.5.2 Avaliao Ecotoxicolgica

Os testes foram realizados empregando um aneldeo da espcie Eisenia foetida,

que tem sido amplamente empregada para avaliar a toxicidade de vrios contaminantes

em solos. O mtodo empregado foi uma adaptao da metodologia descrita no Guia

para Testes Qumicos n. 207 da OECD (Organization for Economic Cooperation and

Development). Sisinno et al. (2006) ressaltam que este mtodo est relacionado com as

normas ISO (International Organization for Standardization) 11268-1 (Soil quality

Effects of pollutants on earthworms (Eisenia foetida) Part 1: Determination of acute

toxicity using artificial soil substrate e ISO 11268-2 (Soil quality Effects of pollutants

on earthworms (Eisenia foetida) Part 2: Determination of effects on reproduction).

Os resultados so apresentados em duplicata e expressos em nmero de

organismos vivos no stimo e dcimo quarto dia de experimento. Para tal, foram

utilizados 200 g de solo, 20 g de esterco, 10 minhocas e gua suficiente para

proporcionar 35% de umidade. Todos os frascos foram revestidos com papel, a fim de

reproduzir o ambiente natural das minhocas, visto que estas so sensveis

luminosidade direta.

47
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

CAPTULO 4: RESULTADOS E DISCUSSO

4.1 CONDICIONAMENTO DO LANDFARMING

A adequao das clulas do landfarming contribuiu para a otimizao da rea

til do local e facilitou nas etapas de aerao do solo. A implantao da camada reativa

com profundidade de 0,450,05 m foi uma etapa fundamental. Essa espessura permitiu

a incorporao da umidade e nutrientes no solo, e consequentemente, favoreceu a

biodegradao por microrganismos aerbios que apresentam maiores velocidades e

porcentagens de biodegradao de hidrocarbonetos (OLLIVIER & MAGOT, 2005). A

partir das adequaes, o bioprocesso esteve de acordo com os requisitos apresentados na

norma ABNT NBR ISO 13.894 (Tratamento no Solo Landfarming). A Figura 4.1

apresenta o aspecto inicial do solo quando submetido a etapa de revolvimento.

Figura 4.1: Aspecto inicial do solo submetido a etapa de revolvimento

48
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Aps a etapa de condicionamento do landfarming s condies adequadas para o

tratamento de resduos slidos oleosos promoveu-se os procedimentos de umidificao,

aerao e fertilizao do solo das clulas A, B, C, D e E (clulas tratadas) de acordo

com a sistemtica apresentada no item 3.1. A Figura 4.2 apresenta a aparncia da

camada reativa do bioprocesso.

Figura 4.2: Aparncia do solo aps adequao do sistema

Os resultados apresentados a seguir compreendem os valores mdios com

respectivos desvios-padres das clulas, perfazendo uma rea de 1.000 m2 sob

tratamento. A densidade do solo do landfarming foi de 0,860,11 g.cm-3, determinada

pela pesagem do solo em volume pr-definido. As 5 clulas apresentaram 0,450,05 m

de profundidade equivalente a 387 toneladas de solo.

A literatura reporta um nmero significativo de trabalhos envolvendo tratamento

de hidrocarbonetos em escala industrial pelo processo de landfarming. Castro et al.

49
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

(2005) viabilizaram a otimizao do landfarming da RPBC (Refinaria Presidente

Bernardes) para o tratamento de resduo slido contido numa rea de 24.000 m2 atravs

das seguintes atividades: recuperao topogrfica; caracterizao qumica, fsica e

biolgica do solo; correo do pH; fertilizao; aerao; e monitoramento da camada

reativa do solo (variveis fsico-qumicas e biolgicas).

Atagana (2004) tratou uma rea de 9.375 m2 contaminada com creosoto

(derivado do processamento do alcatro de hulha contendo alta concentrao de

hidrocarbonetos policclicos aromticos) aplicando operaes de aerao, umidificao,

controle de pH e adio de fertilizantes NPK.

Na maioria dos trabalhos desenvolvidos em landfarming so aplicadas tcnicas

de bioestimulao (aerao, umidificao, controle do pH e adio de nutrientes) e/ou

bioaumentao (insero de microrganismos alctones e/ou autctones). A norma

ABNT NBR ISO 13.894 preconiza a necessidade de monitoramento dos fatores

ambientais para avaliar o desempenho do bioprocesso e, caso necessrio, aplicar as

aes corretivas.

Neste trabalho foram empregadas operaes de umidificao, aerao e

fertilizao por um perodo de 225 dias. Nesse tempo, o sistema no sofreu acentuadas

interferncias climticas como chuva e incidncia direta da radiao solar porque o

galpo tem cobertura metlica.

Os resultados fsico-qumicos e biolgicos finais, que sero apresentados nos

itens seguintes, indicaram sucesso no tratamento dos resduos slidos. Posteriormente, o

solo pode ser utilizado para tcnicas de fitorremediao a fim de promover uma

remoo e aproveitamento dos compostos remanescentes. Na sequncia, o vegetal

crescido pode ser usado como fonte de matria-prima para produo de biodiesel

atravs de processamento adequado do leo vegetal extrado.

50
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

4.2 DETERMINAES FSICO-QUMICAS

A partir do incio dos procedimentos operacionais de umidificao, aerao e

fertilizao das clulas A, B, C, D e E do landfarming, implantaram-se as

determinaes fsico-qumicas e microbiolgicas do solo das clulas estudadas.

4.2.1 Curva Granulomtrica

Na etapa inicial foi realizada uma anlise granulomtrica do resduo slido

presente nas clulas e os resultados


Curvaesto apresentados na Figura 4.3.
Granulomtrica

AREIA PEDREGULHO
ABNT ARGILA SILTE
FINA MDIA GROSSA FINO MDIO GROSSO

100 200 100 60 40 30 20 10 8 4 3/8 3/4 1 1 1/2 0

10
90
Porcent agem ul trapassada

20
80

Porcent agem Retida


30
70
40
60
50

50 60

40 70

80
30
90
20
100
10

0
0,001 0,01 0,1 1 10

Dimetro das Partculas (mm)

Figura 4.3: Curva granulomtrica do solo

A composio granulomtrica do resduo slido estudado mostrou 50% de areia,

23% de silte, 20% de argila e 7% de pedregulho. De acordo com a escala de Atterberg

da NRCS (Natural Resourses Conservation Services) o solo foi classificado como solo

franco-argilo-arenoso.

A predominncia de areia no solo indica maior permeabilidade, tendo em vista

que solos arenosos apresentam poros com dimetro maior do que 0,1mm,

51
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

consequentemente favorecendo a transferncia de massa, e a disponibilidade de

nutrientes, em especial o oxignio, e permitindo o contato dos microrganismos e

hidrocarbonetos (MARIN et al., 2005). No entanto, os teores de finos indicam a

necessidade de operaes para aerao e homogeneizao do solo, com vistas

melhoria da biodegradao de hidrocarbonetos.

Adicionalmente, uma maior permeabilidade no solo facilita a disperso de gua

tornando o hidrocarboneto mais biodisponvel aos microrganismos porque aumenta a

interface hidrocarboneto-gua.

4.2.2 Umidade e pH

Os teores de umidade monitorados nas clulas tratadas e na clula controle esto

apresentados na Figura 4.4.

30
Tratado
Controle
25

20
Um i da de (%)

15

10

0
0 30 60 90 120 150 180 210 240

Perodo (dias)

Figura 4.4: Perfil da umidade nas clulas tratadas e controle

Pela Figura 4.4 notamos um pequeno desvio-padro em relao mdia

indicando pequena variabilidade da umidade na rea estudada. A umidade das clulas

tratadas ficou no nvel de 20% a 23%, enquanto na clula controle esteve entre 13% a

52
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

19%, sendo menos expressivo porque o solo no foi umidificado. Neste processo

indicado que a umidade fique na faixa de 20 a 26%, pois este ndice apresenta o melhor

custo-benefcio (ATAGANA et al. 2006).

Segundo Mphekgo & Cloete (2004), a umidade um fator importante para a

biodegradao, pois est relacionada com a biodisponibilidade do contaminante, atravs

dos fenmenos de transferncia de massa entre o hidrocarboneto e os microrganismos.

O aumento da umidade resulta em maior biodegradao de hidrocarbonetos,

entretanto o excesso pode dificultar a disperso de oxignio (MARIN et al., 2005).

Alm disso, a umidificao em excesso pode comprometer economicamente o processo.

Jatar et al. (1993) destacam as oportunidades de implantao de landfarming em

regies de clima tropical, ressaltando a intensa precipitao anual (ndice mdio de

1.020 mm.ano-1) como fator auxiliar no aumento da umidade da rea.

O clima da regio amaznica, em estudo, caracterizado como equatorial

mido, sendo resultante de uma combinao de vrios fatores, dos quais o mais

importante a disponibilidade de energia solar. Apresenta temperatura mdia anual de

26,6C, umidade relativa do ar entre 75-86% e precipitao anual variando entre 1750 a

2500 mm (LIMA, 2002).

Algumas faixas de umidade so apresentadas por Mphekgo & Cloete (2004),

citando vrios autores, destacando valores entre 20% a 80% de capacidade de reteno

em campo.

As condies climticas de precipitao intensa na regio amaznica fomentam

a necessidade deste sistema ter cobertura para evitar forte incidncia de chuva, e

permitir melhor controle dessa varivel no bioprocesso.

O comportamento do pH das clulas tratadas e controle est apresentado na

Figura 4.5.

53
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

10
Tratado
Controle
9

8
pH

4
0 30 60 90 120 150 180 210 240

Perodo (dias)

Figura 4.5: Perfil dos valores de pH das clulas tratadas e controle

De acordo com a Figura 4.5, o baixo desvio-padro indica pequena variabilidade

desta grandeza no sistema. O pH nas clulas tratadas iniciou com 7,3 e atingiu 6,2.

Nota-se a ocorrncia de uma reduo do pH no decorrer do perodo de tratamento,

possivelmente devido formao de metablitos intermedirios de carter cido, que

posteriormente podero ser biodegradados at o nvel de gua e dixido de carbono. Na

clula controle, o pH variou menos.

De acordo com Oliveira & de Frana (2004), os microrganismos devem manter

seu pH intracelular em torno de 7,5, considerando que o pH do meio influencia

diretamente no metabolismo microbiano.

Em solos e em guas, a faixa ideal para que ocorra a biodegradao de forma

mais efetiva entre 6,5 a 7,5, pois permite o crescimento de bactrias,

reconhecidamente mais eficientes na metabolizao de hidrocarbonetos. O pH neutro

mais favorvel ao crescimento de bactrias, enquanto os valores de pH cido permitem

o desenvolvimento de fungos filamentosos (OLLIVIER & MAGOT, 2005).

54
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Nas clulas tratadas, com 160 dias, o pH do solo ficou ligeiramente abaixo de

6,5, ainda na faixa de biodegradao, no necessitando adicionar corretivos para

aumentar esta varivel.

Peltola et al. (2006) descrevem diversos produtos auxiliares para controle do pH

em torno da neutralidade, tais como calcrio, sulfato de amnio e hidrxido de clcio.

4.2.3 Elementos Qumicos

As clulas tratadas e controle foram submetidas anlise de metais aps o

perodo de tratamento do solo. Estes resultados esto apresentados na Tabela 4.1.

Tabela 4.1: Comparativo dos valores de interveno e de referncia de qualidade com os


resultados obtidos
Valores de interveno para Referncia de
Resultados obtidos
Elementos solos de rea industrial Qualidade
Qumicos CETESB USEPA Clulas Tratadas CETESB
mg.Kg-1
Antimnio 25 N.R. 2,090,26 <0,5
Arsnio 150 N.R. 0,520,11 3,5
Brio 750 N.R. 53,456,59 75
Berlio N.R. 1.900 <0,1 N.R.
Cdmio 20 N.R. 0,180,06 <0,5
Chumbo 900 N.R. 28,692,94 17
Cobre 600 N.R. 281,8915,95 35
Cromo Total 400 N.R. 25,123,71 40
Ferro Total N.R. 100.000 13.252,51722,14 N.R.
Mangans N.R. 19.000 60,935,92 N.R.
Mercrio 70 N.R. 0,130,02 0,05
Nquel 130 N.R. 47,9210,28 13
Prata 100 N.R. <0,25 0,25
Selnio N.R. 5.100 0,690,08 0,25
Vandio N.R. 1.000 284,5349,63 275
Zinco 2.000 N.R. 328,4279,10 60
N.R.: No referenciado

55
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

A Tabela 4.1 mostra que todos os metais apresentaram teores menores do que

aqueles preconizados pela CETESB e USEPA para interveno em reas industriais.

Entretanto, as concentraes dos principais metais encontrados no leo cru como

Vandio, Nquel, Chumbo, Ferro e Cobre apresentaram valores maiores do que os

valores de referncia de qualidade da CETESB.

Adicionalmente, os elementos Antimnio, Mercrio, Zinco e Selnio tambm

estiveram acima dos valores de referncia de qualidade que definem um solo natural

isento de ao degradadora. A concentrao desses elementos qumicos no solo controle

apresentou valores prximos ao solo das clulas tratadas.

Aps o perodo de tratamento, o solo tratado foi submetido ao ensaio de

classificao de acordo com a norma ABNT NBR ISO 10.004 (Resduos Slidos

Classificao, 2004), ABNT NBR ISO 10.005 (Procedimento para Obteno de Extrato

Lixiviado de Resduos Slidos, 2004) e ABNT NBR ISO 10.006 (Procedimento para

Obteno de Extrato Solubilizado de Resduos Slidos, 2004). Os resultados obtidos no

lixiviado do solo tratado e os valores orientadores esto apresentados na Tabela 4.2.

Tabela 4.2: Concentrao de elementos qumicos no lixiviado do solo tratado


Clulas Tratadas Valores Padro no Lixiviado
Parmetro
mg.L-1
Alumnio 0,1160,024 0,200
Arsnio <0,005 0,010
Brio 0,0710,005 0,700
Cdmio 0,002 0,010
Chumbo 0,016 0,010
Cobre 0,0980,040 2,000
Cromo Total <0,01 0,050
Ferro 1,5410,352 0,300
Mangans 1,1960,397 0,100
Mercrio <0,001 0,010
Prata <0,01 0,050
Selnio <0,005 0,010
Zinco 4,2130,892 5,000

56
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

De acordo com a Tabela 4.2 os elementos Brio e Chumbo estiveram

ligeiramente acima do limite mximo permitido segundo a norma ABNT NBR ISO

10.004. Entretanto, os elementos Ferro e Mangans apresentaram discrepncia em

relao a este limite. Por este motivo o solo foi classificado como Classe IIA (No

Inerte).

Hejazi et al. (2003) destacam que os metais presentes nos resduos de refinarias

so provenientes principalmente de catalisadores gastos, e ressaltam ainda que alguns

metais como Arsnio, Cromo, Chumbo e Nquel podem ser txicos para a microbiota,

comprometendo o desempenho do bioprocesso.

Baird (2002) descreve que Hg, Pb, Cd e As so perigosos nas suas formas

catinicas e tambm quando ligados a cadeias curtas de tomos de carbono. O

mecanismo de sua ao txica deriva da forte afinidade dos ctions pelo enxofre dos

grupos sulfidrilas das enzimas, acarretando em inativao de algumas vias metablicas

essenciais s atividades fisiolgicas.

Souza et al. (2009) trabalharam em landfarming contendo as seguintes

concentraes de metais: Ba (493,4), Cd (<0,01), Cr (400,2), Ni (104,5) e Pb (18,8

mg.Kg-1). Os autores discutem que as elevadas concentraes desses metais foram

fatores limitantes do metabolismo microbiano, resultando na degradao de apenas 27%

de HTP em 108 dias. Nota-se que este solo apresentou concentraes de metais maiores

do que o solo tratado atravs de nossos experimentos (Tabela 4.1), com exceo dos

metais Chumbo e Cdmio.

Vrias clulas microbianas apresentam a capacidade de biossoro de metais.

Vieira et al. (2007) desenvolveram processos em escala piloto (regime batelada e

contnuo) para absoro de Chumbo, em altas concentraes, usando microalgas

Sargassum filipendula. Enfatiza-se que diversos grupos de bactrias podem captar

57
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

metais pesados do meio ambiente por fenmenos de adsoro ou absoro. Os

resultados obtidos mostraram tolerncia da microbiota autctone aos metais,

possivelmente devido a um desses mecanismos.

4.2.4 Nutrientes: Fsforo (P), Nitrognio (N) e Carbono Orgnico Total (COT)

Os macronutrientes so os compostos requeridos em grande quantidade pelas

clulas microbianas como carbono, oxignio, nitrognio, potssio, clcio, magnsio

fsforo e enxofre (RISER-ROBERT, 1998). O monitoramento desses nutrientes, em

especial fsforo, nitrognio e carbono, importante para avaliar o desempenho do

bioprocesso de degradao (BENTO et al., 2005). O perfil desses elementos em funo

do tempo est apresentado nas Figuras 4.6 e 4.7.

220

COT - Tratado
200

180
x 103 COT (mg / Kg )

160

140

120

100

80

60
0 30 60 90 120 150 180 210 240

Perodo (dias)

Figura 4.6: Perfil de Carbono Orgnico Total (COT) nas clulas tratadas

De acordo com a Figura 4.6 nota-se que a concentrao de carbono orgnico

total esteve na faixa de 180.000-80.000 mg.Kg-1 no solo tratado. O solo controle teve

comportamento semelhante ao tratado. Assim, nos dois sistemas os teores de COT

58
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

decresceram enfatizando-se que no solo tratado o decaimento foi mais acentuado,

possivelmente em funo dos melhores fatores ambientais oferecidos biodegradao.

2400

2200

2000

1800 N - Tratado
P - Tratado
N; P (mg / Kg )

1600
P - Controle
1400 N - Controle

1200

1000

800

600

400

200

0
0 30 60 90 120 150 180 210 240
Perodo (dias)

Figura 4.7: Perfil de Fsforo (P) e Nitrognio (N) nas clulas tratadas e controle

Pela Figura 4.7 observa-se que a concentrao de fsforo esteve na faixa de 506-

1.020 mg.Kg-1 e 435-202 mg.Kg-1 para os solos tratados e controle, respectivamente. O

teor de nitrognio ficou no intervalo de 1.665-2.180 mg.Kg-1 e 1.306-852 mg.Kg-1 para

os solos tratados e controle, respectivamente.

Nas clulas tratadas, as concentraes de nitrognio e fsforo aumentaram em

funo da adio de 0,125 Kg.m-2.ms-1 de fertilizantes NPK com suprimento maior do

que a demanda pelos microrganismos. Entretanto, no solo controle os teores de N e P

decresceram decorrentes do consumo pelos microrganismos.

O nitrognio no solo representado naturalmente pelas formas inicas: amnio

(NH4+), nitrato (NO3-) e raramente nitrito (NO2-). A assimilao de NO3- e NO2- pelos

microrganismos conduz reduo desses compostos com formao de amnia,

envolvendo as enzimas nitrato redutase e nitrito redutase. Nas demais rotas bioqumicas

59
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

sequenciais o nitrognio precursor de vias metablicas para formao de aminocidos,

peptdeos ou peptonas (OLLIVIER & MAGOT, 2005).

O fsforo assimilado pelos microrganismos sob a forma de nion fosfato, o

qual importante por fazer parte de molculas como DNA (Deoxyribonucleic Acid),

RNA (Ribonucleic Acid), fosfolipdios, NAD, FAD, coenzima A e de algumas

vitaminas (MADIGAN et al., 2008).

MARIN et al. (2005) descrevem que a quantificao de enzimas dos ciclos do

carbono (-glucosidase), nitrognio (urease e protease) e fsforo (fosfatase) so

medidas importantes para estimar a atividade microbiana, assim como avaliar o grau de

contaminao da rea impactada.

As relaes C:N e C:P so variveis de processo importantes para verificar a

disponibilidade desses nutrientes essenciais para as atividades metablicas dos

microrganismos (SOUZA et al., 2009).

A Figura 4.8 apresenta o comportamento das relaes C:N e C:P dos solos

tratado e controle.

180 600

160
500
140

120 400

100
C: N

300
C: P

80

60 200

40
100
20

0 0
0 75 125 160 185 222

Perodo (dias)

C:N - Tratado C:N - Controle C:P - Tratado C:P - Controle

Figura 4.8: Relaes C:N e C:P nas clulas tratadas e controle

60
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Pela Figura 4.8 nota-se que a relao C:N variou de 108 a 35 (reduo de

66,98%) e 156 a 110 (decrscimo de 29,12%) para os solos tratado e controle,

respectivamente. Enquanto a relao C:P variou de 355 a76 (reduo de 78,57%) e 466

a 300 (reduo de 35,62%) para os solos tratado e controle, respectivamente. Observa-

se que estas razes reduziram no solo tratado em consequncia da utilizao dos

hidrocarbonetos, principal fonte de carbono orgnico, pelos microrganismos.

No mercado existe uma grande variedade de fontes nutricionais para tratamento

de solos no sistema de landfarming. Line et al. (1996) avaliaram a adio de sulfato de

amnio e superfosfato para atingir as razes 28:1 (C:N) e 200:1 (C:P) obtendo reduo

de HTP de 4.644 mg.Kg-1 para menos de 100 mg.Kg-1 em 12 meses.

Atagana (2004) aplicou 0,25 Kg.m-2 de calcrio e 0,20 Kg.m-2 de fosfato de

amnio. Essas concentraes foram baseadas em trabalhos em escala piloto, e

permitiram alcanar a relao C:N:P de 25:1:1, possibilitando o tratamento de uma

grande rea contaminada com creosoto.

A otimizao do sistema landfarming desenvolvida por Castro et al. (2005)

envolveu adies de calcrio (1,12), sulfato de amnio (0,178), fertilizante NPK

(0,083), cloreto de potssio (0,159) e superfosfato triplo (0,0853 Kg.m-2). As

concentraes de COT, fsforo e nitrognio obtidas foram semelhantes s obtidas neste

trabalho, permitindo um aumento considervel da populao microbiana.

A adio controlada de nutrientes deve ser obedecida para evitar a eutrofizao

do local. Peltola et al. (2006) estudaram o efeito da atividade nitrificante aps

fertilizao com uria e metileno de uria. Os resultados mostraram que a fertilizao

prolongada por um perodo de 20 anos levou acumulao de NH4+, acarretando em

inibio de uma parcela significativa da microbiota. Os autores reportam ainda que a

adio de metileno de uria teve melhores resultados por permitir melhor absoro de

61
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

amnia pelos microrganismos agilizando as etapas metablicas de consumo de

nitrognio.

A adio de nutrientes e co-substratos (por exemplo, biodiesel e leos graxos)

em escala industrial requer uma anlise preliminar das propriedades fsico-qumicas e

biolgicas do solo para dimensionar o tipo e a quantidade de nutrientes.

4.2.6 Degradao de Hidrocarbonetos Totais do Petrleo (HTP)

Para acompanhar o desempenho do bioprocesso foi monitorada a concentrao

de Hidrocarbonetos Totais do Petrleo (HTP) durante o perodo de tratamento. Esses

resultados constam na Figura 4.9.

8.000
Tratado
7.000 Controle

6.000
HT P (mg / Kg )

5.000

4.000

3.000

2.000

1.000

0
0 30 60 90 120 150 180 210 240

Perodo (dias)

Figura 4.9: Degradao de hidrocarbonetos totais do petrleo (HTP)


nos solos tratados e controle

Pela Figura 4.9 nota-se que no solo tratado a concentrao de HTP iniciou com

6.475385 mg.Kg-1 e atingiu 67025 mg.Kg-1 em 225 dias de tratamento, equivalente a

89,6% de degradao. Enquanto no solo controle a concentrao de HTP iniciou com

6.479 mg.Kg-1 e atingiu 5.026 mg.Kg-1 perfazendo 22,4% de degradao.

62
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Nos dois sistemas a degradao de HTP foi caracterizada por fenmenos fsico-

qumicos de volatilizao e microbiolgicos de biodegradao, entretanto nas clulas

tratadas esses fatores foram mais intensos devido s adequadas fontes nutricionais,

sobretudo de nitrognio e fsforo, alinhadas com as condies ambientais oferecidas de

aerao e umidificao.

De acordo com a legislao holandesa, um solo merece interveno quando o

teor de HTP exceder a 5.000 mg.Kg-1. Com base na Figura 4.9, no solo tratado a

concentrao de HTP ficou abaixo desse limite de interveno em apenas 90 dias, em

contrapartida o solo controle permaneceu fora dos padres mesmo aps 225 dias.

O sucesso desse tratamento (89,6% de degradao no solo tratado) no se deve

somente microbiota autctone presente no solo mas, sobretudo, s tcnicas aplicadas

de aerao, fertilizao e umidificao que permitiram estimular o crescimento dos

microrganismos.

Outra forma de visualizar a eficincia do bioprocesso atravs da produtividade,

conforme apresentado na Figura 4.10.

40
Controle

35 Tratado
Pr od u t ivi da de (mg / Kg . di a)

30

25

20

15

10

0
0 30 60 90 120 150 180 210 240
Perodo (dias)

Figura 4.10: Produtividade de degradao de hidrocarbonetos totais do petrleo

63
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

De acordo com a Figura 4.10 nota-se que a produtividade de degradao de HTP

foi maior no solo tratado em relao ao solo controle. A velocidade de degradao foi

mais expressiva no perodo de 75 a 120 dias, e se manteve estvel em 30 mg.Kg-1.dia-1

no perodo de 120 a 190 dias, embora aps 190 dias tendo apresentado ligeiro

decrscimo, provavelmente devido a efeitos ocasionados por metablitos formados. A

produtividade mdia no solo tratado foi de 25,8 mg.Kg-1.dia-1 enquanto o controle

apresentou apenas 6,5 mg.Kg-1.dia-1.

Line et al. (1996), estudando o processo de landfarming atravs de tcnicas de

umidificao e aerao, obtiveram uma produtividade de degradao de HTP de 12

mg.Kg-1.dia-1. Por outro lado, Paudyn et al. (2007) trabalhando em regio de clima

rtico (localizado no Canad) observaram uma reduo de HTP de 2.800 ppm para

menos de 200 ppm em 700 dias de tratamento (3,71 mg.Kg-1.dia-1).

Balba et al. (1998) aplicaram a tecnologia de landfarming para o tratamento de

resduos oleosos na regio desrtica do Kuwait, e obtiveram uma reduo de HTP de

40.000 mg.Kg-1 para 7.000 mg.Kg-1 em 12 meses (91,67 mg.Kg-1.dia-1). Os

experimentos de Souza et al. (2009) resultaram na reduo de HTP de 13.500 mg.Kg-1

para 9.800 mg.Kg-1 em 108 dias (34,25 mg.Kg-1.dia-1).

Comparando os resultados obtidos com os dados reportados na literatura

verifica-se que o bioprocesso em estudo teve excelente desempenho na degradao de

HTP, considerando as tcnicas empregadas, a concentrao inicial de hidrocarbonetos e

o perodo de tratamento.

Segundo Hejazi et al. (2003), o teor de HTP no pode ser empregado como

resposta para quantificar o risco sade humana e ao meio ambiente, visto que engloba

diferentes tipos de hidrocarbonetos em distintas propores. No entanto, pode ser

64
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

empregado como uma ferramenta til para identificao do grau de contaminao,

assim como avaliar o desempenho de um processo de remediao.

Mesmo aps o solo se enquadrar abaixo do limite preconizado pela legislao

holandesa, em termos de HTP, o monitoramento se manteve at que o teor de HPA

tambm alcanasse os nveis permitidos para descomissionamento.

4.2.6 Degradao de Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA)

Para avaliar a biodegradao foram monitoradas, tambm, as concentraes de

compostos mais recalcitrantes, os Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA).

Esses resultados esto apresentados na Figura 4.11.

45
Tratado
40 Controle
35
HP A (mg / Kg )

30

25

20

15

10

0
0 30 60 90 120 150 180 210 240

Perodo (dias)

Figura 4.11: Degradao dos 16 Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (HPA)


prioritrios da USEPA, nos solos tratados e controle

Pela Figura 4.11 nota-se que no solo tratado o somatrio dos 16 HPA prioritrios

segundo a USEPA iniciou com 34,173,25 mg.Kg-1 e atingiu 3,871,13 mg.Kg-1 aps

225 dias de tratamento, equivalente a 88,7% de degradao. A velocidade de

biodegradao foi mais acentuada entre 75 e 130 dias. No solo controle a concentrao

65
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

de HPA iniciou com 40,17 mg.Kg-1 e alcanou 29,79 mg.Kg-1 perfazendo 25,8% de

degradao.

A anlise da eficincia do bioprocesso atravs da quantificao de HPA se deve

reconhecida recalcitrncia desses compostos.

Enfatiza-se a elevada mutagenicidade e carcinogenicidade causada por esses

compostos (HARSEM et al., 2007). Hejazi et al. (2003) destacam que a intoxicao

pode ocorrer pelas vias drmicas e areas, e os efeitos mais comuns so: alteraes no

DNA, troca de cromatdeos irmos, aberraes cromossomiais e sntese descontrolada

do DNA. Segundo Baird (2002), o mecanismo carcingeno dos HPA envolve reaes

metablicas de epoxidao por meio de monooxigenases (dependentes do citocromo P

450) formando molculas estveis capazes de se ligar ao DNA, induzindo, assim, a

mutaes e cncer.

Em vista desta problemtica, as legislaes ambientais esto cada vez mais

severas em relao aos compostos policclicos aromticos. A legislao holandesa

estabelece os seguintes valores mximos de HPA em solos semelhantes aos estudados

nesse trabalho: 1,0 mg.Kg-1 como referncia de qualidade; 20,5 mg.Kg-1 para alerta; e

40 mg.Kg-1 para interveno em rea industrial. Comparando-se com os resultados

apresentados na Figura 4.11, nota-se que os solos tratados e controle estiveram abaixo

do limite de interveno em rea industrial.

De acordo com a Figura 4.11, o solo tratado apresentou valores prximos ao

padro de referncia de qualidade segundo a legislao holandesa. Entretanto o solo

controle pode ser classificado como rea de alerta, decorrente da concentrao de HPA

remanescente ser maior do que 20,5 mg.Kg-1, o que implica no estabelecimento de pelo

menos um plano de monitoramento para o local.

A Figura 4.12 apresenta a produtividade de degradao de HPA.

66
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

0,20
Controle

Pr od u t ivi dade (mg / Kg . di a) Tratado

0,15

0,10

0,05

0,00
0 30 60 90 120 150 180 210 240
Perodo (dias)
Figura 4.12: Produtividade de degradao de hidrocarbonetos policclicos aromticos

De acordo com a Figura 4.12, nota-se que a produtividade de degradao de

HPA foi maior no solo tratado em relao ao solo controle. A velocidade de degradao

foi mais expressiva no perodo de 75 a 120 dias, e se manteve estvel em 0,14 mg.Kg-
1
.dia-1 no perodo de 150 a 225 dias. A produtividade mdia no solo tratado foi de 0,13

mg.Kg-1.dia-1, enquanto o controle teve apenas 0,04 mg.Kg-1.dia-1, trs vezes menor, o

que revela a importncia das aes implementadas.

Picado et al. (2001) estudaram o tratamento de resduo de coque pelo processo

de landfarming contendo alta concentrao de HPA (1.140 mg.Kg-1), e aps 3 meses

obtiveram 63% de degradao, sendo mais acentuada para os compostos com 2 e 3

anis benznicos, e com uma produtividade mdia de 7,98 mg.Kg-1.dia-1.

Sayles et al. (1999) avaliaram a degradao de HPA em landfarming em escala

piloto. A concentrao de HPA total variou de 2.800 mg.Kg-1 (incio) para 1.160

mg.Kg-1 (final) em 175 dias, equivalente a uma produtividade de 9,37 mg.Kg-1.dia-1. A

avaliao toxicolgica feita pelos autores indicou significativa reduo do carter

carcinognico e mutagnico no solo tratado.


67
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Atagana (2004) viabilizou o tratamento de solo contaminado com creosoto

(derivado do processamento do alcatro de hulha) pelo processo de landfarming numa

rea contendo alta concentrao de HPA (1.229,9 mg.Kg-1), e aps um perodo de 10

meses observou a reduo de HPA para 92,4 mg.Kg-1, equivalente a uma produtividade

mdia de 3,79 mg.Kg-1.dia-1, sendo mais acentuada para HPA contendo 2 e 3 anis

benznicos, embora os compostos com 4 e 5 anis foram 81,5% degradados.

Comparando com os resultados reportados na literatura verifica-se que o

bioprocesso em estudo apresentou excelente desempenho na degradao de HPA,

considerando as tcnicas empregadas e o perodo de tratamento.

Na Figura 4.13 est detalhado o percentual de degradao dos 16 HPA

prioritrios segundo a USEPA nos solos tratado e controle.

Naftaleno (2)
Acenaftileno (2)
Acenafteno (2)
Fluoreno (2)
Fenantreno (3)
Antraceno (3)
Fluoranteno (3)
Pireno (4)
Benzo[a]antraceno (4)
Criseno (4)
Benzo[b]fluoranteno (4)
Benzo[k]fluoranteno (4)
Benzo[a]pireno (5)
Indeno[1,2,3-cd]pireno (5)
Dibenzo[a,h]antraceno (5)
Benzo[g,h,i]perileno (6)
SOMA 16 HPA

0 20 40 60 80 100

Solo Tratado Solo Controle Degradao (%)

Figura 4.13: Degradao dos 16 hidrocarbonetos policclicos aromticos da USEPA

68
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

A comparao da biodegradao dos compostos policclicos aromticos (Figura

4.13) indica que houve maior degradao desses compostos no solo tratado, embora

houvesse remoo tambm no solo controle.

No solo tratado, Naftaleno e Acenaftileno foram totalmente degradados. Mesmo

o composto sendo altamente recalcitrante como o Benzo[g,h,i]perileno apresentou 74%

de degradao.

Oliveira e de Frana (2005) trataram solo arenoso contaminado com 14.000

mg.Kg-1 de leo rabe leve, e aplicaram tcnicas de fertilizao, correo do pH e

bioaumentao. Os autores reportam os seguintes valores de degradao: Naftaleno

(40%), Fenantreno (35%), Criseno (33%), Benzo[a]antraceno (30%) e

Benzo[b]fluoranteno (29%) em 56 dias de tratamento.

Segundo Xia et al. (2006) a eficincia da biodegradao de compostos como

Benzo[g,h,i]perileno foi menor em relao a Criseno e Benzo[a]pireno. As eficincias

de biodegradao para Criseno, Benzo[a]pireno e Benzo[g,h,i]perileno foram de 95%,

79% e 49%, respectivamente.

Os nossos resultados esto de acordo com os estudos reportados na literatura

indicando que HPA com menor complexidade estrutural tende a ser mais facilmente

biodegradado.

Sayles et al. (1999) descrevem que os compostos mais carcinognicos so

Benzo[a]antraceno, Criseno, Benzo[b]fluoranteno, Benzo[k]fluoranteno,

Benzo[a]pireno, Dibenzo[a,h]antraceno e Indeno[1,2,3-cd]pireno. Os autores trataram

HPA pelo processo de landfarming e obtiveram 59% de remoo de HPA totais, mas

somente 26% de degradao da classe dos HPA carcinognicos, que tendem a ser mais

recalcitrantes.

69
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

A CESTEB prev interveno em solos de reas industriais se as concentraes

de Benzo[a]pireno e Benzo[g,h,i]perileno ultrapassarem 3,5 e 1,3 mg.Kg-1,

respectivamente. No perodo monitorado, o solo tratado apresentou concentraes

desses compostos abaixo do limite de interveno. Entretanto, no solo controle o

Benzo[g,h,i]perileno permaneceu acima dos padres devido elevada recalcitrncia em

funo do nmero de anis benznicos constituintes na estrutura molecular.

De acordo com os limites de interveno da USEPA, a concentrao limite do

Benzo[b]fluoranteno de 2,1 mg.Kg-1. No solo tratado, em apenas 75 dias foi possvel

reduzir esta concentrao para valores abaixo desse limite, entretanto o solo controle

ficou fora dos padres mesmo aps 225 dias de tratamento.

A Tabela 4.3 apresenta a degradao das diferentes classes de HPA para os solos

de controle e tratado.

Tabela 4.3: Relao entre nmero de anis benznicos do HPA e respectiva degradao
N de Anis Benznicos
Solo 2 3 4 5 6
Degradao (%)
Tratado 93,84 5,23 91,88 1,20 87,42 1,98 79,92 2,18 74,34
Controle 29,50 7,47 24,72 1,53 23,37 2,96 21,57 2,77 21,61

Pela Tabela 4.3 nota-se que quanto menor o nmero de anis benznicos na

molcula, mais facilmente ocorre a biodegradao. O solo tratado apresentou

degradao aproximadamente 3 vezes maior do que o controle para todas as classes de

HPA.

Byss et al. (2008) avaliaram a remediao de uma rea contaminada com

creosoto (alta concentrao de HPA) usando bioaumentao com linhagens de

basidiomicetos previamente selecionadas e isoladas. A concentrao de HPA inicial foi

70
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

de 200mg.Kg-1, e aps 120 dias de tratamento obtiveram 96%, 72%, 49% e 38% de

biodegradao de compostos contendo 2, 3, 4 e 5 anis benznicos, respectivamente.

Hamdi et al. (2007a) avaliaram a biodegradao especfica de Antraceno (ANT),

Pireno (PYR) e Benzo[a]pireno (B[a]P), e empregaram tcnicas de bioestmulo e

bioaumento para a remoo desses compostos. Os autores observaram completa

degradao de ANT e PYR em apenas 30 dias, mas B[a]P reduziu de 1.000 mg.Kg-1

para 420 mg.Kg-1 em 90 dias. A velocidade de biodegradao foi coerente com o

nmero de anis benznicos, sendo maior para o ANT e PYR, que possuem 3 e 4 anis

respectivamente, e mais lenta para o B[a]P, que pode estar relacionada com a forte

interao dos 5 anis benznicos com a matriz slida, resultando em baixa transferncia

de massa para os microrganismos.

Dentre os HPA estudados, o Benzo[a]pireno o mais preocupante porque

acumula na cadeia alimentar com propriedades fsico-qumicas semelhantes as de

muitos inseticidas organoclorados como DDT, dieldrin e antrazina (BAIRD, 2002).

Os resultados obtidos neste trabalho resultaram na remoo de 83,4% e 20,5%

de Benzo[a]pireno nos solos tratado e controle, respectivamente; no lixiviado do solo

tratado no foi detectado este composto. A ABNT NBR ISO 10.004 estabelece o valor

de 0,07 mg.L-1 de Benzo[a]pireno como limite mximo permitido no lixiviado.

4.3 MONITORAMENTO MICROBIOLGICO E ENSAIO TOXICOLGICO

A microbiota do solo foi avaliada no perodo de tratamento do solo. No final, o

solo tratado foi submetido a ensaio ecotoxicolgico para verificar a eficincia de

remoo de contaminantes txicos.

71
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

4.3.1 Monitoramento Microbiolgico

Os resultados da concentrao de microrganismos, em termos de Bactrias

Aerbias Heterotrficas (BAE), Fungos Filamentosos e Bactrias Anaerbias

Heterotrficas (BAN), esto apresentados na Figura 4.14 para os solos tratados e

controle.

1,E+09

1,E+08

1,E+07
UFC/ g; Cel s/ g

1,E+06

1,E+05
BAE - Tratado

1,E+04 BAE - Controle


Fungos - Tratado
1,E+03 Fungos - Controle
BAN - Tratado
1,E+02
BAN - Controle

1,E+01

1,E+00
0 75 125 160 185 225

Dias

Figura 4.14: Quantificaes de microrganismos nos solos tratados e controle


durante o processo de landfarming.
BAE bactrias aerbias; BAN Bactrias Anaerbias

Pela Figura 4.14, observa-se que no solo tratado as populaes de BAE, Fungos

e BAN apresentaram valores mdios de 1,4x107 UFC.g-1, 2,7x105 UFC.g-1 e 2,2x106

Cels.g-1, respectivamente. Essas concentraes esto compatveis com os dados

reportados pela literatura como efetivos para biodegradao de hidrocarbonetos

(OLLIVIER & MAGOT, 2005).

Mphekgo & Cloete (2004) reportam que a populao e diversidade da

microbiota so informaes importantes para avaliar o potencial de biorremediao,

assim como o grau de contaminao do local.

Na clula controle, a populao microbiana esteve na mesma ordem de grandeza

em relao s clulas tratadas. Entretanto, observou-se maior concentrao de BAN

72
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

neste solo devido inexistncia de tcnicas de aerao que proporcionaram condies

anxicas mais acentuadas.

A performance da microbiota autctone est associada ao solo da regio

amaznica que considerado um ambiente complexo com ampla diversidade gentica,

resultante da interao de mltiplas variveis, as quais incluem pH, umidade,

composio do solo, variaes climticas e sinergismo da atividade bitica (BATISTA,

2007). Os principais gneros de bactrias encontradas nos solos da regio amaznica

so:

- Anaerbias e aerbias facultativas: Acetovibrio, Bacterioides, Butyrivibrio,

Caldocellum, Clostridium, Erwinia, Eubacterium, Micromonospora, Pseudonocardia,

Ruminococcus e Thermoanaerobacter.

- Aerbios e anaerbios facultativos: Acidothermus, Actinoplanes, Actinopolyspora,

Archangium, Arthrobacter, Bacillus, Cellulomonas, Celvibrio, Corynebacterium,

Cytophaga, Frankia, Herpetosiphon, Streptomyces, Thermoactinomyces,

Thermonospora e Xanthomonas.

Ollivier & Magot (2005) relacionaram alguns gneros microbianos degradadores

de compostos aromticos, tais como: Naftaleno (Acidocella, Clavibacter,

Neptunomonas, Polaromonas, Coccochloris, Nostoc, Basidiobolus, Choanephora,

Circinella, Claviceps, Cokeromyces, Conidiobolus, Cunninghamella, Emericellopsis,

Epicoccum, Gilbertella, Helicostylum, Hyphochytrium, Linderina, Neurospora,

Panaeolus, Pestolotia, Phyctochytrium, Phycomyces, Phytophthora, Rhizophlyctis,

Rhizopus, Saccharomyces, Saprolegnia, Smittium, Sordaria, Syncephalastrum,

Thamnidiu e Zygorhynchus); Fenantreno (Acidovorax, Beijerinckia, Comomonas,

Lutibacterium, Mycobacterium, Nocardioides, Paenibacillus, Rhodococcus, Vibrio,

Agmenellum, Irpex, Kuehneromyces, Laetiporus); Pireno (Thermus, Coniothyrium,

73
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Coriolopsis, Crinipellis, Cyclothyrium, Gliocladium, Mucor, Nematoloma, Penicilium,

Pleurotus, Pseudallescherita, Psilocybe, Scopulariopsis, Trametes); Fluoranteno

(Pasteurella); Fluoreno (Absidia); Benzo[a]pireno (Agrocybe, Bjerkandera,

Chrysosporium, Marasmiellus, Mortierella, Phanerochaete, Romaria, Stropharia,

Ankistrodesmus, Scenedesmus, Selenastrum); e Antraceno (Rhizoctonia).

As Figuras 4.15, 4.16 e 4.17 apresentam as anlises microscpicas da microbiota


do solo tratado.

Figura 4.15: Microscopia do solo em preparao a fresco aumento de 100x

A tcnica aplicada para visualizao de fungos (Figura 4.15) permitiu comprovar

a presena deste grupo microbiano no solo em estudo, capaz de biodegradar diversas

classes de hidrocarbonetos.

Paula et al. (2006) avaliaram a ocorrncia de fungos micorrzicos arbusculares

(Glomus clarum e Paraglomus occultum) em solo de landfarming para tratamento de

resduos petroqumicos. Nesse estudo, os autores verificaram o potencial dessas

espcies na remoo de poluentes txicos.

74
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Atagana et al. (2006) trabalharam em landfarming para tratamento de creosoto,

isolando e identificando 5 gneros de fungos: Cladosporium, Fusarium, Penicillium,

Aspergillus e Pleurotus. Os autores destacam a habilidade desses microrganismos na

degradao de compostos recalcitrantes como HPA. O diferencial dos fungos em

relao aos demais grupos microbianos se deve a maior disperso das hifas, resultando

em maior rea efetiva de atuao e produo de enzimas extracelulares.

Figura 4.16: Microscopia de preparaes coradas pelo mtodo de Gram do solo


aumento de 1000x

Figura 4.17: Microscopia de preparaes coradas pelo mtodo de Gram de


microrganismos crescidos em meio nutriente aumento de 1000x

75
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

De acordo com a Figura 4.16 observa-se a presena de bastonetes Gram

positivas e negativas. A Figura 4.17 apresenta a presena de clulas em forma de

bastonetes com diferentes dimenses, isoladas e em cadeias, retas e curvas, esporuladas

e no esporuladas, Gram positivas e negativas.

Lima (2002) isolou do solo de landfarming avaliado neste trabalho alguns

microrganismos, identificando os seguintes gneros de bactrias: Proteus,

Pseudomonas, Acinetobacter, Alcaligenes, Shigella, Klebsiella e Enterobacter.

A partir de pesquisa feita no Manual Bergey de determinao bacteriolgica

(HOLT et al., 1994), foram levantadas algumas das caractersticas principais dos

gneros identificados.

a) Gnero Proteus: pertecente famlia Proteeae, Gram-negativa; aerbia estrita;

oxidase negativa; clulas arredondadas, dimetro de 0,4 a 0,8 m, comprimento de 1,0 a

3,0 m e mveis por flagelos peritrquios. As espcies pertencentes a este gnero

produzem cidos a partir de muitos mono e dissacardeos, assim como glicerol. So

encontradas no intestino do homem e outros mamferos, tambm ocorrem em

manguezais, solos e guas poludas.

b) Gnero Pseudomonas: pertecente famlia Pseudomonaceae, Gram-negativa;

aerbia facultativa utilizando oxignio como aceptor final de eltrons, e em alguns

casos o nitrato pode assumir essa funcionalidade; oxidase positiva ou negativa, catalase

positiva; clulas em forma de bastonetes retos ou levemente curvados, dimetro de 0,5 a

1,0 m e comprimento de 1,5 a 5,0 m; mveis por um ou vrios flagelos polares e,

raramente imveis. As espcies pertencentes a este gnero so frequentemente

encontradas em locais contaminados por hidrocarbonetos, visto que participam

ativamente do processo de biodegradao de inmeros compostos orgnicos.

76
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Obayori et al. (2009) estudaram a biodegradao de leo cru, e identificaram

duas linhagens de Pseudomonas (putida e aeruginosa). Os autores destacam ainda que

espcies de Pseudomonas aeruginosa foram mais efetivas na biodegradao de

hidrocarbonetos, conseguindo degradar compostos alifticos diversos (C6 a C16),

compostos aromticos variados, incluindo policclicos aromticos.

Ollivier & Magot (2005) citam outras espcies do gnero Pseudomonas

degradadoras de hidrocarbonetos: Pseudomonas flurescens, Pseudomonas stutzeri,

Pseudomonas chlororaphis e Pseudomonas syringae.

c) Gnero Acinetobacter: pertecente famlia Acholeplasmataceae, Gram-negativa,

mas ocasionalmente torna-se difcil de ser distinguida visualmente; aerbia estrita;

oxidase negativa, catalase positiva; clulas arredondadas, mas comumente tornam-se

esfricas na fase estacionria de crescimento, dimetro de 0,9 a 1,6 m e comprimento

de 1,5 a 2,5 m; imveis, mas apresentam fmbrias polares. As espcies pertencentes a

este gnero ocorrem naturalmente nos solos, guas e efluentes. Essas linhagens

apresentam crescimento entre 20 e 30C, mas algumas espcies tm crescimento timo

entre 33-35C.

d) Gnero Alcaligenes: pertencente famlia Actinobacilleae, Gram-negativa; aerbia

obrigatria utilizando oxignio como aceptor final de eltrons, mas algumas linhagens

apresentam respirao anaerbia usando nitrato ou nitrito como aceptor final de

eltrons; oxidase positiva, catalase positiva; clulas arredondadas ou ovais, dimetro de

0,5 a 1,0 m e comprimento de 0,5 a 2,6 m; mveis com 1-8 flagelos peritrquios. As

espcies pertencentes a este gnero so quimiorganotrficas consumindo uma variedade

de cidos orgnicos como fonte de carbono, e ocorrem naturalmente no solo e gua.

Jiang et al. (2007) avaliaram a biodegradao de efluente contendo alta

concentrao de compostos fenlicos usando espcies Alcaligenes faecalis. A

77
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

identificao desta espcie foi possvel atravs da tcnica de sequenciamento do gene

rRNA 16S.

e) Gnero Shigella: pertencente famlia Serratieae, Gram-negativa; anaerbia

facultativa tendo ambos tipos de respirao; oxidase negativa, catalase positiva; clulas

arredondadas, dimetro de 0,3 a 1,0 m e comprimento de 1,0 a 6,0 m; imveis. As

espcies deste gnero so quimiorganotrficas e fermentam acares, embora no usem

citrato ou maleato como fonte de carbono.

f) Gnero Klebsiella: pertencente famlia Halobacteriaceae, Gram-negativa formando

cpsulas; anaerbia facultativa tendo ambos tipos de respirao; oxidase negativa;

clulas estreitas e arredondadas, arranjos simples, em pares ou pequenas cadeias,

dimetro de 0,3 a 1,0 m e comprimento de 0,6 a 6,0 m; imveis. As espcies

pertencentes a este gnero podem usar citrato e glicose como fonte de carbono, gerando

2,3-butanodiol como produto intermedirio, e produzindo lactato, acetato e cido

frmico (em menor quantidade) e etanol (em grande quantidade).

g) Gnero Enterobacter: pertencente famlia Ehrlichiae, Gram-negativa; anaerbia

facultativa; clulas estreitas e arredondadas, dimetro de 0,6 a 1,0 m e comprimento de

1,2 a 3,0 m; mveis por flagelos peritrquios. Fermentam glicose produzindo cidos e

gases. Citrato e maleato so geralmente usados como fonte de carbono e energia com

temperatura tima de crescimento em 30C e amplamente distribuda no meio-ambiente.

Os gneros Pseudomonas e Alcaligenes apresentam oxidase positiva indicando

atuao das enzimas oxigenases na degradao aerbia de hidrocarbonetos. Os outros

gneros microbianos aerbios podem degradar alcanos via hidroxilao pela ao de

enzimas pertencentes ao citocromo P450.

Outro grupo microbiano que merece investigao est relacionado s algas.

Navarrete et al. (2006) promoveram o tratamento de resduos oleosos em landfarming

78
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

atravs de bioaumentao com algas alctones (Anabaena, Chroococcus, Scytonema e

Lyngbya - Cyanophyta, Klebsormidium, Mougeotia e Oedogonium - Chlorophyta e

Navcula Bacillariophyta).

Convm enfatizar que a concentrao de microrganismos no landfarming

estudado foi semelhante em todas as clulas, incluindo o solo controle. Portanto, as

tcnicas de bioestimulao atravs de umidificao e aerao aperfeioaram as

atividades metablicas de biodegradao de hidrocarbonetos.

Nos estudos para determinar os efeitos dos agentes contaminantes e do manejo

do solo sobre a atividade e a dinmica da comunidade microbiana, as anlises mais

utilizadas como indicadoras so: produo de CO2 pela respirao microbiana,

mineralizao de nitrognio e carbono, fixao biolgica do nitrognio, atividades

enzimticas, contagem de grupos microbianos e biomassa microbiana de C, N, P e S.

Recentemente, tambm, os mtodos moleculares de extrao de DNA do solo e a

anlise de fosfolipdios esto sendo utilizados na obteno de indicadores para avaliao

do impacto ocasionado pela presena de agentes poluentes no solo (SILVEIRA &

FREITAS, 2007).

Segundo Batista (2007), a eficincia da extrao de DNA microbiano do solo

depende da qualidade do solo, particularmente do teor de argila, do contedo de matria

orgnica e do pH.

4.3.2 Avaliao Ecotoxicolgica

Os testes de ecotoxicidade so ferramentas importantes para estimar se as

concentraes de um determinado composto so capazes de provocar alguma resposta

deletria especfica em uma dada populao de organismos e deve ser parte integrante

de qualquer anlise de poluio, devendo serem utilizados simultaneamente com

79
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

estudos fsico-qumicos e microbiolgicos, como parte de uma avaliao mais completa

(HAMDI et al., 2007b). Constitui, portanto, uma ferramenta para comprovao de

descontaminao de um ambiente.

Sayles et al. (1999) citam algumas metodologias para avaliao ecotoxicolgica

em landfarming, tais como: alteraes mitticas de cepas de Allium; teste de

sobrevivncia de aneldeos das espcies Eisenia foetida e Lumbricus terrestrius;

medidas do comprimento das razes e germinao de sementes das espcies vegetais de

Avena sativa e Lactuca sativa; e ensaio Microtox em fase slida usando espcies de

Vibrio fischeri. Esses ensaios avaliam as respostas agudas, crnicas e letais dos

organismos quando submetidos aos contaminantes que podem causar efeitos deletrios

atravs de alteraes mitticas, mutagnicas, crescimento e metabolismo.

Navarrete et al. (2006) avaliaram a desintoxicao do solo de landfarming

usando minhocas da espcie Eisenia foetida (Oligochaeta), e observaram melhores

resultados para os experimentos submetidos bioaumentao com algas, as quais

absorveram os metais do solo tornando-o menos txico.

Os resultados do ensaio de letalidade (toxicidade aguda) esto apresentados na

Tabela 4.4. No incio de cada experimento foram utilizadas 10 minhocas. As respostas

esto expressas em duplicatas para os perodos de 7 e 14 dias.

Tabela 4.4: Organismos vivos no ensaio de ecotoxicologia


7 dias 14 dias
Tipo de Solo
Nmero de organismos vivos

Tratado 10 ; 10 10 ; 9

Controle 9;5 4;4

80
SILVA, L. J. Resultados & Discusso

Pela Tabela 4.4 nota-se que o ndice mdio de letalidade nos testes do solo

tratado foi de zero e 55% para os perodos de 7 e 14 dias, respectivamente. Estes

valores indicam a desintoxicao do solo tratado.

Entretanto, o solo controle apresentou letalidade de 3028% e 60% para 7 e 14

dias, respectivamente. Esse ndice indica toxicidade remanescente neste solo.

Geissen et al. (2008), trabalhando em condies semelhantes, obtiveram 6,6%

19% e 88% de letalidade para os organismos submetidos aos solos controle, tratados em

landfarming e compostagem, respectivamente. Os autores reportam ainda que as

minhocas da espcie Polypheretima elongata e Eisenia foetida apresentaram resultados

semelhantes.

Entretanto, no se pode afirmar que as concentraes remanescentes dos

contaminantes ainda no sejam txicas para os organismos do solo ou mesmo que o uso

de substncias durante o processo de remediao da rea no possa ter afetado seu

equilbrio ecolgico.

81
SILVA, L. J. Concluses

CAPTULO 5: CONCLUSES

A adequao do landfarming s condies de tratamento de resduos slidos foi

uma etapa fundamental para facilitar as operaes de homogeneizao e

umidificao do solo. O isolamento de uma rea (clula controle) foi

fundamental para se avaliar o desempenho do bioprocesso;

A composio granulomtrica do solo indica predominncia de areia resultando

em maior permeabilidade facilitando os fenmenos de transferncia de massa,

em especial oxignio, nutrientes (nitrognio e fsforo) e gua;

O volume de gua adicionado (umidificao), a fertilizao e o teor de oxignio

na matriz do solo (aerao) foram responsveis pela elevada biodegradao de

hidrocarbonetos, visto que no solo controle a biodegradao foi muito menor;

A concentrao de hidrocarbonetos totais do petrleo (HTP) decresceu

significativamente no decorrer do perodo de tratamento no solo, obtendo-se

89,6% de degradao com uma produtividade mdia de degradao de 25,8

mg.Kg-1.dia-1. Entretanto, o solo controle teve inexpressiva degradao da ordem

de 22,4% (6,5 mg.Kg-1.dia-1), devido ao baixo metabolismo microbiano;

A degradao de hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPA) foi da ordem de

88,6% (0,13 mg.Kg-1.dia-1) no solo tratado, enquanto o solo controle apresentou

25,1% de degradao (0,04 mg.Kg-1.dia-1);

Quanto menor o nmero de anis benznicos na molcula, mais facilmente

ocorre biodegradao;

A populao de BAE, Fungos e BAN apresentaram um valor mdio de 1,4x107

UFC.g-1, 2,6x105 UFC.g-1 e 2,2 x106 Cels.g-1, respectivamente. Essa

concentrao de microrganismos est compatvel com os dados reportados pela

literatura como efetivos para biodegradao de hidrocarbonetos;

82
SILVA, L. J. Concluses

Os resultados foram promissores considerando o tempo de tratamento e

concentrao inicial de contaminantes. Os teores de HTP e HPA obtidos no solo

tratado estiveram abaixo dos limites de interveno preconizados pelas

legislaes brasileira (CETESB), holandesa e americana;

O teste de ecotoxicidade no solo tratado foi um indicativo da eficincia do

bioprocesso que pode ser comprovado pela alta taxa de remoo de policclicos

aromticos;

Foi possvel tratar uma rea de 1.000 m2, correspondente as clulas A, B. C, D e

E, perfazendo aproximadamente 387 toneladas de resduo slido em 225 dias.

5.1 SUGESTES

Considerando os resultados obtidos, providncias tornam-se necessrias, tais

como:

Estudar a viabilidade tcnica-econmica do emprego das fontes de nitrognio e

fsforo de resduos agrcola e industrial;

Estudar a cintica da biodegradao de hidrocarbonetos pelos microrganismos

autctones;

Quantificar parmetros bioqumicos das enzimas oxidoredutases, desidrogenases

e hidrolases.

83
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